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Autor: Fernando Zamorano
DuocUC
GUIA DE TALLER
Centrifugación de la Sangre.
Dirigido a:
Alumnos de la carrera de Técnico de Laboratorio Clínico y Banco de Sangre en la
asignatura de “Banco de Sangre II”
Requisito:
Guía de Taller “Centrifugas”, asignatura Instrumentación
Guía de Taller “Flebotomía en Donantes de Sangre”
Norma para la Extracción de Sangre de Donantes de Sangre Completa, MINSAL.
Circular 4C/ 25, de abril del 2000.
Autor: TM. Fernando Zamorano
DuocUC
Realizado por:
Tecnólogo Medico (con la especialidad de Laboratorio y Banco de Sangre).
Duración del Taller:
3 módulos.
Numero de Participantes:
10 alumnos
Introducción.
La sangre ha sido transfundida con éxito durante unos 60 años. Sin
embargo, con el paso del tiempo la práctica transfusional ha cambiado
radicalmente, en lo que respecta al procesamiento de sangre total1 y los productos
obtenidos.
Las primeras transfusiones corresponden a sangre completa, procedimiento
que se realiza de brazo a brazo y que soluciona solo uno de los problemas que
padecen los pacientes, aquel asociado a la capacidad transportadora de oxigeno2,
mientras que, el resto de hemocomponentes se encuentra en pequeña cantidad o
pierden su funcionalidad producto de la extracción o el almacenamiento.
Separar la sangre en sus componentes debe haber sido una idea que nace
de observar lo que ocurre en forma natural, cuando ella permanecer almacenada,
pero, como este proceso se extiende
por un tiempo superior al que algunos
hemocomponentes se mantienen
viables, fue necesario utilizar una
herramienta que lo facilitara (lograr la
separación en menor tiempo), lo que
se logra con la centrifugación.
La centrifugación corresponde a
una técnica ampliamente usada en los
bancos de sangre, que permite
obtener Glóbulos Rojos, Plasma,
Plaquetas (ver imagen nro. 1),
Leucocitos y Crioprecipitado3.
1 También puede ser nombrada como Sangre Completa o Sangre Entera.
2 Función desempeñada por los glóbulos rojos.
3 Para obtener Crioprecipitado es necesario incorporar una etapa de
congelación rápida y descongelación del plasma.
Imagen nro 1. Productos obtenidos usando la centrifugación
Autor: TM. Fernando Zamorano
DuocUC
El plasma puede ser separado en otros componentes (conocidos también
como hemoderivados), si además de la centrifugación se agregan técnicas como
el fraccionamiento alcohólico de Cohn, de Cohn – Oncley o la ultra-filtración. La
utilización de estos procedimientos permite obtener factores de la coagulación,
albúmina, inmunoglobulinas, etc. La producción de hemoderivados es un proceso
industrializado que necesita de grandes cantidades de plasma, lo que implica que
existan plantas para el fraccionamiento fuera de los bancos de sangre o centros
de sangre.
Por último, una forma alternativa para separar los componentes de la
sangre es la aféresis, que puede ser aplicada para obtener solo plasma
“plasmaferesis”, solo plaquetas “plaquetoferesis” o algunas de las células
presentes en al sangre “citoferesis”, etc.
La transfusión sanguínea es más que extraer sangre a un donante, para
luego, administrarla a un paciente, hoy, se procura reponer a cada paciente solo el
componente deficiente. La “terapia por componente” disminuye el riesgo de
efectos adversos a la transfusión, pues no se administran componentes que el
paciente no necesita y permite aprovechar cada uno de los componentes de la
sangre, o sea, de cada unidad donada se logra el mayor rendimiento.
Objetivos.
Al finalizar el taller el alumno será capaz de:
 Conocerá las técnicas de centrifugación de la sangre para obtener
hemocomponentes (Los producidos mas frecuentemente en los Bancos de
Sangre).
 Conocerá los procedimientos adecuados que mantienen la viabilidad y la
funcionalidad de los hemocomponentes.
Marco Teórico.
El fraccionamiento de la sangre es el proceso mediante el cual se efectúa la
separación de los componentes de una unidad de sangre fresca a través de una
centrifugación diferencial. Los diferentes componentes sanguíneos al poseer
distintas gravedades son separados en diferentes capas por centrifugación,
dependiendo de tres factores: el peso específico de cada componente, la fuerza
centrífuga relativa (velocidad) y la duración de la centrifugación o sea el tiempo
determinado en revoluciones por minuto (rpm) además de la temperatura,
aceleración y la desaceleración. Estas últimas comprenden la aceleración o
desaceleración de la velocidad en cada una de las centrifugaciones.
Autor: TM. Fernando Zamorano
DuocUC
La fuerza centrifuga relativa (FCR-g) es el producto de:
FCR-g = 0.00001118 x r x N2
Donde “r” es el radio del rotor de la centrifuga en
centímetros y N, el número de revoluciones por minuto.
Los distintos rotores tienen radios diferentes4
(ver imagen nro. 2. Radio destacado por rectángulo
rojo), por lo tanto, se utilizaran diferentes velocidades
para obtener la misma FCR en cada centrifuga.
La velocidad y el tiempo de centrifugación son
los elementos clave en la separación de los componentes, los que varían según la
centrífuga, el modelo y la posición del cabezal. Para cada centrifuga se deben
calcular las distintas variables (FCR y tiempo) para obtener productos de una
buena calidad y no puede utilizar un mismo valor para todas.
Recuerde que cuando la centrífuga está funcionando a altas velocidades, el
cabezal y las copas desarrollan una fuerza de gravedad de miles de libras, debido
a ello es importante que los capachos tengan igual peso, de lo contrario la
máquina se desajusta, se daña, vibra y la separación de los componentes será
pobre, por el inadecuado balanceo.
El adecuado balanceo se puede lograr mediante discos de goma o lastre
(material no punzocortante) de distintos pesos. No es recomendable utilizar agua,
ni otros materiales rígidos que puedan romper la bolsa. Por otro lado, tanto el agua
como dichos materiales se desplazan durante la aceleración y desaceleración
produciendo resuspensión de las células, por eso, no es conveniente centrifugar
sangre y colocar como contrapeso bolsas de plástico conteniendo agua.
Con la centrifugación se obtienen ventajas como:
 Mejora la supervivencia los componentes de la
sangre, pues, permite almacenarlos en las condiciones
requeridas para mantener su nivel óptimo de funcionalidad.
 Mejora la práctica transfusional, al hacerla más
específica y acorde con las necesidades del receptor.
Para la producción de hemocomponentes es
recomendable el uso de equipos de extracción de sangre
(bolsas para la extracción de sangre) dobles, triples (ver
imagen nro. 3) o cuádruples, que al ser sistemas
4 El largo del rotor desde el centro al extremo.
Imagen nro. 2 Rotor de una
Centrifuga.
Imagen nro. 3 Equipo de
Extracción de Sangre Triple
Autor: TM. Fernando Zamorano
DuocUC
interconectados y estériles aseguran riesgo de contaminación de los productos,
situación que ocurre con mas frecuencia al usar equipos simples y transfer.
