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César Castor Fretes Torales.
 Los enterococos forman parte de la flora
  gastrointestinal, aislándose en más del 90% de los
  individuos sanos. A pesar de su escasa virulencia, los
  enterococos son uno de los principales agentes de
  infección nosocomial. La infección enterocócica más
  frecuente es la urinaria.
 La especie aislada con mayor frecuencia
  es Enterococcus faecalis (80-90%), seguida de
  Enterococcus faecium (5-10%) y otras especies de
  enterococo (menos del 10%).
 Los enterococos se caracterizan por presentar resistencia intrínseca a
  un gran número de antibióticos (b -lactámicos, aminoglucósidos y
  trimetoprim-sulfametoxazol) y por su capacidad para adquirir nuevas
  resistencias. La resistencia intrínseca a los b -lactámicos se manifiesta
  por concentraciones mínimas inhibitorias (CMI) más elevadas que en
  el género Streptococcus.

 La vancomicina se desarrolló en los años 50 como un antimicrobiano
  activo frente a grampositivos y, sobre todo, frente a los estafilococos
  productores de b -lactamasa. El desarrollo de los nuevos antibióticos
  con menos efectos indeseables limitó su uso a los casos de alergia a
  los b -lactámicos. La aparición, en los años 80, de las cepas
  de Staphylococcus aureus resistentes a meticilina favoreció de nuevo el
  uso de la vancomicina, en estos momentos con menor desarrollo de
  reacciones alérgicas, toxicidad ótica y renal.

 En la actualidad, este tipo de resistencia se asocia a tres fenotipos bien
  definidos: VanA, VanB y VanC. Últimamente, se ha descrito un cuarto
  tipo, VanD, en una cepa de E. faecium.
CMI (m g/ml)
Fenotipo   Descrito en
                              Vancomicina                  Teicoplanina

VanA       E. faecium          64- >1000                     16- 512
           E. faecalis
           E. avium
           E. durans
           E. hirae
           E. mundtii
           E. raffinosus
           E. gallinarum
           E. casseliflavus
VanB       E. faecium           4- 1024                      0,25- 2
           E. faecalis
VanC       E. gallinarum         2- 32                       0,12- 2
           E. casseliflavus
           E. flavescens
VanD       E. faecium                                         2- 4
 Fenotipo VanA: se caracterizan por presentar
  resistencia inducible de alto nivel tanto a la
  vancomicina (MIC 64 m g/ml) como a la teicoplanina
  (MIC 16 m g/ml). La resistencia tipo VanA es
  transferible.
 FenotipoVanB: Las cepas portadoras del gen vanB se
  caracterizan por niveles variables de resistencia a la
  vancomicina (CIM entre 4 y 1000 m g/ml) y
  sensibilidad a la teicoplanina.
 Fenotipo VanC: El fenotipo VanC se observa en las
 especies Enterococcus gallinarum, Enterococcus
 casseliflavus y Enterococcus flavescens,
 intrínsecamente resistentes a la vancomicina, con CIM
 entre 2-32 m g/ml,pero sensibles a la teicoplanina.

