Este documento describe una práctica de laboratorio realizada por estudiantes para identificar diferentes tipos de hongos. Los estudiantes inocularon muestras de hongos de alimentos como naranja, queso y pan en placas de Petri con medio de cultivo. Luego aplicaron tinción para observar la estructura de los hongos y esporas al microscopio y así identificar los tipos de hongos.

1. Centro de Bachillerato Tecnológico Industrial y de Servicios Noº128
Práctica 8. Hongos.
Sub módulo 3: Ejecuta técnicas de identificación de microorganismos con base en las normas.
Equipo 3. Integrantes: Cabral Brandon, González Lesly, Hernández Nayelli, Hernández Alan, Jiménez Fa-biola,
Lagunas Itzel, Lira Vanesa, Mata Lizbet.
Facilitadora: Ing. Acosta Jessica
Fecha: Inició 18 de Noviembre del 2014, 23 de Noviembre del 2014.
Introducción
Los hongos se diferencian mucho de las plantas y
de los animales, razón por la cual pertenecen a
otro reino llamado Fungi. Han jugado y juegan un
papel muy importante en distintas áreas, como la
medicina, la industria y la alimentación.
En esta práctica analizaremos distintas muestras
de hongos procedentes de múltiples alimentos, ta-les
como la naranja, el café, el pan y queso. Reali -
zaremos morfología de colonia, emplearemos la
tinción de Gram y la de tinta Verde de Malaquita y
la tinción algodón lactofenol, cada una nos ayudara
a observar algo específico, y finalizaremos con la
morfología microscópica.
Resumen
Los hongos pueden crecer en ambientes húmedos
y con suficientes nutrimentos.
En el laboratorio microgiológico, se emplean aga-res
con características adecuadas para el creci-miento
de estos organismos, como el agar Sabo-rau.
En esta práctica, se inocularon una serie de placas
de Petri con medio Saborau con hongos que cre-cieron
en algunos alimentos. Posteriormente se
observó el crecimiento de hongos sobre este me-dio,
este lapso es más prolongado que el de las
bacterias. Además, se aplicaron las tinciones co-rrespondientes
para observar la estructura de los
hongos y sus esporas, esto con el fin de identificar
el tipo de hongo y sus características morfológicas.
Abstract
Fungi can grow in moist environments with suffi -
cient nutrients.
In the microbiological laboratory, agars with suita-ble
characteristics are used for the growth of these
organisms, such as agar Saborau.
In this practice, a series of petri dishes were inocu-lated
with medium Saborau with fungus that grew
in some foods. Subsequently, fungal growth on this
medium was observed, this lapse of time is longer
than the lapse of bacteria. Also, the corresponding
stains were applied to observe the structure of fun-gus
and their spores, this in order to identify the
type of fungi and their morphological characteris-tics.
Materiales y métodos
Preparación del medio
Materiales
Matraz
Espátula
Agitador
Mechero de Bunsen
Manguera de látex
Guante de asbesto
Vidrio de reloj
Balanza granataria
Reactivos
Agar Saborau
Agua
Procedimiento
1-Diluir la cantidad necesaria de Agar Saborau en
agua destilada suficiente para 4 placas de Petri.
2-Agitar el matraz y ponerlo a calentar en el me-chero
de Bunsen, empleando el guante de as-besto.
3-Calentar hasta diluir la mezcla y que quede de
un tono cristalino.
4-Envolver las placas de Petri y colocar una cu-bierta
al matraz Erlenmeyer con el agar.

2. 5-Colocar los instrumentos en la olla de presión y
esterilizar a 15 libras de presión por 15 minutos.
6-Sacar los instrumentos de la olla de presión.
7-Montar un triángulo de seguridad con tres me-cheros
de Bunsen encendidos.
8-Preparar las placas y el matraz para el vaciado.
9-Dentro del triángulo de seguridad, vaciar 20 ml
de agar Saborau en cada placa de Petri.
10-Etiquetar las placas y dejarlas solidificar.
Incoculación
Materiales
4 placas de Petri con medio Saborau
Asas de platino
3 mecheros de Bunsen
3 Mangueras de látex
Reactivos
Muestras de hongos (naranja, queso,
pan, café)
Procedimiento
1-Colocar un triángulo de seguridad de mecheros
de Bunsen.
2-Dentro del triángulo de seguridad, tomar una
muestra de hongos e inocular cada una de estas
en las placas de Petri empleando el método de
estriado de crecimiento.
3-Etiquetar las placas y colocarlas en la incuba-dora
a 36° por varios días hasta observar creci-miento
de hongos.
