VIRUELA SIMICA

1. TOMA DE MUESTRA, CONSERVACION,
ALMACENAMIENTO Y ENVÍO DE MUESTRAS
CENETROP- JUNIO 2022
TOMA DE MUESTRA, CONSERVACION, ALMACENAMIENTO Y ENVIO DEMUESTRAS
Debido a la variedad de afecciones que causan erupciones cutáneas y debido a que la presentación
clínica puede ser más atípica en este brote, puede ser difícil diferenciar un caso de Monkeypox
únicamente en función de la presentación clínica. Por lo tanto, la decisión de realizar una prueba de
laboratorio debe basarse en factores clínicos y epidemiológicos, vinculados a una evaluación de la
probabilidad de infección. A cualquier persona que cumpla con la definición de un caso sospechoso
se le debe ofrecer una prueba.
CASO
SOSPECHOSO
CUMPLE CON LA DEFINICIÓN DE
CASO SOSPECHOSO
AVISO ACENETROP
MUESTRAS PARA PESQUISA DE
BACTERIAS
MUESTRAS PARA DIAGNÓSTICO
MOLECULAR DE VIRUELA
MUESTRAS PARA DIAGNÓSTICO
DIFERENCIAL
¿QUE PASOS SEDEBEN SEGUIR EN CASO DE TENER UN CASOSOSPECHOSO?
NO
EPIDEMIOLOGÍADEL
SEDES
SI
TOMA DE MUESTRAS
PORQUIPO
DE EMERGENCIA DE
CENETROP
TOMA DE MUESTRAS
POR PERSONAL DEL CENTRODE
SALUD U HOSPITAL

2. Toma de
muestra con
EPP
Bata
desechable
antifluído
Guantes de
látex
Gafas o cubierta facial
completa
Gorro
Cubrecalza
do
Mascarilla
N95
El personal que recolecta muestras debe
usar equipo de protección personal (EPP)
de
acuerdo con las recomendaciones para
precauciones estándar, de contacto y de
gotas; el personal de laboratorio debe estar
capacitado para el uso adecuado del EPP,
incluyendo bata desechable antifluído,
guantes de látex, gafas o cubierta facial
completa, gorro, cubre calzados, respirador
N95.
El tipo de muestra recomendada para la confirmación por laboratorio de la viruela del mono es el material de la lesión cutánea,
que incluye:
Tipo de
muestra a
tomar
Hisopado de la superficie y/o
del exudado de la
lesión
Bordes superiores de más de
una lesión (superficie de las
lesiones)
Costras de
lesiones
 Hisopado de lesiones, costras y fluidos vesiculares no
deben mezclarse en el mismo tubo
 La muestra recomendada a tomar es el Hisopado de
la superficie y/o del exudado de la lesión porque al
frotar la lesión se recuperan células de la piel que
pueden estar infectada además del liquido.
Otra muestra que se puede colectar adicionalmente es el:
Hisopado orofaríngeo
Las muestras del material de la lesión cutánea y de los bordes deben
ser colectadas con Hisopos de Dacrón o Poliéster, se debe frotar
vigorosamente la lesión para garantizar que se recolecte suficiente
material para la obtención del ADN viral. Los hisopados se pueden
colectar en tubos con medios de transporte viral (MTV). Dos lesiones
del mismo tipo deben recogerse en un solo tubo, preferiblemente de
diferentes lugares del cuerpo y que difieren en apariencia.
Si las pústulas ya explotaron espontáneamente, enviar costras de las
lesiones en tubo eppendorf, para ello desinfectar la piel con una gasa
con alcohol, dejar secar y recoger la costra con una aguja de calibre 26
o quitar al menos 4 costras (dos costras cada uno de al menos dos
lugares del cuerpo).
Las muestras orofaríngeas se deben tomar con Hisopo de Dacrón o
Poliéster, cepillar el tejido amigdalino posterior, romper el extremo del
aplicador en el tubo que contiene el MTV.
Una vez tomada las muestras deben refrigerarse
inmediatamente (2 a 8 °C), (NO dejar más de una
hora a temperatura ambiente), o congelarse (-20 °C
o menos). Si el transporte excede los 7 días para
que la muestra se analice, las muestras deben
almacenarse a -20 ° C o menos.
Se recomienda el almacenamiento de muestras a
largo plazo (>60 días desde la recolección) a -70
°C. Se deben evitar los ciclos repetidos de
congelación-descongelación porque pueden reducir
la calidad de los especímenes.
Almacenamiento de las muestras
(No mas de una hora
a atemperatura
ambiente después de la
recolección)
Inmediatamente 2 a 8 °C
7 días para que la
muestra
Si el transporte excede
los
se analice, las
muestras deben
almacenarse a -20
°C o menos
Almacenamiento de
muestras a largo
plazo (>60 días
desde la
recolección) a -70 °
C

