Perito

1. ARTÍCULO CIENTÍFICO
ANÁLISIS TOXICOLÓGICO DE CANABINOIDES EN CASOS FORENSES
TOXICOLOGICAL ANALYSIS OF CANNABINOIDS IN FORENSIC CASES
Autor: BQF.BYRON ISRAEL GUEVARA BONILLA
Fecha de Aceptación: 04 agosto 2017
RESUMEN
El cuerpo humano posee sitios específicos de acople para los cannabinoides en la
superficie de muchos tipos de células y nuestro organismo produce varios
endocannabinoides, derivados de ácidos grasos, que se acoplan a estos receptores
cannabinoides (CB) activándolos. Juntos, receptores CB y endocannabinoides,
constituyen el sistema endocannabinoide. Algunos fitocannabinoides (cannabinoides de
la planta de cannabis) y muchos cannabinoides sintéticos dan lugar, en el laboratorio, a
efectos similares al de los endocannabinoides. El ∆9 -THC (o dronabinol), el
cannabinoide farmacológicamente más activo de la planta de cannabis, se acopla a ambos
tipos de receptores cannabinoide identificados hasta la fecha, el CB1 y el CB2, los cuales
se han localizado en el sistema nervioso central (cerebro y médula espinal) así como en
muchos tejidos y órganos periféricos. Se ha tomado como referencia el documento de
Análisis de Química y Toxicología Forense de la Fiscalía General del Estado. Así como
también una recopilación en análisis y detección de Cannabis, utilizando una
investigación con microscopio electrónico y revelado mediante Cromatografía de
diversos tipos.
INTROCUCCIÓN
Los cannabinoides son sustancias que suelen tener una estructura carbocíclica con 21
carbonos y están formados generalmente por tres anillos, ciclohexeno, tetrahidropirano y
benceno. Los principales cannabinoides son ' 9 -tetrahidrocannabinol (' 9 -THC o THC),
' 8 -tetrahidrocannabinol (' 8 -THC), cannabidiol (CBD) y cannabinol (CBN). Otros
cannabinoides presentes en la planta son el cannabicromeno (CBC), cannabiciclol (CBL),
cannabigerol (CBG), monometileter del cannabigerol (CBGM), cannabielsoina (CBE),
cannabinodiol (CBND), cannabitriol (CBT), dehidrocannabifurano y cannabicitrano, que
aparecen en cantidades diferentes según la variedad de cannabis sativa valorada (Bodes,
2014)

2. METABOLISMO Y EXCRECIÓN
Los mecanismos de eliminación del ∆9 -THC son bastante conocidos tanto en animales
de experimentación como en el ser humano. Solo una mínima cantidad de este compuesto
es eliminada del cuerpo en su forma original, mientras que la mayor parte aparece en
forma de metabolitos en heces (un 68%) o en orina (12%). La droga está también presente
en otros tejidos y fluidos biológicos como el pelo, la saliva y el sudor. La mayor parte del
metabolismo ocurre en el hígado, aunque también puede producirse en otros órganos
como el pulmón y el intestino. (Toxicologia Forense, 2012)
PARTES DE LA PLANTA CON MAYOR CONCENTRACION DE THC
La parte de la planta que contiene mayor cantidad de THC son los brotes florecientes de
la parte superior y en menor cantidad las hojas, tallos y semillas. La marihuana, con un
contenido de THC del 0,5 al 5%, se prepara a partir de las flores, hojas y tallos de pequeño
tamaño desecados y triturados. El hachís consiste en un preparado de resina exudada y
flores prensadas. El hachís puede contener del 2 al 20% de THC. La resina o aceite de
cannabis, que puede llegar a contener del 15% al 50% de THC, se recoge de la secreción
de las brácteas y de las terminaciones de los tallos, esta secreción también cubre las flores.
(Sociedad Española de Investigación, 2013)
Las concentraciones de THC en plasma o en otros fluidos biológicos dependerán en gran
medida de la procedencia de la planta, de la forma de preparar la droga y de la vía de
administración. La forma más frecuente de consumir el cannabis es fumado en cigarrillos
(“porros”) o pipas, mezclándolo con tabaco. Habitualmente los consumidores realizan
inhalaciones profundas para incrementar la absorción de THC a través de los pulmones.
La marihuana y el hachís también se pueden consumir a través de la vía oral, pero esta es
una vía de administración menos usada porque retrasa y disminuye los efectos
psicoactivos de la droga. Un cigarrillo suele contener entre 0,5 y 1 gramo de cannabis,
cuyo contenido en THC dependerá del preparado. En función del número de inhalaciones
y de su intensidad la cantidad de THC que suministra el “porro” varía entre el 20% y el
70% de su contenido. Del THC inhalado, sólo del 10% al 25 % pasa al torrente

