Este documento describe el aislamiento y selección de bacterias productoras de polihidroxialcanoatos (PHA) a partir de lodos y aguas residuales de la industria del cartón. Dos aislamientos bacterianos, NAP11 y NAC1, mostraron una alta producción de PHA utilizando aguas residuales de la industria del cartón como única fuente de carbono. Los análisis mostraron que NAP11 y NAC1 son cepas de Enterococcus sp. y Brevundimonas sp. respectivamente, y pueden consider

1. AISLAMIENTO Y CRIBADO DE POLIHIDROXIALCANOATOS QUE
PRODUCEN BACTERIAS A PARTIR DE DESECHOS DE LA INDUSTRIA
DE LA PULPA, EL PAPEL Y EL CARTÓN
Anish Kumari Bhuwal
Gulab Singh
Varsha Goyal
Anita Yadav
ALUMNO:
VELASQUEZ PAUCAR, Brush Noel
DOCENTE:
Dr. SOTO GONSALES, Hebert Hernan
Neeraj Kumar Aggarwal

2. AISLAMIENTO Y CRIBADO DE
POLIHIDROXIALCANOATOS QUE
PRODUCEN BACTERIAS A PARTIR DE
DESECHOS DE LA INDUSTRIA DE LA
PULPA, EL PAPEL Y EL CARTÓN
PHA
Biodegradables
Respetuosos con el medio
ambiente
Bioplásticos biocompatibles
LosSon
Completamente degradados
dentro de un año, por
variedad de microorganismos
en CO y agua
Pueden
ser
INTRODUCCIÓN
Utilizado universalmente
Plásticos
Los
Causan graves problemas ambientales
Plásticos no degradables
Los PHA son polímeros de reserva de
carbono y energía
(PHB) es el polímero más común y una
alternativa prometedora a los plásticos
sintéticos no degradables
La empresa norteamericana WR Grace
Co. hizo el primer intento de producir PHB
Las aguas residuales de la pasta química y
mecánica contienen 12-25 kg de DBO / t
de ADP
El nitrógeno y el fósforo también están
presentes en las aguas residuales
Utilizar lodos y aguas residuales de la industria de la pulpa, el papel y el cartón
para el aislamiento y cribado de bacterias que acumulan polihidroxialcanoatos
(PHA) y la producción de PHB rentable utilizando aguas residuales de la
industria del cartón
OBJETIVO
MATERIAL Y MÉTODOS
Lodos activados y aguas
residuales de la industria
de fabricación de pulpa
Agua esterilizada
Placas agar nutritivo con
glucosa al 1%
Solución alcohólica al
0,02% de negro B
MATERIAL
MÉTODOS
Aislamiento de bacterias
productoras de ácidos
polihidroxialcanoicos (PHA)
Detección de
bacterias
productoras de PHA
Tratamiento previo de
aguas residuales de la
industria del cartón
Extracción y análisis
cuantitativo de PHA
Caracterización morfológica e
identificación bioquímica de
bacterias productoras de PHA
Análisis de polímeros Análisis FT-IR Análisis GC-MS
aislamiento de las
bacterias productoras de
PHA
Las muestras se
almacenaron a temperatura
ambiente
disolvió 1 g de muestra de
lodo
se aplicó una solución alcohólica al
0,02% de negro B
Tinción con azul de
Nilo A
Este tinte en
concentraciones de
solo 0.5 μg / mL
Estimación de la
presencia de PHA
en colonias viables
se almacenó a 4 ° C
hasta su uso para el
análisis
El efluente se filtró
través de la tela de
muselina y luego con
papel de filtro
Se obs. en un matraz
Erlenmeyer que contenía
50 mL de aguas residuales
Después de 72 h de
incubación a 37 ° C
Se centrifugó a 8000 rpm
durante 15 min
El extracto celular se
centrifugó a 12000 rpm
durante 30 min
Se observa la morfología de
las colonias bacterianas
cultivadas en agar nutritivo
Se realizaron diversas
pruebas bioquímicas en
bacterias productoras de PHB
seleccionadas
Se siguió la utilización
fermentativa de varios
carbohidratos durante 48
horas a 37 ° C inoculando
Se analizaron en un
espectrómetro Bruker
Avance II 500 a 22 ° C
con un ancho de pulso de
7,4 ms
Repetición de pulso de 1
s, ancho espectral de
10,330 Hz y 65,536
puntos de datos
Se llevó a cabo
en MB-3000,
espectrofotómet
ro ABB FTIR
en el rango
4000-600 cm
Se disolvió en 2
mL de
cloroformo y
luego se
agregaron 2 mL
de metanol y se
acidificó con H
SO4 al 3% (v /
v) y se calentó a
100 ° C durante
3.5 h

