Este documento presenta los criterios de la Asociación para el Estudio de la Biología de la Reproducción (ASEBIR) para la valoración morfológica de oocitos, embriones tempranos y blastocistos humanos. Describe los parámetros evaluados en cada etapa del desarrollo, desde el oocito hasta el blastocisto, e incluye imágenes para ilustrar dichos parámetros. También propone un esquema de gradación de la calidad embrionaria y ofrece recomendaciones generales para la evaluación morfológica.
Gestión de la calidad pretécnica en el laboratorio de reproducción humana asi...Asebir
Este documento describe los requisitos de la fase pretécnica del laboratorio de reproducción humana asistida (LRHA). Define la fase pretécnica como el conjunto de actividades que comienzan con la solicitud de análisis e incluyen la preparación del paciente, obtención de la muestra, identificación, transporte y entrega en el laboratorio. Además, explica la necesidad de definir requisitos claros para cada una de las actividades de las distintas fases que componen los procesos del LRHA, con el fin de garantizar la calidad
Este documento proporciona recomendaciones sobre los recursos humanos y físicos necesarios para un laboratorio de reproducción. Describe la necesidad de un sistema de gestión de calidad, cumplimiento de normas éticas e implementación de medidas de seguridad y prevención de riesgos laborales. Además, especifica los requisitos mínimos de personal cualificado, que incluye embriólogos, coordinadores y un director del laboratorio, así como las instalaciones y equipos necesarios para llevar a cabo diferentes técnicas como FIV e ICSI.
Modul perkembangbiakan makhluk hidup media pembelajaran (Halimatussa'Diyah 19...DiyahHalimatussa
Modul ini membahas tentang perkembangbiakan pada makhluk hidup meliputi manusia, tumbuhan, dan hewan. Pertumbuhan dan perkembangan manusia dijelaskan melalui tahapan bayi hingga dewasa beserta gambarnya. Perkembangbiakan tumbuhan secara generatif dan vegetatif digambarkan beserta contohnya. Perkembangbiakan hewan secara generatif dan vegetatif dijelaskan melalui ovipar, vivipar, ov
1002 control documentos internos v7.0 nov22jpl74275
Este documento establece el procedimiento para controlar los documentos internos del Sistema Integrado de Gestión de la Contraloría de Bogotá. Define los pasos para elaborar, revisar, aprobar, actualizar e identificar los manuales, procesos, procedimientos, formatos y otros documentos internos. Asigna responsabilidades a los líderes de los procesos y a la Dirección de Planeación. Establece pautas para identificar las versiones vigentes y obsoletas de los documentos y asegurar el uso de copias controladas.
ISO 22000 adalah standar internasional untuk sistem manajemen keamanan pangan yang menerapkan pendekatan manajemen risiko dan HACCP. Organisasi harus membangun sistem manajemen keamanan pangan sesuai standar ini, melakukan audit internal, dan mendapatkan sertifikasi dari lembaga sertifikasi untuk memastikan kepatuhan. Standar ini memberikan panduan implementasi sistem mulai dari pembentukan tim, analisis risiko, validasi, verifikasi, dan perbaikan berkelanj
Este documento presenta los criterios actualizados de ASEBIR para la clasificación morfológica de oocitos, embriones tempranos y blastocistos humanos. Se basa en encuestas a laboratorios, estudios de validación y controles de calidad externos para mejorar la clasificación previa de 2007. Incluye parámetros de evaluación detallados para cada estadio desde el oocito hasta el blastocisto, así como esquemas de gradación actualizados para facilitar la clasificación embrionaria.
7º indicadores de calidad del laboratorio de embriologíaAsebir
Este documento presenta la definición y especificaciones de calidad para los indicadores del laboratorio de embriología. Explica conceptos clave como calidad, gestión y garantía de la calidad e indicadores de calidad. Además, describe los componentes básicos de un sistema de garantía de calidad y los pasos para establecerlo. Finalmente, proporciona ejemplos de indicadores según el tipo de actividad en las áreas del laboratorio de reproducción asistida. El objetivo es establecer estándares para la correcta aplicación de la norma UNE 17
Gestión de la calidad pretécnica en el laboratorio de reproducción humana asi...Asebir
Este documento describe los requisitos de la fase pretécnica del laboratorio de reproducción humana asistida (LRHA). Define la fase pretécnica como el conjunto de actividades que comienzan con la solicitud de análisis e incluyen la preparación del paciente, obtención de la muestra, identificación, transporte y entrega en el laboratorio. Además, explica la necesidad de definir requisitos claros para cada una de las actividades de las distintas fases que componen los procesos del LRHA, con el fin de garantizar la calidad
Este documento proporciona recomendaciones sobre los recursos humanos y físicos necesarios para un laboratorio de reproducción. Describe la necesidad de un sistema de gestión de calidad, cumplimiento de normas éticas e implementación de medidas de seguridad y prevención de riesgos laborales. Además, especifica los requisitos mínimos de personal cualificado, que incluye embriólogos, coordinadores y un director del laboratorio, así como las instalaciones y equipos necesarios para llevar a cabo diferentes técnicas como FIV e ICSI.
Modul perkembangbiakan makhluk hidup media pembelajaran (Halimatussa'Diyah 19...DiyahHalimatussa
Modul ini membahas tentang perkembangbiakan pada makhluk hidup meliputi manusia, tumbuhan, dan hewan. Pertumbuhan dan perkembangan manusia dijelaskan melalui tahapan bayi hingga dewasa beserta gambarnya. Perkembangbiakan tumbuhan secara generatif dan vegetatif digambarkan beserta contohnya. Perkembangbiakan hewan secara generatif dan vegetatif dijelaskan melalui ovipar, vivipar, ov
1002 control documentos internos v7.0 nov22jpl74275
Este documento establece el procedimiento para controlar los documentos internos del Sistema Integrado de Gestión de la Contraloría de Bogotá. Define los pasos para elaborar, revisar, aprobar, actualizar e identificar los manuales, procesos, procedimientos, formatos y otros documentos internos. Asigna responsabilidades a los líderes de los procesos y a la Dirección de Planeación. Establece pautas para identificar las versiones vigentes y obsoletas de los documentos y asegurar el uso de copias controladas.
ISO 22000 adalah standar internasional untuk sistem manajemen keamanan pangan yang menerapkan pendekatan manajemen risiko dan HACCP. Organisasi harus membangun sistem manajemen keamanan pangan sesuai standar ini, melakukan audit internal, dan mendapatkan sertifikasi dari lembaga sertifikasi untuk memastikan kepatuhan. Standar ini memberikan panduan implementasi sistem mulai dari pembentukan tim, analisis risiko, validasi, verifikasi, dan perbaikan berkelanj
Este documento presenta los criterios actualizados de ASEBIR para la clasificación morfológica de oocitos, embriones tempranos y blastocistos humanos. Se basa en encuestas a laboratorios, estudios de validación y controles de calidad externos para mejorar la clasificación previa de 2007. Incluye parámetros de evaluación detallados para cada estadio desde el oocito hasta el blastocisto, así como esquemas de gradación actualizados para facilitar la clasificación embrionaria.
7º indicadores de calidad del laboratorio de embriologíaAsebir
Este documento presenta la definición y especificaciones de calidad para los indicadores del laboratorio de embriología. Explica conceptos clave como calidad, gestión y garantía de la calidad e indicadores de calidad. Además, describe los componentes básicos de un sistema de garantía de calidad y los pasos para establecerlo. Finalmente, proporciona ejemplos de indicadores según el tipo de actividad en las áreas del laboratorio de reproducción asistida. El objetivo es establecer estándares para la correcta aplicación de la norma UNE 17
La criopreservación de embriones es una técnica que permite preservar la fertilidad de una pareja mediante la congelación de embriones sobrantes de un tratamiento de fecundación in vitro. El documento analiza diversas cuestiones relacionadas con el uso y destino de embriones criopreservados en diferentes situaciones como la separación de la pareja, el fallecimiento de uno de los miembros o la existencia de embriones no utilizados. Se concluye que el transporte de embriones debe realizarse siempre a través de empresas especializadas
Este documento contiene las respuestas a varias consultas sobre aspectos legales relacionados con la reproducción asistida en España. La primera consulta pregunta sobre el tipo de seguro que exige la ley para cubrir una posible pérdida accidental de embriones criopreservados. La respuesta indica que la ley requiere un seguro o garantía financiera equivalente para compensar económicamente a las parejas en caso de pérdida, aunque actualmente es difícil encontrar compañías de seguros dispuestas a ofrecer esta cobertura debido a la falta de
Criterios de Valoración Morfológicos de Oocitos, Preembriones tempranos y B...Asebir
ASEBIR ha publicado en sus Cuadernos de Embriología Clínica los Criterios de Valoración Morfológicos de Oocitos, Preembriones tempranos y Blastocistos Humanos, buscando poder consensuar los criterios de calidad entre todas las clínicas de reproducción asistida españolas. Sin embargo, estos criterios no sólo deben ser útiles para los embriólogos clínicos, sino que pueden servir a los embriólogos pertenecientes a centros de investigación como ayuda para facilitar la derivación de líneas celulares embrionarias humanas así como para estudios moleculares y genéticos básicos de embriología humana. El objetivo de este trabajo es mostrar si los criterios publicados por ASEBIR son extrapolables a preembriones congelados donados a investigación con células madre, utilizando para ello los preembriones autorizados para un proyecto de investigación del Banco Andaluz de Células Madre.
Microsurgery plays an important role in treating male infertility. The document discusses microsurgical techniques for varicocelectomy, vasovasostomy, vasoepididymostomy, and sperm retrieval. Varicocelectomy by the subinguinal microsurgical approach has the lowest recurrence and postoperative hydrocele rates compared to other techniques. Microsurgical vasovasostomy can achieve patency rates of over 90% and pregnancy rates of over 50%. Prognostic factors for microsurgical reconstruction include the obstruction interval and presence of granuloma. Microsurgical epididymal sperm aspiration and testicular sperm aspiration are effective techniques for sperm retrieval in obstructive azoospermia.
This document summarizes the principles and practices of LH administration in assisted reproductive technology (ART). It discusses the role of LH in reproductive cycles, patient subgroups that may benefit from LH supplementation, and differences in LH supplementation using various gonadotropin preparations. Specifically, it finds that LH supplementation can benefit older patients, poor responders, and hypo-responders by restoring androgen production and improving follicular development, oocyte quality, and pregnancy rates.
The Istanbul Consensus Workshop on Embryo Assessment: Proceedings of an Exper...Sandro Esteves
O documento estabelece padrões para a classificação da morfologia de oócitos e embriões visando a comparação de resultados entre laboratórios de reprodução assistida. Ele define os pontos críticos de checagem de fertilização e clivagem e padroniza a terminologia para descrever a maturação oocitária e embrionária.
Este documento resume los principales cambios que traerá la nueva Directiva Europea sobre tejidos y células humanos, que entrará en vigor en abril de 2006. La directiva establece nuevos estándares de calidad y seguridad para la donación, obtención, procesamiento, almacenamiento y distribución de tejidos y células humanos. Afectará a todos los centros de reproducción asistida en la UE y regulará aspectos como la acreditación de los centros, los procedimientos para la obtención y manejo de las muestras
This document summarizes the program for a conference on embryology and clinical biology of reproduction. It includes sessions on andrology, embryology, quality, genetics, and debate. Topics discussed include new sperm selection techniques, non-invasive embryo assessment, embryo cataloging standards, genetic screening methods, and a discussion on the role of embryologists.
Este documento discute el traslado de embriones humanos criopreservados entre centros de reproducción asistida. Aunque los embriones forman parte del proyecto reproductivo de una mujer o pareja y pueden solicitar el cambio de centro, actualmente no existe un protocolo único consensuado para realizar este tipo de traslados. El documento analiza aspectos como la responsabilidad de los centros sobre la custodia de los embriones y la legislación española aplicable.
