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La histología de la inserción tendinosa
Dr. José Peña Amaro
Departamento de Ciencias Morfológicas. Área de Histología
Facultad de Medicina. Universidad de Córdoba. CÓRDOBA
Clásicamente el tendón viene definido como tejido conjuntivo denso
modelado, caracterizado por tener células y fibras conjuntivas ordenadas en
haces paralelos y muy juntas al objeto de proveer la máxima resistencia. A
pesar de tratarse de estructuras duras e inextensibles, los tendones son
flexibles.
En general se presentan como bandas o cordones conjuntivos que unen
el músculo al hueso. Su relación con ambos se establece en dos regiones
especializadas−la unión miotendinosa y la unión osteotendinosa − que
concentran la mayoría de las lesiones deportivas.
Histología del tendón
Desde el punto de vista histológico el tendón es la forma más densa de
tejido colagenoso con abundantes fibras de colágena (colágena tipo I) y muy
escasos prorteoglicanos y fibras elásticas.
Las fibras de colágena están constituidas por fibrillas de colágena de
diámetro variable (60 nm-170nm), encontrándose fuertemente empaquetadas
longitudinalmente ya que su orientación se corresponde con la dirección de
tracción (figs 1 y 2). Aunque en muy baja proporción (1-2%) también se
presentan fibras elásticas.
Las células tendinosas, tenocitos o tendinocitos son fibroblastos de
morfología aplanada con prolongaciones delgadas “a modo de alas”; esta
morfología se debe al hecho de encontrarse comprimidas entre las fibras de
2
colágena. Así, en los preparados histológicos de rutina, no se observan las
extensiones citoplasmáticas quedando confundidas en la colágena y
distinguiéndose únicamente los núcleos aplanados y basófilos de los tenocitos
dispuestos en hileras (fig. 1).
Fig. 1. Sección longitudinal de un tendón; los núcleos aplanados corresponden
a los tenocitos dispuestos entre los haces de fibras de colágena. Hematoxilina-
eosina..
Fig. 2.. Haz de fibrillas de colágena. TEM.
Presenta dos tipos de revestimientos: el peritendón interno y el externo.
El peritendón externo, también denomina epitendón, rodea externamente al
tendón, continuándose directamente con el epimisio. El peritendón interno o
endotendón es un tejido conjuntivo laxo que subdivide en fascículos al tendón
como consecuencia de la proyección hacia el interior de extensiones del
epitendón.
Vainas tendinosas
En determinados sitios en los que los tendones sufren rozamiento contra
el hueso u otras superficies, estos se encuentran envueltos por vainas. Se trata
de un revestimiento consistente en una cubierta de dos capas: una externa de
21
3
tejido conectivo que se une a la estructuras adyacentes y otra interna
íntimamente unida al tendón; se establece así un espacio ocupado por un
líquido similar al liquido sinovial, que se encarga de lubrificar el movimiento del
tendón dentro de la vaina. La cubierta celular de revestimiento interno de las
vainas es similar a la de la membrana sinovial articular, por lo que a la vaina
tendinosa también se le denomina vaina sinovial.
Vascularización e inervación del tendón
Mientras que en el desarrollo embriológico, los tendones son más
celulares, el riego sanguíneo es más abundante para favorecer la síntesis y
secreción de colágena. Una vez formados los tendones, la baja densidad
celular del tendón, junto a sus bajos requerimientos de oxígeno y nutrientes,
determinan su limitada vascularización. Esto ocasiona que tras un traumatismo,
los tendones cicatricen con gran lentitud. Los pequeños vasos y nervios del
tendón se encuentran contenidos en el endotendón.
Los llamados órganos, corpúsculos o husos neurotendinosos o
tendinosos de Golgi, son receptores propioceptivos que responden frente a las
variaciones de tensión ejercidas por los músculos sobre los tendones.
Son estructuras cilíndrica encapsuladas de un tamaño similar a los
husos neuromusculares (1mm de largo y 0.1 mm de diámetro), que se
encuentran ubicados en la vecindad de la unión miotendinosa. Se encargan de
captar la información relativa a la diferencia de tensión transmitiéndola hacia el
sistema nervioso central, donde es procesada para la coordinación de la
intensidad de las contracciones musculares. De esta manera proporcionan una
retroalimentación inhibidora a la neurona motora α del músculo, lo que tiene
como resultado la relajación del tendón del músculo en contracción.
