Halos de inhibición

1. Práctica No. 6 Halos de inhibición
Sub-modulo 3: Ejecuta técnicas de identificación de microorganismos con base en las
normas
Integrantes: Quistián García Hylary Estefanía, Ramírez Arellanos Génesis, Ramírez
Hernández Jessica, Ramos Franco Michelle Valeria, Ramos Juárez Mario Antonio, Rangel
Osorio Hugo Cesar, Rascón Castrejón Lizeth Guadalupe, Reyes Marcial Luis Diego, Ríos Palacios Selene.
Facilitadora: Ing. Jessica Alicia Acosta Bezada
Fecha: se inició el 10 de noviembre del 2014 y se terminó el 11i de noviembre del 2014.
Introducción
La preocupación permanente del ser humano, ha
sido vivir en un ambiente acogedor, limpio y
ordenado para el buen desarrollo de sus diarias
actividades.
Todas las personas se sienten tranquilas y
saludables cuando el entorno está pulcro y para ello
cuentan con una serie de productos que facilitan esta
actividad que debe hacerse de manera continua y
permanente.
Con este fin la elaboración de productos de limpieza
tiende a facilitar esta tarea a los consumidores, en
especial a las amas de casa.
Por ello se hallan en permanente búsqueda para
adquirir productos de calidad que sean efectivos,
rápidos y fáciles de usar en la limpieza del hogar, que
protejan la salud y cumplan las expectativas de
manera eficiente. Pero ¿todos los productos
eliminan las bacterias?
En esta práctica analizaremos distintos productos de
limpieza para ver que tanto eliminan a las bacterias
utilizando halos veremos la inhibición que estos
generan a los distintos tipos de bacterias y cual es
más potente entre estos.
Resumen
Esta práctica tuvo la finalidad de observar halos de
inhibición, que se pueden entender como la zona
alrededor de un disco de antibiótico en un
antibiograma en el que no se produce crecimiento
bacteriano en una placa con agar inoculada con la
bacteria. Son una medida de la potencia del
antibiótico frente a la bacteria.
En esta ocasión se determinó la potencia para
evitar y/o eliminar bacterias presentes en: manos,
mesa de cocina, trapo, cocina, lavabo, trapeador
y baño de algunos desinfectantes como: “Pinol”,
“Cloro”, “Axion” y “Bref”.
Se midió el radio de inhibición de cada
desinfectante y se pudo observar la eficiencia de
cada uno de estos de acuerdo a la medida que se
obtuvo, que resultó ser la mayor. No se presentó
crecimiento en todas las cajas Petri inoculadas,
más sin embargo si hubo en dos de estas.
Las bacterias presentes en cada caja Petri fueron
cocobacilos Gram negativos y Bacilos Gram
positivos.
Así, con esto, se puede determinar que
desinfectante sería más útil para la vida cotidiana.
Abstract
This practice had the purpose of observing zones of
inhibition, which can be understood as the area
around an antibiotic disk sensitivity testing in which
no bacterial growth occurs on an agar plate
inoculated with bacteria. They are a measure of the
potency of the antibiotic against the bacteria.
This time the power was determined to prevent or
eliminated bacteria in: hands, kitchen table cloth,
kitchen, sink, mop and bath disinfectants like "Pinol,"
"Chlorine", "Axion" and "Bref".
The radius of inhibition of each disinfectant was
measured and the efficiency was observed for each
of these according to the extent that was obtained,
which was the highest. No growth in all inoculated
petri dishes are presented, however, if there were
two of these.

2. The bacteria present in each petri dish were Gram
negative coccobacilli and Gram positive bacilli.
So with this, you can determine which disinfectant
would be more useful for quotidian life.
Materiales y Métodos
ETAPA 1: Preparación del medio de cultivo
Material
Matraz Erlenmeyer
Espátula
Bascula
Mechero Bunsen
Guante de asbesto
7 Cajas Petri
Reactivos
Agua destilada
Agar nutritivo
Procedimiento
Se preparó el medio de cultivo necesario para vaciar
20 mililitros en cada una de las cajas Petri. Teniendo
en cuenta el margen de error se preparó 160
mililitros, para ello:
1. Se colocó 160 mililitros de agua destilada o
potable en un matraz Erlenmeyer.
2. Se pesó 3.7 gramos de agar nutritivo en un
vidrio se reloj.
3. Se disolvió el agar en el agua destilada, y se
hirvió durante un minuto, hasta su completa
disolución.
4. Se dejó enfriar y se procedió a esterilizarse.
5. Mientras esto se llevó a cabo, se envolvió las
cajas Petri y después se les esterilizó,
posteriormente se vació el agar preparado
en las cajas Petri.