Descripción del Taller.
 El docente hará una demostración simulada de las técnicas para producir
hemocomponentes.
 Los alumnos realizaran el procedimiento en forma simulada.
Materiales para el Taller.
 Bolsas para la extracción de sangre de distinto tipo
 Extractor de plasma
 Clips de metal y sellador manual
 Pinzas
 Tijeras
 Balanza
 Lápiz marcador
 Centrifuga Refrigerada
Procedimientos.
I. Encendido y Carga de la Centrifuga.
1 Encender la centrifuga unos 10 minutos antes de su uso, para que la unidad
refrigerante alcance la temperatura adecuada según el hemocomponente que
será producido (en caso de plasma fresco 2° a 6° C y en el caso de plaquetas
20° a 24° C).
2 Determinar el peso (gramos) de la unidad de sangre total (bolsa principal +
bolsas satélites + sangre), regístrelo.
3 Calcule el volumen de sangre extraído, proceda de la siguiente forma:
 Reste al peso determinado en el punto 2 (bolsa principal, satélites y sangre)
el peso del equipo de extracción vacío5 (bolsa principal y satélites).
 Aplique formula de densidad6, despejando volumen (v).
d = m/v
 El valor obtenido corresponde al volumen de sangre extraído, el que debe
oscilar en el rango de 405 a 495 ml solo así puede ser considerado para la
producción de hemocomponentes, regístrelo.
5 Debe ser una bolsa de la misma marca, modelo que la bolsa con sangre
total.
6 Densidad de la sangre es 1,06
Autor: TM. Fernando Zamorano
DuocUC
4 Habrá la centrífuga, retire los capachos (ver imagen nro.
4). Los capachos deben ser hermanados7 por peso
(igual o semejante).
5 Introduzca una bolsa de sangre al interior del capacho y
busque una bolsa con peso semejante para colocarla al
interior del capacho hermano, en ambos casos todos los
dispositivos de conexión de la bolsa deben quedar hacia
afuera8 (ver imagen nro. 4).
6 Iguale el peso de capachos hermanos, agregue trozos
de goma de distinto tamaño entre la bolsa satélite y la
pared del capacho, nunca en el fondo, pues durante la
centrifugación pueden romper la bolsa de sangre.
7 En el caso de que el capacho disponga de tapa,
colóquela.
8 Los capachos hermanados son depositados en la centrifuga, uno frente al
otro, para mantener equilibrada la centrifuga (balanceo).
9 En el caso que no cuente con bolsas con sangre suficientes para todos los
capachos de la centrifuga:
 Si dispone de una bolsa de sangre, en el capacho hermano coloque una
bolsa de extracción a la que ha introducido agua y para igualar el peso, agregue
trozos de goma.
 Si no dispone de bolsas para un par de capachos, colóquelos vacíos en la
centrifugas, nunca utilice una centrifuga sin su capachos.
10 Cierre la centrífuga y observe que se alcanza la temperatura que se necesita.
11 Proceda programar el tiempo y RPM al cual debe funcionar la centrífuga, para
lograr el producto que desea obtener. A menos que este indicado en la
técnica, no utilice el freno de la centrifuga.
A continuación se describe en forma general los procedimientos para
obtener los hemocomponentes más comunes.
II. Producción de Concentrado de Glóbulos Rojos (CGR).
El CGR se obtiene por eliminación del plasma sobrenadante de la unidad la
sangre total, luego que ha sido centrifugada.
7 Se habla de capachos hermanos en el caso de capachos de un mismo peso o
que en la centrifuga se ubican uno frente al otro.
8 Las bolsas satélites se colocan extendidas detrás de la bolsa
principal, con la tubuladura que las une entre ellas. La tubuladura que
conectaba con la aguja se coloca alrededor de las bolsas, de forma que
compacte bolsas y tubuladuras, evitando que durante la centrifugación
estas salgan del capacho y se rompan (pero no se debe formar una cintura
en la bolsa de sangre).
Imagen nro. 4 Capacho y
Equipo de extracción de
sangre
Autor: TM. Fernando Zamorano
DuocUC
1. Centrifugar la sangre total con una “centrifugación
pesada”9 a una temperatura de 4° C.
2. Luego de centrifugar coloque la bolsa principal que
contiene la sangre en un Desplasmatizador.
Manipule con cuidado la bolsa de sangre, para no
mezcla las distintas capas en que ha separado.
3. Suelte el muelle del Desplasmatizado (ver imagen
nro. 5), deje que la placa entre en contacto,
suavemente, con la bolsa (ver imagen nro. 6).
4. Realice nudos flojos (2) en la tubuladura, entre la
bolsa primaria y la bifurcación en “Y” de la
tubuladura10.
5. Si son dos o más las bolsas satélites, pinzar la
tubuladura de aquellas a las que no debe ingresar
Plasma.
6. Rotular la bolsa satélite, que contendrá el Plasma
con la misma identificación de la bolsa principal.
7. Rompa el sello de la bolsa principal que la comunica con
las bolsas satélites (ver imagen nro. 7), deje pasar el
plasma a la bolsa satélite.
8. La bolsa principal que contiene los glóbulos rojos debe
mantener plasma (aproximadamente unos 50 ml)11, al
evaluar el CGR su microhematocrito debe ser de 70 hasta
80% (ver imagen nro. 8).
9. Pinzar la tubuladura cuando haya trasladado el plasma.
Sellar la comunicación entre la bolsa principal y las
satélites, cerrando los nudos flojos o aplicando sellos a la
tubuladura, cortar la tubuladura y observar que en los
extremos no existan filtraciones.
10.Calcule el volumen de CGR obtenido, aplique la misma
formula de densidad utilizada en el procedimiento I punto 3
(solo que la densidad del Glóbulo Rojos es de 1,1).
Regístrelo.
11.Almacenar el hemocomponente obtenido a la temperatura
adecuada (ver imagen nro. 9).
Nota: Se puede producir hemocomponentes en un
equipo simple, siempre y cuando, se prevenga toda
posibilidad de contaminación bacteriana, se trabaje en un
ambiente limpio, utilizando materiales estériles y técnicas de
9 Una Centrifugación Pesada, Liviana o Leve deberá ser determinada para
cada centrifuga, por lo tanto, debe buscar los datos de las variables en
los manuales técnicos de cada unidad o centro productivo.
10 Si dispone de un sellador de tubuladura no requiere realizar nudos
flojos.
11 Excepto si trabaja con bolsas que contengan solución aditiva, en cuyo
caso se extrae prácticamente todo el plasma.
Imagen nro 8. CGR y
Plasma Fresco
Imagen nro 5. Desplasmatizador
Imagen nro 6. Placa del
Desplasmatizador
Imagen nro 7. Bolsa
Principal
Autor: TM. Fernando Zamorano
DuocUC
manejo aséptico, manteniendo una presión positiva sobre la
bolsa original hasta que sea sellada.
