Este documento describe un laboratorio de bioquímica sobre carbohidratos. Se realizó la prueba de Benedict para identificar monosacáridos y azúcares en jugos comerciales. La prueba involucró diferentes soluciones de carbohidratos que dieron varios colores según su contenido de azúcar. También se hicieron diluciones seriadas de glucosa que mostraron distintos colores dependiendo de la concentración. El documento analiza los resultados y concluye que la prueba identifica azúcares reductores a través

1. Facultad de Ciencias Ambientales y
Agrícolas
Curso: Bioquímica Laboratorio
Catedrático: Walter Mayen
Sección: 1
Glauco Contreras Cossich. Carnet: 1320315
Fecha de entrega: 29/09/16
Laboratorio no. 3
Carbohidratos: Extracción de almidón
OBJETIVOS
1. Conocer la prueba de benedict para monosacáridos con distintas soluciones de
carbohidratos dadas en el laboratorio.
2. Determinar cualitativamente azucares en jugos comerciales de frutas.
ANTECEDENTES
Antecedentes
Los carbohidratos son moléculas formadas por carbono, oxígeno e hidrogeno. Las cuales
varias moléculas más importantes en la vida de los microorganismos la contienen, como por
ejemplo la glucosa. Esta es utilizada por las células para la obtención de energía metabólica,
el glucógeno contenido en el hígado y el musculo, que forma la reserva de energía más
fácilmente accesible para las células del organismo y la ribosa y desoxirribosa que forma
parte de la estructura química de los ácidos nucleicos. Desde el punto de vista químico, los
carbohidratos son polihidroxi aldehídos o cetonas y sus polímeros. Existen tres categorías
principales que se distinguen por el número de unidades de azúcar que los conforman:
monosacáridos, oligosacáridos y polisacáridos. Los polisacáridos liberan a la hidrolisis
centenares o millares de monosacáridos; mientras que los oligosacáridos producen de dos a
10 monosacáridos y los monosacáridos mismos son las unidades mínimas de los
carbohidratos que ya no se pueden hidrolizar. Se les llama carbohidratos debido a que su
estructura química se parece a formas hidratadas de carbono y se representa con la formula
Cn (H2O) (Koolman and Röhm., 2012)
Los carbohidratos poseen diversas funciones en el organismo tales como, combustible
metabólico ( 1 gramo de carbohidrato produce 4 kilocalorías), como precursores en la
biosíntesis de ácidos grasos y algunos aminoácidos y también como constituyentes de
moléculas complejas importantes como lo es, glucolípidos, glicoproteínas, nucleótidos y
ácidos nucleicos. (Pacheco, 2006)
Hay dos familias de monosacáridos, las aldosas y cetosas. Las aldosas y cetosas más
abundantes en la naturaleza tienen entre 3 y 6 átomos de carbono. Normalmente, las cetosas
se denominan insertando una silaba ul en el nombre de la aldosa correspondiente. Los
monosacáridos, son ópticamente activos, esto quiere decir que, hacen girar el plano de la luz

2. polarizada ya que tienen uno o más átomos de carbono asimétricos (quirales). En general,
una molécula con n centros quirales puede tener 2n esteroisomeros. En la nomenclatura de
los monosacáridos se pone habitualmente la letra D o L que corresponda según su
configuración de su último carbono asimétrico. La D significa que el OH en ese carbono se
encuentra en la derecha y la L de izquierda, a diferencia de cuando se escribe d y l en letras
minúsculas que hablan solamente del sentido de rotación del plano de la luz polarizada.
Para identificar carbohidratos existe un método más común, que es la prueba Benedict. Esta
reacción es específica para azucares con grupo de reductores libres (C-O). Todos los
monosacáridos poseen un grupo reductor libre. Los disacáridos como la maltosa y la lactosa
tienen grupos reductores libres, pero la sacarosa no los posee, ya que se llegan a perder estos
grupos reductores de sus componentes cuando se encuentra ya formada. Se basa en la
capacidad del carbohidrato de reducir el Cu +2 a en un medio alcalino. El Cu+1 se oxida y se
precipita en forma de Cu +1, lo que proporciona la coloración positiva de la reacción. La
coloración dependerá de la cantidad de concentración de óxido de cobre y la reducción del
cobre va desde verde, amarillo, anaranjado o rojizo. (Armstrong, 2001)
DIAGRAMA DE FLUJO
DATOS, CALCULOS Y RESULTADOS
Identificar 7 tubos de ensayo.
Colocar 20 gotas de
soluciones azucares y jugos
naturales
Agregar 5 ml del reactivo
Benedict.
Colocar los tubos de ensayo
en baño de maría. Luego de 5
minutos colocarlos en orden
de colores. Anotar.
Colocar 5 tubos de
ensayo con 1 ml de
agua cada uno.
Añadir al primer
tubo 1 ml de
glucosa.
Del tubo anterior
tomar 1 ml y
agregar al segundo
tubo.
Realizar el mismo
procedimiento. Hasta terminar
en el 5to tubo de ensayo.
Colocar otros 5 tubos de
ensayo y agregar 5 ml del
reactivo de Benedict.
Agregar 10 gotas de cada una
de las 5 diluciones de glucosa
que se preparó.
Mezclar bien.
Colocar en baño de
maría durante 3
minutos. Anotar.

