COVID-19

1. CENTRO DE SALUDY EMERGENCIA CERRO DE PLATA

2.  En diciembre del 2019, en la ciudad de Wuhan, provincia de Hubei en
China, se originó un brote de casos de neumonía de origen desconocido,
enfermedad denominada, actualmente, COVID-19 . El aumento progresivo
de casos, que supera los dos millones de infectados en casi todos los
países, llevó a la OMS hace algunas semanas a declarar esta infección viral
como pandemia. La determinación de la secuencia genómica del virus que
la ocasiona (Gen Bank, código de acceso MN908947.3) permitió identificar
la relación entre este y los miembros de una especie viral denominada CoV
causantes del síndrome respiratorio agudo severo (SARS, por sus siglas en
inglés), por lo que el virus fue denominado SARS-CoV-2 por el Comité
Internacional de Taxonomía de Virus. En la gran mayoría de los casos, la
infección por SARS-CoV-2 presenta síntomas parecidos a la influenza, pero
en los pacientes con edad avanzada la enfermedad puede progresar hasta
una forma grave de neumonía intersticial, que rápidamente evoluciona y
causa la muerte a entre el 2 % y el 5 % de los casos, aunque factores como
la edad y las enfermedades crónicas preexistentes pueden incrementar
esta cifra .

3.  El primer caso de coronavirus se registró el 10 de marzo
en Bolivia y desde entonces los pacientes con el Covid-19,
aparecido en diciembre de 2019 enWuhan.
 La primera prueba de diagnostico es el PCR (Reacción de la
cadena de la polimerasa)
 Septiembre del 2020, en el mundo se empiezan a utilizar las
pruebas de antígeno nasal, como una prueba diagnostica
mas oportuna.
 En Bolivia las primeras pruebas utilizadas fueron la de Elisa ,
prueba rápida capilar.
 En Bolivia hasta el momento hubo 488,933 casos
confirmados, recuperados 431,002 , y un total de decesos de
18,392 casos.

4.  Detección viral
 Detección de anticuerpos

5.  Los tipos de pruebas que existen para la detección de
covid-19 son:
 1. Pruebas de detección de ácidos nucleicos (reacción en
cadena de la polimerasa o PCR).
 2. Pruebas de detección de antígeno.
 3. Pruebas de detección de anticuerpos (IgG, IgM).
 4. Flujo lateral/ Inmunocromatografia coloidal

7.  La PCR, permite detectar el ARN (ácido ribonucleico) del
virus, es una prueba de alta sensibilidad y especificidad; pero
que no está exenta de dificultades ya que puede dar falsos
negativos si se realiza en fases tempranas de la enfermedad.
 La interpretación de la PCR se debe hacer con prudencia
dentro del contexto clínico (sobre todo, cuando esta es
negativa).

8. La RT-PCR se realiza en laboratorios
de Microbiología clínica, necesita
personal experto en Microbiología
molecular y medidas de bioseguridad.
El hisopo se introduce en una de las
fosas nasales, orofaringe y se desplaza
por el suelo de la cavidad nasal
siguiendo el tabique hasta la
nasofaringe, hasta la muesca de
seguridad, sin forzar si se encuentra
resistencia. Se gira la torunda con
suavidad durante 5-10 segundos.

9. Una vez que se recoge la muestra, se deben eliminar proteínas y otras moléculas,
aislando tan sólo el ARN. Esta será una mezcla del material genético de una persona,
así como cualquier ARN viral que pueda estar presente.
Las enzimas del kit transcriben el ARN en el ADN, que se amplifica para permitir la
detección de virus mediante el uso de un termociclador que genera un programa de
temperaturas para producir aproximadamente 35 mil millones de copias de ADN viral
para cada cadena de ARN viral que estuvo originalmente presente.
Se utilizan marcadores fluorescentes que son capaces de unirse al ADN amplificado y
producir luz, que la máquina puede leer para producir el resultado de la prueba. Si la
intensidad de la luz producida alcanza un cierto umbral, esta se clasifica con un
resultado positivo. Se registra el número de ciclos de temperatura de PCR que se
requerían antes de alcanzar el umbral de fluorescencia y proporciona una estimación
de la cantidad de virus presente en la muestra del paciente.
En primer lugar, el ADN viral se calienta a 94ºC, separando las dos hebras del ADN.
Acto seguido, la reacción se enfría a 55ºC, Este hecho, permite que pequeñas porciones
de ADN complementario (primers o cebadores) se unan al ADN viral. Finalmente, se
eleva la temperatura a 72ºC para que la Taq polimerasa pueda elongar cada una de
estas hebras de ADN.Y de esta manera, se inicia un nuevo ciclo de PCR

