criptococosis

1. CRIPTOCOCOSIS
DEFINICIÓN
• Es una micosis oportunista de curso subagudo o crónico
causada principalmente por la levadura capsulada Cryptococcus
neoformans (vars. neoformans y grubii) y C. gattii
• Se han registrado casos raros provocados por Cryptococcus
albidus, C. laurentii y C. uniguttulatus.
• Se afectan inicialmente pulmones con posterior diseminación
a piel y vísceras, con una predilección hacia Sistema Nervioso
Central (SNC).
• En la actualidad se considera una infección grave asociada al
SIDA.

2. SINONIMIA
• Blastomicosis Europea.
• Torulosis.
• Enfermedad de Busee-Buschke

3. REVISIÓN HISTÓRICA
• 1894: Sanfelice aísla por primera vez una levadura
capsulada (Saccharomyces neoformans) de jugo de
frutas.
• 1894: Busee y Buschke aíslan el mismo hongo de un
lesión cutánea diseminada (S. hominis).
• 1901: Vullemin la clasifica como ascomiceto y la llama
Cryptococcus hominis.
• Posteriormente se clasifica como Torula histolytica y T.
neoformans (Torulosis).
• Finalmente es llamada Cyptococcus neoformans.
• 1975: Kwon-Chong describe el estado perfecto como
basidiomiceto (Filobasidiella neoformans)

4. Actualmente a nivel mundial se
estma que cada año ocurren
alrededor de 957 900 casos
(371 700 - 1 544 000) con una
mortalidad cercana a 624 700
individuos que viven con
VIH/SIDA
B.J. Park, K.A. Wannemuehler, B.J. Marston, N. Govender, P.G. Pappas, T.M.
Chiller (2009).
Revisión histórica

5. CRYPTOCOCCUS NEOFORMANS
Taxonomía.
Reino: Fungi
Phylum: Basidiomycota
Orden: Tremellales
Familia: Tremellaceae
Género: Cryptococcus
Especies: C. neoformans
var. grubii, C. neoformans
var. neoformans, C. gattii,
C. albidus, C. laurentii
Y aproximadamente, otras
35 especies más

6. VARIEDADES Y SEROTIPOS DE
CRYPTOCOCCUS NEOFORMANS
• Variedades: Basadas en estudios bioquímicos,
morfológicos y genéticos.
• Serotipos: Basados en características antigénicas
derivadas de diferencias estructurales del
polisacárido capsular (glucuronoxilomananas). Las
pruebas se realizan con sueros de conejo.

7. VARIEDADES Y SEROTIPOS DE
CRYPTOCOCCUS NEOFORMANS
• C. neoformans var. neoformans (serotipo D).
• C. neoformans var. grubii (serotipo A). (1999)
• C. gattii (serotipos B y C).

8. Xiaorong Lin. Infection: Genetics and Evolution Volume 9, Issue 4, July 2009, Pages
401–416

9. ASPECTOS EPIDEMIOLÓGICOS
SEROTIPOS A Y D
• Serotipos A y D son aislados del medio ambiente y casos
clínicos.
• Su estado perfecto corresponde a Filobasidiella neoformans.
• El serotipo A se encuentra en casi todo el mundo y es mas
resistente a las altas temperaturas.
• El serotipo D se presenta en zonas templadas y está mas
asociado a infecciones cutáneas.

10. ASPECTOS EPIDEMIOLÓGICOS
SEROTIPOS A Y D
Steendbergen 2000

11. ASPECTOS EPIDEMIOLÓGICOS
C. NEOFORMANS VAR.
NEOFORMANS.(SEROTIPO D)
• Frecuentemente es aislado de excretas de palomas (Columba
livia), loros, papagayos, gallinas
• Crece en ambiente salino, alcalino y rico en nitrógeno.
• La enfermedad en el hombre se considera una zoonosis.
• En excretas puede sobrevivir hasta dos años, perder su cápsula
y volverse muy infectivo.
• Se ha encontrado en leche, fruta y tubérculos.
• Sobrevive poco en suelo y ambientes contaminados con otros
microorganismos y protozoarios.

12. ASPECTOS EPIDEMIOLÓGICOS DE C. GATTII
(SEROTIPOS B Y C)
• Predomina en áreas tropicales y subtropicales.
• Existe una asociación biotrófica con plantas
hospederascomo el eucalipto (Eucalyptus camaldulensis y
E. tereticornis E. gomphocephala) y almendros (Terminalia
catappa).
• El estado prefecto corresponde a Filobasidiella bacillispora
y sobrevive en la planta hospedera.
• Las basidiosporas se dispersan de manera concomitante
con las florescencias de la planta (final de primavera y
principios de verano).

