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INMUNOFLUORESCENCIA
 Es una técnica inmunohistoquímica
  ampliamente utilizada tanto en clínica como
  en investigación, siendo éste su uso más
  habitual.
 Su nombre se atribuye a que utiliza
  fluoróforos como sistema de detección
 Requiere la utilización de un microscopio de
  fluorescencia o un microscopio laser
  confocal
FLUORÓFOROS

 Son sustancias que al ser excitadas por una
  fuente de energía apropiada, emiten luz.
 La excitación se produce a una determinada
  longitud de onda y la emisión en otra
  longitud de onda mayor.
 Su fotoestabilidad es baja, es decir, tienen
  un tiempo de duración limitado debido al
  decaimiento de la señal que experimentan
FLUORÓFOROS

 Algunos más utilizados
 FITC (verde)

 Alexa 488 (rojo)

 DAPI (azul)




                      Aumento de brillo
TIPOS DE MUESTRA

 Células en cultivo adheridas a sustrato
 Células de cultivo en suspensión

 Frotis o improntas de células

 Citología base líquida
TIPOS DE MUESTRA

 Cortes en crióstato de tejidos sin fijar
 Cortes en crióstato de tejidos fijados

 Cortes de tejidos fijados en formalina e
  incluidos en parafina.
TÉCNICA
RESULTADOS




     Aumento de brillo y contraste en ambas fotos
VENTAJAS

 Es una técnica rápida
 Reproducible

 Permite marcación
  doble e incluso triple




                           Modificación de la curva para
                           mejorar distinción de colores
DESVENTAJAS

 Posee una baja sensibilidad
 Debido al fading de los fluoróforos, es
  necesario fotografiar las muestras para
  documentar los resultados
 Es necesario para su observación un
  microscopio de fluorescencia o
  confocal, instrumentos de altos costo.
APLICACIÓN CLÍNICA

   Identificación y diagnóstico de patologías de
    la piel




Modificación de
la curva para
resaltar dermis
APLICACIÓN CLÍNICA

   Identificación y diagnósticos de patologías
    renales




Aumento del brillo y el
contraste

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Inmunofluorescencia

  • 2.  Es una técnica inmunohistoquímica ampliamente utilizada tanto en clínica como en investigación, siendo éste su uso más habitual.  Su nombre se atribuye a que utiliza fluoróforos como sistema de detección  Requiere la utilización de un microscopio de fluorescencia o un microscopio laser confocal
  • 3. FLUORÓFOROS  Son sustancias que al ser excitadas por una fuente de energía apropiada, emiten luz.  La excitación se produce a una determinada longitud de onda y la emisión en otra longitud de onda mayor.  Su fotoestabilidad es baja, es decir, tienen un tiempo de duración limitado debido al decaimiento de la señal que experimentan
  • 4. FLUORÓFOROS  Algunos más utilizados  FITC (verde)  Alexa 488 (rojo)  DAPI (azul) Aumento de brillo
  • 5. TIPOS DE MUESTRA  Células en cultivo adheridas a sustrato  Células de cultivo en suspensión  Frotis o improntas de células  Citología base líquida
  • 6. TIPOS DE MUESTRA  Cortes en crióstato de tejidos sin fijar  Cortes en crióstato de tejidos fijados  Cortes de tejidos fijados en formalina e incluidos en parafina.
  • 8. RESULTADOS Aumento de brillo y contraste en ambas fotos
  • 9. VENTAJAS  Es una técnica rápida  Reproducible  Permite marcación doble e incluso triple Modificación de la curva para mejorar distinción de colores
  • 10. DESVENTAJAS  Posee una baja sensibilidad  Debido al fading de los fluoróforos, es necesario fotografiar las muestras para documentar los resultados  Es necesario para su observación un microscopio de fluorescencia o confocal, instrumentos de altos costo.
  • 11. APLICACIÓN CLÍNICA  Identificación y diagnóstico de patologías de la piel Modificación de la curva para resaltar dermis
  • 12. APLICACIÓN CLÍNICA  Identificación y diagnósticos de patologías renales Aumento del brillo y el contraste