El documento describe un estudio epidemiológico y molecular de infecciones invasivas causadas por Staphylococcus aureus resistente a meticilina (MRSA) adquirido en la comunidad en Argentina. El estudio encontró que la clona ST30-SCCmec IVc fue la causa predominante de infecciones, mostrando resistencia a oxacilina pero sensibilidad a otros antibióticos. Los autores concluyen que el conocimiento de las características clínicas y moleculares de estas infecciones
Legionella es un microorganismo de características muy particulares. De difícil cultivabilidad en el laboratorio, presenta una asombrosa capacidad para desarrollarse en prácticamente todo medio natural acuático estancado o remansado. Es una bacteria de crecimiento lento, con unos requerimientos nutricionales muy exigentes, dichos nutrientes son por lo general escasos en el agua dulce, de otra forma crecerían competidores de Legionella con una tasa de desarrollo más rápida que la de ésta.
Como patógeno responsable de la legionelosis, ha ido creciendo en importancia en nuestro país en los últimos años. Tanto es así que actualmente se contempla un Real Decreto exclusivo para establecer los criterios higiénico-sanitarios para la prevención y control de la legionelosis (R.D 865/2003). El Real Decreto remite directamente a la norma ISO 11731 – parte 1 como procedimiento indicado para el análisis de esta bacteria en las muestras de agua, la cual sólo contempla como método oficial el cultivo en placa. Su uso ha sido de gran utilidad, pero también que presenta significativas limitaciones.
El género Legionella sp es de crecimiento lento y si existe mucha microbiota acompañante puede imposibilitar su detección (Yu 1990, Prats 2002). Puede, también, darse una pérdida de la cultivabilidad de la bacteria después de la recogida de la muestra, durante el tratamiento de la misma (tratamiento, ácido, calor antibióticos, restricción de nutrientes, etc.) (Ohno et al 2003) o después de un tratamiento de desinfección (Cheng YW 2007). También se ha visto que especies del genero Aeromonas y Pseudomonas interfieren en su crecimiento (Cotuk A et al 2005, Al-Sulami et al 2013, Giao MS et al 2011). Además, la variabilidad de resultados puede ser elevada. (Benthan, 2000).
El método alternativo empleado en nuestro estudio es la separación inmunomagnética (Legipid). Este método consiste en un enzimoinmunoensayo combinado con una retención magnética del microorganismo diana, que permite una cuantificación de Legionella de forma rápida y sencilla utilizando un método colorimétrico. En este caso los resultados se obtienen en unidades formadoras de colonias.
Conclusiones:
Los métodos alternativos utilizados muestran ser tanto o más efectivos para la detección de Legionella spp. en muestras de rutina que el método de referencia.
La elección de uno u otro se debe motivar en otro tipo de elementos tales como coste, objetivos del análisis, disponibilidad de medios y personal o el tipo de muestras gestionadas en el laboratorio.
Frente a muestras muy sucias el método que peor respuesta presenta es el cultivo en placa, debido principalmente a la presencia de microbiota interferente.
En el caso de qPCR, esta suciedad puede provocar inhibiciones en la detección debido a sustancias presentes en la muestra.
Best Share Market Tips Provider in India - Osarcapital.com Get the latest Stock Market Advice, Tips & Recommendations for Equities, Mutual Funds, investment.
Legionella es un microorganismo de características muy particulares. De difícil cultivabilidad en el laboratorio, presenta una asombrosa capacidad para desarrollarse en prácticamente todo medio natural acuático estancado o remansado. Es una bacteria de crecimiento lento, con unos requerimientos nutricionales muy exigentes, dichos nutrientes son por lo general escasos en el agua dulce, de otra forma crecerían competidores de Legionella con una tasa de desarrollo más rápida que la de ésta.
Como patógeno responsable de la legionelosis, ha ido creciendo en importancia en nuestro país en los últimos años. Tanto es así que actualmente se contempla un Real Decreto exclusivo para establecer los criterios higiénico-sanitarios para la prevención y control de la legionelosis (R.D 865/2003). El Real Decreto remite directamente a la norma ISO 11731 – parte 1 como procedimiento indicado para el análisis de esta bacteria en las muestras de agua, la cual sólo contempla como método oficial el cultivo en placa. Su uso ha sido de gran utilidad, pero también que presenta significativas limitaciones.