Están formados por un pequeño fascículo de fibras de colágena
onduladas del tendón encerradas en una cápsula de colágena revestida por
varias capas de células aplanadas que se continua con las células
perineurales que recubren a la fibras nerviosas aferentes; el nervio sensitivo
4
mielínico al atravesar la cápsula pierde la mielina dando lugar a ramificaciones
nerviosas amielínicas dispuestas entre las fibras de colágeno. En el músculo
relajado se abren los espacios situados entre las fibras de colágena del tendón,
reduciendo la presión sobre los terminales nerviosos; cuando el músculo se
contrae los haces de de colágeno se juntan comprimiendo las terminaciones
nerviosas.
Histología de la unión miotendinosa (UM)
Las uniones miotendinosas son regiones especializadas donde las fibras
musculares se unen a las fibras de colágena del tendón (figs. 3 y 4) , en las que
las fuerzas son transmitidas entre las miofibrillas y la matriz extracelular. La
zona de transición que abarca la UM cubre una longitud de 100 a 200 µm.
Evidentemente se trata de una zona especializada de la fibra muscular que
requiere de una estabilidad estructural extrema, lo que determina sus
características microscópicas.
Fig 3. Corte semifino de una región miotendinosa en la que se aprecian varias
fibras musculares en sección longitudinal, teñidas de azul, mientras que el
tendón muestra tinción pálida; las zonas de contacto muestran un patrón de
interdigitación. Azul de toluidina.
3 4
5
Fig. 4.En el centro, una fibra muscular cortada transversalmente a nivel de la
zona de unión miotendinosa. Es normal que la fibra muscular presente
hendiduras y núcleos internalizados. Hematoxilina-eosina.
En microscopía óptica resulta prácticamente imposible apreciar los
rasgos estructurales de la UM; si es posible, en cambio hacerlo en microscopía
electrónica en secciones longitudinales. Ultraestructuralmente el extremo de la
fibra muscular muestra evaginaciones e invaginaciones digitiformes de la
membrana plasmática a las que se adapta la lámina basal configurando un
aspecto irregular en “dientes de sierra” (fig. 5 ). En la cara interna de la
membrana plasmática de la fibra muscular se observan las placas de adhesión
(material de línea Z) es las que se insertan los filamentos de actina de la
primera sarcómera de las miofibrillas; en esta conexión entre citoesqueleto y
matriz extracelular las integrinas desempeñan un papel fundamental junto con
otras proteinas como vinculina, talina, tenascina C. El sarcoplasma de las
fibras musculares en esta región contiene numerosos ribosomas y polisomas.
5
6
Fig. 5. Invaginaciones profundas a nivel del extremo final de la fibra
muscular, entre las cuales se introducen las fibrillas de colágena. En las
proyecciones digitiformes de la superficie de fibras se pueden ver la mayor
electrodensidad de las placas de adhesión (flechas). MET.
En la región de UM es normal encontrar variabilidad en el tamaño de las
fibras musculares además de fibras musculares con núcleos internalizados y
fisuras internas consecuencia de las proyecciones digitiformes de la fibra hacia
el tendón (fig.4); también se han descrito en las fibras musculares de esta
región duplicación de líneas Z, formación de leptómeras, cuerpos nemalínicos y
granos de lipofucsina . Estos rasgos histológicos, que en esta región son
normales, pueden ser malinterpretados comos cambios patológicos. Por esta
razón, entre otras, las biopsias musculares deben ser siempre obtenidas del
vientre muscular, evitando biopsiar las regiones miotendinosas; esto explica,
además, que no existan datos publicados sobre reacciones patológicas a nivel
de la UM.
En las UMs las miofibrillas de las fibras musculares se añaden o
suprimen en respuesta a cambios en la longitud durante el crecimiento
muscular o de variaciones o modificaciones en su utilización. Por otro lado, la
tenotomía, un fenómeno común que puede resultar de traumatismos, procesos
degenerativos o manipulación quirúrgica, ocasiona cambios importantes en el
músculo esquelético como atrofia y lesiones core-targetoides, cambios estos
que parecen ser expresión de un proceso de remodelación del tejido muscular
esquelético.
7
Fig. 6. Músculo tenotomizado en el que se observan fibras atróficas que
alterna con otras en la son evidentes lesiones tipo core (flechas). Antidesmina.
Fig. 7. Músculo tenotomizado mostrando variabilidad en el tamaño de las
fibras musculares junto con alteraciones tintoriales indicativas de cambios
citoarquitecturales. NADH-tr.
