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Mariana Gomez Lopez / Biología molecular
tercer semestre / facultad de medicina
2020-1
Introduction
LUNG CANCER
Is the leading cause of cancer
death in men and the second
leading cause of cancer in women
worldwide
Non-small cell lung cancer (NSCLC) accounts
for more than 85% of all lung cancer cases.
However, approximately 70% of patients with
lung cancer present with locally advanced or
metastatic disease at the time of diagnosis
KLF4 MET
Krüppel-likefactor 4 (KLF4)is a
member of the KLF family,with
an evolutionarily conserved
mammalian zinc finger structure.
cause the inhibition of transitional
mesenchymal epithelium that plays an
important role in cancer metastasis and
causes inhibition of the MMP 2 promoter
by preventing cancer invasion
transitional mesenchymal epithelium:
these are multipotent stromal cells
that can differentiate into a variety of
cell types.
EMT is essential for numerous
developmental processes including
mesoderm formation and neural tube
formation. EMT has also been shown to
occur in wound healing, in organ
fibrosis and in the initiation of
metastasis in cancer progression.
objective
The study aimed to further investigate how
upregulation of KLF4 affects NSCLC metastasis.
MATERIALES Y MÉTODOS
INMUNOFLUORESCENCIA
FUNDAMENTO:
Es una técnica de inmunomarcación que hace uso
de anticuerpos unidos químicamente a una
sustancia fluorescente para demostrar la presencia
de una determinada molécula.
¿Para que se usó ?
western blot
Fundamento:
Es una técnica analítica usada para detectar
proteínas específicas en una muestra
determinada (una mezcla compleja de
proteínas, como un extracto tisular). Mediante
una electroforesis en gel se separan las
proteínas atendiendo al criterio que se desee:
peso molecular, estructura, hidrofobicidad, etc.
¿Para que se usó ?
cultivos
Ensayo in vitro de raspado de células Ensayo de Invasión Matrigel de células
in vitro
- Se basa en la observación del
comportamiento de una
monocapa de células a las
que previamente se les ha
hecho una herida o brecha.
- Evaluar la motilidad celular
- Evalúa la capacidad invasiva de las
células luego de un estímulo
empleado, regularmente es
acompañado de la prueba de
migración celular
- Se utilizó para evaluar la
respuesta de las células frente a
un estímulo
ensayo inmunohistoquímico
Fundamento:
Técnica que permite localizar moléculas en
los tejidos durante el empleo de
anticuerpos( proteínas tipo
inmunoglobulina g), se permite identificar
el número de moléculas debido a la gran
especificidad y alta afinidad por el
anticuerpo hacia la molécula específica.
¿Para que se usó ?
RESULTADOS
La expresión de factor 4
similar a Krüppel (KLF4)
disminuyó en los tejidos
de cáncer de pulmón no
microcítico humano
(NSCLC)
- método utilizado:
western blot
-4, 12,19
Método : inmunohistoquímica
-Mayor intensidad : F
-No mostró tinción positiva: J
- Figura K, tinción a tejido sano
MÉTODO: WESTERN BLOT
Se evalúa la e-cadherina y la
vimentina en cancer de pulmon no
microcitico humano
- disminución de la e-cadherina
en comparación con los tejidos
normales
- casos 6, 17,16,13,8,9
Tinción de inmunofluorescencia
para klf4 en ratones con
pulmones infectados
Método: western blot
- la presencia de klf4 , inhibe la fosforilación
de jnk
- hubo normalización de pjnk/ jnk
Discussion
AUTHOR HYPOTHESIS YES OR NO
(Zhao et al., 2018; Wang
et al., 2018; Dong et al.,
2018)
Previous studies have demonstrated that activated JNK
promotes the invasion and metastasis of tumors by
promoting the development of EMT .
(Fadous-Khalife et al.,
2016).
KLF4, a notable transcription factor, has dual functions in
transcriptional activation and suppression. Multiple
researches showed that KLF4 was downregulated in colon
cancer, lung cancer, esophageal cancer, bladder cancer, but
upregulated in breast cancer. Our data showed that the
expression of KLF4 was decreased in NSCLC tissues.
(Shi et al., 2014). discovered that a deficiency of KLF4 in mouse bone marrow
decreased the incidence of lung metastasis
CONCLUSIONS
1. By increasing the presence of KLF4 transcription factor, it could be used in
patients with lung cancer, seeking to prevent metastases in different tissues by
inhibiting the proliferation of transitional mesenchymal epithelium.
2. At the overexposure to KLF4, the migration of cells is reduced, since the
signaling pathway JNK/MET is inhibited, which would prevent the tumor from
expanding, can be used for patients in which the pathology is diagnosed very
late, allowing the medical staff to act.