ETAPA 2: Toma de muestra, inoculación, y
desinfectantes
Material
Hisopos estériles
Papel filtro
Mecheros bunsen
Pinzas de laboratorio
Marcador
Reactivos
4 tipos de desinfectante (Cloro, pinol, jabón
Axión, Bref)
7 cajas Petri con medio de cultivo (agar
nutritivo)
Agua destilada
Procedimiento
Para la toma de la muestra: se tomó 7 diferentes
muestras con un hisopo diferente (manos, mesa,
cocina, trapo, lavabo, trapeador y baño), esto se
realizó de la siguiente manera:
1) Para las manos: se humedeció la punta de
un hisopo con agua destilada y se pasó por
los dedos de las manos de una persona (no
se debió haber lavado las manos
previamente en un lapso de 40 minutos
aproximadamente). El hisopo se movió con
suaves movimientos por las uñas, tratando
de “llegar” por debajo de ellas. El hisopo se
envolvió en papel para envolver, de esta
forma se evitó su contaminación hasta la
inoculación.
2) Para la mesa: Se humedeció la punta de un
hisopo con agua destilada y se giró esta por
la superficie de una mesa, en una de las
zonas de la mesa usada frecuentemente. Se
envolvió el hisopo en papel para envolver,
de esta forma se evitó su contaminación
hasta la inoculación.
3) Para la cocina: Se humedeció la punta de un
hisopo con agua destilada y se pasó por una
superficie de una cocina donde se consideró
que la cantidad de bacterias presente en ella
era grande. Se envolvió el hisopo en papel
para envolver, de esta forma se evitó su
contaminación hasta la inoculación.
4) Para el trapo: se mojó el trapo y se exprimió
encima de un recipiente se humedeció la
punta de un hisopo en esta agua y después
se envolvió en papel para envolver, de esta
forma se evitó su contaminación hasta la
inoculación.
5) Para el lavabo: se humedeció la punta de un
hisopo y se pasó por la superficie del lavabo,

3. con suaves movimientos circulares,
después se envolvió en papel para envolver,
de esta forma se evitó su contaminación
hasta la inoculación.
6) Para el trapeador: dado que el trapeador es
áspero y podría romper el algodón del
hisopo, lo que se hizo fue que se exprimió el
trapeador en un recipiente y el hisopo de
humedeció en el agua, después al igual que
con los anteriores se envolvió para evitar su
contaminación.
7) Para el baño: se humedeció la punta de un
hisopo y se pasó por la superficie la taza del
baño con movimientos circulares, se
envolvió en papel para envolver.
La forma de inocular en cada caja Petri fue la misma
para todas las muestras:
1) Se etiqueto cada caja Petri con el nombre de
la muestra que se iba a inocular en ella.
2) Se formó un triángulo de seguridad con
mecheros bunsen y se trabajó dentro de él.
3) Se desenvolvió el hisopo, se tomó una de las
cajas Petri en una mano y el hisopo en otra.
4) Se arrastró la punta del hisopo por todo el
agar sin tocar las orillas, mientras se arrastró
el hisopo este se giró constantemente.
5) Se realizó esto de forma horizontal, vertical
y en diagonal, para un crecimiento masivo.
Para colocar los desinfectantes se procedió de la
siguiente forma:
1) Se supuso que cada caja Petri estaba
dividida en cuatro partes iguales, y se marcó
cada parte con las iniciales de uno de los
desinfectantes (C, P, B, A)
2) Se esterilizó unas pinzas de laboratorio, con
ellas se tomó un papel filtro de 0.5 cm2
3) El papel filtro se remojo en uno de los
desinfectantes y este se colocó en la parte
correspondiente con sus iniciales.
4) Antes de tomar otro desinfectante se
esterilizó nuevamente las pinzas de
laboratorio.
5) Se repitió el procedimiento con cada
desinfectante en cada una de las cajas Petri
ya inoculadas.
6) Se colocó las cajas en la incubadora.
ETAPA 3: Lectura de colonias y medición del
halo de inhibición
Material
Marcador
Mecheros Bunsen
Cajas Petri con muestra incubada
anteriormente
Procedimiento
1) Se formó un triángulo de seguridad con mecheros
Bunsen y se trabajó dentro de él para evitar la
posible contaminación de bacterias. En ningún
momento se abrió alguna de las cajas Petri.
2) Se procedió a realizar la lectura de colonias. Para
ello primero se identificó los diversos tipos de
colonias que había en cada caja Petri.