La esterilidad de los componentes preparados en un
sistema abierto debe ser monitoreada, utilizando métodos
validados. Los componentes sanguíneos obtenidos por medio
de un sistema abierto deben ser utilizados tan pronto como sea
posible. Los hemocomponentes cuya temperatura de
almacenamiento es de 2° a 6° C deben ser transfundidos antes
de 24 horas; la nueva fecha y hora de vencimiento se debe
anotar en al etiqueta y en los registros.
Producción de Concentrado de Glóbulos Rojos en Solución Aditiva.
La recolección de sangre con una solución aditiva permite la remoción de
un volumen mayor de plasma. Una vez removido el plasma, se permite que el
aditivo fluya desde la bolsa satélite con el aditivo a la bolsa con los glóbulos rojos.
Producción de Concentrado de Glóbulos Rojos Leucodepletados.
Durante la filtración en línea de la sangre entera anticoagulada, ésta pasa a
través se un filtro de leucorreducción colocado dentro del equipo de extracción de
sangre. La sangre obtenida puede ser manufacturada para obtener CGR
leucorreducidos. De este producto no pueden prepararse Concentrado Plaquetario
debido a que la filtración de sangre entera reduce el número de plaquetas en ellas.
Producción de Concentrado de Glóbulos Rojos Leucoreducidos.
El Alumno debe investigar sobre la Preparación de este Hemocomponente.
Producción de Concentrado de Glóbulos Rojos Lavados
El Alumno debe investigar sobre la Preparación de este Hemocomponente.
Producción de Concentrado de Glóbulos Rojos Irradiados
El Alumno debe investigar sobre la Preparación de este Hemocomponente.
III. Producción de Concentrado de Plasma Fresco Congelado (PFC).
El plasma se separa de los elementos celulares de la sangre y se congela
para preservar la actividad de los factores lábiles de la coagulación.
El Plasma no debe ser producido a partir de unidades lipémicas, ictéricas o
contaminadas con glóbulos rojos.
Imagen nro 9. CGR
Autor: TM. Fernando Zamorano
DuocUC
1. La unidad extraída se debe refrigerar a 4° C (2 – 6° C) si no se procesa de
inmediato, hasta por un máximo de 8 horas desde la extracción.
2. Al ejecutar el procedimiento II, obtiene CGR y Plasma Fresco (puntos 7, 9 y
10), al traspasa el Plasma Fresco sobrenadante a una bolsa satélite.
3. Deje pasar unos 230-250 grs12 de plasma a la bolsa satélite.
4. Calcule el volumen de Plasma Fresco obtenido, aplique la misma formula de
densidad utilizada en el procedimiento I punto 3 (solo que la densidad del
Plasma Fresco es de 1,03). Regístrelo.
5. El Plasma Fresco se debe congelar a –18° C o menos, para mantenerlo en la
condición de Plasma Fresco Congelado, todo el procedimiento debe realizarse
en no mas de 8 horas desde al extracción.
6. Al almacenar el PFC es recomendable usar un sistema que permita detectar
eventos de descongelación no programados, se describen los siguientes:
6.1.Durante la congelación del Plasma coloque un tubo contra la bolsa que
contiene el Plasma, permanecerá la marca una
vez congelado. En caso de descongelación ello
desaparecerá.
6.2.Durante la congelación del Plasma, coloque la
bolsa en posición horizontal, la burbuja de aire al
interior de ella se ubicara mas o menos en la
posición indicada en la imagen nro 10; luego al
ser almacenado ubicarlo en posición vertical, en
caso que se descongele la burbuja se desplaza a
la parte mas alta de la bolsa.
IV. Producción de Concentrado de Plaquetas.
Como primer paso se debe obtener Plasma Rico en Plaquetas (PRP),
desde sangre total con una “centrifugación liviana”, luego, las plaquetas son
concentradas por “centrifugación pesada”.
Un concentrado de plaquetas no debe ser producido a partir de unidades
lipémicas, ictéricas o contaminadas con glóbulos rojos.
1. Para producir un concentrado de Plaquetas se requiere:
1.1.Que la unidad de sangre total haya sido extraída en bolsa triple o
cuádruple.
1.2.Que la bolsa satélite que almacenara las plaquetas sea de un plástico
aprobado para la conservación de ellas.
1.3.Si la unidad de sangre total no es procesada de inmediato, sea
almacenada a una temperatura de 20 a 24° C, hasta por 8 horas de
extraída.
2. Centrifugar la unidad de sangre total con una “centrifugación leve” y
temperatura de 20 a 24° C.
12 Recuerde que al peso del Plasma Fresco debe agregar el peso de la bolsa
satelite.
Imagen nro 10. Plasma para
congelar en posición Horizontal
Autor: TM. Fernando Zamorano
DuocUC
3. Proceder de acuerdo con el procedimiento II (puntos 2 a 7). Manipule con
cuidado para no dispersar las plaquetas que se encuentran suspendidas en el
plasma. La solución obtenida en la bolsa satélite corresponde a Plasma Rico
en Plaquetas (PRP).
4. Al PRP junto a la(s) otra(s) bolsa(s) satélite sométalo a una Centrifugación
Pesada, siempre a temperatura de 20 a 24° C.
5. Extraer el Plasma Fresco sobrenadante a una bolsa satélite vacía y deje en
bolsa satélite el botón plaquetario con solo 50 a 60 ml de plasma. Sellar la
tubuladura en dos puntos, entre ambas bolsas y cortar entre ellos.
6. Resuspender las Plaquetas. Las plaquetas en el boton plaquetario se agregan
en forma irreversible si son sometidas a una agitación brusca, por ello es
necesario realizar los siguientes pasos para suspenderlas:
6.1.La bolsa satélite con el botón plaquetario debe permanecer sin movimiento,
con el lado que tiene la etiqueta hacia abajo, a temperatura de 20 a 24° C
por 1 hora.
6.2.Resuspenda las plaquetas de una de las siguientes formas:
6.2.1. Manipule la bolsa satélite con plaquetas, manualmente, para lograr
una resuspensión uniforme, hasta lograr que una solución de plasma
con plaquetas suspendidas en el.
6.2.2. Coloque la bolsa satélite con plaquetas en un agitado, a temperatura
de 20 a 24° C. La agitación lenta y suave logra una resuspensión
uniforme de las plaquetas en unas 2 horas.
7. Almacene las unidades de plaquetas a una temperatura entre 20 – 24° C con
agitación suave y continua.
8. Calcule el volumen de Plaquetas obtenido, aplique la misma formula de
densidad utilizada en el procedimiento I punto 3 (solo que la densidad del
Plasma es 1,03). Regístrelo.
9. El plasma pobre en plaquetas puede congelarse rápidamente y conservar
como PFC.
V. Producción de Crioprecipitado (CPP) Globulina anti hemofílica o Factor VIII,
factor antihemofilico (FAH). Se puede concentrar el factor VIII de la
coagulación, desde el PFC, por crioprecipitación. La crioprecipitación se alcanza
mediante el descongelamiento lento (2 – 6° C) del PFC.
