2. Es una técnica inmunohistoquímica
ampliamente utilizada tanto en clínica como
en investigación, siendo éste su uso más
habitual.
Su nombre se atribuye a que utiliza
fluoróforos como sistema de detección
Requiere la utilización de un microscopio de
fluorescencia o un microscopio laser
confocal
3. FLUORÓFOROS
Son sustancias que al ser excitadas por una
fuente de energía apropiada, emiten luz.
La excitación se produce a una determinada
longitud de onda y la emisión en otra
longitud de onda mayor.
Su fotoestabilidad es baja, es decir, tienen
un tiempo de duración limitado debido al
decaimiento de la señal que experimentan
4. FLUORÓFOROS
Algunos más utilizados
FITC (verde)
Alexa 488 (rojo)
DAPI (azul)
Aumento de brillo
5. TIPOS DE MUESTRA
Células en cultivo adheridas a sustrato
Células de cultivo en suspensión
Frotis o improntas de células
Citología base líquida
6. TIPOS DE MUESTRA
Cortes en crióstato de tejidos sin fijar
Cortes en crióstato de tejidos fijados
Cortes de tejidos fijados en formalina e
incluidos en parafina.
8. RESULTADOS
Aumento de brillo y contraste en ambas fotos
9. VENTAJAS
Es una técnica rápida
Reproducible
Permite marcación
doble e incluso triple
Modificación de la curva para
mejorar distinción de colores
10. DESVENTAJAS
Posee una baja sensibilidad
Debido al fading de los fluoróforos, es
necesario fotografiar las muestras para
documentar los resultados
Es necesario para su observación un
microscopio de fluorescencia o
confocal, instrumentos de altos costo.
11. APLICACIÓN CLÍNICA
Identificación y diagnóstico de patologías de
la piel
Modificación de
la curva para
resaltar dermis
12. APLICACIÓN CLÍNICA
Identificación y diagnósticos de patologías
renales
Aumento del brillo y el
contraste