3. circulatorio. De estas consideraciones se desprende que la dosis de THC que se absorbe
con un cigarrillo está entre 0,2 mg y 4,4 mg. Cuando se fuma, la dosis mínima de THC
necesaria para producir efectos farmacológicos está entre 2 mg y 22 mg. (Sociedad
Española de Investigación, 2013)
MATERIALES Y MÉTODOS
ANÁLISIS DE LABORATORIO
Es posible detectar el consumo de cannabis analizando diversas muestras corporales.
Cromatografía
La cromatografía consiste en la separación del componente sólido y del contenido líquido
del fluido que se examina. El sedimento sólido es tratado químicamente para extraer los
compuestos que contiene. Tras exposición a diversos preparados, la presencia de una
droga determinada produce un cambio de color. Este cambio de coloración se interpreta
como un resultado positivo. La cromatografía es un método sencillo y de bajo coste, que
por estos motivos se emplea con mucha frecuencia para la detección de diversas drogas
en orina. Sin embargo, esta técnica es poco sensible para la detección de cannabinoides.
Para la identificación de una muestra positiva se requieren concentraciones de 1000-2000
ng/ml, mientras que con el inmunoensayo bastan concentraciones de 20 ng/ml.
Aspectos morfológicos de Cannabis sativa
(forenses, 2005)

4. Componentes químicos de importancia forense Cannabis

5. (forenses, 2005)

6. PROTOCOLO DE IDENTIFICACION Y ANALISIS DE PRODUCTOS
INCAUTADOS QUE SE PRESUME CONTIENEN CANNABIS.
RESPONSABILIDAD.
El analista químico será responsable de la ejecución, supervisión y verificación del
cumplimiento del proceso.
DEFINICIÓN A CONSIDERARSE EN ESTE PROCEDIMIENTO.
CANNABIS
Componentes químicos:
Tetrahidrocannabinol.
Cannabidiol.
Cannabinol.
Formas de los productos ilícitos del cannabis:
Productos herbáceos (Marihuana)
Productos de la resina (Hachís)
Cannabis Líquida (Aceite de Hachís)
Productos herbáceos:
La cannabis (cannabis sativa L) es una planta común en todas las zonas templadas y
tropicales del mundo. Los constituyentes psicoactivos se encuentran en las sumidades
floridas y con frutos y en las hojas de la planta de cannabis que contienen importantes
cantidades.
Productos de Resina (hachís):
Se concentran en dos regiones del mundo. Los países situados en la parte meridional y
oriental del mediterráneo y del subcontinente indio. Al tener dos procedimientos de
productos análogos, existen “dos familias” de resina de cannabis: Resina de países del
Mediterráneo y productos del Subcontinente Indio.
Cannabis Líquido (aceite de hachís):
Se extrae de la hierba o de la resina. Se realiza para concentrar los ingredientes
psicoactivos (ejemplo THC). Esto hace más fácil para transportar y esconder y posee
mayor poder psicoactivo.
Se utilizan disolventes como acetona, etanol, metanol, éter de petróleo. El disolvente se
calienta hasta el punto de ebullición y el líquido empieza a ascender al matraz o recipiente
de extracción. El procedimiento se puede repetir utilizando el mismo disolvente
condensado y poniendo nuevos trozos de vegetal. Se prepara para que adquiera forma de
aceite espeso.

7. DESARROLLO
Principio: Las muestras de cannabis generalmente se presentan en productos herbáceos
(marihuana). Para su identificación se realizan ensayos como: Ensayos de color,
Observación microscópica de tricomas, espectroscopia UV/Vis y finalmente
espectroscopia infrarrojo
Procedimientos a seguir:
Ensayos presuntivos de determinación de Cannabis en productos herbáceos
(Marihuana).
Los ensayos presuntivos son procedimientos rápidos diseñados para facilitar una
indicación de la presencia o ausencia de determinadas clases de drogas en la muestra y
eliminar rápidamente las muestras negativas. Como sucede con todas las técnicas
analíticas, unas buenas técnicas de ensayo presuntivo elevan al máximo la probabilidad
de obtener un resultado “verdadero” y reducen al mínimo la probabilidad de obtener un
falso positivo. No obstante, los ensayos presuntivos no se consideran suficientes para la
identificación de drogas y resulta necesario confirmar los resultados mediante otros
ensayos de laboratorio.
Ensayo del color:
Las reacciones del color se deben a compuestos que tienen una estructura química
concreta. El color obtenido en un determinado ensayo puede variar en función de las
condiciones en que se realiza, la cantidad de sustancia empleada y la presencia de material
extraño en la muestra. Los reactivos que vayan a utilizarse en ensayos del color deberán
comprobarse con sustancias conocidas en el momento de su preparación. Debe realizarse
un primer ensayo de prueba para evitar falsos resultados positivos.
Ensayo de Duquenois-Levine:
Método:
Etapa 1: Colocar una pequeña cantidad del material sospechoso (hojas) en un tubo de
ensayo.
Etapa 2: Añadir 2 ml del reactivo Duquenois-Levine y agitar el tubo de ensayo durante
un minuto.
Etapa 3: Añadir 2ml de ácido clorhídrico concentrado, agitar y dejar en reposo durante
10 minutos, si aparece color añadir 2 ml de cloroformo.
Resultados:
Si la capa inferior (cloroformo) se vuelve color violeta es positivo para cannabis.
Ensayo con la Sal Azul Sólido B:
Método:
Etapa 1: Doblar dos papeles filtro por la cuarta parte formando un embudo.
Etapa 2: Colocar una pequeña cantidad de Cannabis pulverizada o de resina.
Etapa 3: Añadir dos gotas de éter dietílico, dejando que el líquido penetre al papel filtro
interior, separar los dos papeles de filtro desechando el superior y dejando que se seque
el inferior, colocar una pequeña cantidad de sal azul sólido B en el centro del papel filtro.
Etapa 4: Añadir dos gotas de Bicarbonato de sodio al 10%.
Resultados:

