Este documento describe un procedimiento de laboratorio para observar y contar esporas de hongos aisladas del ambiente. Los estudiantes aprendieron a realizar un conteo de esporas usando una cámara de Neubauer bajo el microscopio. Tomaron una muestra de hongos cultivados, la colocaron en agua, y contaron las esporas en suspensión en cinco cuadrados de la cámara de Neubauer, obteniendo un promedio de 2.65x106 esporas.

1. ESCUELA POLITÉCNICA DEL EJÉRCITO
CARRERA INGENIERÍA AGROPECUARIA
SANTO DOMINGO
Asignatura: Microbiología
Nivel: Tercero
Estudiante: Renato Andrade Cevallos
Docente: Ing. Gustavo Núñez
Fecha:Miércoles 3 de abril del 2013
Práctica No.3

2. 1. TEMA
Observación y conteo de esporas de hongos aislados del ambiente aire, suelo, agua.
2. OBJETIVO GENERAL
Adiestrarse en técnicas de observación y conteo de esporas
3. OBJETIVOS ESPECÍFICOS
Adiestrarse en técnicas de conteo de esporas.
Aprender a realizar un conteo en cámara Neubauer.
4. REVISIÓN DE LITERATURA
Los hongos son organismos eucariotas, constituyen uno de los mayores grupos de seres
vivos, hasta ahora se han descrito unas 80000 especies pero se estima que el número
real llega al millón y medio de especies, hay muchas especies que no presentan
diferencias morfológicas, sino que son genéticamente diferentes. (Cubas, 2007)
La micología es la ciencia que se encarga del estudio de los hongos, tradicionalmente ha
sido una disciplina de la botánica, a pesar de que los análisis filogenéticos indican que
los hongos están más relacionados con los animales que con las plantas. Sin embargo,
los hongos producen esporas sexuales o asexuales para su reproducción y
multiplicación, lo que no ocurre en animales. (Cubas, 2007)
Esporas son los elementos de perpetuación de la especie. De acuerdo a la morfología
reciben distinto nombre: alantospora con forma de banana, aleuriospora con base plana,
dictiospora con septos longitudinales y transversales, didimospora con un tabique,
equinulada como un erizo, escolescospora como un gusano, estaurospora como una
estrella, feospora de color obscuro, fragmospora con tabiques transversales, fusiforme
como un huso, helicospora como una espiral, hialospora de color claro y translúcido,
planospora móvil, verrucosa con verrugas, zoospora con flagelos. Las balistosporas son
proyectadas violentamente una vez maduras. Las hipnosporas son aquéllascapaces de
permanecer con vida latente por largo tiempo. (Carrillo, 2003)
Las esporas pueden ser de origen asexuado (mitosporas) o sexuado (meiosporas), y por
su ubicación relativa internas oexternas. Las mitosporas seoriginan en las estructuras
anamórficas y las meiosporas en las teleomórficas. (Carrillo, 2003)
Esporas o conidios más bien grandes, multicelulares, con tabiques transversales y
longitudinales. La forma de los conidios es característica, varía de claviforme a
elipsoidal y frecuentemente presentan un apéndice apical simple o dividido (de longitud
hasta 20 µm). Paredes gruesas con la superficie lisa o verrugosa, de color marrón pálido

3. u oscuro. A menudo con una pequeña cicatriz en la base. El número de células de los
conidios varía según la especie. (Carrillo, 2003)
La cámara de recuento o cámara de Neubauer es un apárato de precisión hecho de vidrio
óptico especial. Se utiliza para contar células u otras partículas en suspensiones bajo el
microscopio. Las cámaras de recuento se utilizan principalmente para el análisis de
sangre (recuento de leucocitos, eritrocitos, trombocitos) y recuento de células en el
liquor. Además las cámaras de recuento sirven para contar bacterias, esperma y esporas
de hongo. (Marienfield, 2007)
5. EQUIPOS
Microscopio compuesto
Estufa de incubación
6. MATERIALES
Placas cubreobjeto
Vasos de precipitados
Aguja de disección
Varilla de vidrio
Sacabocados
Pipeta automática
Platos petri conteniendo medio de cultivo
Caja Neubauer
7. PROCEDIMIENTO
Se colocó 100 ml de agua en un vaso de precipitación, se tomó una muestra de hongos
de un medio de cultivo que fue extraída con el sacabocados y se la colocó en el agua, se
la agitó con la varilla durante 5 minutos para procurar que queden las esporas en
suspensión en el agua.
Se colocó el cubre objetos tapando parcialmente la caja Neubauer y con la pipeta
automática cogemos una muestra de la suspensión y la colocamos cuidadosamente en la
caja, donde por efecto de capilaridad el fondo de la cámara se llena antes de que la
solución pueda desbordarse.
Llevamos la caja Neubauer a observación en el microscopio, donde primeramente
ubicamos la caja con el lente de aumento 5x, luego con el de 10x observamos el cuadro
central, y con el lente de 40x procedimos a hacer el conteo de las esporas.

4. 8. RESULTADOS
Cuadros seleccionados para el conteo:
c
Cuadro superior izquierdo
11x25mmx100mmx100 = 2,75x106
Cuadro inferior izquierdo
13x25mmx100mmx100 = 3,25x106
Cuadro superior derecho
9x25mmx100mmx100 = 2,25x106
10x 40x5x

5. Cuadro inferior derecho
12x25mmx100mmx100 = 3x106
Cuadro Central
8x25mmx100mmx100 = 2x106
Promedio total = 2,65x106
9. CUESTIONARIO
¿Señale con que lente (aumentos) hace la observación de hongos?
Con el lente de 40x
¿Cuál es la estructura de la pared celular de los hongos?
Su pared celular contiene quitina que es un polisacárido nitrogenado y almacenan
glucógeno en sus células como sustancia de reserva.
10. CONCLUSIONES
Se pudo establecer un promedio de esporas en suspensión en los 100 ml de agua.
El método de recuento en la caja de Neubauer es muy efectivo para establecer un
promedio en este caso de esporas.
11. RECOMENDACIONES
Al mezclar la muestra de cultivo en el agua procurar revolverla bien para que esta libere
todas las esporas que se encuentran en ella.
Tener cuidado al colocar el agua en la caja Neubauer para que esta no se desborde.

6. Establecer qué cuadros se van a contar, preferiblemente los de las esquinas y centro para
que sea al azar.
12. BIBLIOGRAFÍA
Carrillo, L. (2003). Los hongos de los alimentos y forrajes. Jujuy, Argentina.
Cubas, P. (2007). Botánica. Recuperado el 10 de abril de 2013, de Hongos:
http://www.aulados.net/Botanica/Curso_Botanica/Hongos/31_hongos_general_texto.pd
f
Marienfield. (2007). Cámara de recuento.

7. ANEXOS