El documento resume la lucha de ASEBIR por el reconocimiento de la Embriología Clínica como una especialidad médica. A pesar del apoyo de diversas asociaciones y colegios profesionales, el Ministerio de Sanidad propuso inicialmente una especialidad conjunta con Genética, a lo que ASEBIR accedió. Sin embargo, el nuevo anteproyecto de real decreto no incluye esta especialidad combinada. ASEBIR continúa trabajando para lograr el reconocimiento de la Embriología Clínica.
5º recomendaciones para la aplicación del rd1301 2006Asebir
Documento elaborado por el grupo de trabajo conjunto de la Sociedad Española de Fertilidad (SEF) y la Asociación para el Estudio de la Biología de la Reproducción (ASEBIR) para el análisis del RD 1301/2006
Retículo endoplasmático, Funciones, Estructura y Patologías AsociadasDanilo Castillo
El documento presenta información sobre el retículo endoplasmático (RE). El RE es una subestructura celular que provee una gran superficie para reacciones químicas y síntesis de moléculas. El RE se clasifica en liso (REL) y rugoso (RER). El REL participa en síntesis de lípidos y detoxificación, mientras que el RER participa en síntesis de proteínas. Algunas patologías asociadas incluyen esteatosis hepática debido a alteraciones en el REL, y enfermedades neurodegenerativ
O documento descreve as principais etapas do desenvolvimento embrionário humano desde a fecundação até os seis meses de gestação, incluindo a divisão inicial do óvulo em duas células, a formação da mórula e do blastocisto, e a evolução gradual do embrião em feto com estruturas bem definidas.
Este documento presenta una tesis para obtener el grado de Maestro en Salud Pública en el área de Epidemiología. El objetivo es identificar factores y marcadores moleculares de riesgo para cáncer oral. La metodología incluye un diseño de caso-control para analizar factores de riesgo como tabaquismo, alcoholismo e higiene oral deficiente, así como marcadores moleculares como las metaloproteasas de matriz 2 y 9. Los resultados muestran asociaciones significativas entre algunos factores de riesgo y el c
Este manual proporciona recomendaciones para la toma de muestras destinadas a análisis microbiológico con el fin de establecer un diagnóstico etiológico de enfermedades infecciosas. Incluye información sobre aspectos generales como la solicitud de estudios, precauciones de bioseguridad, preparación de muestras y transporte. Además, detalla procedimientos específicos para la recolección de diversos tipos de muestras clínicas y ambientales.
Este manual proporciona recomendaciones para la toma de muestras para análisis microbiológico. Describe los aspectos generales como la solicitud de estudios, precauciones de bioseguridad, preparación de elementos y técnicas de recolección. Luego se enfoca en recomendaciones específicas para la toma de muestras clínicas y ambientales, incluyendo detalles sobre el equipo requerido y las técnicas para cada tipo de muestra. El objetivo es unificar criterios para garantizar la calidad de las mue
Determinacion de parametros_de_desempeño_del_metodo_analiticTatiana Hernández
Este documento presenta los resultados de la determinación de los parámetros de desempeño de un método analítico por espectrofotometría UV-Visible para la cuantificación de losartán potásico en tabletas de 50 mg. Se evaluaron siete parámetros incluyendo precisión, linealidad, exactitud, repetibilidad, estabilidad analítica de la muestra. Los resultados obtenidos estuvieron dentro de los criterios de aceptación, por lo que el método analítico se considera válido y confiable para cuantificar losartán potásico
Este documento describe el desarrollo de un aderezo a base de champiñones y especias secas y el estudio de su tratamiento térmico. El objetivo principal es desarrollar un producto inocuo, de buen sabor y asequible para los consumidores ecuatorianos. En primer lugar, se caracterizan las materias primas y se determinan los pretratamientos óptimos. Luego, se desarrollan diferentes formulaciones que son evaluadas sensorialmente para seleccionar la mejor. Finalmente, se realizan pruebas térmicas para
Este documento presenta un libro de texto sobre Química General dirigido a estudiantes de bachillerato. El libro contiene tres unidades principales que cubren los temas de la química y los cuerpos materiales, la estructura atómica y la tabla periódica, y las sustancias, sus enlaces, nomenclatura y aplicaciones. Además, incluye dos anexos con protocolos de seguridad para el laboratorio y sugerencias de actividades experimentales. El objetivo general es que los estudiantes aprendan los conceptos bás
Castro c, galli a. evaluacin educacional mdulo 3 2002Jor Castillo
Este documento presenta los objetivos y contenidos de un módulo sobre evaluación educacional en facultades de ciencias médicas. El módulo aborda la evaluación de las competencias adquiridas por los estudiantes, incluyendo qué y cómo evaluar a través de observación sistemática, listas de control y escalas evaluativas. También cubre la evaluación de la enseñanza a través del análisis de programas, cuerpo docente y fuentes de información como estudiantes y pares evaluadores. El objetivo general es capacitar en el diseño e
Este documento presenta un texto guía sobre biología para el examen de ingreso a la Facultad de Ciencias y Tecnología de la Universidad Mayor de San Simón. El texto contiene tres unidades principales: Unidad 1 sobre las bases y origen de la vida, Unidad 2 sobre seres vivos y biodiversidad, y Unidad 3 sobre ecología y medio ambiente. Cada unidad contiene varios temas con conceptos clave, glosarios y preguntas de repaso. El objetivo general del texto es proporcionar los conocimientos básicos necesarios sobre bi
2014 - Identificación y cuantificación del morfotipo Haliscomenobacter hydros...WALEBUBLÉ
Ferrer, M. (2014) Identificación y cuantificación del morfotipo Haliscomenobacter hydrossis formador de bulking mediante la técnica FISH y estudio de su relación con los parámetros operacionales y físico-químicos en EDAR de la Comunidad Valenciana. Trabajo final de Máster en Ingeniería Ambiental. Valencia: Universitat Politècnica de València.
www.abgc.es
La criopreservación de embriones es una técnica que permite preservar la fertilidad de una pareja mediante la congelación de embriones sobrantes de un tratamiento de fecundación in vitro. El documento analiza diversas cuestiones relacionadas con el uso y destino de embriones criopreservados en diferentes situaciones como la separación de la pareja, el fallecimiento de uno de los miembros o la existencia de embriones no utilizados. Se concluye que el transporte de embriones debe realizarse siempre a través de empresas especializadas
Este documento contiene las respuestas a varias consultas sobre aspectos legales relacionados con la reproducción asistida en España. La primera consulta pregunta sobre el tipo de seguro que exige la ley para cubrir una posible pérdida accidental de embriones criopreservados. La respuesta indica que la ley requiere un seguro o garantía financiera equivalente para compensar económicamente a las parejas en caso de pérdida, aunque actualmente es difícil encontrar compañías de seguros dispuestas a ofrecer esta cobertura debido a la falta de
Criterios de Valoración Morfológicos de Oocitos, Preembriones tempranos y B...Asebir
ASEBIR ha publicado en sus Cuadernos de Embriología Clínica los Criterios de Valoración Morfológicos de Oocitos, Preembriones tempranos y Blastocistos Humanos, buscando poder consensuar los criterios de calidad entre todas las clínicas de reproducción asistida españolas. Sin embargo, estos criterios no sólo deben ser útiles para los embriólogos clínicos, sino que pueden servir a los embriólogos pertenecientes a centros de investigación como ayuda para facilitar la derivación de líneas celulares embrionarias humanas así como para estudios moleculares y genéticos básicos de embriología humana. El objetivo de este trabajo es mostrar si los criterios publicados por ASEBIR son extrapolables a preembriones congelados donados a investigación con células madre, utilizando para ello los preembriones autorizados para un proyecto de investigación del Banco Andaluz de Células Madre.
Microsurgery plays an important role in treating male infertility. The document discusses microsurgical techniques for varicocelectomy, vasovasostomy, vasoepididymostomy, and sperm retrieval. Varicocelectomy by the subinguinal microsurgical approach has the lowest recurrence and postoperative hydrocele rates compared to other techniques. Microsurgical vasovasostomy can achieve patency rates of over 90% and pregnancy rates of over 50%. Prognostic factors for microsurgical reconstruction include the obstruction interval and presence of granuloma. Microsurgical epididymal sperm aspiration and testicular sperm aspiration are effective techniques for sperm retrieval in obstructive azoospermia.
This document summarizes the principles and practices of LH administration in assisted reproductive technology (ART). It discusses the role of LH in reproductive cycles, patient subgroups that may benefit from LH supplementation, and differences in LH supplementation using various gonadotropin preparations. Specifically, it finds that LH supplementation can benefit older patients, poor responders, and hypo-responders by restoring androgen production and improving follicular development, oocyte quality, and pregnancy rates.
The Istanbul Consensus Workshop on Embryo Assessment: Proceedings of an Exper...Sandro Esteves
O documento estabelece padrões para a classificação da morfologia de oócitos e embriões visando a comparação de resultados entre laboratórios de reprodução assistida. Ele define os pontos críticos de checagem de fertilização e clivagem e padroniza a terminologia para descrever a maturação oocitária e embrionária.
Este documento resume los principales cambios que traerá la nueva Directiva Europea sobre tejidos y células humanos, que entrará en vigor en abril de 2006. La directiva establece nuevos estándares de calidad y seguridad para la donación, obtención, procesamiento, almacenamiento y distribución de tejidos y células humanos. Afectará a todos los centros de reproducción asistida en la UE y regulará aspectos como la acreditación de los centros, los procedimientos para la obtención y manejo de las muestras
This document summarizes the program for a conference on embryology and clinical biology of reproduction. It includes sessions on andrology, embryology, quality, genetics, and debate. Topics discussed include new sperm selection techniques, non-invasive embryo assessment, embryo cataloging standards, genetic screening methods, and a discussion on the role of embryologists.
Este documento discute el traslado de embriones humanos criopreservados entre centros de reproducción asistida. Aunque los embriones forman parte del proyecto reproductivo de una mujer o pareja y pueden solicitar el cambio de centro, actualmente no existe un protocolo único consensuado para realizar este tipo de traslados. El documento analiza aspectos como la responsabilidad de los centros sobre la custodia de los embriones y la legislación española aplicable.
El documento resume la lucha de ASEBIR por el reconocimiento de la Embriología Clínica como una especialidad médica. A pesar del apoyo de diversas asociaciones y colegios profesionales, el Ministerio de Sanidad propuso inicialmente una especialidad conjunta con Genética, a lo que ASEBIR accedió. Sin embargo, el nuevo anteproyecto de real decreto no incluye esta especialidad combinada. ASEBIR continúa trabajando para lograr el reconocimiento de la Embriología Clínica.
5º recomendaciones para la aplicación del rd1301 2006Asebir
Documento elaborado por el grupo de trabajo conjunto de la Sociedad Española de Fertilidad (SEF) y la Asociación para el Estudio de la Biología de la Reproducción (ASEBIR) para el análisis del RD 1301/2006
Retículo endoplasmático, Funciones, Estructura y Patologías AsociadasDanilo Castillo
El documento presenta información sobre el retículo endoplasmático (RE). El RE es una subestructura celular que provee una gran superficie para reacciones químicas y síntesis de moléculas. El RE se clasifica en liso (REL) y rugoso (RER). El REL participa en síntesis de lípidos y detoxificación, mientras que el RER participa en síntesis de proteínas. Algunas patologías asociadas incluyen esteatosis hepática debido a alteraciones en el REL, y enfermedades neurodegenerativ
O documento descreve as principais etapas do desenvolvimento embrionário humano desde a fecundação até os seis meses de gestação, incluindo a divisão inicial do óvulo em duas células, a formação da mórula e do blastocisto, e a evolução gradual do embrião em feto com estruturas bem definidas.
Este documento presenta una tesis para obtener el grado de Maestro en Salud Pública en el área de Epidemiología. El objetivo es identificar factores y marcadores moleculares de riesgo para cáncer oral. La metodología incluye un diseño de caso-control para analizar factores de riesgo como tabaquismo, alcoholismo e higiene oral deficiente, así como marcadores moleculares como las metaloproteasas de matriz 2 y 9. Los resultados muestran asociaciones significativas entre algunos factores de riesgo y el c
Este manual proporciona recomendaciones para la toma de muestras destinadas a análisis microbiológico con el fin de establecer un diagnóstico etiológico de enfermedades infecciosas. Incluye información sobre aspectos generales como la solicitud de estudios, precauciones de bioseguridad, preparación de muestras y transporte. Además, detalla procedimientos específicos para la recolección de diversos tipos de muestras clínicas y ambientales.
