1. [Universidad de Puerto Rico en Arecibo] 2011
Hongos Contaminantes
Autores: Colón Morales, María Estefanía
Ríos Román, Erick
Departamento de Biología
Abstract
Esta investigación consiste en la identificación de hongos contaminantes utilizando
diversos mecanismos que permiten establecer la diversidad de características presentes. Su
enfoque es la identificación de estructuras fúngicas que nos permitan la rápida identificación del
hongo presente en el medio de cultivo.
Introducción anaerobios facultativos pero si disponen de
Los hongos son microorganismos un ambiente aeróbico utilizan el oxigeno
eucarioticos filamentosos que por lo general para metabolizar azucares en CO₂ y agua.
no presentan pigmentos fotosintéticos, con Los mohos son hongos filamentosos, las
núcleo rodeado de membrana, con una cuales poseen un micelio verdadero; poseen
reproducción asexual o sexual (a través de la unas hifas tabicadas las cuales se le conocen
plasmogamia- unión de protoplasmas, como septos y su aspecto es usualmente
cariogamia- fusión de núcleo o por meiosis) velloso-algodonoso. Algunos hongos
y una pared celular que contiene quitina, muestran un proceso conocido como el
polisacáridos y polipeptidos. Poseen una dimorfismo que es característico de las
nutrición de absorción ya que tienen especies patógenas ya que pueden crecer
micelios vegetativos implicados en este como un moho o como una levadura. Este
proceso; no tienen la capacidad de fagocitar. proceso de dimorfismo puede ser afectada
Su condición de crecimiento óptimo varían por varios criterios ya sea los nutrientes en
de 0-55°C; con un rango de temperatura de el medio, la temperatura a la que se
20- 30°C y se puede clasificar como encuentren, el oxigeno disponible, pH del
psicrófilicos (0-20°C), mesofilicos (0-50°C) medio y su patogenicidad.
y los termofilicos (20-50°C). A diferencia de Ya descrito las características se
las bacterias, los hongos son acidofilicos ya puede proceder hablar acerca de la
que crece en un pH de 5.6 a 6.8. identificación de los hongos que se realiza
Los hongos pueden subdividirse en identificando la macroscopia y la
hongos unicelulares (levaduras) u hongos microscopia que posea el hongo
multicelulares (mohos). Las levaduras son desconocido. En la macroscopia se identifica
hongos no filamentosos que por lo general por su forma y tamaño (textura, superficie,
crecen por gemación, con una morfología aspecto, consistencia), color de la superficie
que puede ser globosa, ovoide, cilíndrica o o el reverso y la difusión del pigmento en el
alargada. En ocasiones forman cadenas medio. La microscopia es un proceso más
alargadas de células alargadas conocidas complejo ya que constituye mayormente en
conocidos como el pseudomicelio. Se le la identificación del micelio o de la hifa. La
reconocido la capacidad de crecer como clasificación de los micelios o de las hifas se