3) Se contó el número de cada tipo de colonias que
había en cada caja Petri, para ello se vio la caja a
contra luz para poder ver colonias que no eran muy
claras, con ayuda del marcador se punteaba cada
colonia contada, se tomó notas sobre su:
 Forma
 Borde
 Superficie
 Color
(Véanse los resultados)
Para la medición de los halos de inhibición:
1) Con una regla se midió el radio de cada uno
de los halos formados en las cajas Petri.
2) De esta forma se comparó la efectividad
entre cada uno de los desinfectantes, entre
más grande era el halo de inhibición mayor
era su efectividad.
ETAPA 4: Tinción y morfología de bacteria
Material
Portaobjetos
Cubreobjetos

4. Asa microbiológica
Mecheros Bunsen
Microscopio
Reactivos
Agua destilada o potable
Cristal violeta
Yodo-Lugol
Alcohol-Acetona
Safranina
Aceite de inmersión
Procedimiento
1) Se formó un triángulo de seguridad con mecheros
Bunsen. La toma de muestras se realizó dentro de
él.
2) Para la toma de muestras, se colocó en un
portaobjetos una gota de agua, se colocó una caja
Petri dentro del triángulo de seguridad para evitar
una posible contaminación. Se esterilizó el asa
microbiológica, se abrió la caja y con el asa se tomó
una parte de una de las colonias, esta se disolvió con
movimientos circulares en la gota de agua
previamente puesta en el cubreobjetos. Se volvió a
esterilizar el asa.
3) Se tomó una muestra por cada colonia diferente
en cada agar, cabe destacar que se marcó cada
cubreobjetos con el número de agar y colonia a la
que pertenece la muestra.
4) Se dejó secar las muestras colocadas en los
portaobjetos. Una vez hecho esto se procedió a la
tinción:
-Se pasó el portaobjetos con la muestra por
la llama del mechero 3 veces rápidamente.
-Se le agregó una gota de Cristal violeta y se
dejó actuar durante un minuto. Se enjuagó el
portaobjetos hasta que el colorante dejó de escurrir.
-Se agregó una gota de Yodo-Lugol y se
dejó actuar por un minuto. Se procedió a enjuagar.
-Se agregó una gota de Alcohol-Cetona y se
dejó actuar durante 30 segundos. Se enjuagó.
-Por ultimó se agregó una gota de safranina
y se dejó actuar por 30 segundos, posteriormente se
volvió a enjuagar la muestra.
5) Se le agregó una gota de aceite de inmersión a la
muestra y se le colocó un cubreobjetos.
6) Se procedió a su observación a través del
microscopio y se identificó las distintas bacterias
contenidas en la muestra.
(Véanse los resultados)
Resultados
Identificación de cajas petri
Medio de cultivo Número de caja petri Inoculado con
Agar
nutritivo
1
Muestra de bacteriológica de
manos.
2
Muestra bacteriológica de una
mesa.
3
Muestra bacteriológica de una
parte de una cocina.

5. 4
Muestra bacteriológica del
trapo que se usa en una
cocina.
5
Muestra bacteriológica del
lavabo de manos.
6
Muestra bacteriológica de un
trapeador usado.
7
Muestra bacteriológica del
agua de un escusado.
La anterior tabla muestra las ordenaciones que se le dieron a cada caja petri, en el cual se inoculo con una cierta
muestra. Ya en la siguiente tabla se muestran las morfologías bacterianas y coloniales.
Morfología colonial
Número de caja petri Número de colonia Morfología colonial
3
1
Forma circular, borde entero,
superficie convexa, color
beige.
2
Forma circular, borde entero,
superficie plana, con
transparencia.
4 1
Forma circular, borde entero,
superficie convexa, color
blanquecino.
Morfología bacteriana
Número de caja petri Número de colonia Morfología bacteriana
3
1 Bacilos Gram positivos
2 Bacilos Gram negativos
4 1 Cocobacilos Gram negativos
Después de esto, se muestran en la tabla siguiente, los resultados de los respectivos halos de inhibición.

6. Halos de inhibición
Número de caja petri Desinfectante Halo de inhibición
4
Cloro 3 cm de radio
Bref (densicloro) 1 cm de radio
Axión 1 cm de radio
Pinol 1.5 cm de radio
Con estos resultados se comprobó que el
desinfectante más efectivo fue el cloro, que ataco
primordialmente a los cocobacilos Gram negativos,
lo cual también comprueba que este tipo de
bacterias son susceptibles a este tipo de
desinfectante.