Este manual proporciona recomendaciones para la toma de muestras para análisis microbiológico. Describe los aspectos generales como la solicitud de estudios, precauciones de bioseguridad, preparación de elementos y técnicas de recolección. Luego se enfoca en recomendaciones específicas para la toma de muestras clínicas y ambientales, incluyendo detalles sobre el equipo requerido y las técnicas para cada tipo de muestra. El objetivo es unificar criterios para garantizar la calidad de las mue
Determinacion de parametros_de_desempeño_del_metodo_analiticTatiana Hernández
Este documento presenta los resultados de la determinación de los parámetros de desempeño de un método analítico por espectrofotometría UV-Visible para la cuantificación de losartán potásico en tabletas de 50 mg. Se evaluaron siete parámetros incluyendo precisión, linealidad, exactitud, repetibilidad, estabilidad analítica de la muestra. Los resultados obtenidos estuvieron dentro de los criterios de aceptación, por lo que el método analítico se considera válido y confiable para cuantificar losartán potásico
Este documento describe el desarrollo de un aderezo a base de champiñones y especias secas y el estudio de su tratamiento térmico. El objetivo principal es desarrollar un producto inocuo, de buen sabor y asequible para los consumidores ecuatorianos. En primer lugar, se caracterizan las materias primas y se determinan los pretratamientos óptimos. Luego, se desarrollan diferentes formulaciones que son evaluadas sensorialmente para seleccionar la mejor. Finalmente, se realizan pruebas térmicas para
Este documento presenta un libro de texto sobre Química General dirigido a estudiantes de bachillerato. El libro contiene tres unidades principales que cubren los temas de la química y los cuerpos materiales, la estructura atómica y la tabla periódica, y las sustancias, sus enlaces, nomenclatura y aplicaciones. Además, incluye dos anexos con protocolos de seguridad para el laboratorio y sugerencias de actividades experimentales. El objetivo general es que los estudiantes aprendan los conceptos bás
Castro c, galli a. evaluacin educacional mdulo 3 2002Jor Castillo
Este documento presenta los objetivos y contenidos de un módulo sobre evaluación educacional en facultades de ciencias médicas. El módulo aborda la evaluación de las competencias adquiridas por los estudiantes, incluyendo qué y cómo evaluar a través de observación sistemática, listas de control y escalas evaluativas. También cubre la evaluación de la enseñanza a través del análisis de programas, cuerpo docente y fuentes de información como estudiantes y pares evaluadores. El objetivo general es capacitar en el diseño e
Este documento presenta un texto guía sobre biología para el examen de ingreso a la Facultad de Ciencias y Tecnología de la Universidad Mayor de San Simón. El texto contiene tres unidades principales: Unidad 1 sobre las bases y origen de la vida, Unidad 2 sobre seres vivos y biodiversidad, y Unidad 3 sobre ecología y medio ambiente. Cada unidad contiene varios temas con conceptos clave, glosarios y preguntas de repaso. El objetivo general del texto es proporcionar los conocimientos básicos necesarios sobre bi
2014 - Identificación y cuantificación del morfotipo Haliscomenobacter hydros...WALEBUBLÉ
Ferrer, M. (2014) Identificación y cuantificación del morfotipo Haliscomenobacter hydrossis formador de bulking mediante la técnica FISH y estudio de su relación con los parámetros operacionales y físico-químicos en EDAR de la Comunidad Valenciana. Trabajo final de Máster en Ingeniería Ambiental. Valencia: Universitat Politècnica de València.
www.abgc.es
Este documento presenta la formulación de un Sistema de Gestión Ambiental (SGA) bajo la norma ISO 14001 para la empresa Schapeli Ltda, dedicada a la producción de quesos. Se describe el proceso productivo de la empresa, identificando sus aspectos e impactos ambientales significativos. Adicionalmente, se evalúa el cumplimiento de la legislación ambiental aplicable y se diseñan programas, objetivos y metas ambientales para la gestión de dichos aspectos. El documento concluye con recomendaciones para la implementación del SGA.
Este documento presenta una tesis doctoral sobre los estilos de vida y la salud de los estudiantes universitarios. La tesis analiza cómo la universidad puede promover la salud de los estudiantes a través de su entorno. El documento revisa la literatura sobre los determinantes de la salud, los estilos de vida, y la prevención y promoción de la salud. Además, describe el diseño del estudio que incluye la validación de un cuestionario mediante el método Delphi y su aplicación a una muestra de estudiantes para evaluar sus estilos de
Este manual proporciona recomendaciones para la toma y el procesamiento de muestras para análisis microbiológico. Describe los aspectos generales como la solicitud de estudios, precauciones de bioseguridad, preparación de elementos y equipo de asepsia. Además, detalla los procedimientos específicos para la recolección de diferentes tipos de muestras clínicas y ambientales. El objetivo es unificar criterios que garanticen la calidad de las muestras y la seguridad de quienes las manipulan.
Este documento describe el desarrollo de métodos para controlar a priori la densidad y los contactos defectuosos en la predicción de estructuras cristalinas mediante el uso del Método de Algoritmos Genéticos Modificados para Cristales (MGAC). Se proponen dos métodos: uno basado en el volumen de celda para excluir estructuras con volúmenes anómalos, y otro basado en la verificación de contactos atómicos para excluir estructuras con defectos en los contactos. Estos métodos se implementan y evalúan en vari
Este documento presenta un resumen de los principales procedimientos y programas de seguridad alimentaria implementados en una planta productora de gelatinas, incluyendo HACCP, GMP, control de calidad del agua, zonificación y sanitización. Se describen los métodos utilizados para garantizar la salubridad de los alimentos a lo largo de toda la cadena de producción, así como los resultados obtenidos tras la implementación de los nuevos procedimientos, los cuales incluyen una mejora en las condiciones higiénicas y una disminución
Este documento presenta la tesis de Miguel Ángel Cando Rodríguez para obtener el título de Ingeniero Ambiental. La tesis analiza un proceso de biorremediación de suelos contaminados con hidrocarburos en la central termoeléctrica El Descanso en Cuenca, Ecuador. El estudio evalúa tres tratamientos utilizando bacterias nativas para degradar hidrocarburos totales de petróleo y compuestos aromáticos de hidrocarburos. Los resultados muestran que el tratamiento más efectivo fue el que util
Este documento presenta la guía didáctica para el curso de Temas Selectos de Biología 1 para estudiantes de quinto semestre del Colegio de Bachilleres de Tabasco. Incluye los contenidos teóricos, actividades y evaluaciones sobre tres bloques temáticos: 1) la biología como ciencia, 2) procesos celulares y biología molecular, y 3) ingeniería genética y biotecnología. Fue elaborado por un equipo de docentes con el objetivo de facilitar el aprendizaje de los estudiantes a trav
Este documento presenta el diseño del Sistema de Vigilancia Epidemiológica del Cáncer Ocupacional (SIVECAO) específico para Colombia. El SIVECAO consta de dos módulos: 1) vigilancia de la exposición laboral a carcinógenos, y 2) vigilancia de eventos de salud relacionados con la exposición a carcinógenos ocupacionales. El objetivo del SIVECAO es prevenir la aparición del cáncer ocupacional en Colombia mediante la detección temprana y el seguimiento de la expos
Este documento presenta el diseño del Sistema de Vigilancia Epidemiológica del Cáncer Ocupacional (SIVECAO) específico para Colombia. El SIVECAO consta de dos módulos, uno para la vigilancia de la exposición a carcinógenos laborales y otro para la vigilancia de eventos de salud relacionados con dicha exposición. La Fase 1 del SIVECAO se implementará entre 2011-2015 en cinco ciudades colombianas y vigilará 7 carcinógenos, 12 circunstancias de exposición y el of
Este documento presenta los temas y objetivos de la Subred Temática de Metrología Biomédica. Los temas incluyen el formato de actas de reuniones, el plan de trabajo con diagnóstico, implementación, resultados y análisis, y las necesidades y oferta metrológica en el sector salud. El objetivo principal es generar lineamientos que garanticen la metrología biomédica y la trazabilidad de mediciones en el sector salud.
Este documento presenta una guía de prácticas de laboratorio sobre el reconocimiento de protozoarios. Los objetivos son reconocer los diferentes tipos de protozoarios y sus características, trabajar con orden y limpieza, y compartir conclusiones. La actividad experimental implica observar un video, representar lo observado en grupos, e identificar y enumerar las características de los protozoarios identificados. Los estudiantes deben ilustrar los tipos de protozoarios y contrastar sus respuestas con la hipótesis planteada para llegar a conclusiones
Cuaderno de Criobiología. Protocolo para el cese de la conservación de gameto...Asebir
En España, la crioconservación de semen y embriones fue posible, y regulada legalmente, desde casi los comienzos de la aplicación clínica de las técnicas de reproducción humana asistida (TRHA) en los años 80. Sin embargo, la criopreservación de ovocitos y tejido ovárico no se permitió hasta la ley que entró en vigor en 2006. En esta, fueron consideradas como técnicas experimentales y con la necesidad de autorización administrativa previa. Dejó de ser considerada como experimental para los ovocitos en septiembre de 2008 por acuerdo de la Comisión Nacional de Reproducción Humana Asistida (CNRHA).
Este documento resume los cambios realizados por la OMS en los criterios para el análisis del semen humano en 2010. Reconoce que los valores de referencia establecidos en 1999 necesitaban actualizarse. También estandariza los métodos para medir la morfología y movilidad espermática. Los nuevos criterios buscan mejorar el diagnóstico y la interpretación clínica de los resultados del seminograma.
Segundo Cuaderno de Embriología Clínica, versión inglesaAsebir
This document presents criteria for the morphological evaluation of human oocytes, embryos, and blastocysts established by the ASEBIR committee. It outlines parameters evaluated at each developmental stage from oocyte to blastocyst. A grading system is proposed to assess embryo quality for D+2/3 and D+5/6 transfers. The goal is to standardize evaluation criteria to facilitate multicenter studies and comparisons between clinics.
Este documento resume la revista de diciembre de 2010 de la Asociación para el Estudio de la Biología de la Reproducción. Incluye artículos sobre útero de alquiler, diagnóstico genético preimplantacional, animales transgénicos, vitrificación de blastocistos bovinos y el impacto de la oligozoospermia. También cubre noticias, formación continua, y normas de publicación.
El documento discute la impronta genómica y su relación con las técnicas de reproducción asistida. La impronta genómica es una marca epigenética que regula la expresión de genes dependiendo del origen parental y conduce a la expresión monoalélica. Estudios recientes han encontrado anomalías en la impronta genómica asociadas con la reproducción asistida o la infertilidad. Un mejor entendimiento de este campo contribuirá a mejorar el éxito y la seguridad de las técnicas de reproducción asistida.