3. Toma de muestra
con todas las
medidas de
bioseguridad
Conservar refrigerada
2 a 8°C o congelar a
-20 °C
Envío en forma inmediata
en triple envase a
CENETROP/ INLASA
(acompañado con ficha
epidemiológica)
Las muestras deben almacenarse refrigeradas o
congeladas dentro del lapso de una hora de la
recolección, y transportarse al laboratorio tan pronto
como sea posible después de la recolección
manteniendo la cadena de frio.
El manejo y almacenamiento correctos de las
muestras durante el transporte es esencial para
realizar un diagnóstico preciso.
Todos los especímenes que se transporten deben
contar con un sistema de triple embalaje, etiquetado y
documentación adecuados.
Las pruebas para detectar la presencia de Monkeypoxvirus (MPXV) deben realizarse en laboratorios debidamente equipados
por personal capacitado en los procedimientos técnicos y de bioseguridad pertinentes. Se deben tomar medidas para minimizar
el riesgo de transmisión en el laboratorio en base a la evaluación de riesgo al analizar muestras clínicas de rutina de pacientes
confirmados o sospechosos de viruela del mono.
Una infección por MPXV puede ocurrir en el laboratorio por vía respiratoria durante la etapa de procesamiento de muestras a
partir de material contaminado o por prácticas inadecuadas. Por lo tanto, se recomiendan medidas de bioseguridad reforzadas
además de los requisitos básicos, incluidos los siguientes, para ensayos diagnósticos sin propagación del virus:
• Las muestras de pacientes con sospecha de infección por MPXV deben manipularse en una cabina de bioseguridad de
Clase II revisada o certificada, antes de la inactivación de la muestra. Si se va manipular costras de lesiones se tiene que
realizar una homogeneización antes de la extracción. Las muestras debidamente inactivadas no requieren cabina de
bioseguridad.
• El personal de laboratorio debe usar el EPP adecuado, especialmente para manipular las muestras antes de la
inactivación.
•Cuando se requiera el uso de una centrífuga para un procedimiento, se deben usar recipientes de seguridad o rotores
sellados.
La confirmación de la infección por MPXV se basa en
pruebas de amplificación de ácidos nucleicos (NAAT),
utilizando la reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
convencional o en tiempo real, para la detección de
secuencias específicas de ADN viral.
La PCR se puede usar sola o en combinación con la
secuenciación.
Primeramente se realiza el PCR para detectar el gen
G2R (viruela genérica).
En caso de un resultado positivo se realiza otros dos
PCR para la determinación del lado específico:
-Viruela del Congo (C3L)
-Viruela de Africa Occidental (G2-WA)

4. En el diagnóstico diferencial de la viruela del mono, se deben tener en cuenta varicela, herpes zóster,
sarampión, Zika, dengue, chikungunya, herpes simplex, sífilis, infecciones bacterianas de la piel, y cualquier
otra causa común localmente relevante de erupción vesicular o papular; para ello se recomienda tomar las
siguientes muestras, las cuales tienen que ser conservadas y enviadas a una temperatura entre 2 a 8 °C.
- Sangre sin anticoagulante (niño 5mL, adulto 10mL)
- Suero 600uL
- Sangre con EDTA
- Hisopado nasofaríngeo
- Orina (Diferencial de Zika)
INACTIVACI
ÓN
CENTRIFUGACI
ÓN
SUERO
DENGUE
CHIKUNGUN
YA
ZIKA (orina)
PC
R
INGRESO AL BSL-
3
PUSTUL
A
ELISA SAR/RUB
HISOPADO NF SAR/ RUB
HERPES
SIMPLEX
VARICELA
ZOSTER
ELISA CHIK, ZIK, DEN
SERO-PARASITO
V.E.
R
ELISA
VIROLOGI
A
ELISA VARICELA Ig G/Ig M,
ELISA
VHS IgM/IgG, VIH
CULTIVO
DE
LESIONE
S
DIAGNOSTICO
DIFERENCIAL
MANEJO DE LA
MUESTRA
PRUEBAS
BACTERIOLOGI
CAS
SIFIILI
S
SEROLO
GIA
BIOLOGI
A
MOLECUL
AR
ENTREGA PARA
PROCESAMIENTO
RECEPCIÓN EN
CENETROP
DIAGNÓSTICO DIFERENCIAL
CASOS SOSPECHOSOS DE VIRUELA SÍMICA
MUESTRAS:
*SANGRE CON ADITIVO
*SANGRE SIN ADITIVO
*HISOPADO NASO/OROF.
*HISOPADO DE LESIONES
*COSTRAS
NEISSERIA GONORRHOEAE
KLEBSIELLA GRANULOMATIS
OTRAS INFECCIONES
BACTERIANAS
RPR
UFs.:
*BACTERIOLOGÍA
*BSL3-CULTIVO CELULAR
*BIOLOGÍA MOLECULAR.
*SEROLOGÍA-PARASITOLOGÍA
*VIROLOGÍA
*VIRUS EMERGENTES/REEMERGENTES