Curso de Gestion de Calidad - Universidad Nacional de Quilmes

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Clase teórica 11.2
Asignatura Gestión de Calidad
Tema:
Técnicas Microbiológicas
Apropiadas y Bioprotección
Universidad Nacional de Quilmes
Roque Sáenz Peña 352
Bernal, 2013

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Buenas practicas y bioproteccion
Las infecciones adquiridas en los laboratorios generalmente son debidas a:
– errores humanos accidentes por roturas, salpicaduras, cortes y
pinchazos
– técnicas de laboratorio incorrectas inhalación de aerosoles con
potencialidad infectiva generadas por pipeteo, flameado, apertura de
recipientes a diferente presión de la atmosférica, agitación de líquidos,
siembra de placas de agar, homogeneización, agitación vorticial,
centrifugación.
– mal uso del equipo agitación, centrifugación
• Para la protección frente a la exposición laboral a dichos materiales, se
deberá:
– Controlar el material peligroso en la fuente, evitando así su liberación al
ambiente de trabajo.
– Reducir las consecuencias de una liberación accidental de dicho
material al medio ambiente, mediante sistemas de protección colectiva.
– Protejer al trabajador frente al contacto con los materiales peligrosos en
el caso que éstos se encuentren en el medio ambiente.

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técnicas microbiológicas apropiadas
• La recolección, transporte y manipulación de muestras en el laboratorio deben
hacerse en forma segura.
• Los recipientes para muestras deben ser de vidrio o de plástico, fuertes, y no
permitir fugas.
• Para evitar fugas o derrames en el transporte
deben utilizarse envases/embalajes
secundarios (por ejemplo, cajas metalicas o
plasticas) equipados con gradillas para
mantener las muestras en posición vertical,
lavables, autoclavables, estancos.
• El personal que recibe y desembala las
muestras debe conocer los riesgos para la
salud que entraña su actividad y debe estar
capacitado para adoptar precauciones
normalizadas, particularmente cuando manipule
recipientes rotos o con fugas.

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Uso de pipetas y dispositivos de pipeteo
• Debe utilizarse siempre un dispositivo de pipeteo. El pipeteo con la boca está
prohibido.
• Todas las pipetas tendrán tapones de algodón.
• Nunca se insuflará aire en un líquido que contenga agentes infecciosos.
• No debe mezclarse el material infeccioso aspirando y soplando alternativamente
a través de una pipeta.
• No se expulsarán a la fuerza los líquidos de una pipeta.
• Usar pipeteros con desinfectante y tratar un tiempo suficiente
antes de descartarlas.
• Debe colocarse un recipiente para las pipetas usadas dentro
(no fuera) de la CSB.
• No deben utilizarse las jeringas como pipetas.
• En caso de derrame accidental recubrir la superficie de
trabajo con material absorbente, que se desechará como
residuo infeccioso una vez utilizado.

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Técnicas para evitar la dispersión de material infeccioso
• las asas microbiológicas deben tener un diámetro de 2–3mm y
terminar en un anillo completamente cerrado.
• para esterilizar las asas es preferible un microincinerador
eléctrico cerrado (no un mechero de bunsen). Mejor es utilizar
asas desechables.
• Utilizar bolsas de desechos de laboratorio para las muestras y
los cultivos desechados (destinados al autoclave o
incineración).
• Las zonas de trabajo se descontaminarán con un desinfectante
apropiado después de cada periodo de trabajo.

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Uso de las cabinas de seguridad biológica
• La ventana de vidrio transparente no debe abrirse mientras se está utilizando la
cabina.
• reducir al minimo los aparatos y materiales dentro de la cabina, y no deben
bloquear la circulación del aire en la cámara de distribución trasera.
• No deben utilizarse mecheros en el interior de la cabina
• Todo el trabajo debe hacerse en la zona media o posterior de la superficie de
trabajo y ser visible a través de la ventana.
• minimizar el paso de personas por detrás del operador.
• no sacar y volver a introducir repetidas veces los brazos.
• no bloquear las rejillas de aire.
• La superficie de la CSB deberá limpiarse con un paño con
desinfectante una vez terminado el trabajo y al final del día.
• encender la CSB al menos 5 minutos antes y dejar al
menos durante 5 minutos después de concluido el trabajo.
• nunca se introducirán papeles en las CSB.

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Técnicas para evitar la ingestión de material infeccioso
y su contacto con la piel y los ojos
(las partículas y gotas que se desprenden durante las manipulaciones microbiológicas
se depositan rápidamente en la superficie de las mesas y en las manos del
trabajador)
• usar guantes descartable
• evitar tocarse la boca, los ojos y el
rostro.
• prohibido tener o consumir alimentos o
bebidas en el lab.
• no colocarse objetos en la boca
(lápices, goma de mascar).
• no aplicarse cosméticos en el lab
• usar mascarilla-anteojos-mascara para
protegerse la cara, los ojos y la boca

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Técnicas para evitar la inyección de material infeccioso
• usar material de plástico siempre que sea posible (pipetas pasteur, frascos, tubos
de centrifuga, etc).
• restringir al mínimo el uso de jeringas y agujas (no usar para pipetear!)
• utilizar dispositivos especiales de seguridad para objetos cortantes y punzantes
cuando se hace imprescindible utilizar jeringuillas y agujas.
• no volver a cubrirse las agujas.
• desechar cortantes y punzantes en recipientes resistentes a la perforación que
tengan tapa

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Uso de las centrifugadoras
• Las centrífugas generan aerosoles, por eso respetar indicaciones del fabricante,
usar una buena técnica de centrifugación y tubos tapados correctamente
• evitar corrosion de centrifuga y rotores. Limpiar luego de cada uso
• los tubos de la centrifugadora deben ser de vidrio grueso o de plástico.
• los tubos deben estar siempre bien cerrados (con tapón de rosca si es posible).
Hermeticamente en BSL3 y BSL4
• los canastos deben cargarse, equilibrarse, cerrarse y abrirse en una CSB.
• no llenar demasiado y equilibrar por peso.

