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El documento describe la importancia económica de los camélidos sudamericanos como la vicuña, cuya fibra fina tiene alto valor comercial. El objetivo es identificar genes relacionados con la calidad de la fibra de vicuña mediante la optimización de una técnica para extraer ARN de folículos pilosos y detectar secuencias de genes expresados.
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![La crianza de camélidos sudamericanos constituye una actividad económica de suma importancia para el desarrollo social y económico de las comunidades andinas del Noroeste argentino. De ello se aprovecha la carne y la fibra. La fibra de los camélidos se clasifica como fibra textil de origen animal de naturaleza proteica y es considerada dentro de las fibras textiles especiales. En particular, la fibra de vicuña es muy codiciada por ser la fibra animal más fina del mundo con altísimo valor comercial. Entre los camélidos sudamericanos silvestres, la vicuña está protegida por convenios internacionales por el “peligro de su extinción”; así gracias a un buen proyecto de conservación, la población de vicuñas aumentó y ha cambiado su estatus a “vulnerable”. Debido a ello, su aprovechamiento se basa solo en la obtención de la fibra mediante esquila. La calidad de fibra de vicuña ha sido evaluada en cuanto a sus parámetros físico-químicos, tales como grosor, largo de mecha, resistencia al lavado. Sin embargo, no existen estudios a nivel molecular tendientes a identificar los genes responsables de la calidad de la fibra de esta especie. En otras especies de animales productores de fibra como la oveja, se han identificado genes con herencia mendeliana para muchos caracteres importantes de la lana; siendo de particular importancia los genes que influyen en la pigmentación y la morfología de la fibra de la lana, en la que están involucradas proteínas tales como algunos tipos de queratinas. OBJETIVO GENERAL: Identificar genes que estén relacionados con la calidad de la fibra de vicuña. OBJETIVO ESPECÍFICO: Optimizar una técnica de obtención de ARN de células de folículos pilosos de vicuñas, con el fin de detectar secuencias de genes expresados. Muestras de pelos arrancados provenientes de distintos animales que conservan células del folículo piloso en la raíz. ABRA PAMPA - JUJUY Tubos estériles con solución de lisis para extracción de ARN (Tri-Reagent, MRC) Las muestras se mantuvieron en hielo hasta la llegada al laboratorio en Tucumán, donde fueron almacenadas a -70ºc INTRODUCCIÓN OBJETIVOS MATERIALES Y MÉTODOS 15 min Resuspender en 10 ul de H2O libre de RNA sas 0,2 vol de cloroformo. Incubar 5 min en hielo 3000 rpm 5 min 10000 rpm 15 min Recuperar fase acuosa 1 vol. de isopropanol. Incubar 10 min en hielo Descartar el sobrenadante Lavar con Etanol 75% 15000 rpm Se realizaron grupos de cuatro muestras de ARN provenientes de distintos individuos. Se purificó ARNm mediante un kit (GenElute Direct Mrna miniprep kit, Sigma) EXTRACCIÓN DE ARN TOTAL Incubar a 42ºC 60 min. Desnaturalizar la Transcriptasa reversa a 94ºC 2 min. Buffer de la enzima (5 x) DNTPs 0.83 mM, c/u ADNc M-MLV RT 200 U Desnaturalización del ARN con 25 pmol de oligo dT (70 ºC, 5 min.) Enfriar en hielo Síntesis de ADNc RT-PCR en condiciones poco restrictivas Cebador V01 ACCACACCTTCCACTTCCTG Amplificación de fragmento de β actina Clonado y Secuenciación de fragmentos amplificados Los productos generados por RAP-PCR fueron ligados al vector PGEM T easy vector. Posteriormente se realizó la transformación de bacterias competentes obtenidas de la cepa DH5 α de Escherichia coli . Las secuencias fueron comparadas con otras secuencias existentes en las bases de datos de secuencias de nucleótidos y de proteínas disponibles en NCBI. Se utilizó el algoritmo BLAST y el programa Multalin. RESULTADOS TABLA 1: Similitudes entre fragmentos de ADNc obtenidos a partir de células del folículo piloso de vicuña y secuencias conocidas de las bases de datos consultadas. Longitud: cantidad de nucleótidos secuenciados (nt) Secuencias DISCUSIÓN ,[object Object],[object Object],[object Object],PROYECCIONES ,[object Object],[object Object],AGRADECIMIENTOS: Agradecemos al personal del INTA de Abra Pampa por su colaboración en el manejo de vicuñas durante la toma de muestras, y a las siguientes instituciones, que financiaron este trabajo: BANCO SANTANDER-RIO/UNIVERSIA y Agencia de Promoción Científica y Tecnológica. DETECCIÓN DE SECUENCIAS DE ADNc EN FOLÍCULOS PILOSOS DE VICUÑAS AUTORES: Daniela C. Garcia, Andrea E. Longo DIRECTORES: Mariela Roldán Olarte, Pablo A. Valdecantos y Dora C. Miceli Cátedra de Biología Celular y Molecular, Instituto de Biología