Histología de la unión osteotendinosa
Los lugares de inserción de los tendones y ligamentos al hueso, uniones
osteotendinoss y osteoligamentosas respectivamente, son conocidas como
entesis. Desde un punto de vista histológico Benjamín et al (2006) distinguen
dos categorías: entesis fibrosa y entesis fibrocartilaginosa en función al tipo de
tejido que se presenta en la zona de unión.
Las fibras de colágena del tendón se irradian hacia el interior de hueso
(fig. 8), fusionándose por un lado con las fibras de colágena del periostio y, de
otro, mediante fibras de colágena más gruesas y robustas, denominadas fibras
de Sharpey, que se introducen en ángulo más profundamente en la corteza
6 7
8
ósea (fig. 9). En este territorio se observa cartílago fibroso que se mineraliza en
su proximidad al hueso; este hecho pone de manifiesto la potencialidad de las
células del periostio para transformarse en células condroprogenitoras y
osteoprogenitoras. La superficie ósea es rugosa en la zona de inserción del
tendón.
Fig. 8. Unión osteotendinosa (entesis) con evidencia de fibrocartílago.
Hematoxilina-eosina.
Fig. 9. Unión osteotendinosa sin evidencia de fibrocartílago; la flecha
indica una fibra de Sharpey introduciéndose profundamente en la inserción
ósea. Hematoxilina-eosina..
Regeneración e ingeniería tisular en tendón y sus inserciones
Larkin et al (2006) han desarrollado constructos 3D músculo-tendón que
muestran una interrelación estructural capaces de soportar fuerzas de tensión.
Con microscopía electrónica se ha podido comprobar que estas zonas de
interacción entre músculo y tendón obtenidas por ingeniería tisular se asemejan
ultraestructuralmente con las uniones miotendinosas durante el desarrollo fetal
(Kostrominova et al, 2009).
98
9
Por otro lado, es interesante señalar que en un estudio en el que se
empleó una población pura de mioblastos (C2C12) para la construcción de un
músculo bioartificial, se observaron uniones miotendinosas que fueron puestas
de manifiesto por microscopía electrónica e inmunohistouímica (detección de
paxilina, una proteina de adhesión focal en la región miotendinosa) (Rhim et al,
2007); para estos autores los mioblastos o los miotubos multinucleados
sintetizaron, presumiblemente, las fibrillas de colágeno I en esas incipientes
regiones de unión miotendinosa sin ayuda de fibroblastos.
10
Bibliografía
Benjamín M., Toumi H, Ralphs J.R., Vides G, Best T.M., Milz S. Where tendons
and ligaments meet bone: attachment sites (“entheses”) in relation to exercise
and/or mechanical load. Journal of Anatomy, 208: 471-490. 2006
Lieber R.L., Friden J. Functional and clinical significance of skeletal muscle
architecture. Muscle & Nerve, 23: 1647-1666. 2000
Luque E., Jimena I., Noguera F., Jiménez-Reina L. and Peña J. Effects of
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Myology, 12: 203-208 2002
Peña J., Luque E., Noguera F., Jimena I. and Vaamonde R. Experimental
induction of ring fibers in regenerating skeletal muscle. Pathology Research &
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Peña J., Luque E., Jimena I., Noguera F. and Vaamonde R. Abnormalities in
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Kostrominova TY, Calve S, Arruda EM, Larkin LM. Ultrastructure of
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11
Larkin LM, Calve S, Kostrominova TY, Arruda EM. Structure and functional
evaluation of tendon-skeletal muscle constructs engineered in vitro. Tissue
Engineering , 12: 3149-3158. 2006
Okahashi K, Sugimoto K, Iwai M, Oshima M, Samma M., Fujisawa Y, Takakura
Y. Regeneration of the hamstring tendons after haverting for arthroscoppic
anterior cruciate ligament reconstruction: a histological study in 11 patients.
Knee Surg Sports Traumatol Artrosc, 14: 542-545. 2006
Rhim C, Lowell DA, Reddy MC, Slentz DH, Zhang SJ, Kraus WE, Truskey GA.