El género Legionella sp es de crecimiento lento y si existe mucha microbiota acompañante puede imposibilitar su detección (Yu 1990, Prats 2002). Puede, también, darse una pérdida de la cultivabilidad de la bacteria después de la recogida de la muestra, durante el tratamiento de la misma (tratamiento, ácido, calor antibióticos, restricción de nutrientes, etc.) (Ohno et al 2003) o después de un tratamiento de desinfección (Cheng YW 2007). También se ha visto que especies del genero Aeromonas y Pseudomonas interfieren en su crecimiento (Cotuk A et al 2005, Al-Sulami et al 2013, Giao MS et al 2011). Además, la variabilidad de resultados puede ser elevada. (Benthan, 2000).
El método alternativo empleado en nuestro estudio es la separación inmunomagnética (Legipid). Este método consiste en un enzimoinmunoensayo combinado con una retención magnética del microorganismo diana, que permite una cuantificación de Legionella de forma rápida y sencilla utilizando un método colorimétrico. En este caso los resultados se obtienen en unidades formadoras de colonias.
Conclusiones:
Los métodos alternativos utilizados muestran ser tanto o más efectivos para la detección de Legionella spp. en muestras de rutina que el método de referencia.
La elección de uno u otro se debe motivar en otro tipo de elementos tales como coste, objetivos del análisis, disponibilidad de medios y personal o el tipo de muestras gestionadas en el laboratorio.
Frente a muestras muy sucias el método que peor respuesta presenta es el cultivo en placa, debido principalmente a la presencia de microbiota interferente.
En el caso de qPCR, esta suciedad puede provocar inhibiciones en la detección debido a sustancias presentes en la muestra.
Best Share Market Tips Provider in India - Osarcapital.com Get the latest Stock Market Advice, Tips & Recommendations for Equities, Mutual Funds, investment.
How I lost 100 pounds and got fit using basic skills, without having to pay a lot of money for special diets or programs. This is it. There's no magic.
I gave this presentation at Ignite San Diego 2013, and am uploading the slides at the request of the organizers. The slides don't make sense without the audio. Video coming soon.
Seminario biología molecular. Luisa Maria Posso Ramirez.
Docente: Lina Maria Martinez S.
Universidad Pontificia Bolivariana, Medellin, Colombia.
2019/2
Estudio del género Neisseria: Neisseria gonorrhoeae y Neisseria meningitidis
Origen histórico, genoma microbiano, caracteristicas microscopicas, fisiologia microbiana, micrografias, cultivo, diagnostico, prueba de sensibilidad antibiotica, prueba de citocromo oxidasa
Nosocomial infections with metallo-beta-lactamaseproducing Pseudomonas aerugi...Elizabeth García
Nosocomial infections with metallo-beta-lactamaseproducing
Pseudomonas aeruginosa: molecular
epidemiology, risk factors, clinical features and
outcomes
Diseña una experiencia de aprendizaje sobre lectura y escritura como
herramientas de aprendizaje transversal integrando recursos digitales.
La experiencia se debe planear en el formato 1 y luego, se socializa en
una presentación Power Point y se sube a un Slide Share, Issu u otro
recurso que genere un enlace para su visualización.
Esta guía es una ayuda para hacer por tu cuenta el retiro mensual, allí dónde te encuentres, especialmente en caso de dificultad de asistir en el oratorio o iglesia donde habitualmente nos reunimos para orar.
Fuente: Emeric Amyot d'Inville, C.M. "Anunciar la Buena Nueva de la Salvación siguiendo las huellas de San Vicente", Vincentiana: Vol. 41: No. 4, Artículo 7.
Guia de las cartas del tarot de el extraño mundo de jack.
Arcanos mayores y arcanos menores.
Primera guía cien porciento en español!
Con 5 tiradas para comenzar predicciones.
Aprende y utiliza este mazo para divertirte.
1. By Diana Grecco Herrera
& Daniel Gallego González
Pontificial Bolivarian University
Faculty of Medicine
Molecular Biology
III Semester
2013 - I
Methicillin-resistant Staphylococcus aureus
ST30-SCCmec IVc clone as the major
cause of community-acquired invasive
infections in Argentina
2. ORIGINAL ARTICLE
Authors:
• S. Fernandez;
• L. de Vedia;
• M. Lopez;
• N. Gardella;
• S. Di Gregorio;
• M. Ganaha; et al.
3. ORIGINAL ARTICLE
Short communication.
Article history:
• Received 5 October 2012.
• Received in revised form
18th December 2012.
• Accepted 19th December 2012.
• Available online January 20th.
• Published by Elsevier.
4. INTRODUCTION
STAPHYLOCOCCUS
• Genus of Gram-positive
bacteria.
• 32 species most of wich
are animal pathogens or
commensals.
• Aerobic and facultative
anaerobic.
• 1μm in diameter.
5. INTRODUCTION
STAPHYLOCOCCUS
• Catalase +, oxidase -,
nonmotile, nonsporing,
noncapsulated.
• Solid media: Grape-like
clustering.