13. Eucalyptus camaldulensis

14. Eucalyptus tereticornis

15. Las basidiosporas están presentes en el ambiente por períodos de
tiempo cortos. Pueden ser propágulos infecciosos para el humano y
otros animales. Después de su diseminación, las basidiosporas
pueden sintetizar material polisacárido y transformarse en levaduras
capsuladas.

16. Los osos Koala
son huéspedes
susceptibles a
la infección.
Las esporas pueden a través del intestino de los mamíferos y aves
que tienen alguna asociación con la planta hospedera y eliminar
levaduras capsuladas en heces fecales.

17. CÁPSULA Y VIRULENCIA
La cápsula es un factor definitivo
dentro de la virulencia del hongo.

18. CÁPSULA
• Polisacárido de alto peso molecular formado de unidades de α-1,3-D-manopiranosa y
residuos de ß-D-xilopiranosil y ß-D-glucuronopiranosil.
• El polisacarido se denomina glucuronoxilomanana (GXM)

19. El polisacárido capsular puede inhibir la
producción de ciertas linfocinas, lo que provoca
respuestas tanto celular como humoral muy
débiles
También puede enlazar e inmovilizar
parcialmente a los anticuerpos dirigidos contra
la pared celular y la cápsula del hongo.
Cápsula y Virulencia

20. OTROS FACTORES DE VIRULENCIA
• La enzima difenil-oxidasa funciona como antioxidante
incrementando la sobrevivencia del hongo dentro del huésped.
Produce melanina que impide la acción de superóxidos una vez
que es fagocitada.
• La predilección por SNC en debida al uso de catecolaminas como
sustrato de esta enzima.
• Produce inmunomoduladores.
• Produce proteínas que favorecen el rompimiento de tejidos.

21. ASPECTOS EPIDEMIOLÓGICOS
2000

22. ASPECTOS EPIDEMIOLÓGICOS
2000

23. ASPECTOS EPIDEMIOLÓGICOS
2000

24. ASPECTOS EPIDEMIOLÓGICOS
2000
Se ha encontrado una estrecha relación entre C. neoformans en pacientes
con SIDA y C. gattii en pacientes inmunocompetentes.

25. ASPECTOS EPIDEMIOLÓGICOS
2000
No se han encontrado diferencias significativas relacionadas a la edad,
raza u ocupación en la frecuencia de la Criptococosis.
Es más frecuente en hombres que en mujeres en una relación 3:1

26. ASPECTOS EPIDEMIOLÓGICOS
2000

27. ASPECTOS EPIDEMIOLÓGICOS
2000

28. CUADRO CLÍNICO
• Criptococosis:
• Pulmonar (25%)
• Las lesiones pulmonares generalmente sanan espontáneamente y son
asintomáticas
• En SNC (45%)
• Cutánea (10%)
• Diseminada (visceral 15%)
• Ósea (5%)

29. CRIPTOCOCOSIS PULMONAR
• 95% es asintomática o subclínica.
• Cuadro gripal
• Tos
• Fiebre
• Dolor pleural
• Forma grave
• Fiebre constante
• Pérdida de peso
• Astenia
• Adinamia
• Esputo mucoso y hemoptisis

30. CRIPTOCOCOMA

31. CRIPTOCOCOSIS EN SNC
• Meningitis (97%). Se
manifiesta en forma crónica y
gradual.
• Meningoencefalitis (2%). Es
de curso agudo y fulminante.
• Criptococomas (1%). Masas
fúngicas en el cerebro.

32. MENINGITIS

33. MENINGITIS
• Cefalea intensa frontal.
• Dolor de las órbitas
oculares.
• Fiebre constante.
• Rigidez.
• Dolor de la nuca.
• Vómito en proyectil.
• Vértigo.
• Delirio.
• Alucinaciones.
• Irritabilidad.
• Convulsiones.
• Pérdida de la memoria.
• Fotofobia.
• Estrabismo.
• Muerte.

34. MENINGOENCEFALITIS
• Se presenta generalmente en personas inmunosuprimidas o sometidas a
corticoterapia.
• El paciente cae en coma rápidamente y en 2-3 días muere.

