espero que les sea de gran ayuda

1. CULTIVO DE SECRECION
VAGINAL

2. La leucorrea, conocida comúnmente como “descenso”, es la causa más
frecuente de la consulta ginecológica en cualquier edad. Se le
describe como un incremento del flujo vaginal que se produce
normalmente por la exudación permanente de la vagina y del cuello del
útero, acompañándose de abundantes células de descamación y bacterias
habituales. Se pueden presentar dos tipos de leucorrea: fisiológica y
patológica
Es por ello que un cultivo vaginal es importante para detectar
infecciones vaginales crónicas, de transmisión sexual o no, las cuales
cuando se vuelven crónicas pueden derivar en casos más graves como
enfermedades pélvicas, y/o hasta infertilidad. Hoy en día se cuenta
con la posibilidad de hacer un cultivo con antibiograma que ayuda al
médico a determinar el tratamiento específico para el microorganismo
causante de la infección.

3. Obtención de muestras del tracto genital
femenino
Condiciones previas: La paciente no debe estar
recibiendo tratamiento antimicrobiano. no
practicarse duchas vaginales, ni tener
relaciones sexuales 24 horas antes de la
obtención de la muestra. Así mismo, no debe
bañarse el día de la recolección de la misma.
Materiales
• Espéculo estéril
• Hisopos de alginato de calcio o de
algodón previamente buferados y
esterilizados
• Solución salina fisiológica estéril
• Medio de transporte: Amies o Stuart
• Láminas portaobjetos limpias y
desengrasadas

4. Procedimiento: Para la obtención de la
muestra vaginal y/o cervical, se debe
emplear un espéculo; la maniobra puede
ser realizada por el médico en la consulta o
por el microbiólogo en el laboratorio,
siempre que se disponga de una camilla
ginecológica. Por lo general, las muestras
son enviadas al laboratorio, por ello es
importante la instrucción del personal que
recolectará las mismas.
Observación: si la muestra es recolectada
en el laboratorio de microbiología, se debe
disponer además de los medios de cultivo
necesarios, según el tipo de muestra a
obtener.
Procedimiento para la investigación
microbiológica de muestras vaginales
Características macroscópicas de la muestra:
Valorar e identificar las siguientes características
en la secreción genital:
• Cantidad
• Consistencia
• Olor
• pH
• Color
Características microscópicas de la muestra: Con
la muestra vaginal obtenida se debe realizar un
montaje en fresco entre lámina y laminilla y dos
extendidos finos para teñir al gram.
 Examen al fresco: informar la presencia de
células descamativas, leucocitos y bacterias,
presencia o ausencia de levaduras y de
trofozoítos de Trichomonas vaginalis.
 Gram: Herramienta citológica muy útil para el
diagnóstico diferencial entre vaginitis y
vaginosis bacteriana o citolítica.

5. TINCIÓN DE
GRAM
Es la tinción más utilizada en Microbiología. Se
emplea para la observación microscópica de
muestras clínicas y de cultivos bacterianos. Permite
visualizar la mayoría de las bacterias y algunos
hongos (principalmente levaduras), por lo que con
ella se puede hacer el diagnóstico de infección por
Candida, y detecta además si la paciente padece
vaginosis bacteriana.
Permite diferenciar las bacterias en dos grandes
grupos:
o Gram positivas: se tiñen de AZUL.
o Gram negativas: se tiñen de ROJO.
También permite identificarlas por su forma:
o Cocos: bacterias redondas.
o Bacilos: bacterias alargadas.

6. 1. MATERIAL NECESARIO
 Torunda de
algodón estéril.
 Portaobjetos.
 Mechero de
alcohol o gas.
 Agua.
 Reactivos: Cristal
Violeta, Lugol,
Alcohol-Acetona,
Safranina o
Fucsina.
 Microscopio.
 Aceite de
inmersión para el
microscopio.
1. Una vez tomada la muestra, preparar una extensión de la misma sobre
un portaobjetos.
2. Dejar secar a temperatura ambiente (hasta que la muestra esté
completamente seca).
3. Fijar la muestra con calor pasando el portaobjetos por encima de la
llama de un mechero durante unos segundos y dejar enfriar. A partir de
este momento la muestra ya está lista para ser teñida.
4. Cubrir completamente la preparación con el reactivo llamado CRISTAL
VIOLETA y dejarlo actuar durante un minuto.
5. Lavar con AGUA.
6. Cubrir la preparación completamente con el reactivo LUGOL y dejarlo
actuar durante 1 minuto.
7. Lavar con AGUA.
8. Decolorar la preparación con ALCOHOL-ACETONA durante unos
segundos (15-20 seg). Recuerde que este el paso más importante de la
tinción, no sobrepase ese tiempo. Las bacterias gram positivas quedan
teñidas de azul, las gram negativas se decoloran.
9. Lavar con AGUA.
10.Cubrir la preparación con SAFRANINA o FUCSINA diluida durante 1
minuto.
11.Lavar con AGUA. Las bacteria gram negativas quedan teñidas de rojo y
Procedimiento de la tinción gram

8. 13. Visualizar en microscopio con objetivo 100x y aceite de inmersión. Las
levaduras (Candida) tienen una forma ovoide, en muchas ocasiones se las puede
observar en gemación y pueden presentar prolongaciones denominadas
pseudohifas; se tiñen de azul/morado tras la tinción de Gram, por lo que se
comportan como microorganismos gram-positivos:

11. Antibiograma
Se efectúa cuando se aíslan bacterias de
tipo entérico o cocos Gram-positivos,
generalmente en niñas en etapa pre-
púber o púber, o en la menopausia.
También puede hacerse cuando se aísla
gonococo del endocérvix. En pacientes en
edad fértil, cuando la patología obedece
mayormente a parásitos, hongos, virus o
vaginosis bacteriana, no es posible
realizarla. Existen esquemas específicos
para el tratamiento de estas entidades.