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Histologia insercion tendinosa_xxjj_trauma

  • 1. 1 La histología de la inserción tendinosa Dr. José Peña Amaro Departamento de Ciencias Morfológicas. Área de Histología Facultad de Medicina. Universidad de Córdoba. CÓRDOBA Clásicamente el tendón viene definido como tejido conjuntivo denso modelado, caracterizado por tener células y fibras conjuntivas ordenadas en haces paralelos y muy juntas al objeto de proveer la máxima resistencia. A pesar de tratarse de estructuras duras e inextensibles, los tendones son flexibles. En general se presentan como bandas o cordones conjuntivos que unen el músculo al hueso. Su relación con ambos se establece en dos regiones especializadas−la unión miotendinosa y la unión osteotendinosa − que concentran la mayoría de las lesiones deportivas. Histología del tendón Desde el punto de vista histológico el tendón es la forma más densa de tejido colagenoso con abundantes fibras de colágena (colágena tipo I) y muy escasos prorteoglicanos y fibras elásticas. Las fibras de colágena están constituidas por fibrillas de colágena de diámetro variable (60 nm-170nm), encontrándose fuertemente empaquetadas longitudinalmente ya que su orientación se corresponde con la dirección de tracción (figs 1 y 2). Aunque en muy baja proporción (1-2%) también se presentan fibras elásticas. Las células tendinosas, tenocitos o tendinocitos son fibroblastos de morfología aplanada con prolongaciones delgadas “a modo de alas”; esta morfología se debe al hecho de encontrarse comprimidas entre las fibras de
  • 2. 2 colágena. Así, en los preparados histológicos de rutina, no se observan las extensiones citoplasmáticas quedando confundidas en la colágena y distinguiéndose únicamente los núcleos aplanados y basófilos de los tenocitos dispuestos en hileras (fig. 1). Fig. 1. Sección longitudinal de un tendón; los núcleos aplanados corresponden a los tenocitos dispuestos entre los haces de fibras de colágena. Hematoxilina- eosina.. Fig. 2.. Haz de fibrillas de colágena. TEM. Presenta dos tipos de revestimientos: el peritendón interno y el externo. El peritendón externo, también denomina epitendón, rodea externamente al tendón, continuándose directamente con el epimisio. El peritendón interno o endotendón es un tejido conjuntivo laxo que subdivide en fascículos al tendón como consecuencia de la proyección hacia el interior de extensiones del epitendón. Vainas tendinosas En determinados sitios en los que los tendones sufren rozamiento contra el hueso u otras superficies, estos se encuentran envueltos por vainas. Se trata de un revestimiento consistente en una cubierta de dos capas: una externa de 21
  • 3. 3 tejido conectivo que se une a la estructuras adyacentes y otra interna íntimamente unida al tendón; se establece así un espacio ocupado por un líquido similar al liquido sinovial, que se encarga de lubrificar el movimiento del tendón dentro de la vaina. La cubierta celular de revestimiento interno de las vainas es similar a la de la membrana sinovial articular, por lo que a la vaina tendinosa también se le denomina vaina sinovial. Vascularización e inervación del tendón Mientras que en el desarrollo embriológico, los tendones son más celulares, el riego sanguíneo es más abundante para favorecer la síntesis y secreción de colágena. Una vez formados los tendones, la baja densidad celular del tendón, junto a sus bajos requerimientos de oxígeno y nutrientes, determinan su limitada vascularización. Esto ocasiona que tras un traumatismo, los tendones cicatricen con gran lentitud. Los pequeños vasos y nervios del tendón se encuentran contenidos en el endotendón. Los llamados órganos, corpúsculos o husos neurotendinosos o tendinosos de Golgi, son receptores propioceptivos que responden frente a las variaciones de tensión ejercidas por los músculos sobre los tendones. Son estructuras cilíndrica encapsuladas de un tamaño similar a los husos neuromusculares (1mm de largo y 0.1 mm de diámetro), que se encuentran ubicados en la vecindad de la unión miotendinosa. Se encargan de captar la información relativa a la diferencia de tensión transmitiéndola hacia el sistema nervioso central, donde es procesada para la coordinación de la intensidad de las contracciones musculares. De esta manera proporcionan una retroalimentación inhibidora a la neurona motora α del músculo, lo que tiene como resultado la relajación del tendón del músculo en contracción. Están formados por un pequeño fascículo de fibras de colágena onduladas del tendón encerradas en una cápsula de colágena revestida por varias capas de células aplanadas que se continua con las células perineurales que recubren a la fibras nerviosas aferentes; el nervio sensitivo