En las últimas tres tablas no se muestran los
resultados de todas las cajas petri, debido a que en
ellas hubo un crecimiento nulo, durante el proceso
práctico.
Conclusión
 Quistián García Hylary: los halos de
inhibición cumplen con la función de
permitirnos observar la eficacia inhibidora de
bacterias de un antibiótico, detergente,
desinfectante, antiséptico entre otros
productos de este tipo.
Consiste en colocar un papel filtro con el
inhibidor encima de un estriado bacteriano,
y después incubar los medios de cultivo para
que se desarrolle el crecimiento bacteriano.
El halo de inhibición se puede observar
claramente después de la incubación, este
consiste en un “circulo” en el que no se
desarrolla crecimiento bacteriano (siempre y
cuando el producto sea capaz de inhibir el
crecimiento de esas bacterias), es decir las
colonias crecen alrededor de él pero no
dentro de él.
En base a esto se puede observar la eficacia
de inhibición de productos de este tipo, tal
como se observó en esta práctica con varios
desinfectantes y jabones. De igual forma
existen inhibidores que solo son capaces de
inhibir ciertas bacterias, y esto también se
pudo observar, al ver que algunas colonias
lograban crecer dentro de los halos.
 Ramírez Arellanos Génesis: A mí se me hizo
una práctica muy interesante porque
pudimos observar cuantas bacterias se
encuentran en un trapo sucio, en el agua del
trapeador y en nuestras manos. Las
muestras las tomamos de los lugares más
limpios que vimos para que a la hora de que
crecieran nuestras bacterias observáramos
que no están limpios del todo. A muchos no
les crecieron sus bacterias porque no
estriaron bien o no tomaron suficiente
muestra.
 Ramírez Hernández Jessica: Con los halos
de inhibición se puede determinar de
manera más clara qué antibiótico en la
farmacología es más útil para combatir o
prevenir bacterias patógenas.
En nuestra vida diaria podemos analizar cual
desinfectante es el que deberíamos adquiri r
cuando queremos verdaderos resultados,
que en este caso fue el cloro con un gran
halo de inhibición.
Muchas personas compran desinfectantes y
de alguna manera se pueden dar cuenta de
cuál es más efectivo, así como cuáles no y
por el lado contrario ni siquiera notarlo.
Sin embargo, con esta práctica al inocular un
medio nutritivo con muestras de las cuales
tenemos contacto comúnmente podemos
determinar que producto es más fiable y de
confianza.
En esto último se hace referencia a que los
medios de comunicación promueven
productos que aseguran “matar el 99.9% de
las bacterias” y que las personas que no
tienen la oportunidad de observar la
verdadera eficacia de estos productos,

7. afectan su economía, en ocasiones de
manera considerable.
 Ramos Franco Michelle: En mi conclusión
diría que en esta práctica en si lo que fue su
objetivo era identificar los halos de inhibición
pero a nuestro equipo no le salió muy bien
los estriados o no tomamos bien las
muestras, en el agar se iba a identificar un
halo de inhibición y como crecieron las
bacterias, y cuál de los detergentes tenia
mayor efectividad pero al parecer el único
que nos funcionó a nosotros fue el pinol en
cloro, jabón, y otra sustancia no hizo
reacción o más bien no creo un halo solo en
el pinol se observó, lo que nos dio a entender
que el pinol es más efectivo para las
bacterias.
 Ramos Juárez Mario: Hay que saber a qué
bacterias estamos expuestos día a día,
puesto que es muy importe para la higiene y
salud de la persona y la que las rodean.
 Rangel Osorio Hugo: Bueno al observar el
poder de cada desinfectante nos podemos
dar cuenta a través de este método que no
todos los productos de limpieza y/o higiene
(jabones, limpiadores, desinfectantes etc.)
eliminan muy bien a las bacterias ya se por
sus propiedades u otro factor en este caso,
de los limpiadores y desinfectantes que
analizamos vimos que el cloro fue más
efectivo, ya que el halo de inhibición fue
mayor que el de los otros tres, concluyendo
que este método es muy eficaz para ver la
inhibición de antibiótico y productos de
higiene ante las bacterias y además que el
cloro es un gran inhibidor de bacterias.
 Rascón Castrejón Lizeth: La desinfección es
un proceso que implica la destrucción de
microorganismos ya sean patógenos o no, a
través del uso de sustancias químicas o
agentes físicos como Cloro, Axion, Pinol
aplicados sobre superficies. Entre los
desinfectantes más utilizados podemos
destacar los alcoholes y compuestos de
cloros, etc.