3. RESULTADO Y DISCUSIÓN CONCLUSIÓN
Aislamiento y selección de bacterias
productoras de PHA
Producción, extracción y estimación
de PHA con aguas residuales de la
industria del cartón como única fuente
de carbono
Caracterización morfológica y
bioquímica de aislados seleccionados
Análisis de polímeros por
espectroscopia de H-RMN
Espectroscopía Infrarroja por
Transformada de Fourier (FTIR)
Análisis termogravimétrico (TGA)
Análisis GC-MS de PHA extraído
Aproximadamente el 35% de las bacterias aisladas produjeron PHA
Un total de 42 aislamientos mostraron una coloración negro-azul
cuando se tiñeron
Un total de 15 aislamientos mostraron un resultado positivo con la
tinción de azul Nilo A
El PHA de los aislados se extrajo mediante el método de hipoclorito y cloroformo
Los aislados NAP11 y NAC1 mostraron máxima producción de PHA 79.27% y 77.63%
La materia orgánica de los desechos y las aguas residuales tiene altos valores de DBO y DQO
El licor crudo apoyó la producción de solo 0.43 g / L de PHA
Se cuantificó el PHA extraído de aislados seleccionados y se compararon sus eficiencias con el estándar
Los aislados seleccionados NAP11 de lodo de pulpa han producido 79,27% p / p de PHA
NAP11 y NAC1 se encontró que eran Enterococcus sp ., Y Brevundimonas sp ., Respectivamente
Las especies predominantes encontradas en las aguas residuales crudas fueron Enterococcus hirae,
Enterococcus faecium y Enterococcus faecalis
PHA era alta (40,3% del peso de células secas (DCW )), condiciones bajas en nitrógeno (45,1% DCW) y
bajas en fósforo (54,2% DCW)
Se observó el PHA obtenido a partir de NAP11 y NAC1 tiene propiedades similares al de PHB estándar
Los espectros de H RMN de los PHA extraídos de Enterococcus sp . NAP11
Los PHA extraídos de Brevundimonas sp. NAC1
Los espectros de H RMN de las muestras y el estándar son casi idénticos
El polímero extraído de NAP11 y NAC1 se utilizó para registrar los espectros de IR en el rango de 4000 a 600 cm-1
Las bandas de absorción a 2932 y 2954 cm-1 se deben a las vibraciones de estiramiento C – H de los grupos metilo,
metileno
Los resultados de TGA de NAM5 mostraron que la Tm es 171,33 ° C y la entalpía de la fusión de PHA es 85,56 J / g
El PHB se metanolizó en presencia de ácido sulfúrico y metanol
El 3HB metanólico se analizó luego por GC-MS
Pico predominante de éster metílico del dímero 3HB a los 13,63 a 13,667 min
El peso molecular de PHB obtenido a partir del aislado NAP11 es de 256 kDa y del aislado NAC1 es de 242 kDa
Se probó el agua residual barata de la industria del
cartón como fuente de carbono para producir PHA
Se probó el agua residual barata de la industria del
cartón como fuente de carbono para producir PHA
Los aislados bacterianos NAP11 y NAC1 pueden
considerarse como cepas potenciales para la
conversión de aguas residuales de la industria del
cartón en PHB
Los aislados bacterianos NAP11 y NAC1 pueden
considerarse como cepas potenciales para la
conversión de aguas residuales de la industria del
cartón en PHB
Los aislamientos NAP11 y NAC1 pueden
considerarse buenos candidatos para la producción
industrial de PHB a partir de aguas residuales de la
industria del cartón.Enterococcus sp . y
Brevundimonas sp.
Los aislamientos NAP11 y NAC1 pueden
considerarse buenos candidatos para la producción
industrial de PHB a partir de aguas residuales de la
industria del cartón.Enterococcus sp . y
Brevundimonas sp.