LAS VARIANTES CROMOSÓMICAS AFECTAN LA CALIDAD EMBRIONARIAAsebir
Este estudio evalúa si la presencia de variantes cromosómicas en el cariotipo de alguno de los miembros de la pareja puede afectar los resultados de los ciclos de ICSI. Se compararon 81 ciclos con variantes cromosómicas con 169 ciclos con cariotipos normales. Los resultados mostraron que las variantes más frecuentes afectaban al cromosoma 9 y que existían diferencias significativas en la calidad de los embriones transferidos, siendo peores en los ciclos con variantes. Sin embargo, la vi
EFECTO DEL PROCESO DE VITRIFICACIÓN SOBRE LA ESTRUCTURA DEL HUSO MEIÓTICO Y...Asebir
Este estudio evaluó el efecto de la vitrificación usando CryotipTM sobre la estructura del huso meiótico y organización cromosómica en ovocitos humanos en metafase II. Se vitrificaron 12 ovocitos y se compararon con 6 ovocitos frescos. La tasa de supervivencia de los ovocitos desvitrificados fue de 91.6%. No hubo diferencias significativas en la proporción de ovocitos con configuración normal del huso meiótico y cromosomas entre los grupos frescos y vitrificados, sugiri
Relación entre los patrones pronucleares y la calidad embrionaria según crite...Asebir
Este estudio examinó la relación entre los patrones pronucleares observados el día de la fecundación y la calidad embrionaria posterior según los criterios ASEBIR. Se observaron retrospectivamente 3424 embriones procedentes de 619 ciclos de FIV-ICSI, clasificándolos en cuatro grupos (GI, GII, GIII, GIV) según el patrón pronuclear. Los embriones del grupo GI tuvieron un mayor porcentaje de calidad A, mientras que los del grupo GIII tuvieron una mayor probabilidad de calidad D
PAPEL DE LOS FACTORES SOLUBLES EN FOLICULOGÉNESISAsebir
La foliculogénesis es el proceso de crecimiento y maduración folicular que culmina con la ovulación. Este proceso está sujeto a complejos mecanismos de regulación endocrina, autocrina y paracrina que conjuntamente garantizan la formación de oocitos maduros. En este contexto, los factores solubles desempeñan un papel clave actuando de forma coordinada con los mecanismos de comunicación e interacción celular. En este trabajo llevamos a cabo una revisión exhaustiva de aquellos mediadores solubles que están involucrados en el proceso de la foliculogénesis.
FUNDAMENTOS DE CRIOBIOLOGÍA ESPERMÁTICA PARA BANCOS DE SEMENAsebir
Los espermatozoides tienen unas características especiales para la congelación, en este trabajo se analizan estas características y su influencia en la supervivencia espermática aplicada a los bancos de semen. Entre ellas se encuentran factores propios del tipo celular a congelar y factores dependientes del protocolo de congelación. Dentro de los primeros podemos hablar del tamaño y la permeabilidad celular y entre los segundos nos encontramos la curva de congelación y la adicción de los crioprotectores.
La curva de congelación se refiere a la respuesta celular a la congelación (shock por frío, formación de hielo y descongelación) que puede provocar lesiones crioinducidas como la formación de hielo intracelular, estrés osmótico o recristalización. Para evitar estos daños en todos los protocolos se describe como parte fundamental la adicción de agentes crioprotectores beneficiosos para la supervivencia celular aunque también recogen aspectos perjudiciales como su toxicidad. Por último se analizarán las bases y el papel de la vitrificación de espermatozoides en los bancos de semen.
ESTUDIO GENÉTICO PREIMPLANTACIONAL EN PACIENTES PORTADORES DE TRANSLOCACIÓN...Asebir
En pacientes portadores de translocaciones Robertsonianas (13;14) se observa una mayor tasa de abortos. El análisis cromosómico de los espermatozoides por FISH en estos pacientes, describe la proporción de espermatozoides normales que nos podemos encontrar en el eyaculado de los mismos. Esta proporción se ajusta al número de pre-embriones normales que se obtienen en estas parejas tras someterlas a un ciclo de Fecundación in Vitro y posterior diagnóstico genético preimplantacional.
El objetivo del presente trabajo es establecer la relación entre el análisis cromosómico de los espermatozoides por FISH y la tasa de pre-embriones genéticamente normales en pacientes portadores de una traslocación Robertsoniana (13;14).
LOS GLUCOCORTICOIDES Y LA REPRODUCCIÓN FEMENINAAsebir
Los glucocorticoides ejercen multitud de funciones en el organismo para mantener la homeostasis, pero en condiciones de estrés, puede producirse la secreción de elevadas cantidades de éstos. Está ampliamente aceptado que los efectos del estrés pueden tener consecuencias negativas en la reproducción. Esta acción negativa está mediada principalmente a través de la alteración del eje hipotálamo-hipofisiario-adrenal, aunque existen evidencias que indican que los glucocorticoides tienen también un efecto directo sobre la esteroidogénesis y la oogénesis. Las acciones encaminadas a reducir los efectos negativos del estrés durante la aplicación de técnicas de reproducción asistida pueden favorecer el éxito de estas biotecnologías.
PAPEL DE LA INTERACCIÓN CELULAR EN FOLICULOGÉNESISAsebir
El proceso de crecimiento y maduración folicular que conlleva a la formación de gametos femeninos funcionales se denomina foliculogénesis. Este proceso está estrictamente regulado de forma endocrina y paracrina. Además, las interacciones celulares, tanto célula-célula como célula-MEC (matriz extracelular), desempeñan un papel fundamental. En concreto, el correcto diálogo intercelular controla la adecuada maduración oocitaria. Este artículo es una revisión de los principales mecanismos de interacción celular así como las familias de moléculas de adhesión implicadas.
La Biopsia embrionaria es una técnica que se utiliza en los laboratorios de reproducción asistida con el ánimo de mejorar la eficacia de los procesos de fecundación in vitro. Actualmente, entre las razones que hacen difícil apreciar el beneficio verdadero de esta técnica es su heterogeneidad metodológica, por lo que se pretende describir y valorar su utilidad a la luz de los conocimientos existentes.
EFECTO DE LA ECLOSIÓN ASISTIDA EN RELACIÓN AL PORCENTAJE DE GESTACIÓN EN E...Asebir
El objetivo del estudio es comprobar el efecto de la eclosión asistida con ácido Tyrode en embriones descongelados. Se estudiaron un total de 1224 parejas sometidas a ciclos de reproducción asistida.
Observamos y evaluamos la calidad de los embriones descongelados en relación al número de embriones que sobreviven y el porcentaje de blastómeras lisadas de dichos embriones. Comparamos el porcentaje de embarazos en ciclos de descongelados con y sin eclosión asistida. Aparecen diferencias significativas en el porcentaje de embarazos en el grupo de embriones que han sido sometidos a eclosión asistida (P<0,05), y también observamos una mejor tasa de embarazos en transferencias con embriones de calidad inferior (supervivencia inferior al 60%) cuando son sometidos a eclosión asistida.
CAMBIOS DE EXPRESIÓN DEL RECEPTOR DE ANDRÓGENOS EN RELACIÓN CON LA SUBFERT...Asebir
La producción de testosterona en los humanos se inicia alrededor de las semanas 8a y 9a de gestación. Este es un evento crucial para el desarrollo sexual primario en un embrión 46,XY (masculinización), y para el normal desarrollo sexual secundario en la pubertad (virilización). La testosterona además es esencial para mantener los caracteres sexuales secundarios en la vida adulta y para iniciar y preservar la espermatogénesis. Las acciones de los andrógenos se cumplen por medio del recep- tor de andrógenos (RA). La unión de los andrógenos a su receptor induce un cambio estructural en el RA, convirtiéndolo de un estado inactivo a su forma activa. En el testículo humano la inmunoexpresión del RA se ha detectado exclusivamente en el núcleo de células de Sertoli, en las células de Leydig y en las células mioides peritubulares. La función de estas células está estrecha- mente relacionada a la concentración y expresión del RA. Mutaciones en el RA ocasionan alteraciones en la acción de los andró- genos, afectando la función endocrina a nivel testicular y de otros órganos diana, comprometiendo además la función reproduc- tiva. El significado de la expresión del RA en la patología testicular funcional congénita y adquirida del testículo humano no está aún bien establecido. En la presente revisión se evalúan los diferentes patrones de expresión inmunohistoquímica del RA repor- tados en el testículo de hombres normales y en pacientes con patología testicular, y se valora el significado funcional de las alteraciones histológicas y moleculares del RA en relación con la disfunción de la fertilidad en estos pacientes.
NUEVOS AVANCES EN EL ESTUDIO DE LA INTEGRIDAD DEL DNA ESPERMÁTICOAsebir
Este documento describe los nuevos avances en el estudio de la integridad del DNA espermático. Discuten cinco mecanismos principales que pueden causar fragmentación del DNA en los espermatozoides: 1) apoptosis durante la espermatogénesis, 2) roturas de DNA durante la espermiogénesis, 3) fragmentación post-testicular inducida por ROS y caspasas, 4) fragmentación inducida por caspasas y endonucleasas espermáticas, y 5) fragmentación inducida por radiación y quimioterapia. También describen diferentes p
ORGANIZACIÓN Y RECURSOS FÍSICOS EN LOS LABORATORIOS DE FIV DE LOS CENTROS D...Asebir
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Preparación del semen para técnicas de reproducción asistidaAsebir
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En la presentación se abarcan temas sobre las diversas formas de traumatisos en niños y adolescentes como las contusiones, esguinces, luxaciones, fracturas y distenciones. Tambien se tratan algunos aspectos para su diagnóstico y, por último, cual es el tratamiento para cada tipo de caso que se presente.
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Primer Lapso de Semiología
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Conceptos de Semiología Médica, Signos, Síntomas, Síndromes, Diagnóstico, Pronóstico
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La medicina tradicional
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quienes integran las comunidades amuzgas, vinculadas por cómo la
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Desde esta perspectiva de salud/enfermedad
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1. CUADERNOS
DE EMBRIOLOGÍA CLÍNICA
II. Criterios ASEBIR de valoración morfológica
de oocitos, embriones tempranos
y blastocistos humanos.
(2ª Edición)
2. CRITERIOS ASEBIR DE VALORACIÓN
MORFOLÓGICA DE OOCITOS, EMBRIONES
TEMPRANOS Y BLASTOCISTOS HUMANOS.
Comisión de trabajo ASEBIR
Coordinadores
Manuel Ardoy
Gloria Calderón
Ponentes
Jorge Cuadros
María José Figueroa
Raquel Herrer
Juan Manuel Moreno
Águeda Ortiz
Fernando Prados
Luz Rodríguez
Josep Santaló
María José de los Santos
Jorge Ten
María José Torelló
Edita:
Asociación para el Estudio de la Biología de la Reproducción (ASEBIR).
C/ Cronos 20, Edificio 4, 1º, 6ª - 28037 Madrid - Tfno: 91 367 89 94
www.asebir.com · asebir@asebir.com
Diseño, maquetación e impresión:
GÓBALO Gráfica · Web · Multimedia · Consultoría
C/ Nogal 1, 1º 31 - 28250 · Torrelodones · Madrid · Tfno - Fax.: 91 859 57 22
www.gobalo.es · info@gobalo.es
Depósito legal: M-30.301-2008
ISSN: 1888-8011
2008
6. P R E S E N TA CI ÓN
La comisión de ASEBIR: “Definición de criterios de valoración morfológica y su
categorización, de Oocito a Blastocisto” se creó en julio de 2004 para tratar de
dar respuesta a la necesidad de unificar los criterios de valoración embrionaria.
La falta de consenso en este aspecto clave de la embriología clínica conlleva
problemas tan comunes como la imposibilidad de generar estudios
multicéntricos con valoración de la calidad embrionaria común, de interpretar
informes clínicos de laboratorios ajenos o de comparar datos bibliográficos.
El objetivo de la comisión ha sido definir una propuesta de criterios
morfológicos de valoración de la calidad y su clasificación en escalas para cada
uno de los diversos estadios embrionarios.
Para llevar a cabo este trabajo, la comisión se ha basado principalmente en tres
herramientas: la revisión bibliográfica exhaustiva, incluyendo consultas directas
a algunos de los principales autores; una encuesta multicéntrica fundamentada
en dicha revisión; y en la propia experiencia de los miembros de la comisión.
El resultado de este trabajo ha sido la elaboración de una clasificación
embrionaria en categorías que, junto con las dudas sobre parámetros esenciales,
está sujeta a revisiones futuras por el Grupo de Interés de ASEBIR “Calidad
Embrionaria”.
Por último, mencionar que hemos considerado imprescindible añadir imágenes
a las descripciones morfológicas, con especial interés en que éstas hayan sido
realizadas por integrantes de la propia comisión, de manera que el consenso
sobre ellas fuera unánime. Esperamos que este hecho sirva para justificar la
variedad en la calidad y presentación de las fotografías.
8. IN T R O D U C CI ÓN
La evidencia científica indica que las posibilidades de gestación en la especie
humana dependen en gran medida tanto de la receptividad endometrial como
de la calidad embrionaria, aspectos que distan mucho de estar bien estudiados.