Dicha desinfección debe ser un paso que
comúnmente deberíamos utilizar, ya que
con este proceso, además de eliminar
sustancias que pueden servir para que
microorganismos se desarrollen en
condiciones generales.
En la práctica anterior analizamos a
profundidad cual era la eficacia de los
distintos desinfectantes tales eran Cloro,
Axion; Con la técnica de halo de inhibición
que se define como la zona alrededor de un
disco de antibiótico en un antibiograma en el
que no se produce crecimiento bacteriano
en una placa de agar inoculada con el
germen. Es una medida de la potencia del
antibiótico frente al germen o muestra
cultivada en un medio de cultivo, dichos
resultados de las pruebas anteriores no
fueron como nosotros suponíamos.
Entonces en el Laboratorio de Microbiología
estos procesos deben realizarse de rutina,
ya que el trabajar con microorganismos
exige que se tomen medidas para evitar la
contaminación del ambiente, del material de
trabajo y del personal.
Y no podemos dejar de lado suma
importancia de la técnica de inhibición ya
que con dicha técnica pudimos analizar a
profundidad cual era la eficacia de los
distintos desinfectantes en un nivel
“aceptable” ante los microorganismos que
nos exponemos día a día.
 Reyes Marcial Diego: Antes de la práctica se
plantearon varias hipótesis; en las que se
especulaba que el desinfectante cloro,
resultaría como el que presentara un mayor
halo de inhibición en todas las cajas.
Lamentablemente las variantes resultaron
incompletas, ya que no en todas las cajas
hubo un crecimiento.
Los posibles errores pudieran ser varios,
pero el más lógico, es el hecho de que no se
inoculo correctamente, tal vez por ser la
primera vez que se inoculaba con esa
técnica, pero se da por entendido, que se
debe aprender de este pequeño error.
Siguiendo con los resultados, se mostró que
los desinfectantes menos inhibidores fueron
tanto el bref, como el axión. Si se planteara
una referencia entre los cuatro
desinfectantes que se usaron, se vería que
el cloro tuvo un resultado en el que las
bacterias son sensibles a este mismo. En
cambio el pinol causa un halo intermedio, y
al final el bref y axión tendrían una
resistencia de las bacterias.
Dicho esto, se concluye que se deben
mejorar los procedimientos de trabajo, para
que de esa manera se logre perfeccionar la
interpretación de resultados y a su vez el
conocimiento que se consigue en este tipo
de prácticas.
 Ríos Palacios Selene: En conclusión, el
análisis de colonias permitió, detectar
diferencias en la respuesta de bacterias a la

8. generación de antibiosis por varios
aislamientos bacterianos. Esos cambios en
patrones de crecimiento de bacterias,
posiblemente reflejan diferencias en los
mecanismos de antibiosis por cada
aislamiento bacteriano, que pasarían
desapercibidas al medir solamente las
zonas de inhibición de crecimiento. La
estrategia combinada del uso de esta
bacteria de crecimiento filamentoso unida a
las mediciones tradicionales de halos de
inhibición, provee una herramienta sensible
que favorecerá la búsqueda de
microorganismos eficientes para uso
agrícola o ambiental.
Se observó que debido a la medida del halo
de inhibición por el disco estándar
encontrada en la prueba cae en el rango de
susceptibilidad, con lo que se demostró que
la cepa enfrentada es sensible a los
principios activos del producto. Y se vio el
efecto potenciado de los antibióticos
componentes.
Discusión
Las áreas de las zonas de inhibición y los patrones
de crecimiento de los cultivos respectivamente,
variaron dependiendo del aislamiento bacteriano
productor de antibiosis. La mayor inhibición del
crecimiento de bacterias se presentó con el
aislamiento de Jabón común y la menor con el
aislamiento de Cloro. Los aislamientos T de
limpiador de pisos y pinol, presentaron zonas de
inhibición similares entre ellos, e intermedias.
Los patrones de crecimiento de Bacterias variaron
dependiendo de la posición en la colonia y el
momento en el que se analizaron. Con 12 h de
crecimiento y en el lado no expuesto a cada
antagonista productor de antibiosis no presentaron
diferencias en los valores de dimensión fractal o
densidad de crecimiento. Sin embargo, 48 horas
más tarde los patrones de crecimiento en la interface
entre la colonia y la zona de inhibición, variaron
dependiendo del aislamiento bacteriano al que se
enfrentaron. El contraste y la correlación espacial.
El efecto de varios aislamientos bacterianos en el
desarrollo de zonas de inhibición y patrones de
crecimiento mejor en esta zona de avance de las
colonias que, al inicio de la prueba y en el lado
opuesto al antagonista bacteriano.