2. [Universidad de Puerto Rico en Arecibo] 2011
puede llevar a cabo por una serie de ser patógenos es decir causante de
factores: su origen ya sea que la misma por enfermedad a cualquier persona que esté en
la presencia de hifas verdaderas (formadas a contacto. La vía más propensa es la aérea
partir de la germinación de conidias o cuando sin darnos cuenta lo inhalamos del
esporas; propias de los hongos filamentosos) aire. Para tomar una muestra de estos, existe
o seudohifas (a partir de gemación; su un medio rico antibiótico que permite su
función (micelio reproductivo/ aéreo o crecimiento es el medio Sabouraud. Como
micelio vegetativo); por su morfología ya propósito de esta investigación se estuvo
sea filamentoso o unicelular; por su identificando si había presencia de hongos
diámetro (micelio macrosifonado y micelio en un lugar escogido dentro de la
microsifonado); por la presencia o Universidad de Puerto Rico en Arecibo. Por
ausencia de pigmentos ya sea un micelio lo que se plantea la siguiente premisa:
hialino (carece de color) o un micelio ¿Tendrá presencia de hongos la muestra
pigmentado (posee pigmentos en sus obtenida de la Oficina de Servicios Médicos
alrededores); por la presencia o ausencia en los previos de la Universidad y otra
de divisiones o septos ya sea un micelio muestra tomada fuera de las mismas?
septado (micelio tabicado que es
característico de los hongos filamentosos y Materiales y Métodos
que ayuda a la formación de poros que Este estudio se realizó como parte
permiten el transporte activo o pasivo de del laboratorio del curso de micología
nutrientes. Existen cuatro tipos de poros: medica en la Universidad de Puerto Rico en
poro simple, microporos, doliporo, o poro Arecibo. Las muestras fueron recopiladas en
rodante) o un micelio cenocítico (no posee los previos de la Universidad y en otros
divisiones). lugares donde se pensó que pudieron
Hoy en día en nuestro medio encontrarse hongos contaminantes que
ambiente existe una gran cantidad de hongos pudieran adherirse al medio de cultivo antes
contaminantes. Que se encuentran en lugares establecido. Para la obtención de estos
como los suelos, aire, heces, frutos y demás. hongos contaminantes se utilizo el medio de
La mayoría se reproducen de forma asexual cultivo Sabouread.
por medio de la liberación de esporas. Lo
que provoca que su proliferación se dé con Materiales
mayor facilidad en el ambiente. Logrando su Laminillas y cubre-objetos
crecimiento en tan solo 48 hrs y con sus Aguja de inoculación
estructuras de reproducción completas de 3 a Cinta adhesiva
5 días. Sin embargo, algunos pueden llegar a “Lactophenol Cotton Blue Wet Mount”
afectar al ser humano de forma adversa. Esto Medio de Cultivo Sabouread (varios)
ocurre cuando dichos hongos sobreviven y Placas esteriles
se desarrollan a temperaturas de 37ºC o más Mechero
son conocidos como oportunistas. Esta Pinzas
característica nos indica que estos llegan a

3. [Universidad de Puerto Rico en Arecibo] 2011
Observación macroscópica de los hongos sostener la laminilla y la misma permite que
La observación macroscópica se le pueda agregar agua para que los
consiste en exponer una placa con un medio hongos puedan crecer en el medio.
de cultivo Sabouraud en un determinado Primero se coloca agua en las
lugar para que las esporas en el ambiente divisiones de la placa. Luego se toma un
puedan alojarse en la superficie del medio medio de Saboureaud que no esté
de cultivo. Se requiere esperar un periodo de contaminado y se corta el mismo en
10 minutos. Luego de la exposición se cuadrados pequeños. Uno de esos cuadrados
requiere incubar las placas entre 5-7 días a es luego transferido a una laminilla que está
una temperatura de 20 a 25°C. Luego de ubicada en el soporte de la muestra. Después
pasado los días de incubación se observa y se toma el hongo previamente incubado y
se anota las características macroscópicas con una aguja de inoculación se transfiere
del hongo contaminante: por ej. el tipo de una pequeña cantidad de la muestra al
colonia fúngica, tiempo de crecimiento, medio de cultivo colocado en la laminilla
aspecto de las colonias, ya sea, forma, previamente. Es importante que al momento
textura, superficie y color y si hay de hacer esta transferencia esta muestra sea
producción de pigmentos. colocada en las esquinas del medio para que
la misma se pueda difundir fácilmente en los
Observación microscópica de los hongos alrededores. Más adelante se coloca el cubre
(Cinta adhesiva) objetos sobre el medio y se tapa la placa y se
En la observación microscópica coloca la misma en una incubadora por un
utilizando cinta adhesiva consiste en tomar periodo de 4-7 días (dependiendo del tipo de
una muestra de un hongo previamente hongo). Luego de pasado el tiempo; en una
incubado con una cinta adhesiva colocada en laminilla se coloca una gota de lactofenol
la superficie del mismo. Se le incorpora una (actúa como agente de soporte y tiñe el
gota de lactofenol a una laminilla y encima micelio y las esporas de color azul).
de la misma se coloca la cinta. Limpie con Finalmente, observamos la muestra en un
cuidado la muestra preparada y obsérvela en microscopio en un objetivo de 4X y
un microscopio. aumentamos paulatinamente hasta llegar a
100X.
Observación microscópica de los hongos Resultados:
(“Wet-mount”) Hongo desconocido #1
Luego de incubado el medio de
En la observación microscópica de
cultivo contaminado por un periodo de 3 a 5
los hongos se requiere la preparación de un
días se observo el crecimiento del hongo
“wet mount” utilizado no solo para
con las siguientes características
identificar con mas especificidad las
macroscópicas: color de la superficie (color
estructuras fúngicas si no para que las
verde con halo micelial blanco), con un
mismas no se vean afectadas. Esta
aspecto plano, polvoroso y aterciopelado y
preparación consiste en obtener una placa
que en su reverso no presenta pigmentos. En
que posea soporte ya que la misma permite