En el abordaje de la calidad embrionaria, la primera decisión a tomar es
seleccionar la herramienta de trabajo. Tras 29 años del nacimiento del primer
bebé mediante FIV, el método más habitual para valorar la calidad embrionaria
es la utilización de parámetros morfológicos. Otros criterios como el consumo
metabólico, el estudio de aneuploidías y otros recursos están demostrando su
eficacia, aguardándoles sin duda un futuro prometedor. Sin embargo, el recurso
a la morfología continúa siendo el sistema más extendido y eficiente (Gardner
et al., 2001; Haggarty et al., 2006; Hamamah, 2005; Leese et al., 1993; Leese,
1995; Munne and Wells, 2002; Scott, 2003).
Otro aspecto necesario es decidir qué estadios del desarrollo hay que escoger
para la clasificación morfológica de los embriones. Habitualmente se ha
escogido el preembrión en el segundo o tercer día de cultivo (D+2 o D+3) o bien
en blastocisto (D+5 o D+6). Sin embargo, los estudios recientes apuntan a que
la valoración en los días de cultivo restantes: oocito (D+0), zigoto y primera
división celular (D+1) y mórula (D+4), puede resultar asimismo útil en la
catalogación embrionaria, por lo que en este trabajo también han sido
considerados.
En cada estadio del desarrollo embrionario se han analizado los parámetros
morfológicos citados en la bibliografía revisada. En el sistema final de
clasificación se han incluido todos aquellos parámetros relacionados de manera
evidente con las probabilidades de implantación del preembrión. Algunos de
los parámetros no utilizados para la clasificación se han propuesto como
criterios que podrían ayudar a elegir entre varios embriones de la misma
categoría. Finalmente, ciertos parámetros morfológicos precisan un mayor
estudio para poder formar parte relevante del esquema de decisión.
Una vez recogidos todos los datos morfológicos, es preciso decidir cómo
ponderarlos para dar una clasificación final al preembrión. Existen dos opciones
fundamentales al respecto: valoración por categorías o por puntuación. En la
comisión se ha optado por la primera, tanto por ser la más extendida, como por
la dificultad para consensuar una ponderación adecuada de cada uno de los
parámetros, tarea hacia la que, sin duda, dirigiremos nuestros esfuerzos en el
futuro (Balaban et al., 2006).
10. Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones). 9
1. EVALUACIÓN MORFOLÓGICA
DE CADA ESTADIO
1.1 Valoración morfológica del oocito
El proceso de maduración oocitaria incluye cambios tanto a nivel citoplasmático
como nuclear, que no siempre son sincrónicos ni ocurren con el mismo grado
de maduración. Oocitos con maduración nuclear en metafase II podrían
presentar deficiencias en su maduración citoplasmática que comprometerían el
desarrollo adecuado del preembrión (Scott, 2003).
La revisión bibliográfica nos muestra que el oocito maduro puede presentar
alteraciones o dimorfismos que nos permitirían realizar una valoración
morfológica:
1.1.1 Parámetros evaluados en estadio de oocito
a) Alteraciones morfológicas citoplasmáticas:
Agrupación de organelas/granulosidad localizada en el centro del oocito.
Agregación de retículo endoplasmático liso.
Vacuolas
Inclusiones citoplasmáticas
b) Alteraciones morfológicas extracitoplasmáticas:
Exudados en el espacio perivitelino
Anomalías de la zona pelúcida
Espacio perivitelino aumentado
Alteraciones del primer corpúsculo polar: fragmentación y tamaño.
c) Complejo cúmulo-corona radiata-oocito
Agrupación de organelas/granulosidad localizada en el centro del
oocito
Se trata de una alteración frecuente del citoplasma del oocito, que podría
describirse al microscopio óptico como una masa individual y oscura con un
contenido excesivo de gránulos, normalmente situada en la porción central del
oocito (Kahraman et al., 2000; Meriano et al., 2001; Van Blerkom and Henry,
1992). También se ha descrito la presencia de un citoplasma irregular con una
apariencia engrosada como consecuencia de una vesiculización extensiva que
ocupa la totalidad del citoplasma (Meriano et al., 2004; Van Blerkom and Henry,
1992); ver imagen 1.
11. 10 Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones).
Imagen 1. Granulosidad localizada en el centro del oocito.
Agregación de retículo endoplasmático liso (AREL)
Visto al microscopio óptico, se trata de un tipo de inclusión citoplasmática
individual, de forma ligeramente elíptica y de dimensiones semejantes a un
pronúcleo; ver imagen 2 (Meriano et al., 2001; Serhal et al., 1997; Van Blerkom
and Henry, 1992)
Se ha confirmado mediante microscopía electrónica que este dimorfismo es el
resultado de una acumulación masiva de sáculos de retículo endoplasmático
liso (Otsuki et al., 2004).
Imagen 2. Presencia de AREL (R) y pequeñas vacuolas (V) en el oocito.
Vacuolas
A diferencia de la AREL, las vacuolas son un tipo de inclusiones citoplasmáticas
rodeadas de membrana y llenas de fluido, claramente distinguibles al
12. Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones). 11
microscopio; ver imagen 3 (Otsuki et al., 2004; Van Blerkom, 1990). Su número
y tamaño varía considerablemente entre oocitos diferentes o incluso dentro de
cada uno de ellos (Van Blerkom and Henry, 1992). Estas vacuolas podrían
formarse espontáneamente o bien mediante una fusión de vesículas
preexistentes derivadas de retículo endoplasmático liso y/o del aparato de Golgi
(El Shafie et al., 2000; Van Blerkom, 1990).
Imagen 3. Presencia de vacuolas en el oocito.
Inclusiones citoplasmáticas
Se incluyen diversos tipos de características citoplasmáticas, consideradas
como pequeñas áreas de necrosis, las cuales incluirían cuerpos refringentes de
~10 μm de diámetro, compuestos de lípidos y gránulos densos que pueden
agruparse o quedarse aislados (Serhal et al., 1997, Suzuki et al., 2004) y de
cuerpos picnóticos no refringentes, que aparecen normalmente en forma de
herradura (Meriano et al., 2001); ver imagen 4.
Imagen 4. Presencia de inclusiones. Cuerpo picnótico (CP), cuerpo necrótico (CN), cuerpos refringentes (I).
13. 12 Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones).
Exudados en el espacio perivitelino
La presencia de granulosidad o detritus en el espacio perivitelino se considera
una anomalía extracitoplasmática. Este detritus se ha relacionado con un
deterioro de la zona pelúcida interna, y su incremento podría afectar a la
capacidad fecundante del oocito tras la realización de FIV convencional (Veeck,
1999b). La presencia de este detritus podría ser un signo de “sobredosis” de
gonadotropinas empleadas en los ciclos de estimulación ovárica, aunque su
presencia no parece relacionarse con la calidad embrionaria o las tasas de
fecundación, división, embarazo o implantación (Hassan-Ali et al., 1998). Por
tanto, este dimorfismo podría ser un fenómeno relacionado con la maduración
fisiológica del oocito (Balaban and Urman, 2006); ver imagen 5.
Imagen 5. Detritus en el espacio perivitelino.
Anomalías de la zona pelúcida
La zona pelúcida sufre cambios en el grosor y en la apariencia de bicapa desde
D+0 hasta D+2, no siendo valorable este aspecto en el D+0. Pero otras anomalías:
contorno no circular, abultamientos, septo, etc., se mantienen a lo largo del
desarrollo y pueden ser detectadas con más facilidad en el momento de la
microinyección al tener que girar el oocito; ver imágenes 6 a 9.
Imagen 6. Zona pelúcida no circular.
14. Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones). 13
Imagen 7. Zona pelúcida oscura.
Imagen 8. Zona pelúcida gruesa.
Imagen 9. Zona septada.
15. 14 Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones).
Espacio perivitelino aumentado
Es un dimorfismo que se visualiza claramente al microscopio debido a un
incremento del espacio perivitelino, que hace que el oocito quede “flotando”
en el interior de la zona pelúcida; ver imagen 10. Si además el oocito presenta
un primer corpúsculo polar grande, se asocia con una disminución de la calidad
embrionaria en D+2 (Xia, 1997).
Imagen 10. Espacio perivitelino aumentado.
Alteraciones del primer corpúsculo polar (1erCP)
Parece ser que la morfología del 1erCP cambia después de unas horas de
cultivo in vitro y, por tanto, puede variar dependiendo del tiempo de
observación transcurrido (Balaban et al., 1998). De hecho, se ha detectado una
correlación positiva entre el porcentaje de fragmentación del 1erCP y el tiempo
transcurrido entre la denudación y la ICSI (Ciotti et al., 2004); así como
también un incremento de la fragmentación del 1erCP a lo largo del tiempo
(Verlinsky et al., 2003).
Algunos autores han sugerido que la morfología del 1erCP podría estar
relacionada con las tasas de embarazo e implantación (Ebner et al., 1999, 2000,
2002).
Por otro lado, la variación en el tamaño del 1erCP (grande o pequeño) puede ser
tratada como una condición anómala del oocito (Veeck, 1999b). El factor
determinante es, probablemente, la posición del huso meiótico en relación con
la superficie del oocito. Estos oocitos pueden dar lugar, por tanto, a alteraciones
cromosómicas (Veeck, 1999b); ver imágenes 11 a 13.
16. Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones). 15
Imagen 11. Diferentes tamaños de corpúsculo polar. A, grande; B, normal; C, pequeño.
Imagen 12. Corpúsculo polar doble.
Imagen 13. Corpúsculo polar fragmentado.
Complejo cúmulo-corona radiata-oocito
El grado de madurez del complejo ha sido utilizado como indicador de la
madurez oocitaria, aunque la sincronía entre ambos es cuestionable, sobre
todo en ciclos estimulados (Hartshorne et al., 1999; Tarin and Pellicer,
1992). Esto puede ser debido a diferencias de sensibilidad de las células del
complejo cúmulo-corona y del núcleo oocitario a la maduración inducida
17. 16 Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones).
por las gonadotropinas u otros factores foliculares (Balaban and Urman, 2006).
1.1.2 Parámetros oocitarios incluidos en el sistema de clasificación
La revisión bibliográfica realizada revela una gran disparidad en los resultados
(De Sutter et al., 1996; Loutradis et al., 1999), probablemente porque los estudios
son retrospectivos, no homogéneos y, en su mayoría, basados en un número de
casos insuficiente. En la tabla I se muestra un resumen de la correlación de la
morfología oocitaria y algunos parámetros.
El estado actual del conocimiento no permite establecer aún que los parámetros
morfológicos analizados tengan una relación directa, por sí solos, con las
variables reproductivas de importancia. Por esta razón, no se puede incluir la
calidad oocitaria como parámetro de relevancia en la categorización del futuro
preembrión; aunque es cada vez más evidente que deberá ser incluida en el
futuro conforme vayan publicándose más datos.
Tabla I. Correlación de la morfología oocitaria y algunos parámetros, según las referencias
bibliográficas consultadas. Sí, muestra correlación; No, no muestra correlación; NE, no evalúa
esta correlación.
1.1.3 Recomendaciones
Basado en la reciente revisión de Balaban and Urman (2006), podríamos concluir:
- Los resultados del efecto de las alteraciones extracitoplasmáticas son
controvertidos y no parece que exista una relación de las mismas con la tasa de
18. Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones). 17
implantación de los embriones resultantes. Estos oocitos, en lugar de anómalos,
podrían ser considerados como desviaciones fenotípicas como resultado de la
heterogeneidad de los oocitos extraídos.
- Basándonos en los datos publicados, parece más evidente que las alteraciones
citoplasmáticas severas, como la presencia de acumulaciones de retículo
endoplasmático liso, la acumulación de organelas/granulosidad severa
centralizada y la vacuolización excesiva, podrían perjudicar el desarrollo
embrionario y su potencial implantatorio. Por tanto, estas desviaciones severas
de la normalidad citoplasmática son las que tendremos en cuenta a la hora de
establecer diferencias entre embriones de la misma calidad morfológica.
Recomendamos la utilización de algunos de los parámetros para establecer
diferencias entre embriones de la misma calidad morfológica:
Desfavorables:
- Acumulaciones del REL
- Granulosidad central
También recomendamos la observación de la zona pelúcida en este estadio.
