Universidad de La Habana
Facultad: “Comandante Manuel Fajardo”
Asignatura: Microbiología y Parasitología médicas
Año: 2do Semestre: 4to
Clase práctica No. 2
Tema II Parasitología Médica
Título: Métodos de laboratorio en Parasitología.
Método de enseñanza: Explicativo - expositivo y métodos
propios de la enseñanza práctica
Duración: 90 minutos
Objetivos:
1. Orientar la toma de muestras relacionada con las
afecciones parasitarias intestinales.
3. Observar las características macroscópicas de adultos de
helmintos.
4. Observar y describir características generales de quistes y
trofozoitos de protozoos y de huevos y larvas de helmintos.
TOMA DE MUESTRA
Principios a manejar por el médico de asistencia para
una buena toma de muestra
La muestra de heces debe ser emitida espontáneamente.
La muestra debe recogerse en un recipiente bien limpio.
Impedir contaminación con orina u otros fluidos biológicos.
Correcta identificación del frasco.
Envío rápido para el laboratorio.
La muestra es inadecuada en las siguientes condiciones:
 Cuando ha estado por más de un día a temperatura
ambiente.
 Cuando se realiza un estudio radiológico contrastado del
tubo digestivo con Bario.
 Cuando se ha ingerido por fines terapéuticos sustancias
tales como laxantes grasos o bismuto.
Uso de laxantes
Sólo se indican en caso de estreñimiento.
Su uso no debe ser una práctica habitual.
Si se usa, deben ser siempre un laxante salino o de otro
tipo, pero nunca un laxante aceitoso.
Número de Muestras
Indicación de exámenes seriados (al menos 3) en
diferentes días para su búsqueda.
En algunas parasitosis (Ej. strongyloidiosis) es necesario
indicar exámenes más apropiados para su búsqueda
(método del embudo de Baermann).).
Conservación y transportación de las muestras de
heces.
Las muestras de heces deben ser transportadas
inmediatamente al laboratorio después de recogidas.
Si van a estar más de dos horas, se tienen que conservar
en refrigeración a 4ºC.
Más de un día, deben usarse preservantes. como la
formalina al 5 o al 10%.
DIAGNÓSTICO DEL PARASITISMO
INTESTINAL
Métodos de diagnóstico
Métodos directos
Se sustentan en la
observación de las
formas parasitarias.
Métodos indirectos
Se basan en la determinación
de la respuesta inmune del
organismo ante la infección
parasitaria a través de
pruebas inmunoserológicas
Métodos de concentración:
- Aumentan la sensibilidad del diagnóstico.
Macroscópico:
Permite a simple vista
observar la presencia de
parásitos adultos, flema
y/o sangre.
Examen directo
Microscópico:
Permite visualizar la
presencia de parásitos
por medio del
microscopio.
Importancia del examen macroscópico para el médico
Permite identificar a simple vista la especie parasitaria
que el paciente o su acompañante trae a la consulta.
Pudiera ser un helminto, el que puede llegar conservado
en algún medio como alcohol casero.
En estos casos se prefiere pasar el parásito para una
solución de formaldehído al 5 %.
Examen de las heces para el diagnóstico.
Adultos
Cintura vulvar
Cestodos Nematodos
Características
Examen directo microscópico de la muestra:
Examen directo con eosina y lugol
Procedimiento
Colocar en la lámina portaobjetos una gota de reactivo de Lugol
parasitológico.
Tomar con un aplicador una pequeña porción de heces y mezclarla
con la gota de Lugol parasitológico en el portaobjetos
Colocar encima una lámina portaobjetos
Lugol
Heces
Portaobjeto
Cubreobjeto
Llevar la lámina al microscopio óptico y enfocar con el
objetivo de 10x.
Al lograr una imagen nítida, pasar al objetivo de 40 x
Observar detenidamente las características de los
huevos, larvas, quistes, ooquistes y/o trofozoitos
Quistes tetranucleados
Muestra 1
Muestra 1
Núcleos
Este parásito se localiza en el intestino grueso
Eritrocitos
fagocitados
Trofozoito
Núcleo
Complejo
E. histolytica/E. dispar
Eritrocitos
fagocitados
Muestra 2
Trofozoito Quiste tetranucleado
Protozoo flagelado, localizado en el intestino delgado
Trofozoito
Protozoo flagelado, localizado en el intestino delgado
Trofozoito
Protozoo ameboideo, localizado en el intestino grueso
Trofozoito
Protozoo ciliado, localizado en el intestino grueso
Métodos de concentración:
- Método de concentración de Willis y Malloy: de flotación
- Método de Ritchie: de sedimentación por centrifugación.