1. Para producir Crioprecipitado se requiere:
1.1.Que la unidad de sangre total haya sido extraída en bolsa triple o
cuádruple.
1.2.Que, si la unidad de sangre total no es procesada de inmediato, se debe
almacenar a una temperatura de 2 a 6° C, hasta por 8 horas desde la
extracción.
2. Procesar de acuerdo con el procedimiento III (Producción de PFC). La cantidad
mínima de PFC para producir CPP debe ser 205 gramos (200 ml).
3. Coloque de inmediato el Plasma Fresco en un dispositivo de congelamiento,
con el objetivo que antes de que se cumplan 8 horas desde la extracción, la
unidad esta completamente congelada. Existen las siguientes alternativas:
Autor: TM. Fernando Zamorano
DuocUC
3.1.Congelador de aire forzado o congeladores mecánicos capaces de
mantener temperaturas de – 65° C o menos,
3.2.Hielo seco o un baño de etanol-hielo seco. Las bolsas de plasma
sumergidas en líquido deben estar protegidas con una envoltura de
plástico.
4. Coloque el PFC a una temperatura de 2 a 6° C, puede usar:
4.1.Un refrigerador a 4° C.
4.2.Un baño de agua con una temperatura de 4° C, en este caso utilizar una
envoltura de plástico u otro medio para mantener secas la unidad de PFC.
5. El PFC se descongelara, hasta que el plasma logre una consistencia fangosa,
luego deberá separar el plasma liquido del crioprecipitado, de una de las
siguientes formas:
5.1.Centrifugar el plasma a una temperatura de 2 a 6° C, utilice una
centrifugación pesada. Colgar la bolsa satélite que contiene el plasma en
posición invertida, deje que el plasma fluya rápidamente a otra bolsa
satélite, el crioprecipitado se adhiere a los costados de la bolsa. Separe
rápidamente, para evitar que el crioprecipitado se disuelva y pase con el
plasma sobrenadante a la bolsa satélite.
5.2.Coloque el plasma descongelando en un desplasmatizador. Con la bolsa
en posición vertical, deje que el plasma sobrenadante fluya lentamente a la
bolsa satélite, utilice los cristales de hielo de PFC como filtro. La pasta de
crioprecipitado se adhiere a los costados de la bolsa o al hielo. La bolsa
satélite contiene plasma pobre en crioprecipitado.
6. La bolsa que contiene el CPP debe mantener unos 10 a 15 ml de plasma
sobrenadante para resuspenderlo.
7. Pinzar la tubuladura cuando se haya extraído aproximadamente el 90% del
plasma pobre en crioprecipitado.
8. Comprobar que la bolsa de CPP este correctamente rotulada (numero de
donante, fecha elaboración, tipo de componente).
9. Sellar la tubuladura entre ambas bolsas en dos lugares y cortar en esa zona.
10.Calcule el volumen de CPP obtenido, aplique la misma formula de densidad
utilizada en el procedimiento I punto 3 (solo que la densidad del Plasma Fresco
es de 1,03). Regístrelo.
11.Almacenar a -18° C o menos, de preferencia a -30° C o menos hasta 12 meses
desde la fecha de colección del la sangre.
Nota: Puede preparar CPP desde unidades de PFC hasta 12 meses
después de la extracción y congelación. La fecha de expiración del crioprecipitado
es de 12 meses, desde la fecha de la flebotomía y no desde la fecha en que fue
producido.
Autor: TM. Fernando Zamorano
DuocUC
Características de los Hemocomponentes
Hemocomponente
Conservación Volumen
(ml)
Contenido
Control de
CalidadMedio Días
Concentrados
Glóbulos Rojos
CPD
CPD-A
Heparina
Circuito abierto
21
35
2
24
280 ± 60
CGR 55 a 75%,
plasma 45 a
25%, algunas
plaquetas y
Glóbulos
Blancos
Hematocrito y
Volumen de la
unidad
Temperatura 2 - 6°C
Concentrados
Glóbulos Rojos
Leucodepletados
CPD
CPD-A
Heparina
Circuito abierto
21
35
2
24 270 ± 50
CGR 55 – 75%,
plasma 45 a
25%
Leucocitos
<5,6x106 por
unidad
Hematocrito,
Contenido de
Hemoglobina,
Volumen de la
unidad y
Recuento de
Leucocitos
Temperatura 2- 6°C
Concentrados
Glóbulos Rojos en
solución aditiva
ADSOL
NUTRICEL
OPTISOL
42
350 ± 70
CGR 50 – 70%,
plasma 50 a
30%
Hematocrito y
Volumen de
las unidad
Temperatura 2 - 6°C
Concentrados
Glóbulos Rojos en
solución aditiva
Leucodepletados
ADSOL
NUTRICEL
OPTISOL
42
280 ± 60
CGR 55 – 75%,
plasma 45 a
25%
Leucocitos
<5,6x106 por
unidad
Hematocrito,
Contenido de
Hemoglobina
volumen de la
unidad y
Recuento de
LeucocitosTemperatura 2- 6°C
Concentrados
Glóbulos Rojos en
solución aditiva
Leucoreducidos
ADSOL
NUTRICEL
OPTISOL
42
280 ± 60
CGR 50 – 70%,
plasma 50 a
30%
Leucocitos
<1,2x10 por
unidad
Hematocrito,
Contenido de
Hemoglobina,
volumen de la
unidad y
Recuento de
LeucocitosTemperatura 2 - 6°C
Concentrados
Glóbulos Rojos
lavados
Usar lo más
rápido posible
24
horas
Rango
definido
localmente
CGR, Proteínas
residuales
Hematocrito,
Contenido de
Hemoglobina,
volumen de la
unidad,
concentración
proteínas
Temperatura 2 - 6°C
Concentrado de
Plaquetas
Dependiendo
del plástico
Circuito abierto
3 – 5
24
horas
50 – 70
Plaquetas,
Plasma,
Leucocitos
Recuento
Plaquetas y
Leucocitos,
pH
Temperatura
20 a
22°C
Plasma Fresco
Congelado
Temperatura
< -30°C
20° a 24°C
1 año
4 horas
Definido
localmente
todos los
factores de la
coagulación,
albúmina.
Volumen de la
unidad,
Plaquetas,
Factor VIII:C,
recuento de
leucocitos
Autor: TM. Fernando Zamorano
DuocUC
Características de los Hemocomponentes
Hemocomponente
Conservación Volumen
(ml)
Contenido
Control de
CalidadMedio Días
Plasma pobre en
Crioprecipitado
Temperatura
< -30°C
20° a 24°C
1 año
4 horas
Definido
localmente
Volumen de la
unidad,
recuento de
leucocitos
Plasma Conservado
Congelado
Liquido
5 años
5 días
mas
que la
sangre
150 a 250
Plasma solo
factores estables
Conservación
< 18°C
Temperatura - 20°C
Crioprecipitado
Temperatura
< -30°C
20° a 24°C
1 año
4 horas
Definido
Localmente
Factor VIII C,
Factor XIII,
Fibrinogeno,
Factor von W,
Fibronectina
Volumen,
Fibrinogeno,
FVIII:C;
recuento de
Leucocitos
BIBLIOGRAFIA
1. Orientaciones y Regulaciones para Centros de Sangre en Chile. Ministerio de
Salud Chile 2004.