1.2 Valoración morfológica del zigoto. D+1
Habitualmente se ha considerado la visualización del estadio de zigoto como
una herramienta útil sólo para discernir fallos o alteraciones de la
fecundación. Sin embargo, el proceso de fecundación supone una serie
ordenada de cambios morfológicos que afectan notablemente el aspecto
celular. Estos cambios están tomando cada vez más relevancia en la
valoración final de la calidad embrionaria. Aún más, determinadas
publicaciones hablan de la posibilidad de discernir sólo en función de este
estadio, ya sea por observaciones de estudios propios o por necesidades
impuestas por legislaciones de cada país.
1.2.1 Intervalo de tiempo de observación postinseminación en D+1
La fecundación supone una secuencia de cambios morfológicos. Este hecho
implica que la hora de observación de los pronúcleos es crucial para una
valoración adecuada del zigoto.
Márgenes de tiempo inadecuados para valorar la fecundación pueden conllevar
diferentes problemas:
19. 18 Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones).
A nivel pronuclear: no visualización de los pronúcleos, alteración del tamaño,
valoración errónea de la yuxtaposición.
Modificación en el tamaño de los precursores nucleolares.
Variación del aspecto del citoplasma.
Los márgenes horarios habituales en la observación de los pronúcleos oscilan
entre las 16 y las 22 horas tras inseminación-microinyección. Este margen
podría provocar que en las observaciones realizadas entre las 20 y las 22 horas
se corriera el riesgo de desaparición de los pronúcleos o el cambio en su tamaño,
por lo que se aconseja restringirlo a un rango preferente de 16 a 19 horas,
máxime al uso generalizado de la ICSI.
1.2.2 Parámetros evaluados en el estadio de D+1
a) Alteraciones morfológicas:
- Corpúsculos polares (CP) (número y apariencia)
- Número pronuclear
- Apariencia de los pronúcleos (PN):
- Simetría, sincronía y localización
- Precursores nucleolares (número, simetría y polarización)
- Halo citoplasmático (presencia y aspecto)
b) División temprana
Corpúsculos polares
- Número. No existen evidencias de que el número de corpúsculos polares pueda ser
incluido en la valoración morfológica. Sin embargo, su valoración es esencial a la
hora de evaluar la ploidía en conjunto con el número de pronúcleos; ver imagen 14.
Imagen 14. Número de corpúsculos polares en D+1.
- Apariencia. La apariencia de los corpúsculos polares suele hacer referencia a
las alteraciones en el tamaño o en la fragmentación de los mismos. Actualmente
20. Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones). 19
no existen evidencias que puedan apoyar la inclusión de este parámetro en la
valoración morfológica; ver imagen 15.
Imagen 15. A, corpúsculos fragmentados.; B, corpúsculos separados.
Número pronuclear
La valoración conjunta del número de pronúcleos, el número de corpúsculos
polares y la técnica de inseminación utilizada (convencional o microinyección
espermática) nos ayudará a decidir qué hacer cuando en D+1 tenemos zigotos
con la morfología observada en las imágenes 16 y 17.
Imagen 16. A, 1 pronúcleo + 2 corpúsculos; B, 1 pronúcleo + 1 corpúsculo; C, 2 pronúcleos + 1 corpúsculo.
Imagen 17. A, 2 pronúcleos + 2 corpúsculos; B, 3 pronúcleos; C, micronúcleos.
21. 20 Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones).
Apariencia de los pronúcleos
La bibliografía consultada muestra diferentes parámetros pronucleares que unifican la
apariencia de los pronúcleos y de los precursores nucleolares. En las figuras 1 y 2 se
muestran dos ejemplos habituales de gradación pronuclear en función de la apariencia
de los mismos (Scott, 2000; Tesarik and Greco, 1999). Sin embargo, no existe
bibliografía relevante para poder valorar cada uno por separado; ver imágenes 18 a 23.
Figura 1. Esquema de gradación pronuclear propuesto por Tesarik and Greco (1999).
Figura 2. Esquema de gradación pronuclear propuesto por Scott (2000).
Imagen 18. Pronúcleos separados.
22. Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones). 21
Imagen 19. A, pronúcleos diferentes; B, sólo un precursor en un pronúcleo.
Imagen 20. A, sólo dos precursores en un pronúcleo; B, polarización de los precursores en sólo un pronúcleo.
Imagen 21. A, pronúcleos periféricos; B, precursores asimétricos, las flechas destacan algunas de las
desigualdades.
23. 22 Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones).
Imagen 22. A, precursores polarizados sólo en uno de los núcleos; B, precursores polarizados en ambos
pronúcleos. p: polarizados, d: dispersos.
Imagen 23. A, oocito atrésico en D+1 tras microinyección; B, presencia de micronúcleo indicado con flecha.
No se ha encontrado consenso en la bibliografía cuando se trata de relacionar los
distintos patrones pronucleares con las tasas de implantación, aunque hay tres
características morfológicas que sí parecen tener relación con bajas tasas de
implantación o con mala morfología embrionaria:
- Un solo precursor nucleolar en un pronúcleo
- Pronúcleos separados
- Pronúcleos de tamaño desigual
Halo citoplasmático
Es la presencia de un área cortical más clara en parte o todo el citoplasma. Varias
publicaciones llegan a la conclusión de que es una característica positiva,
siempre y cuando no sea excesiva. Los zigotos con halo evolucionan hacia
embriones de mejor calidad (60,9%) que los zigotos sin halo (52,2%) con una
diferencia estadísticamente significativa. (Balaban and Urman, 2006; Payne et
al., 1997; Salumets et al., 2001; Zollner et al., 2002); ver imágenes 24 y 25.
24. Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones). 23
Imagen 24. A, zigoto con ausencia de halo; B, zigoto con halo incompleto que se presenta parcialmente en
el contorno celular; C, zigoto con halo completo.
Imagen 25. A, zigoto con halo excesivo; B, zigoto con halo adecuado.
División temprana
La observación se realiza entre las 25 y las 27 horas post inseminación; ver imagen 26.
Son numerosos los estudios que analizan este parámetro, pero nunca por sí solo, sino
combinado con la morfología del zigoto (Chen and Kattera, 2006), la mononucleación
en D+2 (Ciray et al., 2005) o la morfología en D+3 (Neuber et al., 2003).
Imagen 26. Preembrión con división temprana a las 26 hs.
25. 24 Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones).
Estos estudios intentan correlacionar la división temprana con la morfología en
D+2 y D+3 (Ciray et al., 2006; Lundin et al., 2001), el desarrollo hasta blastocisto
(Neuber et al., 2003), la viabilidad (Salumets et al., 2003; Shoukir et al., 1997),
la tasa de implantación (Ciray et al., 2006; Rienzi et al., 2005) o la tasa de aborto
(Van Montfoort et al., 2004). Las conclusiones obtenidas resultan contradictorias
como para establecer la utilidad de su observación. En la mayoría de las
publicaciones se aconseja utilizar la división temprana como “parámetro
secundario”, para decidir entre embriones de calidad similar.
Se han analizado los siguientes parámetros morfológicos:
- Primera división celular realizada.
- Semejanza de los blastómeros.
- Presencia de fragmentación.
- Multinucleación.
Llegando a la siguiente conclusión (Ciray et al., 2006): si utilizamos la división
temprana para decidir en el momento de la transferencia, seleccionaremos aquel
preembrión que 26h post inseminación presente dos blastómeras del mismo
tamaño, con ausencia de fragmentación y ausencia de multinucleación.
1.2.3 Parámetros en estadio D+1 incluidos en el sistema de clasificación
Igual que en D+0, la revisión bibliográfica realizada revela gran variabilidad en
los resultados. El estado actual del conocimiento tampoco permite establecer
aún que los parámetros morfológicos analizados tengan una relación directa,
por sí solos, con la tasa de implantación.
Por el momento, no se puede incluir la calidad en D+1 como parámetro de relevancia en
la categorización del futuro preembrión. Aunque, al igual que los parámetros en D+0, es
probable que deban ser incluidos en un futuro conforme vayan publicándose más datos.
1.2.4 Recomendaciones
Recomendamos la utilización de algunos de los parámetros analizados para
establecer diferencias entre embriones de la misma calidad morfológica.
Favorables:
- La presencia de halo.
- División temprana.
Desfavorables:
- Un solo precursor nucleolar.
- Pronúcleos separados.
- Pronúcleos de tamaño desigual.
26. Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones). 25
También recomendamos seguir las indicaciones de la tabla II para decidir si
continuar o descartar el cultivo embrionario en función del número de
corpúsculos polares y pronúcleos, teniendo en cuenta que la diginia implica
riesgo de triploidía y que la partenogénesis no produce gestación.
Tabla II. Recomendaciones de cultivo en función del número de corpúsculos y pronúcleos.
*En caso de encontrar 2 PN + 1 CP es preciso descartar el zigoto dado que si no es partenogénesis existe
riesgo de diginia con las implicaciones de riesgo fetal existente (Carceller et al., 2004)
** Continuar a decisión del laboratorio.
1.3 Valoración morfológica en D+2 y en D+3
La valoración en estos estadios ha constituido tradicionalmente la base de la
determinación de la calidad embrionaria. Sin embargo, aunque existe cierto
acuerdo sobre qué es un buen preembrión y qué es un mal preembrión, el consenso
entre laboratorios es muy difícil cuando se trata de valorar embriones de calidades
intermedias. En una encuesta reciente realizada a centros de reproducción asistida
en España, se evidenció la gran disparidad de criterios sobre valoración
embrionaria entre los diferentes laboratorios, disparidad que se agudiza en la zona
intermedia de calidad (Bruna et al., 2005). La ausencia de criterios comunes afecta
tanto a los parámetros a evaluar, como a los puntos de corte entre categorías, e
incluso al algoritmo que define la categorización de la calidad embrionaria.
1.3.1 Intervalo de observación en D+2 y D+3
El intervalo de observación recomendado es:
- D+2: 44-47 horas post inseminación.
- D+3: 67-71 horas post inseminación.
1.3.2 Parámetros evaluados en el estadio de D+2 y D+3
- Número celular y ritmo de división.
- Porcentaje y tipo de fragmentación celular.
- Desigualdad en el tamaño de los blastómeros.
27. 26 Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones).
- Contorno del blastómero.
- Visualización de núcleos y grado de multinucleación.
- Anillo acitoplasmático.
- Presencia de vacuolas.
- Zona pelúcida.
- Grado de compactación/adhesión temprana.
- Pitting o moteado.
Número celular y ritmo de división
Son escasos los estudios que pueden aportar un esquema claro asignando tasas
de implantación diferentes para cada número celular o ritmo de división. En
general, la bibliografía consultada no discrimina este parámetro de otros que
pueden influir claramente en el potencial implantatorio: multinucleación,
punto de corte de fragmentación, exclusión de la observación en D+2, etc. (De
Placido et al., 2002; Fisch et al., 2001; Neuber et al., 2003; Racowsky et al., 2003).
Apoyándonos en las principales publicaciones, y en los resultados de la
encuesta multicéntrica que se organizó por la comisión de ASEBIR en el ámbito
nacional, se puede esbozar una clasificación según el número de células para el
D+2 y el ritmo de división de D+2 a D+3 (Desai et al., 2000; Hardarson et al.,
2001; Van Royen et al., 2001); ver imágenes 27, 28 y 29.
Imagen 27. Número celular, estadios celulares de 2 a 5 blastómeros.
28. Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones). 27
Imagen 28. Número celular, estadios celulares de 6 a 8 blastómeros.
Imagen 29. Número celular, estadios celulares de 9 a 10 blastómeros.
Transferencia en D+2:
Con los estudios actuales es posible agrupar los embriones en función de la tasa
de implantación según el número de células observadas, de mejor tasa a peor
tasa de implantación:
- 4 células.
- 2 ó 5 células.
- 3 ó 6 células.
- 1 o más de 6 células.
Si bien no se encuentran diferencias evidentes entre 2 ó 5 células, la presencia
de 5 células tiende a aportar mejor tasa de implantación; situación que se repite
en el siguiente grupo, 3 ó 6 células.
