Se estudió la obtención de plantas libres de enfermedades mediante el cultivo de meristemos de Zantedeschia aethiopica, utilizando explantes de ápices, cultivado en medio Murashige y Skoog, suplementado con AIA, KIN y carbón activado. El uso de meristemos se debe a que estos no presentan virus ni patógenos, además debido a que las células meristemáticas no son diferenciadas, se pudo observar resultados en un corto plazo, los dos explantes sembrados dieron lugar a brotes en una semana.

1. OBTENCIÓN DE PLANTAS LIBRES DE ENFERMEDADES MEDIANTE EL
CULTIVO DE MERISTEMOS DE CARTUCHO (Zantedeschia aethiopica).
Alexandra Chasiquiza
Cultivo de Tejidos. Ingeniería en Biotecnología. Universidad de las Fuerzas Armadas
ESPE.
Sangolquí-Ecuador
Noviembre 2013
RESUMEN
Se estudió la obtención de plantas libres de enfermedades mediante el cultivo de
meristemos de Zantedeschia aethiopica, utilizando explantes de ápices, cultivado en
medio Murashige y Skoog, suplementado con AIA, KIN y carbón activado.
El uso de meristemos se debe a que estos no presentan virus ni patógenos, además
debido a que las células meristemáticas no son diferenciadas, se pudo observar
resultados en un corto plazo, los dos explantes sembrados dieron lugar a brotesen una
semana.
Palabras Clave: meristemos, virus, plantas sanas.
ABSTRACT
Studied the production of disease-free plants by meristem culture of Zantedeschia
aethiopica, using apex explants, cultured on Murashige and Skoog
mediumsupplemented with IAA, KIN and activated carbon.
Meristems use is that these pathogens have no virus or also because the nondifferentiated meristematic cells could be observed in the short term results, the two
explants were seeded in outbreaks in a week.
Keywords: meristems, viruses, healthy plants.
INTRODUCCIÓN
Muchos cultivos vegetales contienen
virus sistémicos, los cuales afectan su
funcionamiento
y
abaten
su
rendimiento, representando grandes
pérdidas
económicas
para
los
agricultores, por tanto es deseable la
producción de plantas libres de virus.
En muchas especies se puede lograr
plantas
sanas
sometiéndolas
a
tratamientos con calor o con la
aplicación de productos químicos, sin
embargo ciertos virus han resistido a
todas las pruebas de erradicación, lo
cual hace necesario el uso de otros
métodos (Pérez, 2009).
Los meristemos están compuestos
por células no diferenciadas que se
dividen
activamente,
sugiriéndose
varias hipótesis respecto de la ausencia
de virus en esta zona. Una primera
hipótesis explicaría la ausencia de virus
en el meristemo por problemas de
transporte de los virus, así si estos se
mueven por el sistema vascular de la
planta, como los vasos no llegan al
meristemo, el virus no podría
alcanzarlo, e incluso si el virus fuera

2. capaz de invadir o moverse de célula a
célula, la velocidad de avance de los
virus sería inferior a la de crecimiento
del meristemo e impediría su invasión;
otras hipótesis proponen una inhibición
de la replicación de los virus en la zona
meristemática debido a la alta tasa
metabólica del meristemo y a la elevada
concentración de reguladores en esa
zona. Aunque el motivo de la ausencia
de virus en el meristemo no está
totalmente esclarecido, estas hipótesis o
una conjunción de las mismas parecen
ser bastante correctas. (López et al,
2013).
La razón principal por la cual las
plantas son susceptibles a los virus, es
que no presentan síntomas cuando estos
invaden los tejidos(Afanor, 2005).
El objetivo de la presente práctica es la
obtención de plantas libres de
enfermedades mediante el cultivo de
meristemos de cartucho (zantedeschia
aethiopica) en medio MS enriquecido
con AIA y KIN, con guía en el “Manual
de Laboratorio de Cultivo de Tejidos
Vegetales”.
solución de detergente al 2% más tres
gotas de tween 20 durante 20min, se
enjuagó tres veces con agua destilada
yse sumergió las muestras en una
solución de cloro al 2.5% más 3 gotas
de tween 20 durante 10min en
agitación, se enjuagó nuevamente tres
veces con agua destilada (Jadán 2012).
Se trasladó las muestras sumergidas en
cloro a la cámara de flujo laminar,
dentro de la misma se realizó tres
lavados con agua estéril previo antes de
proceder a la siembra (Jadán, 2012).
Siembra del material:Sé eliminó el
material de la periferia dañado por la
desinfección, luego se quitó las capas de
tejido hasta llegar al meristemo, se
colocó los explantes en el medio MS
enriquecido con KIN y AIA y se selló
el mismo para incubación en luz (Jadán
2012).
El proceso anteriormente detallado se
llevó a cabo en condiciones de total
asepsia,
procurando
evitar
contaminaciones.
RESULTADOS
MATERIALES Y MÉTODOS
Preparación de la sala de siembra: El
piso se desinfectó con kalipto, las
cámaras de siembra se limpiaron con
papel toalla estéril y Savlón. Los
materiales usados en la siembra tales
como: mecheros, pinzas bisturí, papel
toalla, plástico, ligas, botellas de agua,
etc.
fueron
introducidas
previa
esterilización, luego se prendió las
lámparas UV de las cabinas de flujo
durante 15min y en los siguientes 15
min se encendió el flujo de aire luego de
apagar las lámparas (Jadán, 2012).
Material vegetal:Se usó ápices de
cartucho. La desinfección inició con un
lavado en agua, con el fin de retirar
todas impurezas, presentes en las
muestras, después se
colocó las
muestras vegetales en agitación con una
Los resultados se presentan en las
siguientes fotografías y tablas.
Como se puede observar en la tabla 1 y
en las figuras 1 y 2 los explantes
sembrados dieron resultados positivos,
el explante 1 sufrió oxidación, mientras
que ambos explantes presentan brotes y
raíces.
Tabla 1. Evaluación semanal de explantes de
meristemo de cartucho cultivados in vitro
Fecha
de
siembra (30/10)
#
frasco
Explante
1
2
Me1
Me2
Contaminación
(hongo o
bacteria)
No
No
Nº
brotes
Long.
(mm)
1
1
20
25
Me: Meristemo
Fecha de
evalua-ción
(06/11)
Otras
características
Oxidación
-