de la Fac. de Bqca. Qca. y Fcia. de la UNT, Dep. de Biología del Desarrollo del INSIBIO La síntesis de ADNc fue comprobada mediante la amplificación con cebadores específicos para actina. Alineamiento global entre secuencias clonadas y sus homólogas dani.c.garcia@gmail.com, emroldanolarte@fbqf.unt.edu.ar Clon BAC RP11-801O14 de Homo sapiens (AC092546.4) 688 V01-2 Extremo 3´ de ADNc 592589 MARC 6BOV de Bos taurus (CB419712.1) 874 V01-3 Extremo 3´del gen codificante de proteína hipotética “IQ motif containing F4” de Bos taurus (LOC785925) 629 V01-1 Extremo 5´de ADNc NT2RP3 de Homo sapiens (DA735974) 783 V01-4 Secuencias homólogas (código de acceso) Longitud (nt) Fragmento de ADNc 12000 rpm 15 min 500 pb FIGURA 2: Electroforesis en gel de agarosa al 1,5 %, de productos de amplificación generados mediante RT-PCR en condiciones poco restrictivas con el cebador V01. 1: Marcador de peso molecular (MP), 2: fragmentos amplificados. Se observan cinco bandas correspondientes a fragmentos de amplificación. Amplificación al azar de fragmentos de genes expresados 500 pb FIGURA 3: Electroforesis en gel de agarosa de productos de amplificación obtenidos mediante PCR de un lisado de células provenientes de 4 colonias distintas empleando el cebador V01 a una temperatura de hibridación de 55ºC. Cada colonia posee un fragmento clonado de diferente talla. MPM: Marcador de peso molecular de 100 pb, Col.: colonias 1, 2, 3 y 4. MPM col.1 col.2 col.3 col.4 Clonado FIGURA 1: Electroforesis en gel de agarosa de productos de ADNc amplificados por PCR, con cebadores de β actina. 1: Marcador de peso molecular (MP), 2: Muestra 1, 3: Muestra 2. 1 2 3 500 pb β actina aprox 250 pb Aislamiento de ARN y síntesis de ADNc 94 C 55 C 35 C 1´ 30 ciclos 72 C 94 C 10 ciclos 1´ 30´ 1´ 10´ 1´ 30´´ 1´ 72 C 4 C 94 C 72 C V01-1 V01-2 V01-3 V01-4](https://image.slidesharecdn.com/augm-poster-1220199916635165-9/85/Augm-Poster-1-320.jpg)
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Este documento describe un estudio para identificar microalgas en aguas residuales tratadas mediante la técnica de PCR. Se estandarizó el método de extracción de ADN y amplificación de la región 23S del ADN ribosomal. Se identificaron tres tipos de microalgas mediante el análisis de secuencias nucleotídicas, incluyendo Monoraphidium sp., Mychonastes homosphera y Mychonastes jurissi.
Secuenciaciondegenomas.pdfSecsuenciacion
El documento describe los métodos de secuenciación de ADN como la secuenciación de Sanger y la pirosecuenciación. También cubre proyectos de secuenciación de genomas como el genoma de la planta Arabidopsis thaliana, que contiene alrededor de 25,500 genes codificantes de proteínas distribuidos en cinco cromosomas. Además, se analiza el genoma de la papa, que comprende 12 pseudocromosomas. El documento provee información sobre la estructura y contenido de los genomas de plantas, métodos para
Ingeniería genética
La ingeniería genética incluye técnicas como la tecnología del ADN recombinante, la secuenciación del ADN y la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), que permiten manipular y amplificar genes. Algunas aplicaciones son la producción de insulina y vacunas mediante microorganismos modificados, así como el desarrollo de plantas y animales transgénicos.
Clonación y células madres
Este documento trata sobre la clonación y las células madre. Explica que la clonación es la creación de una réplica genéticamente idéntica a través de procesos como la transferencia nuclear de células somáticas. También describe los diferentes tipos de clonación, incluida la clonación genética, reproductiva y terapéutica. Además, detalla los procesos de clonación celular y por transferencia nuclear, así como las aplicaciones de las células madre embrionarias.
Ud. 20. ingenieria genética
La biotecnología y la ingeniería genética se definen y explican. La ingeniería genética implica la manipulación del ADN de un organismo para lograr un objetivo práctico. Los organismos transgénicos tienen su genoma modificado con genes de otros organismos. Las herramientas clave incluyen enzimas de restricción, vectores de clonación y ADN ligasas. Algunas aplicaciones son la producción de fármacos, terapia génica, plantas y animales transgénicos.
B A S E S M O L E C U L A R E S D E L A I N G E N I E RÍ A G E NÉ T I C ...
El documento presenta información sobre la ingeniería genética y la biotecnología. Explica brevemente hitos históricos clave como la determinación de la estructura del ADN y el desarrollo de técnicas como la PCR y la secuenciación del ADN. También describe técnicas comunes de ingeniería genética como el uso de enzimas de restricción, vectores y marcadores genéticos.