- Copa Cónica: está basado en la sedimentación y es el más
utilizado para el diagnóstico de F. hepatica dado el gran tamaño y
peso de estos huevos.
- Método de Faust: es una técnica basada en la flotación que
emplea sulfato de zinc.
- Método de Sheather: es un método común basado en la
flotación que emplea una solución sobresaturada de azúcar, sal y
formol.
Método de Willis
Huevoss
Huevos
Copa Cónica
Se basa en la sedimentación y es el más utilizado para
el diagnóstico de Fasciola dado el gran tamaño y peso
de estos huevos.
Huevo
Opércul
o
Adulto de forma foliácea
(trematodo), localizado en
los conductos biliares, que
produce huevos grandes y
operculados
Otros métodos
Método de Graham o de la cinta adhesiva
Método especial para la identificación de huevos de
Enterobius vermicularis, (también puede ser útil en el
diagnóstico de Taenia sp).
Se aplica un fragmento de cinta adhesiva transparente en
la zona perianal del paciente, se retira y luego se coloca
sobre una lámina portaobjeto para observar al
microscopio los huevos característicos.
Huevo
Huevo
Hembras en región
perianal poniendo
los huevos
Huevos
transparentes
en forme de
letra D
Adulto pequeño,
suele llamársele
parásito alfiler
Método de la tinta china:
Permite la diferenciación de las especies de Taenia a
través del conteo de las ramas uterinas de los
proglótides.
Proglótide, observe las
ramas uterinas (más de 15
ramas)
Imagen del
adulto completo
T. saginata T. solium
Taenia spp.
Método de Harada-Mori:
Es una técnica empleada para el cultivo de larvas de
nemátodos de interés clínico.
Es un método útil para la diferenciación de
ancylostomídeos cuyos huevos son idénticos.
Método de Baermann
Para el diagnóstico y
seguimiento de las
infecciones por
Strongyloides stercoralis.
Helmintos encontrados después de
una práctica quirúrgica
Helminto localizado en el intestino delgado
Huevo con
bordes
mamelonados
Hembra
Cintura
vulvar
Hembra
Macho
Nematodo intestinal más
grande, localizado en el
intestino delgado
Helmintos encontrados durante un
proceder endoscópico
Helminto localizado en el intestino delgado
Necator americanus
Adulto
Helmintos encontrados durante un
proceder endoscópico
Helmintos localizado en el intestino grueso
Hembra Macho
Huevo
Nemátodo localizado en intestino
grueso
Hembra con la parte posterior en
forma de látigo
Macho con forma de cuerda de reloj.
Huevos con forma limón francés, con dos tapones mucosos en los
extremos

Clase práctica .ppt

  • 1.
    Universidad de LaHabana Facultad: “Comandante Manuel Fajardo” Asignatura: Microbiología y Parasitología médicas Año: 2do Semestre: 4to Clase práctica No. 2 Tema II Parasitología Médica Título: Métodos de laboratorio en Parasitología. Método de enseñanza: Explicativo - expositivo y métodos propios de la enseñanza práctica Duración: 90 minutos
  • 2.
    Objetivos: 1. Orientar latoma de muestras relacionada con las afecciones parasitarias intestinales. 3. Observar las características macroscópicas de adultos de helmintos. 4. Observar y describir características generales de quistes y trofozoitos de protozoos y de huevos y larvas de helmintos.
  • 3.
  • 4.
    Principios a manejarpor el médico de asistencia para una buena toma de muestra La muestra de heces debe ser emitida espontáneamente. La muestra debe recogerse en un recipiente bien limpio. Impedir contaminación con orina u otros fluidos biológicos. Correcta identificación del frasco. Envío rápido para el laboratorio.
  • 5.
    La muestra esinadecuada en las siguientes condiciones:  Cuando ha estado por más de un día a temperatura ambiente.  Cuando se realiza un estudio radiológico contrastado del tubo digestivo con Bario.  Cuando se ha ingerido por fines terapéuticos sustancias tales como laxantes grasos o bismuto.
  • 6.
    Uso de laxantes Sólose indican en caso de estreñimiento. Su uso no debe ser una práctica habitual. Si se usa, deben ser siempre un laxante salino o de otro tipo, pero nunca un laxante aceitoso.
  • 7.
    Número de Muestras Indicaciónde exámenes seriados (al menos 3) en diferentes días para su búsqueda. En algunas parasitosis (Ej. strongyloidiosis) es necesario indicar exámenes más apropiados para su búsqueda (método del embudo de Baermann).).
  • 8.
    Conservación y transportaciónde las muestras de heces. Las muestras de heces deben ser transportadas inmediatamente al laboratorio después de recogidas. Si van a estar más de dos horas, se tienen que conservar en refrigeración a 4ºC. Más de un día, deben usarse preservantes. como la formalina al 5 o al 10%.