4. [Universidad de Puerto Rico en Arecibo] 2011
su microscopia el hongo desconocido
Fig 1.3 A. fumigatus bajo el microscopio
presento una cabeza aspergillar que contenía
teñida con azul de algodón. Se pueden
una vesicula semiredonda y conidióforos
observar claramente sus estructuras
cortos que son altamente caracteristicos de
reproductoras. Posee conidióforo,
los Aspergillus sp.
esterigmas y cabeza aspergilar.
Hongo desconocido #2
Luego de incubada la muestra
obtenida se observa el crecimiento del
hongo desconocido en el medio de cultivo.
Este hongo desconocido en su macroscopia
presenta un color naranja en la superficie y
un color naranja difuso por el medio en el
reverso; presenta un aspecto aterciopelado y
Fig. 1.1- Muestra del medio Sabouraud velloso al mismo tiempo, y tiene una
contaminado elevación a través del medio. En sus
características microscópicas se observa la
presencia de macroconidios fusiformes
presentes en la laminilla, posee sus
estructuras especializadas: sus conidióforos
delgados y la misma es septada y hialina.
Figura 2.1 Color de la superficie
Fig.1.2- Colonia de Asperguillus Fumigatus
Las figuras 1.1 y 1.2 muestran un medio de
cultivo contaminado e identifican una
colonia de A. fumigatus. Ambas imágenes
evidencian el crecimiento de hongos que
fueron aislados de la oficina de Servicios
Figura 2.2 Color del reverso
Médicos en los previos de Universidad.

5. [Universidad de Puerto Rico en Arecibo] 2011
Figura 2.3 Microscopia del hongo
Figura #2 Fusarium
Tabla 1.1- Características macroscópicas de hongo aislada
Colonia Color adverso Forma Elevada Color Días
Aspergillus Verde con Plana, polvosa Sí tiene No presenta 3 a 5 días
fumigatus halo blanco y pigmentos
aterciopelada,
con un tamaño
ilimitado
Fusarium Color Aterciopelada, Llana Pigmento 3 a 5 días
spp. anaranjado vellosa-seca naranja
Conclusión:
Para concluir, los resultados obtenidos con mayor facilidad al observar sus
durante este trabajo por medio de las características microscópicas distinguiendo
técnicas de cultivo permitieron identificar la su cabeza aspergilar, conidióforo,
presencia de crecimiento fúngico. Por lo microconidia y vesícula semirrendonda.
tanto, la hipótesis antes presenta es cierta, Finalmente se encontró que el hongo
afirmando que la muestra aislada de la desconcido #2 en el medio era Fusarium sp
oficina de Servicios Médicos en la UPRA y ya que al realizarse el proceso de
la otra muestra tomada fuera de esos lugares, identificación microscópica del hongo
si tenía presencia de hongos. El hongo encontramos que el hongo poseía
desconocido #1 encontrado lo fue macroconidios fusiformes que es altamente
Asperguillus fumigatus, el cual se identifico característico de este grupo.

6. [Universidad de Puerto Rico en Arecibo] 2011
Referencias
Bennet J., Agentes antimicóticos, capítulo 50 de
Goodman y Gilmans, Las bases farmacológicas
de la terapéutica. 8a. edición. 1991.
Bonifax, A. (2010). Micología Médica
Básica. Tercera edición. Mc-Grill-Hill
Interamericana Editores S.A. de C.V.
“Aspergillusfumigatus”. (s.f). Recuperado de 28
de septiembre de 2011 de
http://www.doctorfungus.org/thefungi/Aspergillus_fumigatus.php
“Los microbios en la red, enfermedades infecciosas
y micobiología médica”. (s.f). Recuperado el 30 de
septiembre de 2011 de http://www.losmicrobios.com.
ar/microbios/aspergillus.html