Los metales pesados pueden ser tratados para reducir su impacto ambiental, esto a partir de la biorremdiacion.

1. Construyendo la excelencia
Programa Ingeniería Agronómica
Extensión Facatativá

2. BIORREMDIACION
Juan Sebastian Morales Cañon
460213245

3. Senthil Kumar.V1, Krishnaveni.B2* and Thinesh Kumar.N3
1Head of Department, Department of Biotechnology, Maharaja Co-education Arts and Science
College,
Perundurai, Erode, India-52.
2Ph.D Research Scholar, Department of Biotechnology, Maharaja Co-education Arts and Science
College,
Perundurai, Erode, India-52.
3M.Phil Research Scholar, Department of Biotechnology, Maharaja Co-education Arts and Science
College, Perundurai, Erode, India-52.
Email-senthilkumarsen73@gmail.com

4. RESUMEN
Con los avances recientes
en tecnología de
fermentación han
conducido a innovar en la
parte de hacer útiles los
subproductos de diversos
microbios en el suelo
Fusariium solani sps CBNR KRRR.
Aislado de los suelos marinos de
Pichavaram Tamil
Nadu fue utilizado para la producción
económica de quitosano utilizando
medio Hesseltine y Anderson
Los polisacáridos fueron
extraídos por el tratamiento
acido-alcalino, y
caracterizado por
espectroscopio infrarrojo
La mayor taza de crecimiento
por fue por el medio Henderson
y Anderson con un peso micelial
de 14 g/L

5. MEJOR RENDIMIENTO DE QUITOSAN
OBTENIDO ES
(33.57 mg/g or 3.3%).
La actividad antimicrobiana de la Quitosana fue
probada contra E. coli y S.Aureus
con cinética de crecimiento. Se encontró que el
quitosano extraído tienen
actividad antimicrobiana comparable al quitosano
comercial así como el antibiótico estándar
usado.
Posteriormente el quitosano extraído fue también
probado para ver su capacidad fotocatalítica
para degradar el colorante azul de metileno y
se encontró que presentan inhibición de 94,5% en 72
horas.
INTRODUCCCIÓN

6. QUITOSANO polímero Quitina Componente principal de la fibra del
exoesqueleto de los cretáceos
Polysacarido formado por
repetidas unidades de ß (1-4) 2amino-2-desoxi-
D-glucosa (o D-glucosamina).
Quitosano en las
paredes celulares se produce a
través de desacetilación enzimática
de la quitina.
La actividad antimicrobiana del quitosan depende de sus
propiedades físicas
• Grado de des acetilación
• Peso molecular
• Especie
• Solvente
• Fuente

7. Este estudio esta orientado a la
utilización de nuevas cepas fúngicas para
obtener el máximo de biomasa y
producción excesiva de quitosano junto
con pruebas de su capacidad
antimicrobiana y degradación de
colorantes

8. MATERIALES Y MÉTODOS
Colección de muestras y aislamiento de hongos
Pichavaram, Tamil, nadu
• Se obtuvo de la capa superficial y se
transfirió a bolsas de plástico estéril
• Las muestras fueron tomadas por
separado para la dilución seriada
• 10 g mx 90 ml agua destilada estéril
• Aproximadamente 0,1ml de la muestra diluid
a sobre el agar patata dextrosa (PDA)
• El medio fue suplementado con 20 μg ml
1 ciprofloxacina para reducir la
contaminación por parte
de los hongos y levaduras
• Se incubaron en una posición invertida duran
te 5-7 días a 25 ± 20C.
• El aislamiento fúngico fue
caracterizado en azul de
lactofenol y registrado según
sus características
morfológicas

9. MATERIALES Y MÉTODOS
Colección de muestras y aislamiento de hongos
Aislamiento e identificación del hongo de la prueba.
Extracción y caracterización de quitina y quitosano
Medio de cultivo
Extracción de quitina y quitosano
Caracterización de quitina y quitosano
Espectroscopia infrarroja (desacetilación grado – DD %).
Estudio comparativo de la actividad antimicrobiana de la
Quitosina
Degradación fotocatalítica de colorantes