• Liquid media: Short
chains.
• Smears taken from pus:
Singly, pairs, clusters,
short chains of 3 or 4 cells.
6. INTRODUCTION
STAPHYLOCOCCUS AUREUS
• Is the most virulent of all the S.
• Coagulase-positive.
• Found mainly on the skin and
mocous membranes of animals.
• Normal microbial flora.
• Produce toxins and virulent
enzymes.
Cause: Foliculitis, osteomielitis,
necrotizing pneumonia, endocar-
ditis, meningitis and others.
7. INTRODUCTION
METHICILLIN
• Narrow-spectrum β - lactam
antibiotic used against A B
Gram-positive bacteria.
• Inhibits the synthesis of
bacterial cell walls.
• Semisynthetic derivate of
penicillin.
A: β-Lactam Ring
• Penicillinase resistance. B: Thiazolidine Ring
• It is no longer manufactured.
8. INTRODUCTION
METHICILLIN-RESISTANT
STAPHYLOCOCCUS AUREUS
• Methicillin-resistant bacteria appeared at 1960’s in UK.
• Nowadays is a worldwide pandemic.
MECHANISM OF RESISTANCE IN MRSA:
mecA gene Encodes PBP2a Low affinity for β -
lactams RESISTANCE TO METHICILLIN
9. INTRODUCTION
METHICILLIN-RESISTANT STAPHYLOCOCCUS
AUREUS ST30-SCCmec IVc CLONE.
Staphylococcus: Genus.
Aureus: Species.
Methicillin-resistant: Strain.
ST30: Sequence type number 30.
SCC: Staphylococcal Cassette Chromosome.
mec: Gene mecA.
IV: Type of SCCmec.
c: Subtype of IV SCCmec.
Clone: Identical copy of a gene
10. GENERAL OBJECTIVE
To describe the clinical and molecular
epidemiology of current invasive infections
caused by CA-MRSA in adolescent and
adult patients in Argentina.
11. MATERIALES & MÉTODOS
DISEÑO DEL ESTUDIO:
• Estudio de tipo prospectivo, multicéntrico,
observacional.
• Diseñado para evaluar las características
clínicas y moleculares de las infecciones
invasivas por CA-MRSA.
• Argentina, marzo de 2010 - diciembre de
2011.
• 11 hospitales participantes, situados en
la región central del país.
12. MATERIALES & MÉTODOS
SELECCIÓN DE PACIENTES:
CRITERIOS DE INCLUSIÓN
Pacientes ≥ 14 años con infección masiva de MRSA
diagnosticada al ser admitido en el hospital o en 48 horas.
CRITERIOS DE EXCLUSIÓN
Si cumplían con alguno de los siguientes ítems
en los últimos 12 meses:
Hospitalización.
Diálisis.
Residencia en centro de atención durante
mucho tiempo.
13. MATERIALES & MÉTODOS
RECOLECCIÓN DE DATOS: Historias clínicas
• Variables socio-económicas.
• Comorbilidades.
• Uso de antibiótico previo.
• Presentación clínica.
• Resultados principales de laboratorio al inicio del estudio.
• La fuente de aislamiento (Ej: sangre, líquido articular, pleura).
Los datos de seguimiento se pretendieron obtener 90 días
después de finalizar el tratamiento.
14. MATERIALES & MÉTODOS
ESTUDIOS MICROBIOLÓGICOS: MÉTODO
KIRBY-BAUER
• Identificación de S. aureus = procedimientos
de diagnóstico convencionales.
• Almacenamiento a -20°C.
• Llevados a un laboratorio de la U. de Buenos
Aires.
• Pruebas de sensibilidad a los antimicrobianos
= Métodos de difusión de acuerdo con las
directrices del Instituto de Normas Clínicas y
de Laboratorio. (CLSI, 2009). Agar
Müller-Hinton
15. MATERIALES & MÉTODOS
Inóculo suspendido VS.
McFarland: Ácido sulfúrico 1% +
cloruro de bario 1,175%
1. 4-5 colonias de 16-24 h de cto en
una placa de agar.
2. Se suspenden en caldo en o
suero fisiológico al 0,85%.
3. Se compara la turbidez de la
suspensión con el estándar 0,5 de
McFarland.
Usado en la preparación del inóculo
para la prueba de sensibilidad a
antimicro- bianos o antibiogramas.
16. MATERIALES & MÉTODOS
AMPLIFICACIÓN POR PCR:
De una región de ADN que
corresponden a un gen o parte de él.
Las porciones molde de ADN
son flanqueadas por dos
oligonucleótidos que inician la
reacción de polimerización.
Con la DNA polimerasa, Mg como
cofactor, un buffer y dNTP.