8. Mancha de color púrpura, indica la presencia de cannabis.
Espectrofotometría ultravioleta (UV):
Método:
Etapa 1: De la muestra que llega al laboratorio, separar las hojas, las cuales deben ser
secadas en una estufa dentro de un crisol a 70°C aproximadamente 12 horas. Una vez
secas, pulverizar las hojas en un mortero hasta polvo finamente dividido.
En un tubo de ensayo, pesar 100 mg aproximadamente; agregar 750 ul etanol grado
reactivo, sonicar durante 15-20 minutos. Dejar en reposo, exento de la luz durante 30-60
minutos. Centrifugar, trabajar con el extracto.
Etapa 2: Realizar la lectura de la muestra en el Espectrofotómetro UV/Vis, de acuerdo al
instructivo del manejo del equipo, utilizar como blanco etanol grado reactivo.
Resultado: El extracto etanólico de THC muestra los siguientes picos de absorción: 278
nm y 283 nm.
Observación de las características microscópicas:
Los abundantes tricomas presentes en las superficies de los sumideros floridas y con
frutos son los rasgos más característicos. Estos son filamentos rígidos, curvos, y hay
glandulares y no glandulares.
Método:
Etapa 1: Colocar en una placa portaobjeto una gota de suero fisiológico; colocar una
pequeña fracción de hoja de marihuana, cubrir con una laminilla; observar al microscopio
con lente de 40x.
Resultado:
Presencia de tricomas multicelulares, tricomascistolíticos, tricomas no cistolíticos, y
glándulas sésiles.
Ensayos confirmatorios de determinación de Cannabis en productos herbáceos
(Marihuana)
Espectroscopia infrarroja por transformada de Fourier (FTIR):
La identidad de una sustancia puede confirmarse mediante la FTIR. Puede conseguirse la
identificación inequívoca de cannabis mediante la comparación con espectros únicos, que
se encuentran en las librerías incorporadas en el equipo.
Método: Colocar una gota del extracto etanólico descrito anteriormente en el equipo, dejar
que se evapore a sequedad el solvente, obtener el espectro correspondiente.
Cromatografía de Capa Fina
Las condiciones para esta técnica de análisis están dadas por la Oficina de las
Naciones Unidas Contra la Droga y el Delito, en el documento: "Recommended
Methods for the Identification and Analysis of Cannabis and Cannabis Products". (FGE,
2014)

9. (Delito, 2017)
Cromatografía de gases - detector de ionización de llama (GC-FID), sin y con
derivación
El propósito del análisis determina la necesidad de realizar o no derivación. Sin
derivación previa (sililación) de THC y THCA, el análisis GC descarboxilará al segundo
y producirá el contenido total de THC de la muestra de cannabis, que es la suma del THC
libre y el THC que forma el THCA. Puesto que el contenido total de THC determina la
potencia máxima del cannabis que se fuma habitualmente (y por lo tanto que se
descarboxila), la mayoría de los sistemas de justicia penal consideran como parámetro
pertinente el contenido total de THC. (forenses, 2005)
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Bodes, J. (24 de Marzo de 2014). Monografía Cannabis. Obtenido de Cannabis:
http://www.uv.es/=Choliz/Cannabis%20(PND).pdf
Delito, O. d. (23 de Enero de 2017). UNODC. Obtenido de Centro internacional de Viena:
https://www.unodc.org/documents/scientific/Cannabis_manual-Sp.pdf
FGE. (2014). Protocolo de Toxicología y Química Forense. Fiscalía General del Estado,
121.
forenses, I. N. (08 de Octubre de 2005). Reglamento Tecnico Forense. Obtenido de
Toxicologia forense:
http://www.medicinalegal.gov.co/documents/48758/78081/R3.pdf/105396f9-
9e93-4cb8-b36c-0b1e9b403ade
Sociedad Española de Investigación. (13 de Mayo de 2013). Guia basica sobre
Cannabinoides . Obtenido de Faculta de Bioquímica: http://www.seic.es/wp-
content/uploads/2013/10/guiab%C3%A1sicacannab.pdf
Toxicologia Forense. (19 de Agosto de 2012). Analisis de Cannabis. Obtenido de
Germany: https://www.cannabis-med.org/data/pdf/es_2006_01_2.pdf