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Sofía Montoya Álvarez
Medical student UPB
Third semester 2019-2
• RMS is the most common soft-tissue
sarcoma in children.
• Pathogenesis of RMS is associated
with aggressive growth pattern and
increased risk of morbidity and
mortality.
Subtypes:
★ Embryonal: is characterized by
distinct molecular aberrations,
including alterations in the activity
of certain protein kinases.
★ Alveolar
2
Rhabdomyosarcoma (RMS)
• FAK is a non-receptor tyrosine
kinase that plays a vital role in
focal adhesion assembly to
promote cytoskeleton dynamics
and regulation of cell motility.
• Aberrations of FAK
phosphorylation have been
linked to the pathogenesis of
different types of cancers
• The activation of this kinase
requires autophosphorylation of
Tyrosine 397
3
Focal adhesion kinase (FAK)
OBJETIVE
4
This study aimed to
investigate
the focal adhesion kinase
phosphorylation as a
regulator of embryonal
rhabdomyosarcoma
Se utilizó una línea
celular RD de
rabdomiosarcoma de
músculo embrionario
humano, establecida
como modelo para
examinar los perfiles
de fosforilación de
FAK para caracterizar
su papel en la
patogénesis de RMS.
5
Materiales
y métodos
6
● Observar la
inhibición del
crecimiento celular,
registrar el daño o
muerte celular
● Examinar los
efectos de la
inhibición de FAK
sobre la viabilidad
celular RD.
Citotoxicidad
¿Para qué?
Fundamento
Materiales y métodos
7
Western blot Fundamento
Técnica analítica
usada para detectar
una proteína
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mediante el uso de
anticuerpos
¿Para qué?
Detectar el
estado de
fosforilación de
FAK en células
RD y hTERT
Materiales y métodos
8
¿Para qué?
Fundamento
Inmunocitoquímica
Localización
microscópica de las
proteínas presentes en los
tejidos o células, tomando
como base una reacción
de antígeno anticuerpo.
Detectar la
fosforilación después
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PF-562271
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9
¿Para qué?
Fundamento
Citometría de flujo
Permite analizar una
población celular
proporcionando una
amplia variedad de
parámetros como el
tamaño celular y la
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Analizar el ciclo
celular y el número
de células en cada
fase
Materiales y métodos
10
Resultados
11
Resultados
12
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13
Resultados
Discussion
14
Author Contribution
Cohen and Guan Regulation of FAK phosphorylation and
localization are highly dynamic mechanisms that
promote various numbers of cellular activities
under physiological conditions
Schaller FAK is a cytoplasmic non-receptor protein
tyrosine kinase that transmits upstream
extracellular signals to regulate cellular
activities, such as cell proliferation and migration
Gabarra-Niecko FAK plays an important role during different
developmental stages and is highly linked to the
pathogenesis of various tumors
or
Conclusions
15
This study in vitro suggest a
key role for FAK in cell
proliferation signals, cell
cycle regulation, and cell
migration activities of RMS
Data presented herein
demonstrate the efficacy of FAK
inhibition using PF-562271 to
suppress RD cell migration
mechanism by attenuating FAK
phosphorylation at Tyr397 site.
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Seminario biologia molecular Sofia Montoya A

  • 1. Sofía Montoya Álvarez Medical student UPB Third semester 2019-2
  • 2. • RMS is the most common soft-tissue sarcoma in children. • Pathogenesis of RMS is associated with aggressive growth pattern and increased risk of morbidity and mortality. Subtypes: ★ Embryonal: is characterized by distinct molecular aberrations, including alterations in the activity of certain protein kinases. ★ Alveolar 2 Rhabdomyosarcoma (RMS)
  • 3. • FAK is a non-receptor tyrosine kinase that plays a vital role in focal adhesion assembly to promote cytoskeleton dynamics and regulation of cell motility. • Aberrations of FAK phosphorylation have been linked to the pathogenesis of different types of cancers • The activation of this kinase requires autophosphorylation of Tyrosine 397 3 Focal adhesion kinase (FAK)
  • 4. OBJETIVE 4 This study aimed to investigate the focal adhesion kinase phosphorylation as a regulator of embryonal rhabdomyosarcoma
  • 5. Se utilizó una línea celular RD de rabdomiosarcoma de músculo embrionario humano, establecida como modelo para examinar los perfiles de fosforilación de FAK para caracterizar su papel en la patogénesis de RMS. 5 Materiales y métodos
  • 6. 6 ● Observar la inhibición del crecimiento celular, registrar el daño o muerte celular ● Examinar los efectos de la inhibición de FAK sobre la viabilidad celular RD. Citotoxicidad ¿Para qué? Fundamento Materiales y métodos
  • 7. 7 Western blot Fundamento Técnica analítica usada para detectar una proteína específica en función de su peso molecular mediante el uso de anticuerpos ¿Para qué? Detectar el estado de fosforilación de FAK en células RD y hTERT Materiales y métodos
  • 8. 8 ¿Para qué? Fundamento Inmunocitoquímica Localización microscópica de las proteínas presentes en los tejidos o células, tomando como base una reacción de antígeno anticuerpo. Detectar la fosforilación después del tratamiento con PF-562271 Materiales y métodos
  • 9. 9 ¿Para qué? Fundamento Citometría de flujo Permite analizar una población celular proporcionando una amplia variedad de parámetros como el tamaño celular y la densidad de epítopes Analizar el ciclo celular y el número de células en cada fase Materiales y métodos
  • 14. Discussion 14 Author Contribution Cohen and Guan Regulation of FAK phosphorylation and localization are highly dynamic mechanisms that promote various numbers of cellular activities under physiological conditions Schaller FAK is a cytoplasmic non-receptor protein tyrosine kinase that transmits upstream extracellular signals to regulate cellular activities, such as cell proliferation and migration Gabarra-Niecko FAK plays an important role during different developmental stages and is highly linked to the pathogenesis of various tumors or
  • 15. Conclusions 15 This study in vitro suggest a key role for FAK in cell proliferation signals, cell cycle regulation, and cell migration activities of RMS Data presented herein demonstrate the efficacy of FAK inhibition using PF-562271 to suppress RD cell migration mechanism by attenuating FAK phosphorylation at Tyr397 site.
  • 16. 16
  • 17. 17