10. RESULTADOS
Identificación morfológica de los aislamientos obtenidos
de la muestra de suelo
Extracción y caracterización de quitina y quitosano
Producción de biomasa
Extraccion de Quitina y quitosano
Caracterización de quitosano
Espectroscopia infrarroja
Estudio comparativo de la actividad antimicrobiana
de la Quitosana
Degradación fotocatalítica de colorantes
Observación visual

11. Aislamiento e identificación del hongo de la prueba.
• Las colonias fúngicas individuales fueron recogidas y llevadas de nuevo a
cultivo en PDA
• Se confirmo la identidad del hongo por
el ADN ribosomal nuclear interno transcrito y espaciado (ITS)
secuenciado usando el kit ABI-Big Dye Termintor v3.1
ABI 3100 automatizado secuenciador por nacional hongos colección de
la cultura de la India (NFCCI), Pune, India.
• La región (ITS) fue amplificado mediante el uso del universal primer set
fúngico (Forward Primer) 5'-GACTCAACACGGGGAAACT-3' y
(Reverse primer) 5'-AGAAA GGAGG TGATCCAGCC-3‘. Se secuenciaron las
regiones amplificadas por PCR
• El análisis de la secuencia de nucleótidos se hizo por medio de Blast-n
site at NCBI server y la alineación de las secuencias fue
realiza utilizando CLUSTALW

12. Extracción y caracterización de quitina y quitosano
Medio de cultivo
F.solani CBNR KRRR se cultiva para la producción de quito
sano, en los siguientes medios de cultivo: Hesseltine y
Anderson (HA medio)-
(glucosa (40 g), asparragina (2 g), chloridrate de tiamina (
0,05mg), fosfato de potasio
(0.50
g) y sulfato de magnesio (0,25 g) por litro de agua destila
da, pH 5.2).

13. MÉTODOS MICROBIOLÓGICOS
Extracción de quitina y quitosano
El proceso de extracción implicada deproteination con hidróxido de sodio
2% w/v solución (30: 1 v/w, 90 º c, 2 horas), separación de la fracción
insoluble del álcali (AIF) por centrifugación (4000 rpm, 15 min)
Extracción de quitosano de AIF bajo reflujo (10% v/v ácido acético 40:
1 v/w, 60 º c,6 horas), separación de la quitina cruda
por centrifugación (4000 xg, 15 min) y una precipitación de quitosano del
extracto a pH 9.0, ajustado con un 4 M Solución de NaOH.
Quitosano y la quitina cruda se lavaron en un embudo de vidrio sinterizado
grueso con agua destilada, etanol y acetona y dejar secar a 20 º c.

14. Caracterización de quitina y quitosano
Espectroscopia infrarroja (desacetilación grado – DD %).
El grado de desacetilacion de quitosan para microbios fue determinado usando
el espectroscopio infrarrojo usando la relacion de 1655/A3450 y calculado
acordando con la ecuacion (Roberts, 1992).
A (%) = (A1655/A3450) x 100 / 1.33
• 2 ml de mx hongo quitina y el quitosano
• Se secó durante la noche a 60 º c bajo presión reducida
• Mezclado bien con 100 mg de KBr discos de espesor 0,5mm.
• Secado durante 24 horas a 110 ºc a presión reducida.
• Se registró con un Espectrómetro Bruker de 66, con undiscos de KBr de 100
mg
• La intensidad del máximo bandas de absorción se determinaron por el
método de línea de base.

15. Estudio comparativo de la actividad antimicrobiana del
Quitosano
Además del quitosano:
preparación de ácido acético de
3% (v/v) 100 ml 3ml concentrado (99%) acetic acid
en 100 ml volagua destilada
1.5gm chitosan was taken into
two test tube