Análisis de colonias y tinciones
Materiales
4 placas de Petri con cultivos de hongos
Asas de platino
Mecheros de Bunsen
Mangueras de látex
Cinta adhesiva
Reactivos
Cristal Violeta
Yodo-Lugol
Safranina
Alcohol cetona
Aceite de inmersión
Agua
Azul de algodón de lactofenol
Verde Malaquita
Procedimiento
1-Aplicar la tinción de Gram:
Colocar una gota de agua en un por-taobjetos.
Tomar una muestra de una colonia
con el asa platino.
Diseminar la muestra sobre el por-taobjetos
Dejar secar el portaobjetos.
Fijar la muestra pasando el portaobje-tos
tres veces por la llama del mechero
de Bunsen.
Agregar una gota de cristal violeta, es-perar
1 minuto y enjuagar con agua.
Agregar una gota de Yodo-Lugol, es-perar
1 minuto y enjuagar con agua.
Agregar una gota de alcohol cetona,
esperar 30 segundos y enjuagar con
agua.
Agregar una gota de safranina, espe-rar
30 segundos y enjuagar con agua.
Colocar una gota de aceite de inmer-sión
en el portaobjetos y cubrir con un
cubreobjetos.
Observar la muestra en el microscopio
a 100x
2-Aplicar la tinción de Verde de Malaquita
Colocar una gota de agua en un portaob-jetos.
Agregar una gota de Verde Malaquita, es-perar
5 minutos y enjuagar con agua.
Agregar una gota de safranina, esperar 1
minuto y enjuagar con agua.
Colocar una gota de aceite de inmersión
en el portaobjetos y cubrir con un cu-breobjetos.
Observar en el microscopio a 100x
3-Para observar esporas:
Colocar una gota de agua en un portaobjetos.

3. Colocar un trozo de cinta adhesiva en el extremo
de un asa de platino y tomar una muestra de un
hongo.
Poner la cinta adhesiva sobre el portaobjetos.
Observar en el microscopio a 40x
Resultados
Se obtuvieron los siguientes resultados:
Morfología de hongos
Medio Color Forma Su-per-ficie
Borde Nú-mero
Saborau 1 Negro Punti-forme
Con-vexa
Irre-gular
21
Saborau 2 Blanco Circu-lar
Con-vexa
Re-don-deado
1
Saborau 3 Negro Irregu-lar
Con-vexa
Irre-gular
9
Saborau 4 Negro Punti-forme
Con-vexa
Irre-gular
15
Medio Tipo Esporas
Saborau 1 Levadura Puntos rojizos
Saborau 2 Levadura Puntos verdes
Saborau 3 Moho Puntos morados
Saborau 4 Levadura ________
Conclusiones
Cabral Brandon:
González Lesly: Como conclusión yo obtengo que
las antibióticos usados tienen diferentes propieda-des,
así como las bacterias que se inocularon ya
que el hijas de ellas si crecían dentro del halo y
otras de ellas no, se puede determinar que esto es
gracias a la eficacia que tienen los antibióticos usa-dos,
respecto a las bacterias inoculadas, algunos
de los si presentaban su halo con un diámetro ex-tenso
así como otras presentaban un halo pe-queño.
En pocas palabras de llega a la conclusión
de que no todos los antibióticos en los que confia-mos
cuando nos encontramos enfermo, actúan de
la misma manera y tienen la misma eficacia que
otro.
Hernández Nayelli: Nos dimos cuenta de los di-ferentes
tipos de hongos que solo en algunos cul-tivos,
estos se cultivaron asi como también el bas-tante
tiempo que estos tardaron en cultivarse.
La importancia de los halos de inhibición que
también nos damos cuentas de su función y que
si funcionan contra estos.
Muy importante la higiene ya que se está traba-jando
con hongos, ya que son alimenticios lo
único que se puede provocar si no se trata con
cuidado es comezón pero si esto se realiza mal
puede llegar a enfermarse así como tratar todo
esto dentro del triángulo de seguridad.
Hernández Alan: Los hongos son organismos eu-cariotas
que intervienen en una gran cantidad de
procesos de simbiosis, además de que algunos de-gradan
la materia orgánica.
Los hongos pueden ser macroscópicos o micros-cópicos,
estos últimos se presentan como levadu-ras,
con formas esféricas que cuentan con peque-ñas
protuberancias conocidas como gemas, y
mohos, hongos filamentosos que liberan esporas.
Algunos hongos representan riesgos potenciales
para la salud y ocasionan enfermedades y patolo-gías
muy graves en los seres humanos, a pesar de
esto, algunos hongos aportan beneficios, como los
hongos del género Penicillum que producen el an-tibiótico
conocido como Penicilina, e intervienen en
el equilibrio entre los ecosistemas.
