Este documento describe tres líneas celulares de mamíferos utilizadas comúnmente para la producción de proteínas: células CHO (ovario de hámster chino), células BHK (riñón de hámster bebé) y células COS (riñón de mono verde). Estas líneas celulares se utilizan para ensayos funcionales in vivo, estudios de interacción entre proteínas y generación de anticuerpos. Si bien son útiles para producir proteínas con plegamiento y modificaciones post-traduccionales

1. Células de Mamíferos
( CHO, BHK, COS)

2. Aplicaciones
Ensayos funcionales in vivo
Interaccion entre proteinas
Generacion de anticuerpos
Líneas celulares
CHO ( ovario de hamster chino)
COS (
BHK ( riñón de hamster bebe)

3. • En domesticación desarrollaron
enfermedades
degenerativas, debido a su
estrecho parentesco entre si.
• Bajo número de cromosomas
(2n=22)
• Dr. Theodore T. Puck ( aisló ovario
y estableció una nueva línea
celular)
CHO ( chinese hamster ovary)

5. Vectores utilizados
• Vectores de DNA viral.
• Plásmidos con
secuencias de DNA viral.
Entre los DNA virales
escogidos:SV40
, adenovirus, papilomavir
us.

6. VECTOR VIRAL

7. Estrategia para el desarrollo línea de células
CHO

8. Estrategia para el desarrollo línea de células
CHO

9. COS ( green monkey kidney)
• Las células COS son células de simio derivada de la
línea celular CV-1 de la que manifiesta en cultivo
permanentemente, transformadas en proteínas SV40
defectivo en el origen de replicación.
• Estas proteínas de SV40 promueve la replicación
reiterada del vector.
• Las células COS transfectada mueren al cabo de 3-4
días posiblemente por una sobrecarga de DNA vector
epidemico que resulta toxico.

10. • Son monocapas de fibroblastos de riñón de hámster .
• La línea original se derivó de los riñones de cinco hámster
de sexo no determinado, en 1961.
• Características beneficiosas: rápido crecimiento, pases
limitados y alta eficiencia.
• Es susceptibles a los virus de la rabia, herpes
simple, rubeola, estomatitis vesicular, fiebre aftosa.
BHK ( baby hamster kidney)

11. Ventajas
• Generar proteínas con un plegado correcto y
con modificaciones post traduccionales (MPT)
idénticas a las proteínas endógenas.
• Este sistema es también perfectamente
adecuado para la producción de
anticuerpos, proteínas para su uso como
estándar en el ELISA o la espectrometría de
masas.

12. Desventajas
• Rendimiento de producción más bajo que otros sistemas
eucariotas, una tasa de crecimiento lento y un coste más
alto, debido a la necesidad de medios de cultivo complejos.
• Aun cuando la capacidad de la células CHO para expresar
glicoproteínas es alta, estas células carecen de enzimas que
permiten la glicosilación terminal de proteínas humanas.
• Esta líneas celulares ( tumorales ) pueden contener
retrovirus.
• Son vulnerables a la contaminación viral, proveniente del
medio suero fetal bovino. Actualmente algunos no
contienen el suero fetal.

13. Gracias