35. CRIPTOCOCOMAS
• Su formación es muy rara.
• Los abscesos se confunden por lo general con neoplasias.
• Síntomas:
• Cefalea.
• Nauseas.
• Vómito en proyectil.
• Convulsiones.
• Coma.
• Paro respiratorio.
• Muerte.

36. CRIPTOCOCOSIS
CUTÁNEA PRIMARIA
• Lesiones chancroides nódulo-
granulomatosas.
• Abscesos ulcerados.
• Topografía principal en miembros
superiores e inferiores.

37. CRIPTOCOCOSIS
CUTÁNEA PRIMARIA

38. CRIPTOCOCOSIS
CUTÁNEA PRIMARIA

39. CRIPTOCOCOSIS
CUTÁNEA PRIMARIA

40. CRIPTOCOCOSIS
CUTÁNEA SECUNDARIA
• Se presenta por
diseminación
hematógena o linfática
• Topografía principal en
cara, cuello y miembros.
• Abscesos y úlceras.

41. CRIPTOCOCOSIS
ÓSEA Y DISEMINADA
• Ósea
• Se origina a partir de focos
pulmonares y/o meníngeos.
• Se presenta en huesos largos
(femur, tibia, esternón),
craneales y vértebras.
• Osteofibrosis y osteolisis.
• Dolor óseo y artralgias.
• Diseminada
• Se presenta en pacientes
severamente
inmunosuprimidos.
• Invade principalmente hígado,
intestinos, bazo, corazón,
testículos, etc.

42. CRIPTOCOCOSIS Y SIDA
• De 6-8% de los pacientes con SIDA desarrollan Criptococosis.
• La forma mas común es la meningoencefalitis.
• Por lo general es siempre mortal.

43. DIAGNÓSTICO
• El diagnóstico clínico es difícil por lo que el diagnóstico microbiológico es
definitivo
• Examen directo con tinta china (tinción negativa) a partir de esputo, LCR
(sedimento) orina.
• Tinción de cápsula con mucicarmín de Mayer.
• Tinción con Blanco de calcofluor.

44. TINCIÓN NEGATIVA
• Levaduras de 2-7µm (sin
considerar la cápsula)
• Hasta 20µm (considerando la
cápsula)

45. TINCIÓN NEGATIVA

46. TINCIÓN NEGATIVA

47. TINCIÓN CON MUCICARMÍN DE MAYER

48. TINCIÓN CON BLANCO DE CALCOFLUOR

49. TINCIÓN DE GRAM

50. DIAGNÓSTICO
• Cultivo:
• SDA sin cicloheximida (NO crece en micobiotic).
• Incubación a 35ºC
• 48-72 horas.
• Crece bien en GS y BHI.
• Examen directo del cultivo (tinción negativa)
• Cultivo en Agar niger.

51. CULTIVO EN SDA

52. EXAMEN DEL CULTIVO
Levaduras de 4-20 µm.

53. PRODUCCIÓN DE FENOLOXIDASA EN AGAR
NIGER

54. AGAR NIGER (STAIB-SEELIGER)
• Semillas de niger (Guizotia abyssinica) 50g
• Fosfato de potasio dibásico 1g
• Creatinina 1g
• Penicilina 20 U/ml
• Estreptomicina 40 U/ml
• Cloranfenicol 1mg/ml
• Difenil 100mg/ml
• Agar 15g
• Agua destilada 1L

55. PRODUCCIÓN DE FENOLOXIDASA EN AGAR
NIGER

56. HISTOPATOLOGÍA
• Hematoxilina Eosina
• Tinción de PAS
• Tinción de Gomori

57. HISTOPATOLOGÍA
H.E.

58. HISTOPATOLOGÍA
H.E.
Debido a su multiplicación, las masas de células de C. neoformans con
su cápsula producen desplazamiento mecánico de tejidos del
hospedero

59. HISTOPATOLOGÍA
H.E.

60. HISTOPATOLOGÍA
H.E.

61. HISTOPATOLOGÍA
PAS

62. HISTOPATOLOGÍA
PAS

63. HISTOPATOLOGÍA
PAS

64. HISTOPATOLOGÍA
GOMORI

65. DIAGNÓSTICO
DETECCIÓN DE ANTÍGENO CAPSULAR
Prueba de alta sensibilidad (90-95%) y especificidad.
Aglutinación con partículas de látex.
Es útil para fines pronósticos.
La sensibilidad puede ser del 90% en pacientes con SIDA.
El suero o LCR se adiciona a partículas de látex sensibilizadas
con anticuerpos anti-Cryptococcus. Se observa reacción de
aglutinación.