17. MATERIALES & MÉTODOS
MÉTODOS DE TIPIFICACIÓN:
Electroforesis en gel de
campo pulsado (PFGE).
Endonucleasas de restricción
de ADN infrecuentes. (SmaI)
Fragmentos de gran tamaño.
(>20kb).
Pulsos alternos de corriente
multidireccional.
21. RESULTADOS
SUSCEPTIBILIDAD ANTIMICROBIANA:
• Las pruebas de sensibilidad antibiótica
revelaron resistencia a la oxacilina (100%),
la eritromicina (9%), clindamicina (6%),
gentamicina (11%), y quinolonas (4%)
22. RESULTADOS
SUSCEPTIBILIDAD ANTIMICROBIANA:
• Todos los aislamientos de MRSA fueron
sensibles a vancomicina, teicoplanina,
linezolid, rifampicina, doxiciclina y trimetoprim /
sulfametoxazol.
Ninguna de las cepas fue multirresistente.
23. RESULTADOS
Caracterización
molecular de los
aislados de MRSA:
• MRSA fue aislado del
70% de los pacientes
y la clona ST30 fue
predominante en el
68%.
C1 C3
24. RESULTADOS
Caracterización molecular de los aislados de MRSA:
En los últimos 6 años la clona que predominó en Argentina fue: CAA clone: ST5-
SCCmec IV-spa t311. Fue reemplazada por la clona ST30- SCCmec IVc-spa t019.
25. DISCUSSION
AUTHORS PHRASE YES NO
“Spread of some epidemic clones into
other regions has produced some
Amorim et al. displacement of previously circulating
(2007); Gardella
et al. (2005)
strains indicating that successful
lineages may have competitive
x
advantages which may be key in the
evolution of this pathogen”.
“Skin and skin structure infections were
the most common primary source for
Klevens et al.
(2007)
invasive CA-MRSA infection. This finding
is in agreement with both recent and old
x
studies”.
26. DISCUSSION
AUTHORS PHRASE YES NO
“Antimicrobial resistance patterns have
been used to distinguish between CA-
Ma et al. (2002); MRSA and HA-MRSA strains, with CA-
Naimi et al.
(2003)
MRSA strains showing greater
susceptibility to several antimicrobial
agents (usually gentamicin,
x
clindamycin, and trimethoprim-
sulfamethoxazole) than HA-MRSA”.
“Suggest the use of monotherapy with
Deresinski
(2009)
vancomycin to treat serious MRSA
infections there are concerns regarding
a diminished efficacy of this agent”.
x
27. PERSONAL CONCLUSIONS
The main factor which has allowed to the massive
proliferation of this bacterial strain is the antibiotics
indiscriminate use. This explains the resistance to
oxacillin, erythromycin, clindamycin, gentamicin and
quinolones, presented by this bacterial strain.
Knowing the clinical and molecular features of bacterial
infections is very important to the development of a
health plan and an appropriate treatment, because
these microorganisms are constantly mutating and
becoming resistant to different antibiotics.
28. PERSONAL CONCLUSIONS
The knowledge of the genetic variability involved in the
virulence and antibiotic resistance determined by PCR
and PFGE methods can provide molecular targets for
antibiotic treatment.
By means of this research it was possible to verify that
the new clones of CA-MRSA have a better capacity to
expand, because they possess more virulence factors
and are better able to survive on the skin of human
beings, which gives them an advantage over existing
clones.
29. REFERENCES
Fernandez S, de Vedia L, Lopez Furst MJ, Gardella N, Di Gregorio S,
Ganaha MC. Methicillin-resistant Staphylococcus aureus ST30-SCCmec
IVc clone as the major cause of community-acquired invasive infections in
Argentina. Infect Genet Evol. 2013:14C:401-405.
Rogers K. Methicillin. Encyclopædia Britannica, Inc. 2013.
Chen L, Chopra T, Kaye K. Pathogens Resistant to Antibacterial Agents.
Med Clin N Am 95, 2011:647-676.
Chandra S. Textbook of Microbiology and Inmunology. Elsevier. 2009:181 –
182.
Forbes, Sahm, Weissfeld. Bailey and Scott’s Diagnostic Microbiology.
Editorial Medica Panamericana. 12th edition. 2007:255p.
Jiménez J, Correa M. Staphylococcus aureus resistente a meticilina: bases
moleculares de la resistencia, epidemiología y tipificación. Iatreia. 2009:22
(2):147-158.
Dufour, Philippe. Jarraud, Sophie. Et al. High Genetic Variability of the agr
Locus inStaphylococcus Species. J Bacteriol. 2002 Feb;184(4):1180-6.