Estos resultados sugieren, que diferentes
mecanismos de antibiosis en esas bacterias, así
como las estrategias adaptativas, a ese
antagonismo, pueden ser detectados mediante el
análisis de imágenes. Esta estrategia unida a la
detección de zonas de inhibición podría contribui r
significativamente al conocimiento de los
mecanismos de inhibición y adaptación en los
microorganismos enfrentados en las pruebas, lo que
a su vez aceleraría la búsqueda y detección de
microorganismos para introducción al suelo.
Muchos microorganismos con potencial agrícola o
ambiental, que se introducen al suelo, usualmente se
seleccionan de colecciones extensas mediante
pruebas de antibiosis. Sin embargo, es difícil
pronosticar el desempeño de esos microorganismos
una vez introducidos al suelo. Esta perspectiva de
selección, sería más efectiva si se conocen los
mecanismos de acción y reacción de los
microorganismos frente a sus competidores o
biocontroladores.
Bibliografía
Ciencianet.com. (s.f.). Recuperado el 12 de
Noviembre de 2014, de
http://ciencianet.com/detergente.html
www.monografías.com. (s.f.). Recuperado el 12 de
Noviembre de 2014, de
http://www.monografias.com/trabajos82/con
trol-calidad-detergentes/cont rol-calidad-detergentes.
shtml#ixzz3IttEZK8k
www.sabelotodo.org. (s.f.). Recuperado el 12 de
Noviembre de 2014, de
http://www.sabelotodo.org/productos/deterg
entes.html

9. Anexos
Halos de inhibición
La técnica actualmente utilizada para la
determinación de la sensibilidad a los
antimicrobianos es el producto de importantes
esfuerzos internacionales desde hace más de
dos décadas enfocados a normatizar el método.
El principio del método involucra el uso de una
cantidad constante de antimicrobianos en un
reservorio (discos de papel) aplicado sobre la
superficie del agar en el cual se ha cultivado el
microorganismo en cuestión. Se formará así por
difusión, un gradiente de concentración del
antimicrobiano y la sensibilidad del
microorganismo estará indicada por el tamaño de
la zona de inhibición del crecimiento alrededor del
reservorio. El diámetro obtenido dependerá no
solo de la sensibilidad del microorganismo y la
carga del disco, sino también del espesor de la
capa del agar, su pH y composición, de la
capacidad de difusión de la droga en ese medio,
la temperatura, la velocidad de duplicación
bacteriana, y el tamaño y fase de crecimiento del
inóculo. Para que los resultados sean confiables
los procedimientos deberán ser controlados y
estandarizados cuidadosamente.
Las pruebas de sensibilidad están indicadas para
cualquier microorganismo, contribuyendo hacia
orientar el tratamiento quimioterápico de los
procesos infecciosos, si su sensibilidad no puede
ser predicha a partir del conocimiento de la
identidad del germen.
Frecuentemente están indicadas en caso que la
especie en estudio sea capaz de mostrar
resistencia a los antibióticos usados
comúnmente.
El antibiograma puede ser indicado con fines
epidemiológicos de resistencia y en el estudio de
nuevos antibióticos. Las pruebas de sensibilidad
se deben realizar a partir de una cepa aislada. Se
debería evitar realizar el antibiograma en forma
directa a partir del material clínico, excepto en las
emergencias clínicas donde la coloración directa
de GRAM sugiere naturaleza monobacteriana.
Los discos de ATB deberán ser almacenados de
la siguiente manera:
• Mantenerlos refrigerados a 8 ºC o en freezer a -
14 ºC o menos, para mantener la droga en
condiciones óptimas.
• Los discos que contienen drogas de la famili a
de antibióticos betalactámicos deben mantenerse
en freezer para mantener su potencia. Los de
pequeños stocks pueden mantenerse en el
refrigerador.
• Los discos deben ser sacados del refrigerador o
freezer 1 ó 2 horas antes de su uso a fin de lograr
un equilibrio en la temperatura antes de ser
abiertos los frascos. Este proceso evita la
condensación que podría ocurrir cuando la
humedad ambiente alcanza los frascos fríos.
• Cuando el indicador del desecador usado
cambia de color debe interpretarse como un
exceso de humedad y reemplazarse.
• Use solo los discos que no han sido calificados
por sus fabricantes como vencidos
La medición del halo de inhibición:
Por la parte trasera de la placa incubada
mediremos el diámetro de los halos de inhibición
que se han formado alrededor de los discos de
antibiótico a los que la bacteria “problema es
sensible”
Detergentes y desinfectantes
Detergente es una sustancia que tiene la
propiedad química de disolver la suciedad o las
impurezas de un objeto sin corroerlo.