3. Tabla 1. Resultado de las soluciones de carbohidratos.
Solución Tiempo/Prueba de Benedict
5 minutos
Maltosa Amarillo
Fructosa Naranja fuerte
Sacarosa Azul
Glucosa Verde
Limon natural Azul con verde
Jugo de manzana procesado Naranja
Tabla 2. Resultado de cantidad de glucosa.
Cantidad 2.5% 1.25% 0.625% 0.3125% 0.1562%
Coloración
Amarillo
Verde
Azul
Anaranjado
Verde
Azul
Verde
Azul
Azul Azul
DISCUSION DE RESULTADOS
La maltosa, al final de la observación el tubo de ensayo tubo un color amarillo. La maltosa
presenta en toda su estructura química un OH hemiacetálico por lo tanto es un azúcar
reductor. Respecto a
La fructosa, es posible observar que dio positivo presentando un color anaranjado, esto ocurre
debido a las condiciones en las que se realiza en un medio alcalino, la cetohexosa (fructosa)
se tautomeriza, lo que quiere decir que se encuentra pasando por un medio enolico,
produciendo glucosa lo que hace que el ion cúprico se reduzca.
La sacarosa dio negativo debido a que no es una azúcar reductora. Ya que sus OH del
Carbono anomérico están siendo utilizados para el enlace glucosidico. La glucosa dio
positivo, es un monosacárido y es un azúcar reductor fuerte.
Los jugos de kerns y de limón natural dieron positiva las pruebas, lo que se deduce que si
contienen azúcares reductoras. La última parte de la prueba, se utilizó distintas cantidades de
glucosa, realizadas por dilución en serie.
La que contenía mayor cantidad de glucosa 2.5% dio positiva. Con forme la cantidad de
glucosa va disminuyendo la prueba de Benedict no encuentra azucares rectores por lo tanto
la solución se torna color azul. Las primeras dos, las cuales se observa una diferencia de
colores que varían entre el amarillo y el verde, es por la cantidad de glucosa. En el tercer tubo
de ensayo la cual se tiene una concentración de 0.625% posee una pequeña cantidad de
azucares reductoras debida a su leve tonalidad de verde en su solución.
CUESTIONARIO

4. 1. Investigar sobre la prueba de Benedict:
La prueba de Benedict se utiliza en química para localizar la presencia de
monosacáridos y azucares reductores. La solución de Benedict tiene entre sus
componentes carbonato de sodio, citrato de sodio y sulfato de cobre. Para realizar esta
prueba se posee una pequeña cantidad del alimento disuelto en agua, se agrega una
pequeña cantidad del reactivo. Si no existe ningún azúcar presente el color de la
solución permanecerá de color azul. En presencia de azúcar el color cambia a verde,
amarillo, naranja rojo y corinto. Un cambio de color confirma la presencia de la
glucosa. La sacarosa no se identifica directamente en esta prueba debido a que no es
una azúcar reductora. (Mendoza, 2005)
2. ¿Qué puede concluir de las diversas coloraciones obtenidas en la primera parte
del experimento?
Las soluciones que tienen más unidades de azúcar cambian de color con mayor
rapidez como lo fueron los jugos. La sacarosa permaneció del mismo color, azul,
debido a que esta no es una azúcar reductora. La mayoría de los tubos de ensayo que
contenían los jugos comerciales presentaron distintas tonalidades de colores dentro
de sus soluciones.
3. Investigue sobre métodos cuantitativos y cualitativos para determinar azucares
en diferentes medios.
- Prueba de Bial: Es una prueba específica para la determinación de pentosas. Cuando
es positiva la prueba su coloración es de color verde brillante.
- Prueba de Molish: Es una prueba específicamente para determinar carbohidratos que
contengan 5 átomos de carbono.
- Prueba de lugol: Se utiliza para identificar almidón. El color azul se debe
posiblemente a la formación de un complejo ioduro de almidón.
- Prueba de Barfoed: Sirve para identificar monosacáridos y algunos disacáridos en
especial los reductores, dan positiva la reacción cuando se calienta ya que se hidroliza
el disacárido. Es posible que se deba debido a la reducción del acetato cúprico a oxido
cuproso.
- Prueba de Fenilhidrazina: Sirve para distinguir oligosacáridos. Los carbohidratos que
solo se diferencian en sus átomos de carbono 1 y/o 2 darán la misma como es el caso
de la glucosa y la fructosa que son isómeros de función.
- Prueba de Benedict: Sirve para identificar soluciones que posean azucares reductores
o carboxilos libres.
- Prueba de Seliwanott: Sirve para identificar cetosas que contengan 5 o más átomos
de carbono, pero se usa específicamente para identificar fructosa.
CONCLUSIONES

5. 1. Los colores calidos denotaban el positivo en la prueba y los azules que
identificaban que la prueba es negativa, lo que quiere decir que no hay azucares
reductores en la disolución.
2. Para la reducción de monosacáridos se pueden utilizar distintas pruebas
cualitativas como la mostrada anteriormente
BIBLIOGRAFIA
Armstrong; Bradley; Bennet. (2001). Bioquímica. 6a ed. Reverté, Barcelona.550 p.
Koolman and Röhm. (2012). Bioquímica: Texto y atlas. 4a ed. Ed. Médica Panamericana,
México.488 p.
Mendoza, L. (2005). Química: Prácticas de laboratorio. 2a ed. INDEC, República
Dominicana. 61 p.