 Fenotipo VanD: Esta cepa presentaba resistencia
 constitutiva moderada a la vancomicina (CMI
 64 m g/ml) y de bajo nivel a la teicoplanina (CMI
 4 m g/ml).
 Entre los factores de riesgo de la infección por ERV, hay
  muchos comunes a la infección por enterococos sensibles a
  la vancomicina: a) la administración de antibióticos
  múltiples o de amplio espectro (vancomicina,
  cefalosporinas, carbapenemas y antibióticos con acción
  antianaeróbica, como la clindamicina y el metronidazol),
  que favorecerían el sobrecrecimiento de los enterococos al
  actuar sobre el resto de la flora bacteriana, b) pacientes con
  enfermedad de base grave: transplante, cáncer, diabetes
  mellitus, etc., c) la hospitalización en una unidad
  quirúrgica, onco-hematológica o de cuidados intensivos, d)
  una prolongada estancia hospitalaria, e) la yatrogenia no
  invasiva, como la inmunosupresión, o invasiva, como la
  cateterización, y f) la proximidad a pacientes colonizados o
  infectados por ERV.
 Dentro del género Enterococcus, es conocida la
 dificultad en la detección de la resistencia a
 determinados antibióticos como, por ejemplo, los b -
 láctamicos. Las cepas productoras de b -lactamasa
 pueden no detectarse mediante los métodos
 convencionales de estudio de la sensibilidad
 (microdilución y difusión en agar), por el bajo nivel de
 producción de la enzima y los bajos inóculos
 utilizados. Por esta razón, en las cepas aisladas en
 casos de endocarditis o de infecciones graves, deberá
 estudiarse siempre la presencia de b -lactamasa
 mediante el disco de nitrocefina.
 Actualmente, está claramente reconocida la dificultad
 en la detección de las cepas de enterococo con
 resistencia intermedia o baja, sobre todo cuando se
 utilizan métodos automatizados o semiautomatizados
 y el método de difusión en agar. Existen múltiples
 estudios multicéntricos que ponen de manifiesto la
 dificultad en la detección de la resistencia tipo VanB
 cuando ésta es baja.
 El método de difusión con discos es poco
  discriminativo. Los halos de inhibición son pequeños,
  al igual que las diferencias entre los halos que indican
  sensibilidad o resistencia. El método cuantitativo de
  difusión E-test permite detectar todos los niveles de
  resistencia pero, al igual que en la técnica con discos,
  debe valorarse cualquier crecimiento en el interior del
  halo de inhibición y, en caso de duda, realizar nueva
  lectura tras 24 horas de incubación.
 Los métodos comerciales automatizados y
  semiautomatizados son útiles para detectar la
  resistencia elevada, pero fallan en la detección de la
  media y baja resistencia, probablemente debido a que
  el corto tiempo de incubación no permite la inducción
  ni la expresión de la resistencia.
 Otro factor importante en la detección en el laboratorio de la
  resistencia a la vancomicina es la correcta identificación de la
  especie. E. gallinarum y el complejo de especies E. casseliflavus-
  E. flavescens pueden confundirse, en la práctica diaria, con
  aislamientos clínicos de E. faecium, si no se les realiza el estudio
  del pigmento y de la movilidad. Algunos aislamientos de E.
  gallinarum no son móviles, lo que dificulta todavía más su
  identificación. En ocasiones las características fenotípicas no son
  suficientes para la identificación y es necesario recurrir a
  métodos genéticos (PCR). A pesar de que las especies de
  Enterococcus con resistencia intrínseca a la vancomicina
  representan un número muy pequeño de los aislamientos y se
  trata generalmente de casos de colonización/infección adquirida
  en la comunidad, su verdadero papel no estará claramente
  establecido hasta que no exista un método simple que permita
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Enterococos resistencia vancomicina

