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2- Bacterias en vida libre
- Se cuantificó la
cantidad de bacterias
cultivables fijadoras de
nitrógeno mediante la
técnica de las
diluciones seriadas
- Se obtuvo un total de
1,62 x 108 unidades
formadoras de colonias
(UFC) por gramo de
compost seco
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de las bacterias
seleccionadas en el
microscopio
- Prueba de producción de
sideróforos: se forma halo
naranja
- Prueba de solubilización
de fosfato inorgánico: se
forma halo trasparente
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presentaron propiedades
PGPR: cepa 1, 2, 7 y 9
- Fueron mejores que la
cepa PGPR de referencia
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- Se eligieron estas 4 cepas
para identificarlas
- Se extrajo su ADN y se
amplificó el gen 16s rRNA
- Su tamaño se comprobó
por electroforesis de gel de
agarosa y se secuenció
- Los aislados pertenecían a
los géneros Burkholderia,
Bacillus,
Gluconacetobacter y
Pseudomonas
- Una búsqueda
bibliográfica confirmó que
esos géneros tienen
propiedades PGPR
CONCLUSIONES
- Los composts de alperujo
son una fuente de bacterias
fijadoras de nitrógeno.
- Hemos conseguido aislar
4 bacterias con propieades
PGPR de los géneros:
Burkholderia, Bacillus,
Gluconacetobacter y
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  • 1. Biofertilizantes con sabor a aceite de oliva: Aislamiento de bacterias promotoras del crecimiento vegetal (PGPR) de composts de “alperujo” Alba Díaz Arco, María Molina Muñoz, Elena Navarro García, Carlos Ortega Fernández, Laura Palma Pérez, María Carmen Sarmiento Vega, Antonio Castellano Hinojosa, Germán Tortosa Muñoz y Eulogio J. Bedmar Web del proyecto: http://www.compostandociencia.com/ proyectos/piiisa2015-2016
  • 2. -España (Andalucía) es la principal productora de aceite de oliva a nivel mundial - El 20% del peso de una aceituna es aceite - El 80% restante genera un residuo orgánico muy contaminante llamado “alperujo” - Para poder reutilizar este residuo orgánico debemos transformarlo
  • 3. Inicio del compostaje 8 semanas Maduro - El COMPOSTAJE es un método MICROBIOLÓGICO que permite transformar residuos orgánicos en enmiendas o abonos orgánicos (COMPOSTS) - Es sencillo y tecnológicamente asequible - Sirve para transformar el “alperujo” - El COMPOST obtenido puede contener microorganismos beneficiosos para la agricultura
  • 4. - Estos microorganismos se los conoce como BACTERIAS PROMOTORAS DEL CRECIMIENTO VEGETAL (PGPR) - Ayudan a las plantas mejorando la disponibilidad de nutrientes del suelo ¿Cómo lo hacen? - Fijación biológica de nitrógeno atmosférico - Producción de sideróforos (quelantes de Fe) - Solubilización de fosfato insoluble del suelo
  • 5. OBJETIVO DE INVESTIGACIÓN Aislar e identificar bacterias PGPR presentes en un compost de “alperujo” Dos aproximaciones metodológicas basadas en bacterias fijadoras de nitrógeno: 1- Simbiosis con leguminosas 2- Bacterias en vida libre
  • 6. 1- Bacterias que forman simbiosis con leguminosas - Jarras Leonard - Disolución nutritiva sin nitrógeno - Plantas de soja, judía y garbanzo - Material estéril Dos experimentos: Compost sólido Compost líquido Dos tratamientos: Con compost Sin compost
  • 7. 1- Bacterias que forman simbiosis con leguminosas - Solo encontramos nódulos en raíces de judía al añadir el compost en forma líquida - No parece haber diferencias entre plantas con y sin compost - Hay que hacer otro experimento para confirmar este resultado
  • 8. 2- Bacterias en vida libre - Extracción acuosa del compost - Diluciones seriadas y cultivo en placas petri con medio Burk (sin nitrógeno) - Selección de bacterias según su morfología usando un microscopio óptico - Aislamiento y crecimiento en placa “master” - Cultivo en medio líquido - Pruebas PGPR: producción de sideróforos y solubilización de fosfato - Aislamiento de ADN, amplificación del gen 16s rRNA, secuenciación e identificación de los aislados
  • 9. 2- Bacterias en vida libre - Se cuantificó la cantidad de bacterias cultivables fijadoras de nitrógeno mediante la técnica de las diluciones seriadas - Se obtuvo un total de 1,62 x 108 unidades formadoras de colonias (UFC) por gramo de compost seco
  • 10. - Aspecto de algunas de las bacterias seleccionadas en el microscopio
  • 11. - Prueba de producción de sideróforos: se forma halo naranja - Prueba de solubilización de fosfato inorgánico: se forma halo trasparente - Solo 4 aislados presentaron propiedades PGPR: cepa 1, 2, 7 y 9 - Fueron mejores que la cepa PGPR de referencia Azospirilum brasilense
  • 12. - Se eligieron estas 4 cepas para identificarlas - Se extrajo su ADN y se amplificó el gen 16s rRNA - Su tamaño se comprobó por electroforesis de gel de agarosa y se secuenció - Los aislados pertenecían a los géneros Burkholderia, Bacillus, Gluconacetobacter y Pseudomonas - Una búsqueda bibliográfica confirmó que esos géneros tienen propiedades PGPR
  • 13. CONCLUSIONES - Los composts de alperujo son una fuente de bacterias fijadoras de nitrógeno. - Hemos conseguido aislar 4 bacterias con propieades PGPR de los géneros: Burkholderia, Bacillus, Gluconacetobacter y Pseudomonas. - Los compost de “alperujo” son potencialmente un fertilizante biológico además de orgánico.
  • 14. ¡¡ Muchas gracias por vuestra intención!!