  • 4. 4 mielínico al atravesar la cápsula pierde la mielina dando lugar a ramificaciones nerviosas amielínicas dispuestas entre las fibras de colágeno. En el músculo relajado se abren los espacios situados entre las fibras de colágena del tendón, reduciendo la presión sobre los terminales nerviosos; cuando el músculo se contrae los haces de de colágeno se juntan comprimiendo las terminaciones nerviosas. Histología de la unión miotendinosa (UM) Las uniones miotendinosas son regiones especializadas donde las fibras musculares se unen a las fibras de colágena del tendón (figs. 3 y 4) , en las que las fuerzas son transmitidas entre las miofibrillas y la matriz extracelular. La zona de transición que abarca la UM cubre una longitud de 100 a 200 µm. Evidentemente se trata de una zona especializada de la fibra muscular que requiere de una estabilidad estructural extrema, lo que determina sus características microscópicas. Fig 3. Corte semifino de una región miotendinosa en la que se aprecian varias fibras musculares en sección longitudinal, teñidas de azul, mientras que el tendón muestra tinción pálida; las zonas de contacto muestran un patrón de interdigitación. Azul de toluidina. 3 4
  • 5. 5 Fig. 4.En el centro, una fibra muscular cortada transversalmente a nivel de la zona de unión miotendinosa. Es normal que la fibra muscular presente hendiduras y núcleos internalizados. Hematoxilina-eosina. En microscopía óptica resulta prácticamente imposible apreciar los rasgos estructurales de la UM; si es posible, en cambio hacerlo en microscopía electrónica en secciones longitudinales. Ultraestructuralmente el extremo de la fibra muscular muestra evaginaciones e invaginaciones digitiformes de la membrana plasmática a las que se adapta la lámina basal configurando un aspecto irregular en “dientes de sierra” (fig. 5 ). En la cara interna de la membrana plasmática de la fibra muscular se observan las placas de adhesión (material de línea Z) es las que se insertan los filamentos de actina de la primera sarcómera de las miofibrillas; en esta conexión entre citoesqueleto y matriz extracelular las integrinas desempeñan un papel fundamental junto con otras proteinas como vinculina, talina, tenascina C. El sarcoplasma de las fibras musculares en esta región contiene numerosos ribosomas y polisomas. 5
  • 6. 6 Fig. 5. Invaginaciones profundas a nivel del extremo final de la fibra muscular, entre las cuales se introducen las fibrillas de colágena. En las proyecciones digitiformes de la superficie de fibras se pueden ver la mayor electrodensidad de las placas de adhesión (flechas). MET. En la región de UM es normal encontrar variabilidad en el tamaño de las fibras musculares además de fibras musculares con núcleos internalizados y fisuras internas consecuencia de las proyecciones digitiformes de la fibra hacia el tendón (fig.4); también se han descrito en las fibras musculares de esta región duplicación de líneas Z, formación de leptómeras, cuerpos nemalínicos y granos de lipofucsina . Estos rasgos histológicos, que en esta región son normales, pueden ser malinterpretados comos cambios patológicos. Por esta razón, entre otras, las biopsias musculares deben ser siempre obtenidas del vientre muscular, evitando biopsiar las regiones miotendinosas; esto explica, además, que no existan datos publicados sobre reacciones patológicas a nivel de la UM. En las UMs las miofibrillas de las fibras musculares se añaden o suprimen en respuesta a cambios en la longitud durante el crecimiento muscular o de variaciones o modificaciones en su utilización. Por otro lado, la tenotomía, un fenómeno común que puede resultar de traumatismos, procesos degenerativos o manipulación quirúrgica, ocasiona cambios importantes en el músculo esquelético como atrofia y lesiones core-targetoides, cambios estos que parecen ser expresión de un proceso de remodelación del tejido muscular esquelético.