  • 2.  Los enterococos forman parte de la flora gastrointestinal, aislándose en más del 90% de los individuos sanos. A pesar de su escasa virulencia, los enterococos son uno de los principales agentes de infección nosocomial. La infección enterocócica más frecuente es la urinaria.  La especie aislada con mayor frecuencia es Enterococcus faecalis (80-90%), seguida de Enterococcus faecium (5-10%) y otras especies de enterococo (menos del 10%).
  • 3.  Los enterococos se caracterizan por presentar resistencia intrínseca a un gran número de antibióticos (b -lactámicos, aminoglucósidos y trimetoprim-sulfametoxazol) y por su capacidad para adquirir nuevas resistencias. La resistencia intrínseca a los b -lactámicos se manifiesta por concentraciones mínimas inhibitorias (CMI) más elevadas que en el género Streptococcus.  La vancomicina se desarrolló en los años 50 como un antimicrobiano activo frente a grampositivos y, sobre todo, frente a los estafilococos productores de b -lactamasa. El desarrollo de los nuevos antibióticos con menos efectos indeseables limitó su uso a los casos de alergia a los b -lactámicos. La aparición, en los años 80, de las cepas de Staphylococcus aureus resistentes a meticilina favoreció de nuevo el uso de la vancomicina, en estos momentos con menor desarrollo de reacciones alérgicas, toxicidad ótica y renal.  En la actualidad, este tipo de resistencia se asocia a tres fenotipos bien definidos: VanA, VanB y VanC. Últimamente, se ha descrito un cuarto tipo, VanD, en una cepa de E. faecium.
  • 4. CMI (m g/ml) Fenotipo Descrito en Vancomicina Teicoplanina VanA E. faecium 64- >1000 16- 512 E. faecalis E. avium E. durans E. hirae E. mundtii E. raffinosus E. gallinarum E. casseliflavus VanB E. faecium 4- 1024 0,25- 2 E. faecalis VanC E. gallinarum 2- 32 0,12- 2 E. casseliflavus E. flavescens VanD E. faecium 2- 4
  • 5.  Fenotipo VanA: se caracterizan por presentar resistencia inducible de alto nivel tanto a la vancomicina (MIC 64 m g/ml) como a la teicoplanina (MIC 16 m g/ml). La resistencia tipo VanA es transferible.  FenotipoVanB: Las cepas portadoras del gen vanB se caracterizan por niveles variables de resistencia a la vancomicina (CIM entre 4 y 1000 m g/ml) y sensibilidad a la teicoplanina.
  • 6.  Fenotipo VanC: El fenotipo VanC se observa en las especies Enterococcus gallinarum, Enterococcus casseliflavus y Enterococcus flavescens, intrínsecamente resistentes a la vancomicina, con CIM entre 2-32 m g/ml,pero sensibles a la teicoplanina.  Fenotipo VanD: Esta cepa presentaba resistencia constitutiva moderada a la vancomicina (CMI 64 m g/ml) y de bajo nivel a la teicoplanina (CMI 4 m g/ml).
  • 7.  Entre los factores de riesgo de la infección por ERV, hay muchos comunes a la infección por enterococos sensibles a la vancomicina: a) la administración de antibióticos múltiples o de amplio espectro (vancomicina, cefalosporinas, carbapenemas y antibióticos con acción antianaeróbica, como la clindamicina y el metronidazol), que favorecerían el sobrecrecimiento de los enterococos al actuar sobre el resto de la flora bacteriana, b) pacientes con enfermedad de base grave: transplante, cáncer, diabetes mellitus, etc., c) la hospitalización en una unidad quirúrgica, onco-hematológica o de cuidados intensivos, d) una prolongada estancia hospitalaria, e) la yatrogenia no invasiva, como la inmunosupresión, o invasiva, como la cateterización, y f) la proximidad a pacientes colonizados o infectados por ERV.
  • 8.  Dentro del género Enterococcus, es conocida la dificultad en la detección de la resistencia a determinados antibióticos como, por ejemplo, los b - láctamicos. Las cepas productoras de b -lactamasa pueden no detectarse mediante los métodos convencionales de estudio de la sensibilidad (microdilución y difusión en agar), por el bajo nivel de producción de la enzima y los bajos inóculos utilizados. Por esta razón, en las cepas aisladas en casos de endocarditis o de infecciones graves, deberá estudiarse siempre la presencia de b -lactamasa mediante el disco de nitrocefina.
  • 9.  Actualmente, está claramente reconocida la dificultad en la detección de las cepas de enterococo con resistencia intermedia o baja, sobre todo cuando se utilizan métodos automatizados o semiautomatizados y el método de difusión en agar. Existen múltiples estudios multicéntricos que ponen de manifiesto la dificultad en la detección de la resistencia tipo VanB cuando ésta es baja.
  • 10.  El método de difusión con discos es poco discriminativo. Los halos de inhibición son pequeños, al igual que las diferencias entre los halos que indican sensibilidad o resistencia. El método cuantitativo de difusión E-test permite detectar todos los niveles de resistencia pero, al igual que en la técnica con discos, debe valorarse cualquier crecimiento en el interior del halo de inhibición y, en caso de duda, realizar nueva lectura tras 24 horas de incubación.  Los métodos comerciales automatizados y semiautomatizados son útiles para detectar la resistencia elevada, pero fallan en la detección de la media y baja resistencia, probablemente debido a que el corto tiempo de incubación no permite la inducción ni la expresión de la resistencia.
  • 11.  Otro factor importante en la detección en el laboratorio de la resistencia a la vancomicina es la correcta identificación de la especie. E. gallinarum y el complejo de especies E. casseliflavus- E. flavescens pueden confundirse, en la práctica diaria, con aislamientos clínicos de E. faecium, si no se les realiza el estudio del pigmento y de la movilidad. Algunos aislamientos de E. gallinarum no son móviles, lo que dificulta todavía más su identificación. En ocasiones las características fenotípicas no son suficientes para la identificación y es necesario recurrir a métodos genéticos (PCR). A pesar de que las especies de Enterococcus con resistencia intrínseca a la vancomicina representan un número muy pequeño de los aislamientos y se trata generalmente de casos de colonización/infección adquirida en la comunidad, su verdadero papel no estará claramente establecido hasta que no exista un método simple que permita una correcta identificación.