2. Manual Técnico. 15° edición. Asociación Argentina de Hemoterapia e
Inmunohematologia. American Association of Blood Banks 2003.
3. Guía Practica Inmunohematologia y Banco de Sangre. Carrera de Tecnología
Médica. Universidad de Chile. 1997.

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Centrifugación de sangre para obtener hemocomponentes

  • 1. Autor: Fernando Zamorano DuocUC GUIA DE TALLER Centrifugación de la Sangre. Dirigido a: Alumnos de la carrera de Técnico de Laboratorio Clínico y Banco de Sangre en la asignatura de “Banco de Sangre II” Requisito: Guía de Taller “Centrifugas”, asignatura Instrumentación Guía de Taller “Flebotomía en Donantes de Sangre” Norma para la Extracción de Sangre de Donantes de Sangre Completa, MINSAL. Circular 4C/ 25, de abril del 2000.
  • 2. Autor: TM. Fernando Zamorano DuocUC Realizado por: Tecnólogo Medico (con la especialidad de Laboratorio y Banco de Sangre). Duración del Taller: 3 módulos. Numero de Participantes: 10 alumnos Introducción. La sangre ha sido transfundida con éxito durante unos 60 años. Sin embargo, con el paso del tiempo la práctica transfusional ha cambiado radicalmente, en lo que respecta al procesamiento de sangre total1 y los productos obtenidos. Las primeras transfusiones corresponden a sangre completa, procedimiento que se realiza de brazo a brazo y que soluciona solo uno de los problemas que padecen los pacientes, aquel asociado a la capacidad transportadora de oxigeno2, mientras que, el resto de hemocomponentes se encuentra en pequeña cantidad o pierden su funcionalidad producto de la extracción o el almacenamiento. Separar la sangre en sus componentes debe haber sido una idea que nace de observar lo que ocurre en forma natural, cuando ella permanecer almacenada, pero, como este proceso se extiende por un tiempo superior al que algunos hemocomponentes se mantienen viables, fue necesario utilizar una herramienta que lo facilitara (lograr la separación en menor tiempo), lo que se logra con la centrifugación. La centrifugación corresponde a una técnica ampliamente usada en los bancos de sangre, que permite obtener Glóbulos Rojos, Plasma, Plaquetas (ver imagen nro. 1), Leucocitos y Crioprecipitado3. 1 También puede ser nombrada como Sangre Completa o Sangre Entera. 2 Función desempeñada por los glóbulos rojos. 3 Para obtener Crioprecipitado es necesario incorporar una etapa de congelación rápida y descongelación del plasma. Imagen nro 1. Productos obtenidos usando la centrifugación
  • 3. Autor: TM. Fernando Zamorano DuocUC El plasma puede ser separado en otros componentes (conocidos también como hemoderivados), si además de la centrifugación se agregan técnicas como el fraccionamiento alcohólico de Cohn, de Cohn – Oncley o la ultra-filtración. La utilización de estos procedimientos permite obtener factores de la coagulación, albúmina, inmunoglobulinas, etc. La producción de hemoderivados es un proceso industrializado que necesita de grandes cantidades de plasma, lo que implica que existan plantas para el fraccionamiento fuera de los bancos de sangre o centros de sangre. Por último, una forma alternativa para separar los componentes de la sangre es la aféresis, que puede ser aplicada para obtener solo plasma “plasmaferesis”, solo plaquetas “plaquetoferesis” o algunas de las células presentes en al sangre “citoferesis”, etc. La transfusión sanguínea es más que extraer sangre a un donante, para luego, administrarla a un paciente, hoy, se procura reponer a cada paciente solo el componente deficiente. La “terapia por componente” disminuye el riesgo de efectos adversos a la transfusión, pues no se administran componentes que el paciente no necesita y permite aprovechar cada uno de los componentes de la sangre, o sea, de cada unidad donada se logra el mayor rendimiento. Objetivos. Al finalizar el taller el alumno será capaz de:  Conocerá las técnicas de centrifugación de la sangre para obtener hemocomponentes (Los producidos mas frecuentemente en los Bancos de Sangre).  Conocerá los procedimientos adecuados que mantienen la viabilidad y la funcionalidad de los hemocomponentes. Marco Teórico. El fraccionamiento de la sangre es el proceso mediante el cual se efectúa la separación de los componentes de una unidad de sangre fresca a través de una centrifugación diferencial. Los diferentes componentes sanguíneos al poseer distintas gravedades son separados en diferentes capas por centrifugación, dependiendo de tres factores: el peso específico de cada componente, la fuerza centrífuga relativa (velocidad) y la duración de la centrifugación o sea el tiempo determinado en revoluciones por minuto (rpm) además de la temperatura, aceleración y la desaceleración. Estas últimas comprenden la aceleración o desaceleración de la velocidad en cada una de las centrifugaciones.