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cabinas de seguridad biológica
• Las CSB están diseñadas para proteger al trabajador, la atmósfera del laboratorio y
los materiales de trabajo de la exposición a las salpicaduras y los aerosoles
infecciosos que pueden generarse al manipular material que contiene agentes
infecciosos, como cultivos primarios, soluciones madre y muestras de diagnóstico.
• Las cabinas de flujo de aire horizontal y vertical («bancos de trabajo de aire
limpio») no son CSB y no deben emplearse como tal.

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Cabinas de seguridad biológica de clase I
• El aire de la sala entra por la abertura
delantera pasa por encima de la superficie
de trabajo y sale de la cámara por el
conducto de extracción. La corriente de
aire arrastra las partículas de aerosol que
puedan generarse en la superficie de
trabajo, alejándolas del trabajador y
dirigiéndolas hacia el conducto de
extracción. La abertura frontal permite que
los brazos del trabajador lleguen a la
superficie de trabajo del interior de la
cabina mientras observa la superficie a
través de una ventana de cristal.
• El aire procedente de la cabina se evacua
a través de un filtro HEPA (al laboratorio y
a continuación al exterior, o directamente
al exterior).

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Cabinas de seguridad biológica de clase
I
• La CSB clase I tiene un uso muy
extendido. Proporciona protección tanto
personal como ambiental y también
puede utilizarse para trabajar con
radionucleótidos y sustancias químicas
tóxicas volátiles.
• No ofrece una protección fiable del
producto porque hace pasar aire de la
sala, sin esterilizar, sobre la superficie de
trabajo.

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Cámaras de seguridad biológica de clase II
• Además de proporcionar protección personal, las CSB de clase II protegen del aire
contaminado del local a los materiales de la superficie de trabajo.
• Las CSB de clase II, difieren de las CSB de clase I en que el aire en contacto con
la superficie de trabajo aire ha pasado por un filtro HEPA (aire estéril).
• Las CSB de clase II pueden utilizarse para trabajar con agentes infecciosos de los
grupos de riesgo 2 y 3, y también con agentes infecciosos del grupo de riesgo 4,
siempre que se utilicen trajes presurizados.

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cabinas de seguridad biológica
• Cámaras de seguridad biológica de clase II tipo A1
• Un ventilador interno succiona aire de la sala a través de la abertura frontal y lo
dirige hacia la rejilla frontal de entrada, pasa a continuación por un filtro HEPA
antes de dirigirse, descendiendo verticalmente, hacia la superficie de trabajo.
• la mitad del aire pasa a través de la rejilla de extracción delantera y la otra mitad
por la rejilla de extracción trasera.
• Debido al tamaño relativo de estos filtros, alrededor del 70% del aire vuelve a
circular a través del filtro HEPA y regresa a la zona de trabajo; el 30% restante
pasa a través del filtro de evacuación hacia la sala o el exterior.

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cabinas de seguridad biológica
Cámaras de clase II de tipo A2 con salida al exterior, y de tipo B1 y B2
• Las CSB de clase IIA2 con salida al exterior, IIB1 y IIB2 son variaciones del tipo IIA1.
• Estas CSB se distinguen entre sí en varios aspectos:
– la velocidad de entrada del aire por la abertura frontal
– la cantidad de aire que se vuelve a hacer pasar por la superficie de trabajo y que sale de
la cámara
– el sistema de extracción de aire, que determina si el aire se evacua hacia la sala o al
exterior por su propio sistema de evacuación o por el sistema de evacuación de aire del
edificio
– las presiones en el interior de la
cámara (en unas los conductos y
las cámaras de distribución
cargados de aire biológicamente
contaminado están bajo presión
negativa, o están rodeados por
conductos y cámaras de
distribución bajo presión negativa).

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cabinas de seguridad biológica clase III
• Este tipo de cabinas es el que proporciona
mayor nivel de protección personal y se
utiliza para trabajar con agentes del grupo
de Riesgo 4.
• Todos los orificios están sellados para
impedir el paso de gases. El aire de
entrada es filtrado por HEPA y el aire de
salida pasa por dos filtros HEPA. La
corriente de aire se mantiene mediante un
sistema de extracción propio en el exterior
de la cámara, que mantiene el interior de
ésta a una presión negativa.

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cabinas de seguridad biológica clase III
• El acceso a la superficie de trabajo se hace mediante guantes de goma gruesa,
conectados a unos orificios en la cámara. La cámara debe tener una caja de paso
que pueda esterilizarse y vaya equipada con una salida de aire provista de un filtro
HEPA.
• Puede ir conectada a una autoclave de doble puerta en la que se descontaminará
todo el material que entre o salga de la cámara. Pueden unirse varias cámaras de
guantes para ampliar la superficie de trabajo.

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