La palabra inglesa equivalente es detergent. El
término alemán empleado es tensid, que parece
más preciso, ya que hace referencia directa a sus
propiedades físico-química. En medicina se
entiende por deterger, limpiar una úlcera o herida,
y se denominan detersorios las sustancias que se
emplean para ello.
Esto implica que puedan calificarse como
detergentes sustancias tan dispares como la
saliva, el jabón o la gasolina dependiendo de

10. sobre qué superficies sean empleadas, ya que
cuando limpian tienen un efecto detergente.
También se podría definir que detergente es
cualquier sustancia que tiene propiedades de
disolver a otra sustancia incorporando la
sustancia disuelta en la sustancia detergente
inicial.
La mayoría de los detergentes son compuestos
de sodio del sulfonato de benceno sustituido,
denominados sulfonatos de alquilbenceno
lineales (LAS). Otros son compuestos de
alquilbencen sulfatos de cadena ramificada
(ABS), que se degradan más lentamente que los
LAS. Hasta 1970 un detergente típico de
lavandería de gran potencia contenía 50% de
tripolifosfato de sodio (fosfato) y sólo un 18% de
LAS. Como se mencionó anteriormente es el LAS
el que tiene la acción detergente, y desde
entonces algunos fabricantes han reducido el
porcentaje de fosfatos.
Los detergentes de uso común al igual que
los jabones son agentes limpiadores, estos
últimos se diferencian de los anteriores desde el
punto de vista funcional, en que mantienen la
capacidad limpiadora aun en aguas duras, cosa
que no sucede con los jabones, por tal motivo
durante las últimas décadas se han hecho muy
populares en el lavado de ropa.
Para que una sustancia sea considerada un
detergente debe actuar de manera efectiva en la
eliminación de las grasas y la suciedad de los
tejidos, sin afectar apreciablemente el tejido
mismo.
Para lograr este propósito, el detergente debe
ser capaz de:
 Ser soluble en agua.
 Tener afinidad por las grasas.
 No afectar los tejidos.
 No ser tóxico ni alergénico.
 Tener capacidad para eliminar las
manchas.
 No tener olor desagradable.
Los detergentes son productos (mezclas) que
pueden estar formados básicamente por:
1. Sales sulfonadas que actúan como
agente tensoactivo modificando
la tensión superficial del agua de lavado
disminuyendo con ello la fuerza de
adhesión de las partículas (mugre) al
tejido.
2. Por fosfatos que tienen un efecto
ablandador del agua y floculan
y emulsionan a las partículas de mugre.
3. Algún otro componente como el
carbonato de sodio que actúa como
solubilizante adicional de grasas.
4. Enzimas, las que son capaces
de hidrolizar las manchas debidas
a proteínas.
5. Blanqueadores.
6. Bactericidas.
7. perfumes.
8. Abrillantadores ópticos (tinturas que dan
a la ropa el aspecto de limpieza).
Son muy variadas las formulaciones de
detergentes que existen en el mercado, así
como sus precios y capacidades de lavado, pero
todas sin excepción, son sustancias
contaminantes del medio ambiente, por tal
motivo, y en aras de proteger el planeta, es muy
recomendable siempre utilizar la menor cantidad
posible de detergentes en el lavado.
La mayoría de los detergentes sintéticos son
contaminantes persistentes debido a que no son
descompuestos fácilmente por la acción
bacteriana después de desechadas las aguas de
lavado. A los detergentes que no
son biodegradables se les llama detergentes
duros y a los degradables, detergentes blandos.
La capacidad contaminante de los detergentes
es tal, que su composición ha sido motivo de
prohibiciones y regulaciones por los gobiernos y
localidades de muchos países, donde el lavado
a máquina, derrama enormes cantidades de
agua con detergentes a las alcantarillas.
Los detergentes son uno de los principales
contaminantes que producen eutroficación.

11. Uno de los detergentes es el jabón que a
continuación se habla de él…
Jabón
Es el componente que realiza un papel similar al
del jabón. Facilita la tarea del agua al consegui r
que esta moje mejor los tejidos. Separa la
suciedad de los tejidos e impide que esta se
deposite de nuevo.
Hay varios tipos:
 Aniónicos: son los más utilizados a nivel
doméstico.
 Catiónicos: tienen propiedades
desinfectantes, aunque no lavan tan
bien.
 No-Iónicos : empleados con frecuencia
para vajillas, no forman mucha espuma.
 Anfotéricos: utilizados en champús y
cremas para usar sobre la piel.