  • 4. Autor: TM. Fernando Zamorano DuocUC La fuerza centrifuga relativa (FCR-g) es el producto de: FCR-g = 0.00001118 x r x N2 Donde “r” es el radio del rotor de la centrifuga en centímetros y N, el número de revoluciones por minuto. Los distintos rotores tienen radios diferentes4 (ver imagen nro. 2. Radio destacado por rectángulo rojo), por lo tanto, se utilizaran diferentes velocidades para obtener la misma FCR en cada centrifuga. La velocidad y el tiempo de centrifugación son los elementos clave en la separación de los componentes, los que varían según la centrífuga, el modelo y la posición del cabezal. Para cada centrifuga se deben calcular las distintas variables (FCR y tiempo) para obtener productos de una buena calidad y no puede utilizar un mismo valor para todas. Recuerde que cuando la centrífuga está funcionando a altas velocidades, el cabezal y las copas desarrollan una fuerza de gravedad de miles de libras, debido a ello es importante que los capachos tengan igual peso, de lo contrario la máquina se desajusta, se daña, vibra y la separación de los componentes será pobre, por el inadecuado balanceo. El adecuado balanceo se puede lograr mediante discos de goma o lastre (material no punzocortante) de distintos pesos. No es recomendable utilizar agua, ni otros materiales rígidos que puedan romper la bolsa. Por otro lado, tanto el agua como dichos materiales se desplazan durante la aceleración y desaceleración produciendo resuspensión de las células, por eso, no es conveniente centrifugar sangre y colocar como contrapeso bolsas de plástico conteniendo agua. Con la centrifugación se obtienen ventajas como:  Mejora la supervivencia los componentes de la sangre, pues, permite almacenarlos en las condiciones requeridas para mantener su nivel óptimo de funcionalidad.  Mejora la práctica transfusional, al hacerla más específica y acorde con las necesidades del receptor. Para la producción de hemocomponentes es recomendable el uso de equipos de extracción de sangre (bolsas para la extracción de sangre) dobles, triples (ver imagen nro. 3) o cuádruples, que al ser sistemas 4 El largo del rotor desde el centro al extremo. Imagen nro. 2 Rotor de una Centrifuga. Imagen nro. 3 Equipo de Extracción de Sangre Triple
  • 5. Autor: TM. Fernando Zamorano DuocUC interconectados y estériles aseguran riesgo de contaminación de los productos, situación que ocurre con mas frecuencia al usar equipos simples y transfer. Descripción del Taller.  El docente hará una demostración simulada de las técnicas para producir hemocomponentes.  Los alumnos realizaran el procedimiento en forma simulada. Materiales para el Taller.  Bolsas para la extracción de sangre de distinto tipo  Extractor de plasma  Clips de metal y sellador manual  Pinzas  Tijeras  Balanza  Lápiz marcador  Centrifuga Refrigerada Procedimientos. I. Encendido y Carga de la Centrifuga. 1 Encender la centrifuga unos 10 minutos antes de su uso, para que la unidad refrigerante alcance la temperatura adecuada según el hemocomponente que será producido (en caso de plasma fresco 2° a 6° C y en el caso de plaquetas 20° a 24° C). 2 Determinar el peso (gramos) de la unidad de sangre total (bolsa principal + bolsas satélites + sangre), regístrelo. 3 Calcule el volumen de sangre extraído, proceda de la siguiente forma:  Reste al peso determinado en el punto 2 (bolsa principal, satélites y sangre) el peso del equipo de extracción vacío5 (bolsa principal y satélites).  Aplique formula de densidad6, despejando volumen (v). d = m/v  El valor obtenido corresponde al volumen de sangre extraído, el que debe oscilar en el rango de 405 a 495 ml solo así puede ser considerado para la producción de hemocomponentes, regístrelo. 5 Debe ser una bolsa de la misma marca, modelo que la bolsa con sangre total. 6 Densidad de la sangre es 1,06
  • 6. Autor: TM. Fernando Zamorano DuocUC 4 Habrá la centrífuga, retire los capachos (ver imagen nro. 4). Los capachos deben ser hermanados7 por peso (igual o semejante). 5 Introduzca una bolsa de sangre al interior del capacho y busque una bolsa con peso semejante para colocarla al interior del capacho hermano, en ambos casos todos los dispositivos de conexión de la bolsa deben quedar hacia afuera8 (ver imagen nro. 4). 6 Iguale el peso de capachos hermanos, agregue trozos de goma de distinto tamaño entre la bolsa satélite y la pared del capacho, nunca en el fondo, pues durante la centrifugación pueden romper la bolsa de sangre. 7 En el caso de que el capacho disponga de tapa, colóquela. 8 Los capachos hermanados son depositados en la centrifuga, uno frente al otro, para mantener equilibrada la centrifuga (balanceo). 9 En el caso que no cuente con bolsas con sangre suficientes para todos los capachos de la centrifuga:  Si dispone de una bolsa de sangre, en el capacho hermano coloque una bolsa de extracción a la que ha introducido agua y para igualar el peso, agregue trozos de goma.  Si no dispone de bolsas para un par de capachos, colóquelos vacíos en la centrifugas, nunca utilice una centrifuga sin su capachos. 10 Cierre la centrífuga y observe que se alcanza la temperatura que se necesita. 11 Proceda programar el tiempo y RPM al cual debe funcionar la centrífuga, para lograr el producto que desea obtener. A menos que este indicado en la técnica, no utilice el freno de la centrifuga. A continuación se describe en forma general los procedimientos para obtener los hemocomponentes más comunes. II. Producción de Concentrado de Glóbulos Rojos (CGR). El CGR se obtiene por eliminación del plasma sobrenadante de la unidad la sangre total, luego que ha sido centrifugada. 7 Se habla de capachos hermanos en el caso de capachos de un mismo peso o que en la centrifuga se ubican uno frente al otro. 8 Las bolsas satélites se colocan extendidas detrás de la bolsa principal, con la tubuladura que las une entre ellas. La tubuladura que conectaba con la aguja se coloca alrededor de las bolsas, de forma que compacte bolsas y tubuladuras, evitando que durante la centrifugación estas salgan del capacho y se rompan (pero no se debe formar una cintura en la bolsa de sangre). Imagen nro. 4 Capacho y Equipo de extracción de sangre