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  • 1. Mariana Gomez Lopez / Biología molecular tercer semestre / facultad de medicina 2020-1
  • 2. Introduction LUNG CANCER Is the leading cause of cancer death in men and the second leading cause of cancer in women worldwide Non-small cell lung cancer (NSCLC) accounts for more than 85% of all lung cancer cases. However, approximately 70% of patients with lung cancer present with locally advanced or metastatic disease at the time of diagnosis
  • 3. KLF4 MET Krüppel-likefactor 4 (KLF4)is a member of the KLF family,with an evolutionarily conserved mammalian zinc finger structure. cause the inhibition of transitional mesenchymal epithelium that plays an important role in cancer metastasis and causes inhibition of the MMP 2 promoter by preventing cancer invasion transitional mesenchymal epithelium: these are multipotent stromal cells that can differentiate into a variety of cell types. EMT is essential for numerous developmental processes including mesoderm formation and neural tube formation. EMT has also been shown to occur in wound healing, in organ fibrosis and in the initiation of metastasis in cancer progression.
  • 4. objective The study aimed to further investigate how upregulation of KLF4 affects NSCLC metastasis.
  • 5. MATERIALES Y MÉTODOS INMUNOFLUORESCENCIA FUNDAMENTO: Es una técnica de inmunomarcación que hace uso de anticuerpos unidos químicamente a una sustancia fluorescente para demostrar la presencia de una determinada molécula. ¿Para que se usó ?
  • 6. western blot Fundamento: Es una técnica analítica usada para detectar proteínas específicas en una muestra determinada (una mezcla compleja de proteínas, como un extracto tisular). Mediante una electroforesis en gel se separan las proteínas atendiendo al criterio que se desee: peso molecular, estructura, hidrofobicidad, etc. ¿Para que se usó ?
  • 7. cultivos Ensayo in vitro de raspado de células Ensayo de Invasión Matrigel de células in vitro - Se basa en la observación del comportamiento de una monocapa de células a las que previamente se les ha hecho una herida o brecha. - Evaluar la motilidad celular - Evalúa la capacidad invasiva de las células luego de un estímulo empleado, regularmente es acompañado de la prueba de migración celular - Se utilizó para evaluar la respuesta de las células frente a un estímulo
  • 8. ensayo inmunohistoquímico Fundamento: Técnica que permite localizar moléculas en los tejidos durante el empleo de anticuerpos( proteínas tipo inmunoglobulina g), se permite identificar el número de moléculas debido a la gran especificidad y alta afinidad por el anticuerpo hacia la molécula específica. ¿Para que se usó ?
  • 9. RESULTADOS La expresión de factor 4 similar a Krüppel (KLF4) disminuyó en los tejidos de cáncer de pulmón no microcítico humano (NSCLC) - método utilizado: western blot -4, 12,19
  • 10. Método : inmunohistoquímica -Mayor intensidad : F -No mostró tinción positiva: J - Figura K, tinción a tejido sano
  • 11. MÉTODO: WESTERN BLOT Se evalúa la e-cadherina y la vimentina en cancer de pulmon no microcitico humano - disminución de la e-cadherina en comparación con los tejidos normales - casos 6, 17,16,13,8,9
  • 12. Tinción de inmunofluorescencia para klf4 en ratones con pulmones infectados Método: western blot - la presencia de klf4 , inhibe la fosforilación de jnk - hubo normalización de pjnk/ jnk
  • 13. Discussion AUTHOR HYPOTHESIS YES OR NO (Zhao et al., 2018; Wang et al., 2018; Dong et al., 2018) Previous studies have demonstrated that activated JNK promotes the invasion and metastasis of tumors by promoting the development of EMT . (Fadous-Khalife et al., 2016). KLF4, a notable transcription factor, has dual functions in transcriptional activation and suppression. Multiple researches showed that KLF4 was downregulated in colon cancer, lung cancer, esophageal cancer, bladder cancer, but upregulated in breast cancer. Our data showed that the expression of KLF4 was decreased in NSCLC tissues. (Shi et al., 2014). discovered that a deficiency of KLF4 in mouse bone marrow decreased the incidence of lung metastasis
  • 14. CONCLUSIONS 1. By increasing the presence of KLF4 transcription factor, it could be used in patients with lung cancer, seeking to prevent metastases in different tissues by inhibiting the proliferation of transitional mesenchymal epithelium. 2. At the overexposure to KLF4, the migration of cells is reduced, since the signaling pathway JNK/MET is inhibited, which would prevent the tumor from expanding, can be used for patients in which the pathology is diagnosed very late, allowing the medical staff to act.