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Reacciones de precipitación
• La interacción Ag-Ac puede dar lugar a una red
capaz de ser visualizada como un precipitado.
Grandes complejos inmunes (CI) formados por la
interacción Ag-Ac.
• A medida que la cantidad de Ag agregado aumenta,
la cantidad de precipitado se incrementa hasta
alcanzar un máximo, luego del cual declina.
• Al agregar grandes cantidades de Ag, los CI se
forman en exceso de Ag siendo pequeños.
• La reacción de precipitación depende de la
VALENCIA del Ac y del Ag
1- Inmuno Difusión Radial (IDR)
• Permite cuantificar inmunoglobulinas de isotipo o
antígenos solubles presentes en muestras biológicas.
• La técnica se basa en la difusión de la muestra
conteniendo el antígeno a medir en una matriz
semisólida de agar en la que se encuentra disuelto el Ac
específico.
• La muestra biológica se introduce en los orificios
cilíndricos excavados en el agar y a medida que el
antígeno difunde en forma radial, se alcanza la relación
Ag-Ac que permite la formación precipitados visibles.
• Se mide el radio (R) de los precipitados que es
proporcional a la concentración de antígeno (C).
2- Inmunoelectroforesis (IEF)
• Es una técnica cualitativa que permite la
identificación de diferentes componentes proteicos
presentes en distintas muestras biológicas (suero,
orina, etc) a través de arcos de precipitación.
• La técnica se realiza preferentemente en geles de
agarosa
ELISA (Enzime Linked
ImmunoadSorbent Assay)
• La técnica de ELISA utiliza Acs marcados con una
enzima (generalmente la peroxidasa) para poder
visualizar la reacción Ag-Ac.
• Determinación de Ag por ELISA
• El modelo ELISA "Sandwich" directo. El Ac
específico para el Ag de interés, se encuentra
adsorbido en un soporte sólido (placa de petri),
sobre el que se añadirá la muestra biológica.
Quedará
capturado en la
placa y será
puesto en
evidencia tras la
adición de otro
Ac específico
conjugado con la
enzima.

Por último, se añade el
substrato que por acción
de la enzima, dará un
producto coloreado que
producirá un color
observable a simple vista
y cuantificable mediante
un espectrofotómetro.
Determinación de Acs por ELISA
• ELISA indirecto en donde el Ag de interés se
encuentra adsorbido en la placa de ELISA. Se
pueden utilizar como antígenos, proteínas virales o
bacterianas e incluso virus completos.
• Esta es una de las técnicas de elección para buscar
Acs contra proteínas del virus VIH en sueros de
pacientes.
• http://www.fmed.uba.ar/depto/microbiologia/guia01.p
df
• http://www.cultek.com/inf/otros/soluciones/Solucione
s-ELISA-protocolos.pdf
• http://pendientedemigracion.ucm.es/info/saniani/tron
cales/inmunologia/documentostemas/Tema%2013.pdf
• http://books.google.com.mx/books?id=TGxGADaoZwE
C&pg=PA144&dq=pruebas+de+precipitacion+y+aglutin
acion&hl=es&sa=X&ei=YPf3Uq6LNoqIygHf7YGoAQ&ve
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  • 1. Reacciones de precipitación • La interacción Ag-Ac puede dar lugar a una red capaz de ser visualizada como un precipitado. Grandes complejos inmunes (CI) formados por la interacción Ag-Ac. • A medida que la cantidad de Ag agregado aumenta, la cantidad de precipitado se incrementa hasta alcanzar un máximo, luego del cual declina. • Al agregar grandes cantidades de Ag, los CI se forman en exceso de Ag siendo pequeños.
  • 2.
  • 3. • La reacción de precipitación depende de la VALENCIA del Ac y del Ag
  • 4. 1- Inmuno Difusión Radial (IDR) • Permite cuantificar inmunoglobulinas de isotipo o antígenos solubles presentes en muestras biológicas. • La técnica se basa en la difusión de la muestra conteniendo el antígeno a medir en una matriz semisólida de agar en la que se encuentra disuelto el Ac específico. • La muestra biológica se introduce en los orificios cilíndricos excavados en el agar y a medida que el antígeno difunde en forma radial, se alcanza la relación Ag-Ac que permite la formación precipitados visibles. • Se mide el radio (R) de los precipitados que es proporcional a la concentración de antígeno (C).
  • 5.
  • 6. 2- Inmunoelectroforesis (IEF) • Es una técnica cualitativa que permite la identificación de diferentes componentes proteicos presentes en distintas muestras biológicas (suero, orina, etc) a través de arcos de precipitación. • La técnica se realiza preferentemente en geles de agarosa
  • 7.
  • 8. ELISA (Enzime Linked ImmunoadSorbent Assay) • La técnica de ELISA utiliza Acs marcados con una enzima (generalmente la peroxidasa) para poder visualizar la reacción Ag-Ac. • Determinación de Ag por ELISA • El modelo ELISA "Sandwich" directo. El Ac específico para el Ag de interés, se encuentra adsorbido en un soporte sólido (placa de petri), sobre el que se añadirá la muestra biológica.
  • 9. Quedará capturado en la placa y será puesto en evidencia tras la adición de otro Ac específico conjugado con la enzima. Por último, se añade el substrato que por acción de la enzima, dará un producto coloreado que producirá un color observable a simple vista y cuantificable mediante un espectrofotómetro.
  • 10. Determinación de Acs por ELISA • ELISA indirecto en donde el Ag de interés se encuentra adsorbido en la placa de ELISA. Se pueden utilizar como antígenos, proteínas virales o bacterianas e incluso virus completos. • Esta es una de las técnicas de elección para buscar Acs contra proteínas del virus VIH en sueros de pacientes.
  • 11. • http://www.fmed.uba.ar/depto/microbiologia/guia01.p df • http://www.cultek.com/inf/otros/soluciones/Solucione s-ELISA-protocolos.pdf • http://pendientedemigracion.ucm.es/info/saniani/tron cales/inmunologia/documentostemas/Tema%2013.pdf • http://books.google.com.mx/books?id=TGxGADaoZwE C&pg=PA144&dq=pruebas+de+precipitacion+y+aglutin acion&hl=es&sa=X&ei=YPf3Uq6LNoqIygHf7YGoAQ&ve d=0CDAQ6AEwAQ#v=onepage&q=pruebas%20de%20p recipitacion%20y%20aglutinacion&f=false