  • 7. Autor: TM. Fernando Zamorano DuocUC 1. Centrifugar la sangre total con una “centrifugación pesada”9 a una temperatura de 4° C. 2. Luego de centrifugar coloque la bolsa principal que contiene la sangre en un Desplasmatizador. Manipule con cuidado la bolsa de sangre, para no mezcla las distintas capas en que ha separado. 3. Suelte el muelle del Desplasmatizado (ver imagen nro. 5), deje que la placa entre en contacto, suavemente, con la bolsa (ver imagen nro. 6). 4. Realice nudos flojos (2) en la tubuladura, entre la bolsa primaria y la bifurcación en “Y” de la tubuladura10. 5. Si son dos o más las bolsas satélites, pinzar la tubuladura de aquellas a las que no debe ingresar Plasma. 6. Rotular la bolsa satélite, que contendrá el Plasma con la misma identificación de la bolsa principal. 7. Rompa el sello de la bolsa principal que la comunica con las bolsas satélites (ver imagen nro. 7), deje pasar el plasma a la bolsa satélite. 8. La bolsa principal que contiene los glóbulos rojos debe mantener plasma (aproximadamente unos 50 ml)11, al evaluar el CGR su microhematocrito debe ser de 70 hasta 80% (ver imagen nro. 8). 9. Pinzar la tubuladura cuando haya trasladado el plasma. Sellar la comunicación entre la bolsa principal y las satélites, cerrando los nudos flojos o aplicando sellos a la tubuladura, cortar la tubuladura y observar que en los extremos no existan filtraciones. 10.Calcule el volumen de CGR obtenido, aplique la misma formula de densidad utilizada en el procedimiento I punto 3 (solo que la densidad del Glóbulo Rojos es de 1,1). Regístrelo. 11.Almacenar el hemocomponente obtenido a la temperatura adecuada (ver imagen nro. 9). Nota: Se puede producir hemocomponentes en un equipo simple, siempre y cuando, se prevenga toda posibilidad de contaminación bacteriana, se trabaje en un ambiente limpio, utilizando materiales estériles y técnicas de 9 Una Centrifugación Pesada, Liviana o Leve deberá ser determinada para cada centrifuga, por lo tanto, debe buscar los datos de las variables en los manuales técnicos de cada unidad o centro productivo. 10 Si dispone de un sellador de tubuladura no requiere realizar nudos flojos. 11 Excepto si trabaja con bolsas que contengan solución aditiva, en cuyo caso se extrae prácticamente todo el plasma. Imagen nro 8. CGR y Plasma Fresco Imagen nro 5. Desplasmatizador Imagen nro 6. Placa del Desplasmatizador Imagen nro 7. Bolsa Principal
  • 8. Autor: TM. Fernando Zamorano DuocUC manejo aséptico, manteniendo una presión positiva sobre la bolsa original hasta que sea sellada. La esterilidad de los componentes preparados en un sistema abierto debe ser monitoreada, utilizando métodos validados. Los componentes sanguíneos obtenidos por medio de un sistema abierto deben ser utilizados tan pronto como sea posible. Los hemocomponentes cuya temperatura de almacenamiento es de 2° a 6° C deben ser transfundidos antes de 24 horas; la nueva fecha y hora de vencimiento se debe anotar en al etiqueta y en los registros. Producción de Concentrado de Glóbulos Rojos en Solución Aditiva. La recolección de sangre con una solución aditiva permite la remoción de un volumen mayor de plasma. Una vez removido el plasma, se permite que el aditivo fluya desde la bolsa satélite con el aditivo a la bolsa con los glóbulos rojos. Producción de Concentrado de Glóbulos Rojos Leucodepletados. Durante la filtración en línea de la sangre entera anticoagulada, ésta pasa a través se un filtro de leucorreducción colocado dentro del equipo de extracción de sangre. La sangre obtenida puede ser manufacturada para obtener CGR leucorreducidos. De este producto no pueden prepararse Concentrado Plaquetario debido a que la filtración de sangre entera reduce el número de plaquetas en ellas. Producción de Concentrado de Glóbulos Rojos Leucoreducidos. El Alumno debe investigar sobre la Preparación de este Hemocomponente. Producción de Concentrado de Glóbulos Rojos Lavados El Alumno debe investigar sobre la Preparación de este Hemocomponente. Producción de Concentrado de Glóbulos Rojos Irradiados El Alumno debe investigar sobre la Preparación de este Hemocomponente. III. Producción de Concentrado de Plasma Fresco Congelado (PFC). El plasma se separa de los elementos celulares de la sangre y se congela para preservar la actividad de los factores lábiles de la coagulación. El Plasma no debe ser producido a partir de unidades lipémicas, ictéricas o contaminadas con glóbulos rojos. Imagen nro 9. CGR
  • 9. Autor: TM. Fernando Zamorano DuocUC 1. La unidad extraída se debe refrigerar a 4° C (2 – 6° C) si no se procesa de inmediato, hasta por un máximo de 8 horas desde la extracción. 2. Al ejecutar el procedimiento II, obtiene CGR y Plasma Fresco (puntos 7, 9 y 10), al traspasa el Plasma Fresco sobrenadante a una bolsa satélite. 3. Deje pasar unos 230-250 grs12 de plasma a la bolsa satélite. 4. Calcule el volumen de Plasma Fresco obtenido, aplique la misma formula de densidad utilizada en el procedimiento I punto 3 (solo que la densidad del Plasma Fresco es de 1,03). Regístrelo. 5. El Plasma Fresco se debe congelar a –18° C o menos, para mantenerlo en la condición de Plasma Fresco Congelado, todo el procedimiento debe realizarse en no mas de 8 horas desde al extracción. 6. Al almacenar el PFC es recomendable usar un sistema que permita detectar eventos de descongelación no programados, se describen los siguientes: 6.1.Durante la congelación del Plasma coloque un tubo contra la bolsa que contiene el Plasma, permanecerá la marca una vez congelado. En caso de descongelación ello desaparecerá. 6.2.Durante la congelación del Plasma, coloque la bolsa en posición horizontal, la burbuja de aire al interior de ella se ubicara mas o menos en la posición indicada en la imagen nro 10; luego al ser almacenado ubicarlo en posición vertical, en caso que se descongele la burbuja se desplaza a la parte mas alta de la bolsa. IV. Producción de Concentrado de Plaquetas. Como primer paso se debe obtener Plasma Rico en Plaquetas (PRP), desde sangre total con una “centrifugación liviana”, luego, las plaquetas son concentradas por “centrifugación pesada”. Un concentrado de plaquetas no debe ser producido a partir de unidades lipémicas, ictéricas o contaminadas con glóbulos rojos. 1. Para producir un concentrado de Plaquetas se requiere: 1.1.Que la unidad de sangre total haya sido extraída en bolsa triple o cuádruple. 1.2.Que la bolsa satélite que almacenara las plaquetas sea de un plástico aprobado para la conservación de ellas. 1.3.Si la unidad de sangre total no es procesada de inmediato, sea almacenada a una temperatura de 20 a 24° C, hasta por 8 horas de extraída. 2. Centrifugar la unidad de sangre total con una “centrifugación leve” y temperatura de 20 a 24° C. 12 Recuerde que al peso del Plasma Fresco debe agregar el peso de la bolsa satelite. Imagen nro 10. Plasma para congelar en posición Horizontal