Transferencia en D+3:
La valoración del preembrión en D+3 es dependiente del ritmo de división entre
D+2 y D+3.
29. 28 Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones).
Con los estudios actuales es posible agrupar los embriones en función de la tasa
de implantación según lo expuesto en la tabla III:
Tabla III. Agrupación del tipo embrionario según evolución de la división celular, de mejor a peor tasa de
implantación.
Porcentaje y tipo de fragmentación celular
La presencia de fragmentos celulares es común en los embriones humanos y no
siempre se correlaciona con una tasa de implantación baja.
Cuando el grado de fragmentación no supera el 20% (Hardarson et al., 2001; Van
Royen et al., 1999; Ziebe et al., 1997) o bien el 25% (Alikani et al., 2000;
Racowsky et al., 2003), la implantación del preembrión no está comprometida.
La observación habitual de los grados de fragmentación no nos permite resolver
diferencias inferiores a 10 puntos porcentuales, por tanto ambos puntos de corte
(20% y 25%) son igualmente aceptables.
Además del porcentaje de fragmentos, también el tamaño y la distribución de
los mismos se correlaciona con la probabilidad de implantación (Alikani et al.,
2000). Cuando predominan los fragmentos de gran tamaño repartidos por todo
el preembrión, que pueden incluso confundirse con células pequeñas, las
posibilidades de implantación son escasas. Este patrón de fragmentación es el
denominado “Tipo IV” (Alikani and Cohen, 1995).
El tratamiento de este parámetro es aplicable tanto a D+2 como a D+3 y se
pueden evidenciar cuatro grupos de calidad preembrionaria, según el porcentaje
de fragmentación; ver imágenes 30 a 32:
- ≤ 10%
- 11 - 25%
- 26 - 35%
- >35%
30. Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones). 29
Imagen 30. Preembriones de 4 y 8 blastómeros con fragmentación aproximada al 10%.
Imagen 31. Preembriones con fragmentación aproximada entre 11 - 25%
Imagen 32. A, preembrión con fragmentación > 35%; B, preembrión con fragmentación tipo IV.
31. 30 Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones).
Desigualdad en el tamaño de los blastómeros
Cuando el zigoto realiza las primeras divisiones mitóticas sus células no
siempre se dividen simétrica y sincrónicamente. Un preembrión con divisiones
sincrónicas y simétricas presentará 2, 4, 8 ó 16 células de tamaño similar.
Generalmente se asocia la desigualdad de tamaño celular con una clara disminución
en la capacidad implantatoria (De Placido et al., 2002; Hnida et al., 2004; Steer et al.,
1992; V Blerkom et al., 2000; V
an eeck, 1999a).
Según Hardarson, un preembrión de 4 células con división asimétrica es aquel
en el que la diferencia entre el diámetro de los blastómeros mayor y menor
supera el 20% del diámetro del menor, relacionándose esta desigualdad en el
tamaño celular con una disminución en el potencial implantatorio del
preembrión; ver figura 3 e imagen 33 (Hardarson et al., 2001).
Figura 3. Relación de diámetros según esquema propuesto por Hardarson.
Imagen 33. A, relación del 16% entre blastómeros; B, relación del 24% entre blastómeros.
32. Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones). 31
Cuando las divisiones celulares no son sincrónicas, es decir, cuando los embriones
no se encuentran en 2, 4, 8 ó 16 células, es evidente que coexisten células de dos
ciclos celulares distintos. Esto implica que cuando vemos embriones de 3, 5, 6, 7, 9,
etc., blastómeros debemos esperar ver dos tamaños celulares diferentes (Scott, 2003).
En un preembrión de 3 células, una de ellas debe corresponder a un blastómero
de un preembrión de 2 células que todavía no se ha dividido y que debe ser
claramente más grande que las otras 2 células, el tamaño de las cuales ha de ser
el esperado para los blastómeros en estadio de 4 células.
Si la citocinesis ha sido simétrica, en un preembrión de 5 células 3 de ellas
deberían tener el tamaño del estadio de 4 células y 2 el del estadio de 8 células.
Es decir, lo esperado sería tener 3 células grandes y 2 pequeñas.
Por lo tanto, la desigualdad en el tamaño de los blastómeros podría ser compatible
con una clasificación buena cuando se manifiesta de la siguiente forma:
3 Células 2 pequeñas + 1 grande
5 Células 2 pequeñas + 3 grandes
6 Células 4 pequeñas + 2 grandes
7 Células 6 pequeñas + 1 grande
Otras combinaciones de tamaños implican divisiones asimétricas con
distribución anómala del citoplasma entre las dos células resultantes.
Contorno del blastómero
Un blastómero de contorno irregular puede sufrir una alteración fisiológica o estar
dividiéndose (Goyanes et al., 1990). Se trata de una característica cuya relación con
el potencial de implantación es difícil de valorar, y por lo tanto no se ha incluido
entre los criterios para asignar una categoría a un preembrión; ver imagen 34.
Imagen 34. Contorno irregular.
33. 32 Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones).
Visualización de núcleos y grado de multinucleación
La presencia de dos o más núcleos o de micronúcleos en una célula tiene una correlación
directa con un incremento en la tasa de anomalías cromosómicas embrionarias
(Hardarson et al., 2001). La presencia de blastómeros multinucleados implica baja tasa de
implantación y aumento en la tasa de aborto, aunque se han descrito nacimientos de
niños procedentes de embriones con blastómeros multinucleados (Jackson et al., 1998;
Meriano et al., 2004; Pelinck et al., 1998; V Royen et al., 2003); ver imagen 35.
an
Imagen 35. A, micronucleación; B, binucleación. Las flechas indican la posición de los núcleos.
La observación de los núcleos se dificulta conforme aumenta el número celular
o la fragmentación, precisándose girar el preembrión con movimientos secos de
la pletina, tanto para evaluar multinucleación como uninucleación.
Anillo acitoplasmático
Se caracteriza porque el citoplasma se muestra retraído, dejando un anillo translúcido
amplio sin organelas en la periferia del blastómero. El anillo acitoplasmático en el
preembrión se relaciona con un proceso de lisis celular; ver imagen 36. (Veeck, 1999b).
Imagen 36. Acitoplasmia. Las flechas indican algunas zonas con esta característica.
34. Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones). 33
Presencia de vacuolas
Se asocia con una disminución del potencial de desarrollo. Sin embargo, no
existen evidencias bibliográficas que relacionen con precisión la cantidad de
vacuolas, su tamaño o su distribución entre los blastómeros con la tasa de
implantación. Vacuolas menores de 5 μm de diámetro pueden no comprometer
el desarrollo del preembrión (Veeck, 1999b); ver imagen 37.
Imagen 37. A, presencia de grandes vacuolas; B, vacuola de aproximadamente 5 micrómetros.
Zona pelúcida
Las anormalidades en la zona pelúcida se relacionan con baja tasa de
implantación, debido a la falta de eclosión (Calderón et al., 2002; Gabrielsen
et al., 2001; Ruiz et al., 1999; Veeck, 1999b).
Se ha descrito como zona pelúcida sana aquella que tiene una silueta redonda,
grosor aproximado de 17 μm que además no es homogéneo, ausencia de doble
capa por tabicación de la zona interna, ausencia de abultamientos y aspecto
translúcido (Gabrielsen et al., 2001; Goyanes et al., 1990; Veeck, 1999b); ver
imágenes 38 y 39.
Imagen 38. A, zona pelúcida septada; B, zona pelúcida no circular; C, zona pelúcida homogénea, las
medidas del grosor de la zona pelúcida son semejantes.
35. 34 Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones).
Imagen 39. A, zona pelúcida gruesa; B, zona pelúcida oscura.
Para poder medir aproximadamente el grosor de la zona pelúcida, se
pueden realizar mediciones del tamaño observado en un monitor
conectado al microscopio invertido con una regla, previa calibración de
la medida.
Grado de compactación/adhesión temprana
La compactación temprana es un signo de activación embrionaria que conlleva
un contacto intercelular, la formación de uniones intercelulares y el inicio de la
polarización embrionaria (Gardner, 1989; Veeck, 1999c). Se pueden distinguir
dos grados de compactación; ver imagen 40:
Inicio de adhesión: estadio en el que las células se pueden identificar bien por
separado, aunque con las membranas adyacentes.
Compactación: estadio en el que es difícil diferenciar los blastómeros entre sí.
Imagen 40. A, preembrión sin signos evidentes de inicio de adhesión celular; B, preembrión con signos de
inicio de adhesión celular; C, preembrión compactado.
36. Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones). 35
La bibliografía consultada no aporta datos suficientes para poder incluir aún
este parámetro en un esquema de clasificación embrionaria, posiblemente por
estar muy influenciado por el protocolo y los medios de cultivo utilizados,
aunque sí se pueden sugerir algunas recomendaciones en función del grado de
adhesión y del día de observación (Desai et al., 2000; Wiemer et al., 1996).
Pitting o moteado
Al igual que la adhesión celular, la aparición de este parámetro morfológico
indica activación citoplasmática y debe ocurrir en el momento fisiológico de la
activación embrionaria en D+3. La apariencia es un moteado en piel de naranja
que no ha de confundirse con una extensiva vacuolización (Desai et al., 2000;
Wiemer et al., 1996); ver imagen 41.
Imagen 41. Preembrión con moteado.
1.3.3 Parámetros en estadio D+2 y D+3 incluidos en el sistema de
clasificación
Para decidir qué parámetros morfológicos se pueden incluir en el sistema de
clasificación embrionaria, se buscaron referencias bibliográficas que
confirmaran la relación entre estos parámetros y la tasa de implantación. A
pesar de que la revisión reveló una gran variabilidad en los resultados, algunas
características morfológicas están claramente relacionadas con la tasa de
implantación y pueden formar parte del sistema de clasificación. Del resto de
parámetros, por el momento, es posible elegir algunos para proponer
recomendaciones para la selección embrionaria.
Parámetros incluidos en el sistema de clasificación:
Número celular en transferencias en D+2 según el esquema citado.
37. 36 Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones).
Ritmo de división celular en transferencias en D+3 según el esquema citado.
Fragmentación celular según la siguiente gradación, de mejor a peor tasa de
implantación:
- ≤10%
- 11 - 25%
- 26 - 35%
- >35% o presencia de fragmentación tipo IV según Alikani.
Desigualdad en el tamaño de los blastómeros, de mejor a peor tasa de
implantación:
- Blastómeros iguales o semejantes.
- Blastómeros diferentes según criterios de Hardarson.
Multinucleación, de mejor a peor tasa de implantación:
- Ausencia de blastómeros multinucleados.
- Presencia de blastómeros multinucleados.
Anillo/halo acitoplasmático en D+3, de mejor a peor tasa de implantación:
- Ausencia de anillo acitoplasmático.
- Presencia de anillo acitoplasmático.
Vacuolas, de mejor a peor tasa de implantación:
- Ausencia de vacuolas.
- Vacuolas escasas, diámetro menor de 5 μm.
- Abundantes.
Zona pelúcida, de mejor a peor tasa de implantación:
- Zona pelúcida normal
- Zona pelúcida anormal
La relevancia de las alteraciones en la zona pelúcida se puede matizar por
la posibilidad de realizar una Eclosión Asistida. Se ha descrito que de
este modo aumentan las posibilidades de implantación (Calderón et al.,
2002).
1.3.4 Recomendaciones
Recomendamos la utilización de algunos de los parámetros siguientes para
realizar una selección más fina entre embriones de calidad morfológica
similar.
38. Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones). 37
Favorables:
- En caso de observación de un número de células diferente de 2, 4, 8 ó 16, debe haber
2 patrones de tamaño celular, correspondientes a una asincronía en la división.
- Presencia de uninucleación en todas las células (Moriwaki et al., 2004)
- Inicio de adhesión, siempre que aparezca en D+3 y cuando el preembrión tenga
7 u 8 células. Evaluar según protocolo de cultivo.
- Presencia de moteado en D+3.
Desfavorables:
- Compactación muy avanzada en D+3. Evaluar según protocolo de cultivo.