Qpcr
El documento describe la técnica de PCR cuantitativa (qPCR), incluyendo sus fundamentos, materiales, etapas y aplicaciones. La qPCR permite cuantificar ADN además de detectarlo y amplificarlo mediante el uso de fluorocromos y un termociclador que mide la fluorescencia después de cada ciclo. Esta técnica se utiliza comúnmente para detección de patógenos, análisis genético y detección de mutaciones.
Analisis de pvh
Este documento resume diferentes métodos para el análisis molecular del virus del papiloma humano (VPH), incluyendo la detección del VPH mediante hibridación, reacción en cadena de la polimerasa (PCR), PCR en tiempo real utilizando sondas como SYBR Green y TaqMan, y caracterización de genotipos usando temperatura de fusión y restricción enzimática de fragmentos amplificados. También describe el uso de microarreglos de ADN para detectar múltiples tipos de VPH de forma simultánea.
Biologia molecular producto deteccion de alimentos transgenicos a travez de p...
Este documento resume varios estudios sobre la detección de alimentos transgénicos mediante la técnica de PCR. Los estudios analizaron muestras de alimentos comerciales en Costa Rica y encontraron la presencia de secuencias de ADN derivadas de maíz y soya genéticamente modificados. Los estudios utilizaron la PCR para amplificar secuencias como el promotor 35S y el terminador NOS, indicando la presencia de transgenes en algunas muestras de alimentos.
La tecnología del adn recombinante
La biotecnología implica la manipulación deliberada del ADN para fabricar o modificar productos. La tecnología del ADN recombinante permite aislar, copiar y secuenciar fragmentos de ADN. Esto incluye cortar el ADN con enzimas, unir los fragmentos, amplificar copias mediante PCR, e identificar genes específicos a través de hibridación con sondas.
Tema 2 8_tecnicas_adn_recombinante
La ingeniería genética permite manipular los organismos a nivel genético. Incluye técnicas como el aislamiento de genes, corte y unión de ADN, construcción de ADN recombinante, y clonación de genes en vectores. Esto permite transferir genes entre organismos y modificar sus características hereditarias de forma dirigida. Se usa para propósitos como la producción de medicamentos, enzimas y cultivos resistentes a plagas.
Del DNA a la ingeniería genética
La ingeniería genética permite manipular el genoma de un ser vivo para obtener productos útiles como alimentos, bebidas y medicamentos. Algunas técnicas clave incluyen la clonación de ADN, la reacción en cadena de la polimerasa, y la secuenciación de ADN. La ingeniería genética se aplica en agricultura, ganadería, medicina y el medio ambiente.
Ingeniería genética y Biotecnología 2º Bachillerato
La biotecnología y la ingeniería genética implican la manipulación de organismos vivos a nivel molecular. La ingeniería genética consiste en la manipulación del ADN de un organismo para transferir genes entre organismos diferentes. Esto se logra mediante el uso de enzimas de restricción para cortar el ADN, vectores para introducir el ADN recombinante en células huésped, y ADN ligasas para unir los fragmentos de ADN. Las aplicaciones incluyen la producción de fármacos, terapia génica, plantas
Extraccion de adn nuclear a partir de tejido de pie y manto de cittarium pica...
El objetivo del análisis fue extraer ADN de tejidos de Cittarium pica usando cloruro de sodio y verificar la calidad mediante electroforesis en gel de agarosa al 0.8%. Se tomaron muestras de tejido del pie y manto, se extrajo el ADN siguiendo el protocolo de sal común, y se analizó la calidad en electroforesis. Solo la muestra de manto M1 mostró suficiente ADN para correr en el gel, concluyéndose que se requirió mayor tiempo de incubación después de añadir NaCl
Capitulo 16
El documento describe la terapia génica para tratar la hipercolesterolemia familiar mediante la inserción de un gen normal para el receptor de LDL en las células del hígado de una paciente. Esto redujo sus niveles de LDL en un 20%, aunque los niveles de colesterol permanecieron altos y se desconoce si prolongará su vida. También explica los procesos de ingeniería genética como el aislamiento, modificación e inserción de genes en organismos usando ADN recombinante.
PDV: Biologia mencion Guía N°34 [4° Medio] (2012)
Este documento describe técnicas de biología molecular como la PCR, el uso de enzimas de restricción, electroforesis en gel y clonación molecular. Explica cómo estas técnicas permiten aislar, amplificar, cortar y recombinar fragmentos de ADN de diferentes orígenes para estudiar y modificar genes.
Biologia
Este documento proporciona información sobre biología molecular y sus aplicaciones en microbiología. Explica las diferencias entre ADN y ARN, los tipos de ARN, y el dogma central de la biología molecular. También describe técnicas como restricción de ADN, PCR, secuenciación, hibridación con sondas y biochips/microarrays, y sus usos en el diagnóstico de enfermedades genéticas e infecciosas.
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Ingeniería genética y Biotecnología 2º Bachillerato
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