66. OTRAS PRUEBAS ÚTILES PARA EL
DIAGNÓSTICO
• Inmunofluorescencia indirecta: detecta la presencia de anticuerpos en suero.
• ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay): Técnica muy sensible para la detección
de anticuerpos. Es menos sensible que la técnica de aglutinación en latex.
• Intradermorreacción: Aún no ha sido obtenido un antígeno estandarizado.

67. DIFERENCIACIÓN DE ESPECIES DE
CRYPTOCOCCUS.
Especie Ureasa KNO3 Psudo
hifas
Crec. a
37ºC
Pigmento
en niger
Cápsula Patoge-
nicidad a
ratón
C. neoformans + - R + + + +
C. albidus var.
albidus + + + + - + -
C. laurentii + - + + - + -
C.
uniguttulatus + - - - - + -

68. PRODUCCIÓN DE UREASA.
MEDIO: CALDO UREA O UREA DE CHRISTENSEN.
Prueba a nivel de género

69. PATOGENICIDAD A RATÓN
CRYPTOCOCCUS NEOFORMANS

70. PSEUDOHIFAS EN CRYPTOCOCCUS

71. DIFERENCIACIÓN DE ESPECIES DE C.
NEOFORMANS.
• Azúcares empleados en la
identificación de especies.
• Dextrosa
• Maltosa
• Sacarosa
• Lactosa
• Galactosa
• Melibiosa
• Celobiosa
• Inositol
• Xilosa
• Rafinosa
• Trealosa
• Dulcitol

72. DIFERENCIACIÓN DE VARIEDADES DE C.
NEOFORMANS.
• Medios empleados:
• CGB: L-Canavanina, glicina, azul de bromotimol.
• GCP: Glicina, cicloheximida, fenol.
• CDBT: Creatinina, dextrosa, azul de bromotimol, tiamina.

73. L-Canavanina
L-Arginina
Los organismos que la consumen pueden incorporarlo
equivocadamente a sus propias proteínas en el lugar de la
Arginina. De este modo se producen proteínas estructuralmente
aberrantes que pueden no funcionar correctamente o no funcionar
en absoluto.
Aminoácido no proteínico

74. DIFERENCIACIÓN DE VARIEDADES DE C.
NEOFORMANS.
Medio Var. grubii Var.
neoformans
Var. gattii
CGB No crece No crece Si crece
GCP No crece No crece Si crece
CDBT No crece Si crece
(naranja)
Si crece
(azul.verde)

75. DIFERENCIACIÓN DE VARIEDADES
C. gattii: Resistente a la L-Canavanina
y produce amonio a partir de la glicina

76. TRATAMIENTO
• Criptococosis Pulmonar.
• Anfotericina B (1-1.5g dosis total).
• Criptococosis en SNC.
• Anfotericina B 0.5-1.0 mg/Kg/día.
• 5-Fluorocitocina 100mg/Kg/día.
Se debe controlar los efectos secundarios como depresión de
médula ósea, daño hepático, diarrea, erupciones.
Tratamiento quirúrgico en caso de masas pulmonares.

77. TRATAMIENTO
• Los derivados del imidazol como Ketoconazol e itraconazol
se emplean en caso de criptococosis pulmonar y cutánea.
No atraviesan la barrera hemato-encefálica.
• El fluconazol es muy efectivo en caso de lesiones en SNC.
• En la actualidad los mejores resultados se han obtenido
con tratamientos mixtos con anfotericina B y fluconazol.
• El tiempo de tratamiento puede ser entre 4 y 6 meses.
Puede haber recidivas.

78. TRATAMIENTO
EN PACIENTES CON SIDA
• Como terapia inicial de la criptococosis en pacientes
con SIDA se recomiendan anfotericina B por vía
intravenosa y después con fluconazol.
• Se puede administrar anfotericina B combinado con
5-fluorocitocina.
• Recientemente se publicó en Archives of Internal
Medicine una revisión de los resultados obtenidos con
fluconazol como tratamiento inicial de la meningitis
por Cryptococcus en 30 pacientes con sida.

79. TRATAMIENTO
• EL seguimiento durante el tratamiento es fundamental y debe realizarse cada
semana hasta que se demuestre claramente la negatividad del cultivo y reducción
en los títulos de antígeno capsular circulante (principalmente en LCR).

80. ESTADO TELEOMÓRFICO
FILOBASIDIELLA NEOFORMANS

81. ESTADO TELEOMÓRFICO
FILOBASIDIELLA NEOFORMANS