  • 7. 7 Fig. 6. Músculo tenotomizado en el que se observan fibras atróficas que alterna con otras en la son evidentes lesiones tipo core (flechas). Antidesmina. Fig. 7. Músculo tenotomizado mostrando variabilidad en el tamaño de las fibras musculares junto con alteraciones tintoriales indicativas de cambios citoarquitecturales. NADH-tr. Histología de la unión osteotendinosa Los lugares de inserción de los tendones y ligamentos al hueso, uniones osteotendinoss y osteoligamentosas respectivamente, son conocidas como entesis. Desde un punto de vista histológico Benjamín et al (2006) distinguen dos categorías: entesis fibrosa y entesis fibrocartilaginosa en función al tipo de tejido que se presenta en la zona de unión. Las fibras de colágena del tendón se irradian hacia el interior de hueso (fig. 8), fusionándose por un lado con las fibras de colágena del periostio y, de otro, mediante fibras de colágena más gruesas y robustas, denominadas fibras de Sharpey, que se introducen en ángulo más profundamente en la corteza 6 7
  • 8. 8 ósea (fig. 9). En este territorio se observa cartílago fibroso que se mineraliza en su proximidad al hueso; este hecho pone de manifiesto la potencialidad de las células del periostio para transformarse en células condroprogenitoras y osteoprogenitoras. La superficie ósea es rugosa en la zona de inserción del tendón. Fig. 8. Unión osteotendinosa (entesis) con evidencia de fibrocartílago. Hematoxilina-eosina. Fig. 9. Unión osteotendinosa sin evidencia de fibrocartílago; la flecha indica una fibra de Sharpey introduciéndose profundamente en la inserción ósea. Hematoxilina-eosina.. Regeneración e ingeniería tisular en tendón y sus inserciones Larkin et al (2006) han desarrollado constructos 3D músculo-tendón que muestran una interrelación estructural capaces de soportar fuerzas de tensión. Con microscopía electrónica se ha podido comprobar que estas zonas de interacción entre músculo y tendón obtenidas por ingeniería tisular se asemejan ultraestructuralmente con las uniones miotendinosas durante el desarrollo fetal (Kostrominova et al, 2009). 98
  • 9. 9 Por otro lado, es interesante señalar que en un estudio en el que se empleó una población pura de mioblastos (C2C12) para la construcción de un músculo bioartificial, se observaron uniones miotendinosas que fueron puestas de manifiesto por microscopía electrónica e inmunohistouímica (detección de paxilina, una proteina de adhesión focal en la región miotendinosa) (Rhim et al, 2007); para estos autores los mioblastos o los miotubos multinucleados sintetizaron, presumiblemente, las fibrillas de colágeno I en esas incipientes regiones de unión miotendinosa sin ayuda de fibroblastos.
  • 10. 10 Bibliografía Benjamín M., Toumi H, Ralphs J.R., Vides G, Best T.M., Milz S. Where tendons and ligaments meet bone: attachment sites (“entheses”) in relation to exercise and/or mechanical load. Journal of Anatomy, 208: 471-490. 2006 Lieber R.L., Friden J. Functional and clinical significance of skeletal muscle architecture. Muscle & Nerve, 23: 1647-1666. 2000 Luque E., Jimena I., Noguera F., Jiménez-Reina L. and Peña J. Effects of tenotomy on regenerating anterior tibial muscles in rats. Basic & Applied Myology, 12: 203-208 2002 Peña J., Luque E., Noguera F., Jimena I. and Vaamonde R. Experimental induction of ring fibers in regenerating skeletal muscle. Pathology Research & Practice, 197: 21-27. 2001 Peña J., Luque E., Jimena I., Noguera F. and Vaamonde R. Abnormalities in tenectomized muscle fiber repair. European Journal of Anatomy, 11: 37-45. 2007 Richardson L.E., Dudhia J, Clegg P.D., Smith R. Stem cells in veterinary medicine attempts at regenerating equine tendon after injury. Trends in Biotechnology, 25: 409-416. 2007 Kostrominova TY, Calve S, Arruda EM, Larkin LM. Ultrastructure of myotendinous junctions in tendon-skeletal muscle constructs engineered in vitro. Histology & Histopathology, 24: 541-550. 2009
  • 11. 11 Larkin LM, Calve S, Kostrominova TY, Arruda EM. Structure and functional evaluation of tendon-skeletal muscle constructs engineered in vitro. Tissue Engineering , 12: 3149-3158. 2006 Okahashi K, Sugimoto K, Iwai M, Oshima M, Samma M., Fujisawa Y, Takakura Y. Regeneration of the hamstring tendons after haverting for arthroscoppic anterior cruciate ligament reconstruction: a histological study in 11 patients. Knee Surg Sports Traumatol Artrosc, 14: 542-545. 2006 Rhim C, Lowell DA, Reddy MC, Slentz DH, Zhang SJ, Kraus WE, Truskey GA. Morphology and ultrastructure of differentiating three-dimensional mammalian skeletal muscle in a collagen gel. Muscle & Nerve, 36: 71-80. 2007