3. 1
2
2
Fig.2Frasco 2 con el explante en desarrollo.
Primera Semana. Vista Lateral (1), vista
superior (2). En rojo se muestra la raíz formada
DISCUSIÓN
Fig.1 Frasco 1 con el explante en desarrollo.
Primera Semana. Vista Lateral (1), vista
superior (2). En rojo se muestra la raíz formada
1
Gómez (2007) argumenta que la técnica
de cultivo de meristemos permite la
obtención de plantas libres de
patógenos, en un tiempo reducido
debido a la no diferenciación de sus
células, en concordancia con lo
expuesto por el autor, en la primera
semana de evaluación se pudo observar
la formación de brotes, como se muestra
en las figuras 1 y 2, además según
Martínez (2008), una concentración
superior de citoquininas, dará lugar a la
formación de brotes mientras que un
cuidadoso equilibrio de los reguladores
de crecimiento producirá raíces y brotes,
y por lo tanto, una plantita incipiente, en
las figuras mencionadas anteriormente se
puede observar también la formación de
raíces debido al uso de la auxina AIA.
Según Roca (1993), el empleo de
sustancias antioxidantes como el carbón
activado, incorporado al medio, ha
mostrado ser de utilidad, posiblemente
por absorber metabolitos tóxicos que
podría matar a los explantes, como se
puede observar en la fig.1 el explante
sufrió oxidación, sin embargo se obtuvo
resultados positivos gracias a la
presencia de carbón activado en el
medio.

4. CONCLUSIONES
El cultivo de meristemos permite la
obtención de plantas libres de
enfermedades, debido a la ausencia
de microorganismos y virus dentro
de este tejido.
Los meristemos están formados por
células no diferenciadas, lo cual
junto
con las concentraciones
adecuadas de reguladores de
crecimiento permiten una rápida
obtención de brotes.
Al quitar las capas de tejido, es
importante hacerlo con sumo
cuidado, ya que el daño del
meristemo ocasiona que las células
del explantes sean incapaces de
dividirse evitando la obtención de
brotes.
Se recomienda el uso de un
antioxidante en el medio de cultivo,
como el carbón activado, puesto que
los explantes tienden a oxidarse
rápidamente.
BIBLIOGRAFÍA
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vitro a partir de meristemos de cinco
variedades comerciales de Dianthus
caryophyllus. Bogotá. Recuperado
el: 10/11/2013. Disponible en:
http://www.javeriana.edu.co/biblos/t
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Caracas.
Recuperado
el:
09/11/2013.
Disponible
en:
http://www.slideshare.net/mariasalo
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Jadán, M., 2012, Manual de
Laboratorio de Cultivo de Tejidos
Vegetales, Escuela Politécnica del
Ejército, Práctica N°3: Muestreo del
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López E., Cazorla M. Saneamiento
del material vegetal: cultivo de
meristemos.
Recuperado
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11/11/2013.
Disponible
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Martínez,
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09/11/2013.
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Pérez M. 2009, Enfermedades en las
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Identificación
y
Diagnóstico.
Recuperado
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10/11/2013.
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Roca, W., 1993. Cultivo de tejidos
en la agricultura. Fundamentos y
aplicaciones,
Cali,
Centro
Internacional
de
Agricultura
tropical.