  • 10. Autor: TM. Fernando Zamorano DuocUC 3. Proceder de acuerdo con el procedimiento II (puntos 2 a 7). Manipule con cuidado para no dispersar las plaquetas que se encuentran suspendidas en el plasma. La solución obtenida en la bolsa satélite corresponde a Plasma Rico en Plaquetas (PRP). 4. Al PRP junto a la(s) otra(s) bolsa(s) satélite sométalo a una Centrifugación Pesada, siempre a temperatura de 20 a 24° C. 5. Extraer el Plasma Fresco sobrenadante a una bolsa satélite vacía y deje en bolsa satélite el botón plaquetario con solo 50 a 60 ml de plasma. Sellar la tubuladura en dos puntos, entre ambas bolsas y cortar entre ellos. 6. Resuspender las Plaquetas. Las plaquetas en el boton plaquetario se agregan en forma irreversible si son sometidas a una agitación brusca, por ello es necesario realizar los siguientes pasos para suspenderlas: 6.1.La bolsa satélite con el botón plaquetario debe permanecer sin movimiento, con el lado que tiene la etiqueta hacia abajo, a temperatura de 20 a 24° C por 1 hora. 6.2.Resuspenda las plaquetas de una de las siguientes formas: 6.2.1. Manipule la bolsa satélite con plaquetas, manualmente, para lograr una resuspensión uniforme, hasta lograr que una solución de plasma con plaquetas suspendidas en el. 6.2.2. Coloque la bolsa satélite con plaquetas en un agitado, a temperatura de 20 a 24° C. La agitación lenta y suave logra una resuspensión uniforme de las plaquetas en unas 2 horas. 7. Almacene las unidades de plaquetas a una temperatura entre 20 – 24° C con agitación suave y continua. 8. Calcule el volumen de Plaquetas obtenido, aplique la misma formula de densidad utilizada en el procedimiento I punto 3 (solo que la densidad del Plasma es 1,03). Regístrelo. 9. El plasma pobre en plaquetas puede congelarse rápidamente y conservar como PFC. V. Producción de Crioprecipitado (CPP) Globulina anti hemofílica o Factor VIII, factor antihemofilico (FAH). Se puede concentrar el factor VIII de la coagulación, desde el PFC, por crioprecipitación. La crioprecipitación se alcanza mediante el descongelamiento lento (2 – 6° C) del PFC. 1. Para producir Crioprecipitado se requiere: 1.1.Que la unidad de sangre total haya sido extraída en bolsa triple o cuádruple. 1.2.Que, si la unidad de sangre total no es procesada de inmediato, se debe almacenar a una temperatura de 2 a 6° C, hasta por 8 horas desde la extracción. 2. Procesar de acuerdo con el procedimiento III (Producción de PFC). La cantidad mínima de PFC para producir CPP debe ser 205 gramos (200 ml). 3. Coloque de inmediato el Plasma Fresco en un dispositivo de congelamiento, con el objetivo que antes de que se cumplan 8 horas desde la extracción, la unidad esta completamente congelada. Existen las siguientes alternativas:
  • 11. Autor: TM. Fernando Zamorano DuocUC 3.1.Congelador de aire forzado o congeladores mecánicos capaces de mantener temperaturas de – 65° C o menos, 3.2.Hielo seco o un baño de etanol-hielo seco. Las bolsas de plasma sumergidas en líquido deben estar protegidas con una envoltura de plástico. 4. Coloque el PFC a una temperatura de 2 a 6° C, puede usar: 4.1.Un refrigerador a 4° C. 4.2.Un baño de agua con una temperatura de 4° C, en este caso utilizar una envoltura de plástico u otro medio para mantener secas la unidad de PFC. 5. El PFC se descongelara, hasta que el plasma logre una consistencia fangosa, luego deberá separar el plasma liquido del crioprecipitado, de una de las siguientes formas: 5.1.Centrifugar el plasma a una temperatura de 2 a 6° C, utilice una centrifugación pesada. Colgar la bolsa satélite que contiene el plasma en posición invertida, deje que el plasma fluya rápidamente a otra bolsa satélite, el crioprecipitado se adhiere a los costados de la bolsa. Separe rápidamente, para evitar que el crioprecipitado se disuelva y pase con el plasma sobrenadante a la bolsa satélite. 5.2.Coloque el plasma descongelando en un desplasmatizador. Con la bolsa en posición vertical, deje que el plasma sobrenadante fluya lentamente a la bolsa satélite, utilice los cristales de hielo de PFC como filtro. La pasta de crioprecipitado se adhiere a los costados de la bolsa o al hielo. La bolsa satélite contiene plasma pobre en crioprecipitado. 6. La bolsa que contiene el CPP debe mantener unos 10 a 15 ml de plasma sobrenadante para resuspenderlo. 7. Pinzar la tubuladura cuando se haya extraído aproximadamente el 90% del plasma pobre en crioprecipitado. 8. Comprobar que la bolsa de CPP este correctamente rotulada (numero de donante, fecha elaboración, tipo de componente). 9. Sellar la tubuladura entre ambas bolsas en dos lugares y cortar en esa zona. 10.Calcule el volumen de CPP obtenido, aplique la misma formula de densidad utilizada en el procedimiento I punto 3 (solo que la densidad del Plasma Fresco es de 1,03). Regístrelo. 11.Almacenar a -18° C o menos, de preferencia a -30° C o menos hasta 12 meses desde la fecha de colección del la sangre. Nota: Puede preparar CPP desde unidades de PFC hasta 12 meses después de la extracción y congelación. La fecha de expiración del crioprecipitado es de 12 meses, desde la fecha de la flebotomía y no desde la fecha en que fue producido.
  • 12. Autor: TM. Fernando Zamorano DuocUC Características de los Hemocomponentes Hemocomponente Conservación Volumen (ml) Contenido Control de CalidadMedio Días Concentrados Glóbulos Rojos CPD CPD-A Heparina Circuito abierto 21 35 2 24 280 ± 60 CGR 55 a 75%, plasma 45 a 25%, algunas plaquetas y Glóbulos Blancos Hematocrito y Volumen de la unidad Temperatura 2 - 6°C Concentrados Glóbulos Rojos Leucodepletados CPD CPD-A Heparina Circuito abierto 21 35 2 24 270 ± 50 CGR 55 – 75%, plasma 45 a 25% Leucocitos <5,6x106 por unidad Hematocrito, Contenido de Hemoglobina, Volumen de la unidad y Recuento de Leucocitos Temperatura 2- 6°C Concentrados Glóbulos Rojos en solución aditiva ADSOL NUTRICEL OPTISOL 42 350 ± 70 CGR 50 – 70%, plasma 50 a 30% Hematocrito y Volumen de las unidad Temperatura 2 - 6°C Concentrados Glóbulos Rojos en solución aditiva Leucodepletados ADSOL NUTRICEL OPTISOL 42 280 ± 60 CGR 55 – 75%, plasma 45 a 25% Leucocitos <5,6x106 por unidad Hematocrito, Contenido de Hemoglobina volumen de la unidad y Recuento de LeucocitosTemperatura 2- 6°C Concentrados Glóbulos Rojos en solución aditiva Leucoreducidos ADSOL NUTRICEL OPTISOL 42 280 ± 60 CGR 50 – 70%, plasma 50 a 30% Leucocitos <1,2x10 por unidad Hematocrito, Contenido de Hemoglobina, volumen de la unidad y Recuento de LeucocitosTemperatura 2 - 6°C Concentrados Glóbulos Rojos lavados Usar lo más rápido posible 24 horas Rango definido localmente CGR, Proteínas residuales Hematocrito, Contenido de Hemoglobina, volumen de la unidad, concentración proteínas Temperatura 2 - 6°C Concentrado de Plaquetas Dependiendo del plástico Circuito abierto 3 – 5 24 horas 50 – 70 Plaquetas, Plasma, Leucocitos Recuento Plaquetas y Leucocitos, pH Temperatura 20 a 22°C Plasma Fresco Congelado Temperatura < -30°C 20° a 24°C 1 año 4 horas Definido localmente todos los factores de la coagulación, albúmina. Volumen de la unidad, Plaquetas, Factor VIII:C, recuento de leucocitos
  • 13. Autor: TM. Fernando Zamorano DuocUC Características de los Hemocomponentes Hemocomponente Conservación Volumen (ml) Contenido Control de CalidadMedio Días Plasma pobre en Crioprecipitado Temperatura < -30°C 20° a 24°C 1 año 4 horas Definido localmente Volumen de la unidad, recuento de leucocitos Plasma Conservado Congelado Liquido 5 años 5 días mas que la sangre 150 a 250 Plasma solo factores estables Conservación < 18°C Temperatura - 20°C Crioprecipitado Temperatura < -30°C 20° a 24°C 1 año 4 horas Definido Localmente Factor VIII C, Factor XIII, Fibrinogeno, Factor von W, Fibronectina Volumen, Fibrinogeno, FVIII:C; recuento de Leucocitos BIBLIOGRAFIA 1. Orientaciones y Regulaciones para Centros de Sangre en Chile. Ministerio de Salud Chile 2004. 2. Manual Técnico. 15° edición. Asociación Argentina de Hemoterapia e Inmunohematologia. American Association of Blood Banks 2003. 3. Guía Practica Inmunohematologia y Banco de Sangre. Carrera de Tecnología Médica. Universidad de Chile. 1997.