  • 9.
  • 10.
    Métodos de diagnóstico Métodosdirectos Se sustentan en la observación de las formas parasitarias. Métodos indirectos Se basan en la determinación de la respuesta inmune del organismo ante la infección parasitaria a través de pruebas inmunoserológicas Métodos de concentración: - Aumentan la sensibilidad del diagnóstico.
  • 11.
    Macroscópico: Permite a simplevista observar la presencia de parásitos adultos, flema y/o sangre. Examen directo Microscópico: Permite visualizar la presencia de parásitos por medio del microscopio.
  • 12.
    Importancia del examenmacroscópico para el médico Permite identificar a simple vista la especie parasitaria que el paciente o su acompañante trae a la consulta. Pudiera ser un helminto, el que puede llegar conservado en algún medio como alcohol casero. En estos casos se prefiere pasar el parásito para una solución de formaldehído al 5 %. Examen de las heces para el diagnóstico.
  • 14.
  • 16.
  • 17.
    Examen directo microscópicode la muestra: Examen directo con eosina y lugol
  • 18.
    Procedimiento Colocar en lalámina portaobjetos una gota de reactivo de Lugol parasitológico. Tomar con un aplicador una pequeña porción de heces y mezclarla con la gota de Lugol parasitológico en el portaobjetos Colocar encima una lámina portaobjetos Lugol Heces Portaobjeto Cubreobjeto
  • 19.
    Llevar la láminaal microscopio óptico y enfocar con el objetivo de 10x. Al lograr una imagen nítida, pasar al objetivo de 40 x Observar detenidamente las características de los huevos, larvas, quistes, ooquistes y/o trofozoitos
  • 20.
    Quistes tetranucleados Muestra 1 Muestra1 Núcleos Este parásito se localiza en el intestino grueso
  • 21.
  • 22.
  • 23.
    Muestra 2 Trofozoito Quistetetranucleado Protozoo flagelado, localizado en el intestino delgado
  • 24.
  • 25.
  • 26.
  • 27.
    Métodos de concentración: -Método de concentración de Willis y Malloy: de flotación - Método de Ritchie: de sedimentación por centrifugación. - Copa Cónica: está basado en la sedimentación y es el más utilizado para el diagnóstico de F. hepatica dado el gran tamaño y peso de estos huevos. - Método de Faust: es una técnica basada en la flotación que emplea sulfato de zinc. - Método de Sheather: es un método común basado en la flotación que emplea una solución sobresaturada de azúcar, sal y formol.
  • 28.
  • 29.
  • 30.
  • 32.
    Copa Cónica Se basaen la sedimentación y es el más utilizado para el diagnóstico de Fasciola dado el gran tamaño y peso de estos huevos.
  • 33.
    Huevo Opércul o Adulto de formafoliácea (trematodo), localizado en los conductos biliares, que produce huevos grandes y operculados
  • 34.
  • 35.
    Método de Grahamo de la cinta adhesiva Método especial para la identificación de huevos de Enterobius vermicularis, (también puede ser útil en el diagnóstico de Taenia sp). Se aplica un fragmento de cinta adhesiva transparente en la zona perianal del paciente, se retira y luego se coloca sobre una lámina portaobjeto para observar al microscopio los huevos característicos.
  • 37.
    Huevo Huevo Hembras en región perianalponiendo los huevos Huevos transparentes en forme de letra D Adulto pequeño, suele llamársele parásito alfiler
  • 38.
    Método de latinta china: Permite la diferenciación de las especies de Taenia a través del conteo de las ramas uterinas de los proglótides. Proglótide, observe las ramas uterinas (más de 15 ramas) Imagen del adulto completo
  • 39.
    T. saginata T.solium Taenia spp.
  • 40.
    Método de Harada-Mori: Esuna técnica empleada para el cultivo de larvas de nemátodos de interés clínico. Es un método útil para la diferenciación de ancylostomídeos cuyos huevos son idénticos.
  • 41.
    Método de Baermann Parael diagnóstico y seguimiento de las infecciones por Strongyloides stercoralis.
  • 42.
    Helmintos encontrados despuésde una práctica quirúrgica Helminto localizado en el intestino delgado
  • 43.
  • 44.
    Helmintos encontrados duranteun proceder endoscópico Helminto localizado en el intestino delgado
  • 45.
  • 46.
    Helmintos encontrados duranteun proceder endoscópico Helmintos localizado en el intestino grueso
  • 47.
    Hembra Macho Huevo Nemátodo localizadoen intestino grueso Hembra con la parte posterior en forma de látigo Macho con forma de cuerda de reloj. Huevos con forma limón francés, con dos tapones mucosos en los extremos