Jimenez Fabiola: Como conclusión respecto a
esta práctica se pudo observar cómo se llevaba a
cabo el crecimiento de diferentes tipos de hongos
y levaduras que se pueden crear con el tiempo en
diferentes tipos de alimentos y el saber cómo se
van reproduciendo en los medios de cultivos du-rante
algunas horas y los diferentes tipos de hon-gos
que son existentes y cada una de sus caracte-rísticas.
También el observar que resultados se

4. pueden dar a observar una vez que se les han rea-lizado
diferentes tipos de tinciones los resultados
que presentan.
Lagunas Itzel: Existen muchos tipos de hongos de
los cuales algunos son perjudiciales para nosotros,
por tal razón a veces no tomamos en cuenta que
han ayudado en la creación de muchos antibióti -
cos, el más famoso “La Penicilina”. Por otro lado
se encuentran las levaduras, si no existiesen care-ceríamos
de pan y de vino, así como del queso o
de la cerveza. Lo que a veces nos parece muy na-tural.
Lira Vanessa:
Mata Lucero:
Meléndez Araceli: Durante la práctica de morfolo-gía
de hongos llevamos a cabo la incubación de la
bacteria de varios hongos conseguidos por noso-tros
mismos dejando honguear algunos alimentos
para poder observar su crecimiento de una manera
más favorable mediante su morfología posterior-mente,
fue algo en si interesante.
Discusión
Al igual que en la práctica 7 se pusieron en práctica
el método de halos de inhibición para así poder
medir la eficacia que tienen los antibióticos que se
inocularon, mostrando unos pequeños halos, algu-nos
de los antibióticos inoculados eran más fuerte
que los otros ya que presentaban un halos con un
diámetro más amplio en cambio los que tenían pro-piedades
más débiles mostraban un diámetro pe-queño
en su halo. Ninguno de ellos presento un
halo perfectamente circular, pero se pudo saber
que tanta y cuál de ellos tienen mejor eficacia.
Bibliografía
Ferrer X., (2009). La levadura. Noviembre 26,
2014, de UAR Sitio web: http://www.cui-nant.
com/elllevat1.htm
UEA. (2007). Clasificación de Hongos. Noviembre
26, 2014, de Instituto Nacional de Biodiversidad
de Costa Rica Sitio web: http://www.in-bio.
ac.cr/papers/hongos/clasificacion.htm
Anexos
Clasificación de hongos
De acuerdo con el Diccionario de Hongos (Hawks-worth
et al, 1995), este reino tiene aproximada-mente
103 órdenes, 484 familias, 4.979 géneros y
unas 80.000 especies descritas. Se divide en cua-tro
grupos o filos: Ascomycota, Basidiomycota,
Chytridiomycota y Zygomycota
Ascomycota
Es el grupo más grande. Es-tos
hongos poseen formas
muy variadas: de copa, bo-tón,
disco, colmena y dedos,
entre otras. Agrupa una
gran cantidad de hongos pa-tógenos
de plantas y anima-les
y aquellos que crecen
sobre alimentos, además al-gunos
que se pueden en-contrar
sobre cuero, tela,
Dibujo de Asca
con esporas
papel, vidrio, lentes de cámaras, paredes, etc.
La característica principal, además de su forma, es
la presencia de estructuras reproductoras micros-cópicas
llamadas ascas, que dan origen a las es-poras.
Las ascas están formadas por una célula
especializada con forma de saco en cuyo interior
se forman las esporas. A las esporas producidas
por los ascos también se les llama ascosporas. Los
líquenes pertenecen al reino de los Hongos porque
tienen el mismo tipo de reproducción y el 99% de
las especies conocidas pertenecen al Filo Ascomy-cota
(Ascolíquenes) y solamente 1% al Filo Basi-diomycota.
Basidiomycota
Incluye aquellos hongos con
forma de sombrilla, de coral,
las orejas de palo, los gelatino-sos,
globosos y algunas leva-duras,
entre otros. También in-cluye
los que tienen aspecto
polvoriento o como manchas y
crecen sobre diversas estructu-ras
Dibujo de Basidio
con esporas
de las plantas (flores, fru-tos,
hojas, tallo o raíces). Algunos tienen importan-cia
económica, como las royas y los carbones.

5. A nivel microscópico su característica principal es
la presencia de estructuras reproductoras especia-lizadas
o basidios, las cuales dan origen a las es-poras
pero en forma externa, generalmente en gru-pos
de cuatro, aunque en algunas especies pue-den
encontrarse dos y seis esporas por basidio.
Las esporas se conocen como basidiósporas.