12. Actualmente hay numerosas pruebas basadas en la reacción antígeno-
anticuerpo, y que están en desarrollo, dentro de estas pruebas se diferencian
aquellas que detectan antígeno y las que detectan anticuerpos (IgM, IgG).
De forma general, son pruebas cualitativas, solo ofrecen resultado positivo o
negativo.
Las principales técnicas de detección de antígeno y anticuerpos son:
●Técnicas de aglutinación indirecta o pasiva.
● Inmunofluorescencia.
● Enzimoinmunoanálisis.
● Contrainmunoelectroforesis.
● Métodos luminométricos.
● Inmunocromatografía.
De éstas las más comúnmente usadas para el diagnóstico rápido de SARS-
CoV-2 son los enzimoinmunoanálisis (ELISA) y sobre todo la
inmunocromatografía (flujo lateral).

13. Los kits de ELISA para detectar anticuerpos están
detectando la respuesta de los anticuerpos a la
infección por COVID-19. La detección de
anticuerpos contra el SARS-CoV-2 podría decirle a
un especialista clínico si un paciente ha sido
infectado con COVID-19, ya sea actualmente o en
el pasado.
El kit de ELISA para la presencia de anticuerpos
proporciona información muy importante para
el diagnóstico, el manejo y la recuperación de
COVID-19 y también ayuda a los investigadores a
evaluar cuántas personas de la población han sido
infectadas, lo cual es importante para planificar el
control de infecciones.

14.  Los inmunoensayos o elisa,
detectan la presencia de
anticuerpos IgM e IgG frente
SARS-CoV-2 en una muestra
de sangre, suero o plasma. La
prueba de elisa utiliza
enzimas que detectan los
anticuerpos totales y estos los
diferencian entre las IgM e
IgG, y pueden detectar
aisladamente IgG o IgM o
ambas en el mismo kit, esto
se realiza cuantificadamente

16.  Los ensayos de flujo lateral
inmunocromatográfico se han
denominado comúnmente “Test
rápidos” en los medios de
comunicación, ya que
actualmente se utilizan para
detectar anticuerpos contra la
enfermedad en la sangre de un
paciente. Las pruebas de flujo
lateral pueden detectar
anticuerpos contra el virus en la
sangre del paciente, lo que indica
que el paciente tiene COVID-19 o
se ha recuperado de COVID-19

17. ¿Cómo funciona?
 Los inmunoensayos de flujo lateral son dispositivos simples que pueden detectar
anticuerpos en la sangre. Personal sanitario toma una pequeña muestra de sangre del
paciente y la deja caer sobre una esponja dentro del dispositivo. A continuación, se agregan
unas gotas de tampón que ayudan a que la muestra de sangre fluya a través del dispositivo.
A medida que la muestra se mueve a través del dispositivo, los anticuerpos contra el SARS-
CoV-2 que están presentes en la muestra se capturarán los anticuerpos en las líneas de
prueba y control. Este proceso de captura y unión produce un cambio de color a lo largo de
las líneas de prueba y control que puede verse a simple vista, produciendo una, dos o tres
líneas dependiendo del tipo de anticuerpos presentes (IgM o IgG).

20.  La prueba rápida de antígeno COVID-19 (torunda nasofaríngea) es un
inmunoensayo cromatográfico rápido para la detección cualitativa de
antígenos del SARS-CoV-2 en muestras de torundas nasofaríngeas de
individuos con sospecha de infección por SARS-CoV-2 junto con la
presentación clínica y los resultados de otras pruebas de laboratorio.
 ¿Qué detectan?
 La partícula viral de los coronavirus consiste en una nucleocápside formada
por el genoma viral de ARN asociada a proteínas de nucleocápside (N)
rodeada de una envoltura compuesta por las proteínas virales espiga (S), de
envoltura (E) y de membrana (M).
 Las pruebas de detección de antígenos (Ag) se basan en la detección de
proteínas virales específicas de SARS-CoV-2 en la muestra, como la proteína
N y las subunidades S1 o S2 de la proteína espiga.

21. Esta prueba para la COVID-19 detecta ciertas proteínas en el virus.
Se usa un hisopo largo para tomar una muestra del fluido de la
nariz, y las pruebas de antígeno pueden dar resultados en minutos.
Se pueden enviar otras muestras a un laboratorio para su análisis.
Estas pruebas actualmente tiene una sensibilidad del 93% y una
especificidad del 99%

23.  La muestra se obtiene del tracto respiratorio, generalmente de exudado
nasofaríngeo u orofaríngeo, mediante un hisopo, o de esputo y se requiere
una correcta recogida en el momento adecuado, como en las pruebas de
PCR. Según estudios la carga viral es mayor en esputo y en nasofaringe que
en orofaringe3,10 y se ha visto que es más alta en la fase aguda de la
infección (los primeros 7 días del inicio de la sintomatología)