Agentes coadyuvantes: Ayudan al agente
tensoactivo en su labor
 Polifosfatos: ablandan el agua y
permiten lavar en aguas duras.
 Silicatos solubles: ablandan el agua,
dificultan la oxidación sustancias como
el acero inoxidable o el aluminio.
 Carbonatos: ablandan el agua.
 Perboratos: blanquea manchas
obstinadas.
Agentes auxiliares
 Sulfato de sodio: evita que el polvo se
apelmace facilitando su manejo.
 Sustancias fluorescentes: absorben luz
ultravioleta y emiten luz visible azul.
Contrarresta la tendencia natural de la
ropa a ponerse amarilla.
 Enzimas: rompen las moléculas de
proteína, eliminando manchas de restos
orgánicos como leche, sangre, etc.
 Carboximetilcelulosa: es absorbida por
los tejidos e impide, por repulsión
eléctrica, que el polvo se adhiera a los
mismos.
Los trapos "sucios"
Los trapos que se utilizan en restaurantes y
locales de comida rápida son refugio de
bacterias desagradables y peligrosas,
advirtieron las autoridades sanitarias
británicas.
La Agencia de Protección de la Salud (HPA,
por sus siglas en inglés) visitó 120 cocinas
en el noreste de Inglaterra y concluyó que el
56% de los trapos utilizados se encontraban
en condiciones inaceptables.
La suciedad incluía bacterias de heces e
incluso microorganismos peligrosos como
la listeria.
Un experto en salud medioambiental señaló
que "de pura suerte" los clientes se han
salvado de enfermedades.
Los trapos podrán servir para quitar comida
de distintas superficies, pero tienden a
conservar parte de ella incluso cuando se
los enjuaga. Eso los convierte en un caldo
de cultivo ideal para todo tipo de bacterias.
Las bacterias se desparraman luego por la
superficie que se "limpie" a continuación.
"Inaceptable"
La recomendación habitual para los
restaurantes es que se usen trapos
desechables, y que se los descarte con
frecuencia, así como utilizar trapos
diferentes para las superficies que están en
contacto con carne cruda.
El equipo de HPA examinó un total de 133
trapos y descubrió que 86 de ellos
arrastraban bacteria fecal, 21 tenían E. coli,
seis estaban infectados de estafilococo
dorado y cinco tenía listeria.
Aunque no es seguro si las cepas de E. coli
halladas eran lo suficientemente dañinas
como para enfermar a un comensal, los
trapos con estafilococo dorado y listeria sí
caían en la categoría de "peligrosos" para la
salud, especialmente para los ancianos y
los niños.

12. Varios de los restaurantes investigados
además fueron pobremente puntuados en
prácticas de higiene, y 24 de los trapos
estaban siendo utilizados en superficies
donde se procesaba carne y comida para
llevar.
Apenas un tercio de los comercios
examinados utilizaba trapos desechables;
el resto, reutilizaba los mismos, y de este
total, en un 15% de los establecimientos no
se sabía con certeza con qué frecuencia se
cambiaban.
Problemas
El Dr. John Pigott, del laboratorio de HPA en
la ciudad de Leeds, explicó que a todos los
restaurantes inspeccionados se les hicieron
recomendaciones. También aseguró que
volvería a visitarlos para comprobar que sus
condiciones hayan mejorado.
"Aunque muchos desinfectaban sus trapos
con hipoclorito u otros productos, la
inmersión no quita los restos de comida
donde crecen las bacterias", agregó.
El también médico Paul Cosford, de la HPA,
añadió que "los hallazgos revelan
problemas que tienen origen en malas
prácticas de higiene".
"La exposición a estas bacterias peligrosas
puede provocar envenenamiento o
indigestión, que es algo desagradable para
la mayoría pero que además para algunos -
como los más pequeños, los muy mayores
y las mujeres embarazadas- puede tener
consecuencias serias", dijo.
Jenny Morris, encargada de políticas del
Instituto de Salud Medioambiental, dijo que
muchos restaurantes y locales de comida
rápida estaban cumpliendo requerimientos
de higiene complejos, y sin embargo
fallaban en cuestiones simples, como
limpiar los trapos.
El problema es que si fallan en lo básico,
explica, "libran al azar que suceda algo malo
a tus clientes".
Para algunos -los más pequeños, los muy
ancianos o las mujeres embarazadas-, la
exposición a estas bacterias puede tener
consecuencias serias.

13. CENTRO BACHILLERATO TECNOLÓGICO INDUSTRIAL Y DE SERVICIOS No. 128

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