Chytridiomycota
Grupo formado principalmente por hongos acuáti-cos
microscópicos, aunque algunos pueden crecer
también sobre materia orgánica en descomposi -
ción u organismos vivos como gusanos, insectos,
plantas y otros hongos. En este caso, las esporas,
llamadas "zoosporas", poseen flagelos que les per-miten
moverse en medios líquidos.
Zygomycota
Compuesto por hongos microscópicos que pueden
desarrollarse sobre materia orgánica en descom-posición,
aunque también se pueden encontrar en
el tracto digestivo de algunas especies de artrópo-dos,
como los insectos.
Levaduras
Las levaduras se han definido como hongos mi-croscópicos,
unicelulares, la mayoría se multipli-can
por gemación y algunas por escisión. Este
grupo de microorganismos comprende alrededor
de 60 géneros y unas 500 especies. Histórica-mente,
los estudios sobre microbiología enológica
se han centrado en las levaduras pertenecientes al
género Saccharomyces, que son las responsables
de la fermentación alcohólica. Anteriormente se
creía que sólo ellas participaban en el proceso de
producción de alcohol, sin embargo, las diferentes
levaduras no-Saccharomyces, especialmente du-rante
la fase inicial de la fermentación, pueden in-fluir
en las propiedades organolépticas de las bebi -
das alcohólicas. El papel de las levaduras como
agentes fermentadores no fue reconocido sino
hasta 1856 por Luis Pasteur. Las teorías científicas
de esa época reconocían la presencia de éstas en
la fermentación alcohólica, pero eran consideradas
como compuestos químicos complejos, sin vida.
Esta era la teoría mecanística liderada por los quí-micos
alemanes von Liebig y Wöhler. Luis Pasteur,
propuso la teoría vitalística y demostró que las cé-lulas
viables de levaduras causan fermentación en
condiciones anaerobias; durante la cual el azúcar
presente en el jugo es convertido principalmente
en etanol y CO2.
Las levaduras son los agentes de la fermentación
y se encuentran naturalmente en la superficie de
las plantas, el suelo es su principal hábitat encon-trándose
en invierno en la capa superficial de la
tierra. En verano, por medio de los insectos, polvo
y animales, son transportados hasta el fruto, por lo
que su distribución se produce al azar. Existe un
gran número de especies que se diferencían por
su aspecto, sus propiedades, sus formas de repro-ducción
y por la forma en la que transforman el
azúcar. Las levaduras del vino pertenecen a varios
géneros, cada uno dividido en especies. Las espe-cies
más extendidas son Saccharomyces ellipsoi-deus,
Kloeckera apiculata y Hanseniaspora uva-rum,
las cuales representan por sí solas el 90% de
las levaduras utilizadas para la fermentación del
vino. Como todos los seres vivos, tienen necesida-des
precisas en lo que se refiere a nutrición y al
medio en que viven. Son muy sensibles a la tem-peratura,
necesitan una alimentación apropiada
rica en azúcares, elementos minerales y sustan-cias
nitrogenadas, tienen ciclos reproductivos cor-tos,
lo que hace que el inicio de la fermentación
sea tan rápido, pero así como se multiplican, pue-den
morir por la falta o el exceso de las variables
mencionadas.
Mohos
Los hongos (moho) son organismos microscópicos
que viven en la materia animal o vegetal. Ayudan
en la descomposición de la materia muerta y a re-ciclar
los nutrientes en el medio ambiente. Se en-cuentran
presente prácticamente en todas partes y
se les puede encontrar creciendo en materia orgá-nica
como el suelo, los alimentos y la materia ve-getal.
Para poder reproducirse, el moho produce
esporas, las cuales se propagan a través del aire,
el agua o a través de insectos. Estas esporas ac-túan
como semillas y pueden propiciar un nuevo
crecimiento de moho si las condiciones son apro-piadas.
El moho crece y se multiplica en las condiciones
adecuadas, necesitando apenas de la suficiente

6. humedad para hacerlo (por ejemplo en forma de
humedad muy alta, condensación, o agua prove-niente
de una tubería, etc.) y de la materia orgánica
(por ejemplo paneles de techo, paneles de yeso,
empapelados, o alfombras de fibra natural).
Es un hongo que se encuentra tanto al aire libre
como en lugares húmedos y con baja luminosidad.
Existen muchas especies de mohos que son espe-cies
microscópicas del reino fungi, que crecen en
formas de filamentospluricelulares o unicelulares .
El moho crece mejor en condiciones cálidas y hú-medas;
se reproducen y propagan mediante espo-ras.
Las esporas del moho pueden sobrevivir en
variadas condiciones ambientales, incluso en ex-trema
sequedad, si bien ésta no favorece su creci-miento
normal.
Los tipos de mohos más comunes son:
Cladosporium
Penicillium
Alternaria
Aspergillus
Mucor