- Inicio de adhesión o de compactación en D+2. Evaluar según protocolo de cultivo.
- 3 células del mismo tamaño en D+2.
1.4 Valoración morfológica en estadio de mórula y blastocisto. D+4,
D+5 y D+6
La transferencia en estadio de blastocisto está asociada a elevadas tasas de
implantación, ya que, en algunos casos, podría permitir una mejor selección
embrionaria en la transferencia (Gardner et al., 2000). El preembrión en estadio de
blastocisto presenta una estructura compleja, debido al gran número de células y
a la organización de las mismas. Diversos autores han descrito en la literatura
cuáles son los parámetros determinantes de los blastocistos morfológicamente
óptimos y que a su vez se correlacionan con altas tasas de implantación (Balaban
et al., 2000; Dokras et al., 1993; Gardner and Schoolcraft, 1999; Racowsky et al.,
2003; Richter et al., 2001; Shoukir et al., 1998).
1.4.1 Intervalo de observación post-inseminación en D+4, D+5 y D+6
- D+4: 94-98 horas post-inseminación.
- D+5: 112-120 horas post-inseminación.
- D+6: 136-140 horas post-inseminación.
1.4.2 Parámetros evaluados en estadio de D+4, D+5 y D+6
- Compactación en mórula.
- Evolución del preembrión. Organización del blastocisto.
- Grado de expansión del blastocele.
- Zona pelúcida.
- Trofoectodermo.
- Masa celular interna.
- Fragmentación.
- Vacuolización.
39. 38 Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones).
Compactación en mórula
La compactación celular es una característica que presentan los embriones alrededor
del D+4 de cultivo, aunque se inicia en los estadios cercanos a las 8 células. Visualmente
se caracteriza por la apariencia de una masa de células compactada. Esta compactación
se debe a las fuertes uniones que se forman entre las células, lo que impide que se
distingan los contornos de cada una claramente. En esta situación las células dejan de
ser totipotentes, lo que corresponde a un preembrión ya especializado. Por lo tanto, la
visualización de la compactación en D+4 responde a un buen pronóstico de desarrollo.
Esta compactación a veces afecta solamente a algunas de las células del preembrión,
resultando en este caso una “compactación parcial”; ver imagen 42.
Imagen 42. A, mórula con compactación parcial; B, mórula con compactación completa.
Las evidencias bibliográficas no permiten, de momento, extraer conclusiones
sobre una posible correlación entre el tipo de compactación y las posibilidades
de implantación del preembrión, aunque los últimos estudios revelan que la
compactación parcial conlleva una menor probabilidad de implantación.
Cuando se producen compactaciones parciales, la proporción de células que realizan
la compactación se correlaciona con el tamaño del embrión resultante. Los embriones
de tamaño inferior al normal tienen menor potencial implantatorio (Tao et al., 2002).
Evolución del preembrión. Organización del blastocisto
Se considera que un preembrión cultivado in vitro adquiere el estadio de
blastocisto en D+5 o D+6. Este rango varía dependiendo del sistema de cultivo
utilizado. Los embriones con un ritmo de desarrollo más lento pueden llegar a
este estadio en D+7 o incluso D+8, situación que conlleva peor pronóstico
(Khorram et al., 2000; Richter et al., 2001; Shapiro et al., 2001). En el blastocisto
es preciso diferenciar (ver imagen 43):
40. Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones). 39
- Blastocele.
- Zona pelúcida.
- Masa celular interna (MCI).
- Trofoectodermo polar y mural.
Imagen 43. Morfología del blastocisto.
Grado de expansión del blastocele
El aumento del volumen del blastocele es un parámetro de difícil catalogación,
muy dependiente del tiempo; aún más debido a las fases de colapso
blastocélico. Si se observa este suceso, la valoración del preembrión debe
posponerse unas horas, ya que este fenómeno es frecuente en el estadio de
blastocisto, recuperándose la morfología en un periodo corto de tiempo. En
pocas horas el blastocisto es capaz de expandirse considerablemente, con el
consiguiente adelgazamiento de la zona pelúcida; ver imágenes 44 y 45.
La observación de la expansión del blastocele está relacionada con buenas tasas
de implantación (Shoukir et al., 1998).
Imagen 44. A, blastocisto temprano; B, blastocisto en expansión; C, blastocisto expandido.
41. 40 Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones).
Imagen 45. A, blastocisto en eclosión; B, blastocisto eclosionado.
Zona pelúcida
El grosor de la zona pelúcida puede presentar grandes variaciones a lo largo del
desarrollo del blastocisto. Con la expansión del blastocele se produce un
afinamiento de la misma, alcanzando un grosor mínimo cuando el blastocisto
está totalmente expandido y se inicia la eclosión con la ruptura de la zona
pelúcida. Algunos autores consideran el adelgazamiento de la zona pelúcida
como un factor favorable para la implantación (Balaban et al., 2000; Racowsky
et al., 2003; Yoon et al., 2001).
Trofoectodermo
Esta estructura se caracteriza por presentar una monocapa de células
cohesionadas que constituyen la pared del blastocele o cavidad del blastocisto.
El número, la forma y el grado de cohesión nos ayudarán a clasificar el
blastocisto en las distintas categorías:
- Epitelio homogéneo con células elípticas.
- Epitelio irregular.
- Epitelio irregular con células escasas.
Los blastocistos con trofoectodermos subóptimos presentan buenas tasas de
implantación siempre que la masa celular interna tenga una morfología normal
(Kovacic et al., 2004).
Masa celular interna (MCI)
Este es el parámetro más importante para definir las distintas categorías de
blastocistos. La masa celular interna ha de tener una forma ovalada y sus células
deben estar compactadas.
El tamaño favorable varía entre 1.900 y 3.800 μm2. Tamaños inferiores
implicarían un menor potencial implantatorio (Richter et al., 2001). 3.800 μm2
42. Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones). 41
es comparable al tamaño de un blastómero de un preembrión en estadio de 4
células; ver figura 4.
Figura 4. Comparación del tamaño de blastómeros según el estadio de desarrollo y el tamaño de la masa
celular interna.
Fragmentación y vacuolización
Ambos parámetros son indicativos de inicio de apoptosis, pero no hay
referencias bibliográficas que los relacionen directamente con fallos de
implantación.
La presencia de vacuolas y la fragmentación son incompatibles con una buena
morfología del blastocisto y aquellos que las presenten quedarían relegados a la
categoría de embriones de peor pronóstico.
1.4.3 Parámetros en estadio D+4, D+5 y D+6 incluidos en el sistema de
clasificación
Parámetros incluidos en el sistema de clasificación:
Evolución del preembrión. Organización del blastocisto, de mejor a peor tasa
de implantación:
- Aparición del blastocele en D+5.
- Aparición del blastocele en D+6.
- Aparición del blastocele en D+7 o D+8.
43. 42 Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones).
La presencia de dos o más cavidades blastocélicas se correlaciona con peores
tasas de implantación.
Grado de expansión del blastocele:
Cuando el blastocisto está organizado, el blastocele ocupa prácticamente todo
el volumen del preembrión. Este parámetro se correlaciona favorablemente con
la tasa de implantación.
Zona pelúcida, de mejor a peor tasa de implantación:
- Aparece adelgazada en D+5.
- Aparece adelgazada en D+6.
Trofoectodermo, de mejor a peor tasa de implantación:
- Trofoectodermo con epitelio homogéneo y células elípticas.
- Trofoectodermo con epitelio irregular.
- Trofoectodermo con epitelio irregular con células escasas.
Masa celular interna, de mejor a peor tasa de implantación:
- Tamaño de la MCI de 1.900 - 3.800 μm2, con apariencia oval y compactada.
- Tamaño de la MCI de <1.900 μm2, con apariencia diferente a oval y compactada.
Fragmentación y vacuolización:
Según lo expuesto
1.4.4 Recomendaciones
Recomendamos la utilización de algunos de los parámetros siguientes
para establecer diferencias entre embriones de calidad morfológica
similar.
Favorables:
- Compactación en mórula en D+4.
- Signos de eclosión.
Desfavorables:
- Aparición del blastocisto en D+7 o incluso en D+8.
44. Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones). 43
2. ESQUEMA DE GRADACIÓN
DE LA CALIDAD EMBRIONARIA
Las diferentes observaciones de un mismo preembrión deben aportar
información relevante para su clasificación y la asignación de unas
probabilidades de implantación que nos sirvan para tomar decisiones respecto
a su transferencia o congelación.
De todo lo tratado en este documento se puede concluir que no se debe valorar
un preembrión mediante una observación aislada en un momento puntual de su
desarrollo. La categorización debe realizarse tras las múltiples observaciones
realizadas a lo largo del desarrollo preimplantacional. La valoración de la
calidad de un preembrión en un momento determinado de su desarrollo debe
tener en cuenta los aspectos observados en estadios anteriores.
Hemos dejado aparte de nuestras conclusiones finales las observaciones de la
morfología oocitaria y del zigoto, por la falta de consenso sobre las
características cuya influencia sobre la calidad embrionaria es relevante.
Para el sistema de gradación se ha empleado la opción de 4 categorías divididas
en función del potencial implantatorio esperado:
Categoría A: Preembrión de óptima calidad con máxima capacidad de
implantación.
Categoría B: Preembrión de buena calidad con elevada capacidad de
implantación.
Categoría C: Preembrión regular con una probabilidad de implantación media.
Categoría D: Preembrión de mala calidad con una probabilidad de implantación
baja.
La asignación de un preembrión a una categoría dependerá de las variables
morfológicas que se han relacionado previamente.
El sistema propuesto sólo pretende establecer un sistema de gradación. La
decisión sobre qué hacer con un preembrión de determinada categoría es una
opción del laboratorio.
Para realizar la clasificación embrionaria proponemos las tablas IV y V basadas
en la observación de los embriones entre D+2 y D+6.
45. 44 Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones).
46. Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones). 45
2.2 Gradación de la calidad embrionaria en transferencias de D+5 y D+6
La morfología que tiene un preembrión en estadio de blastocisto no debe ser
considerada como un parámetro aislado, tal y como hemos comentado en el
D+3. La calidad final debe ser dependiente de las observaciones realizadas a lo
largo de todo el desarrollo. La observación del preembrión se ha de realizar en
el margen horario indicado en el texto; ver tabla VI.
47. 46 Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones).
2.3 Esquemas de gradación propuestos para el trabajo diario
Opción 1. Para transferencias en D+2 y D+3
49. 48 Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones).
Opción 2. Para transferencias en D+3
50. Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones). 49
2.4 Controversias en el sistema de gradación
Parte de los parámetros hallados en las referencias bibliográficas se han podido
contrastar con el análisis parcial de la encuesta realizada a los laboratorios de
FIV. Otros parámetros no han podido ser evaluados dada la disparidad
intercentros. Y otros han entrado en controversia con lo evaluado en la
bibliografía; ver tabla VII.
Tabla VII. Controversias del sistema de gradación.
3. RECOMENDACIONES GENERALES
- Participar en programas de control de calidad externo que incluyan la
valoración morfológica embrionaria.
- Asegurar poca variabilidad intralaboratorio, ya sea mediante un control de
calidad interno con inclusión de la calidad embrionaria y/o limitando el número
de personas encargadas de esta faceta.
- Disponer de sistemas de captación y almacenamiento de imágenes que, además
de facilitar el control interno, permitan evaluar posteriormente los embriones
sin tenerlos demasiado tiempo fuera del incubador.
- En caso de precisar una mejor clasificación embrionaria, es recomendable
optar por las transferencias en D+3 y respetar las horas de observación
establecidas.
- Utilizar la valoración por categorías descrita en este libro, que está abierta a
nuevas correcciones.
51. 50 Clasificación Morfológica (Oocito y Embriones).
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66. EDITA:
JUNTA DIRECTIVA
Mark Grossmann
Mª Victoria Hurtado de Mendoza
Nieves Cremades
Manuel Ardoy
Mª José de los Santos
Begoña Arán
Jorge Cuadros
Fernando Marina
Jorge Ten
Montserrat Boada
María Bonada
Antonio Urries
con la colaboración de: