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1 de 30
Universidad de Concepción
Facultad de Medicina
Carrera de Tecnología Médica
Mención Bioanálisis Clínico, Hematología y Banco de Sangre




                                                                   Seminario Teórico




                                                             Nombre     :Sergio Carrasco Anabalón
                                                             Asignatura :Hematología I
                                                             Docente    :T.M Marianela De La Luz Agurto
                                                                         T.M Danilo Andres Henriquez
                                          4 de Mayo 2011
1.   Explicar los principios del recuento automatizado de células.

2.   Describir como se utilizan los principios generales utilizados en los equipos
     hematológicos automatizados.

3.   Señalar la forma en que los equipos automatizados entregan la información
     y como se realiza la interpretación de esta.

4.   Señalar las fuentes de error, interferencias y alarmas que se presentan en
     los equipos.

5.   Explicar brevemente en que consiste el control de calidad de los
     analizadores hematológicos.

6.   Describir las ventajas de la automatización en la Hematología y el Rol del
     Tecnólogo Médico en esta
• Prueba de Laboratorio     Métodos
               Más Solicitada
             • Costo Razonable
                                         Manuales
             • Rutina
Hemograma    • Urgencia



                                         Métodos
             • Cuantitativo            Automatizados
             • Cualitativos
Parámetros


             • Roja                      “Principio
             • Blanca                     Coulter”
  Series     • Plaquetaria
   Wallace Henry Coulter
                                                     Joseph Coulter


                                                 1913, Arkansas, Estados unidos

                                                 Conteo     rápido de  pequeñas
                                                  partículas en un medio líquido
                                                  cuando atraviesan una pequeña
                                                  apertura.



http://www.whcf.org/about/wallace-h-coulter
                                                       Impedancia Eléctrica
Manual de técnicas de laboratorio en
                                                 hematología / Joan Lluís Vives Corrons, Josep
                                                 Lluís Aguilar Bascompte



                                                          Concentración celular en el
  Impulso Eléctrico          N° de células
                                                                   medio
Amplitud del impulso   Volúmen de electrolitos
                                                                 Volumen Celular
      eléctrico             desplazados
   Parámetros entregados:
    ◦ N° de Células
    ◦ Volumen o Tamaño Celular

                                        Volumen
               N° de
            eritrocitos
                                            de            Hto
                                       eritrocitos




    ◦ Volumen corpuscular Medio (VCM)
                  VCM (fl) = Hematocrito L/L x 1000
                             Rcto. Eritrocitos (1012/L)
50
                                                 años




   http://www.whcf.org/about/wallace-h-coulter            http://www.cellavision.com/?id=5223


Contador Coulter Modelo A en 1953                       CellaVision DM1200, 2010
Programa de actualización continua para Medicina General -Hematología. Director: Dr. Luis Martín Abreu. Año 1996
Equipamiento en Hematología, ematología: fundamentos y aplicaciones clínicas. Bernadette F. Rodak
Interrupción    Recuento
                                                                        de Luz       de Células

                                                                     Dispersión      Diámetro
                                                                       de luz         Celular




                                                                1.     Neutrofilos
                                                                2.     Monocitos
                                                                3.     Linfocitos
Hematología Fundamentos y Aplicaciones Clinicas, 2a. Edicion.
Rodak. Medica Panamericana. 2006
   3° Generación de
                                                        Contadores
                                                       Propiedades incluidas:
                 Caracterización
                                                        ◦ Tamaño
                     Celular
                                                        ◦ Forma
                                                        ◦ Contenido de ADN
Identificación                        Aislamiento
                                                        ◦ Distribución antigénica
   Celular                              Celular
                                                        ◦ Actividad Enzimática.
                                                        ◦ Granulaciones
                  Métodos Ópticos
                     basados en
                    propiedades
                  Físicas, Químicas
                  e Inmunológicas
Dispersión Frontal de la Luz
   3 componentes                        
                                             (Fordwar-Scatter, FALS, FS,o FSC)
    1. Sistema Hidráulico:                       Tamaño Celular

    2. Sistema Óptico
          Laser, Filtros y Detectores      Dispersión Lateral (Side Scatter,
                                             SS o SSC)
                                                 Densidad Celular
                                                 Complejidad Nuclear
                                                 Granularidad




                                             3. Sistema Electrónico-
                                                Informático
-   FSC (frontal) (Y) Tamaño
                                                                          Celular
  FSC (tamaño Celular)




                                                                      -   SSC (lateral) (X)
                                                                          complejidad
                                                                            - Canal de la Peróxidasa
                                                                              - Neutrofilos
                                                                              - Monocitos
                         SSC (Complejidad celular)
                                                                              - Eosinófilos
                                                                            - BASO
                                                                              - Basófilos.
Manual de técnicas de laboratorio en hematología. -Escrito por Joan
Lluís Vives i Corrons,Josep Lluís Aguilar Bascompte
Normal   Patológico


                http://www.pathology.vcu.edu/
         Automatización en Hematología- BQ. Xímena Cid
   Pelicula citometria de flujo
B             A                        C
                                                                          Canal A:
                                                                           ◦ Determinación de la
                                                                             concentración de
                                                                             Hemoglobina
                                                                              Cianometahemoglobina



                                                                          Canal B
                                                                           ◦ Recuento celular
                                                                             eritrocitos/Plaquetas
                                                                              Impedancia /Corriente
                                                                               continua


                                                                          Canal C
                                                                           ◦ RDL
Hematologia Fundamentos y Aplicaciones Clinicas, 2a. Edicion., Rodak
                                                                              Citometría de Flujo
Hematología: fundamentos y aplicaciones clínicas Escrito por Bernadette F. Rodak
   50 Años de Automatización   Sensibilidad y Especificad de los equipos.


                                      Distinción de células de otras partículas o
                    Metodología       fragmentos de células del mismo tamaño de
                                      manera confiable

Limitaciones e                        Cúmulos de plaquetas mas grandes pueden
Interferencias                        contarse como leucocitos, lo que produce un
                                      recuento de plaquetas falsamente disminuido y
                                      una posible falsa leucocitosis.




                      Muestra            Mas frecuentes y variadas
Hematología: fundamentos y aplicaciones clínicas Escrito por Bernadette F. Rodak
Hematología: fundamentos y aplicaciones clínicas Escrito por Bernadette F. Rodak
1.  Distribución anormal
2.  Desviación a la izquireda
3.  Linfocitos Atípicos, blastos, eosinofília.
4.  Granulocitos inmaduros
5.  Por encima o por debajo del valor
    normal                                        Utilización de Métodos
6. Computación incompleta                         manuales de Referencia
7. Valores que no concuerdan con el rango
    estandarizado
8. Fuera del alcance del analizador
9. Atipia plaquetaria                            Importancia del Profesional
10. Sospecha de Error
Señalización                                         Conducta del Laboratorio
Citogramas anormales Revisión del extendido
Blastos                        Revisar extendido. Si hay blastos o células anormales realizar el
                               recuento diferencial manual.
Ig                             Presencia de inmunoglobulinas. Revisar el extendido, si es
                               necesario realizar recuento diferencial manual
PLT                            Confirmar recuento de plaquetas por método alternativo ante
                               nuevo paciente o control delta
RBC                            Controlar la hemoglobina por valores delta o críticos.
LPLT                           Plaquetas grandes: debe confirmar el recuento de plaquetas por
                               estimación del extendido o recuento manual con con contraste de
                               fase




                      Hematología: fundamentos y aplicaciones clínicas Escrito por Bernadette F. Rodak
   Control de Calidad                Reglas de Westgard
    Interno:
    ◦ Al comienzo y al Final del
      Día se Miden 3 controles:

-   Control patológico bajo
-   Control normal
-   Control patológico alto




                                               http://sites.google.com/site/ngator/pag3
   Control de Calidad Externo

                                 Evaluación
         • Envió de                             • Laboratorio de
         muestras por                             Referencia
                            • 4 veces al año
         parte del ISP                          • Participación de
                            • 2 veces al año      profesionales del
                                                  área
               PEEC
                                                       Comparación




    ◦ Resultados graficados en Cartas OPSpecs
   Programa de Garantía de Calidad entre Laboratorios de
     hematología (IQAP). “Interlaboratory Quality Assurance Program”
                      • Complementa y
         Software     • Mejora la Rutina

                                                     Control de Calidad Interno,
                                                         asociado con otros
         Envió de     • Informes de cómo              laboratorios vía internet
         datos de       asegurar la calidad
        control de      del laboratorio
          calidad


http://www.beckmancoulter.com/qap/m_land/landing.portal?_nfpb=true&_pageLabel=hematology
1.   Calidad
     a)     Mejora la precisión y exactitud
     b)     Aumento de la confiabilidad de los resultados
     c)     Reducción del Error Humano (Manual)
2.   Disminuye el tiempo de producción
     a)     Procesamiento de mayor cantidad de muestras al mismo tiempo
3.   Mayor Reproductibilidad de los resultados
                     Reproducibilidad (c.v)          MANUAL          AUTOMATIZADO

                      Eritrocitos                    11%                 1%
                      Leucocitos                     16%                 2%
                      Plaquetas                       22%                4%
                      VCM                             9.5%               1%
                      HCM                             10%               1.5%
                                   Álvaro Gómez Díaz, Hematólogo y Oncólogo. Hospital Regional de Medellín, Colombia.
4.   Aumenta la Bioseguridad
5.   Demostración que parámetros nuevos tienen utilidad Clínica (RDW, IPR)
6.   En muestras normales, el análisis automatizado supera ampliamente en
     precisión y exactitud al análisis manual.
   Automatización:    calidad y tiempo

   Desde la invención del principio Coulter (1949) hasta la fecha los avances
    han sido enormes y de gran utilidad en la hematología.

   Costo de los equipos solventados por la alta productibilidad del
    laboratorio

   Resultados confiables y precisos sometidos a un intenso control de calidad

   Rol del Profesional es Indispensable para la evaluación de los resultados y
    la validación del examen
Universidad de Concepción
Facultad de Medicina
Carrera de Tecnología Médica
Mención Bioanálisis Clínico, Hematología y Banco de Sangre




                                                                   Seminario Teórico




                                                             Nombre     :Sergio Carrasco Anabalón
                                                             Asignatura :Hematología I
                                                             Docente    :T.M Marianela De La Luz Agurto
                                                                         T.M Danilo Andres Henriquez

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Optimización de parámetros hematológicos del coulter

  • 1. Universidad de Concepción Facultad de Medicina Carrera de Tecnología Médica Mención Bioanálisis Clínico, Hematología y Banco de Sangre Seminario Teórico Nombre :Sergio Carrasco Anabalón Asignatura :Hematología I Docente :T.M Marianela De La Luz Agurto T.M Danilo Andres Henriquez 4 de Mayo 2011
  • 2. 1. Explicar los principios del recuento automatizado de células. 2. Describir como se utilizan los principios generales utilizados en los equipos hematológicos automatizados. 3. Señalar la forma en que los equipos automatizados entregan la información y como se realiza la interpretación de esta. 4. Señalar las fuentes de error, interferencias y alarmas que se presentan en los equipos. 5. Explicar brevemente en que consiste el control de calidad de los analizadores hematológicos. 6. Describir las ventajas de la automatización en la Hematología y el Rol del Tecnólogo Médico en esta
  • 3. • Prueba de Laboratorio Métodos Más Solicitada • Costo Razonable Manuales • Rutina Hemograma • Urgencia Métodos • Cuantitativo Automatizados • Cualitativos Parámetros • Roja “Principio • Blanca Coulter” Series • Plaquetaria
  • 4. Wallace Henry Coulter  Joseph Coulter  1913, Arkansas, Estados unidos  Conteo rápido de pequeñas partículas en un medio líquido cuando atraviesan una pequeña apertura. http://www.whcf.org/about/wallace-h-coulter Impedancia Eléctrica
  • 5. Manual de técnicas de laboratorio en hematología / Joan Lluís Vives Corrons, Josep Lluís Aguilar Bascompte Concentración celular en el Impulso Eléctrico N° de células medio Amplitud del impulso Volúmen de electrolitos Volumen Celular eléctrico desplazados
  • 6. Parámetros entregados: ◦ N° de Células ◦ Volumen o Tamaño Celular Volumen N° de eritrocitos de Hto eritrocitos ◦ Volumen corpuscular Medio (VCM) VCM (fl) = Hematocrito L/L x 1000 Rcto. Eritrocitos (1012/L)
  • 7.
  • 8. 50 años http://www.whcf.org/about/wallace-h-coulter http://www.cellavision.com/?id=5223 Contador Coulter Modelo A en 1953 CellaVision DM1200, 2010
  • 9. Programa de actualización continua para Medicina General -Hematología. Director: Dr. Luis Martín Abreu. Año 1996
  • 10. Equipamiento en Hematología, ematología: fundamentos y aplicaciones clínicas. Bernadette F. Rodak
  • 11. Interrupción Recuento de Luz de Células Dispersión Diámetro de luz Celular 1. Neutrofilos 2. Monocitos 3. Linfocitos Hematología Fundamentos y Aplicaciones Clinicas, 2a. Edicion. Rodak. Medica Panamericana. 2006
  • 12. 3° Generación de Contadores  Propiedades incluidas: Caracterización ◦ Tamaño Celular ◦ Forma ◦ Contenido de ADN Identificación Aislamiento ◦ Distribución antigénica Celular Celular ◦ Actividad Enzimática. ◦ Granulaciones Métodos Ópticos basados en propiedades Físicas, Químicas e Inmunológicas
  • 13. Dispersión Frontal de la Luz  3 componentes  (Fordwar-Scatter, FALS, FS,o FSC) 1. Sistema Hidráulico:  Tamaño Celular 2. Sistema Óptico  Laser, Filtros y Detectores  Dispersión Lateral (Side Scatter, SS o SSC)  Densidad Celular  Complejidad Nuclear  Granularidad 3. Sistema Electrónico- Informático
  • 14. - FSC (frontal) (Y) Tamaño Celular FSC (tamaño Celular) - SSC (lateral) (X) complejidad - Canal de la Peróxidasa - Neutrofilos - Monocitos SSC (Complejidad celular) - Eosinófilos - BASO - Basófilos. Manual de técnicas de laboratorio en hematología. -Escrito por Joan Lluís Vives i Corrons,Josep Lluís Aguilar Bascompte
  • 15. Normal Patológico http://www.pathology.vcu.edu/ Automatización en Hematología- BQ. Xímena Cid
  • 16. Pelicula citometria de flujo
  • 17. B A C  Canal A: ◦ Determinación de la concentración de Hemoglobina  Cianometahemoglobina  Canal B ◦ Recuento celular eritrocitos/Plaquetas  Impedancia /Corriente continua  Canal C ◦ RDL Hematologia Fundamentos y Aplicaciones Clinicas, 2a. Edicion., Rodak  Citometría de Flujo
  • 18. Hematología: fundamentos y aplicaciones clínicas Escrito por Bernadette F. Rodak
  • 19. 50 Años de Automatización Sensibilidad y Especificad de los equipos. Distinción de células de otras partículas o Metodología fragmentos de células del mismo tamaño de manera confiable Limitaciones e Cúmulos de plaquetas mas grandes pueden Interferencias contarse como leucocitos, lo que produce un recuento de plaquetas falsamente disminuido y una posible falsa leucocitosis. Muestra Mas frecuentes y variadas
  • 20. Hematología: fundamentos y aplicaciones clínicas Escrito por Bernadette F. Rodak
  • 21. Hematología: fundamentos y aplicaciones clínicas Escrito por Bernadette F. Rodak
  • 22. 1. Distribución anormal 2. Desviación a la izquireda 3. Linfocitos Atípicos, blastos, eosinofília. 4. Granulocitos inmaduros 5. Por encima o por debajo del valor normal Utilización de Métodos 6. Computación incompleta manuales de Referencia 7. Valores que no concuerdan con el rango estandarizado 8. Fuera del alcance del analizador 9. Atipia plaquetaria Importancia del Profesional 10. Sospecha de Error
  • 23. Señalización Conducta del Laboratorio Citogramas anormales Revisión del extendido Blastos Revisar extendido. Si hay blastos o células anormales realizar el recuento diferencial manual. Ig Presencia de inmunoglobulinas. Revisar el extendido, si es necesario realizar recuento diferencial manual PLT Confirmar recuento de plaquetas por método alternativo ante nuevo paciente o control delta RBC Controlar la hemoglobina por valores delta o críticos. LPLT Plaquetas grandes: debe confirmar el recuento de plaquetas por estimación del extendido o recuento manual con con contraste de fase Hematología: fundamentos y aplicaciones clínicas Escrito por Bernadette F. Rodak
  • 24.
  • 25. Control de Calidad  Reglas de Westgard Interno: ◦ Al comienzo y al Final del Día se Miden 3 controles: - Control patológico bajo - Control normal - Control patológico alto http://sites.google.com/site/ngator/pag3
  • 26. Control de Calidad Externo Evaluación • Envió de • Laboratorio de muestras por Referencia • 4 veces al año parte del ISP • Participación de • 2 veces al año profesionales del área PEEC Comparación ◦ Resultados graficados en Cartas OPSpecs
  • 27. Programa de Garantía de Calidad entre Laboratorios de hematología (IQAP). “Interlaboratory Quality Assurance Program” • Complementa y Software • Mejora la Rutina Control de Calidad Interno, asociado con otros Envió de • Informes de cómo laboratorios vía internet datos de asegurar la calidad control de del laboratorio calidad http://www.beckmancoulter.com/qap/m_land/landing.portal?_nfpb=true&_pageLabel=hematology
  • 28. 1. Calidad a) Mejora la precisión y exactitud b) Aumento de la confiabilidad de los resultados c) Reducción del Error Humano (Manual) 2. Disminuye el tiempo de producción a) Procesamiento de mayor cantidad de muestras al mismo tiempo 3. Mayor Reproductibilidad de los resultados Reproducibilidad (c.v) MANUAL AUTOMATIZADO Eritrocitos 11% 1% Leucocitos 16% 2% Plaquetas 22% 4% VCM 9.5% 1% HCM 10% 1.5% Álvaro Gómez Díaz, Hematólogo y Oncólogo. Hospital Regional de Medellín, Colombia. 4. Aumenta la Bioseguridad 5. Demostración que parámetros nuevos tienen utilidad Clínica (RDW, IPR) 6. En muestras normales, el análisis automatizado supera ampliamente en precisión y exactitud al análisis manual.
  • 29. Automatización: calidad y tiempo  Desde la invención del principio Coulter (1949) hasta la fecha los avances han sido enormes y de gran utilidad en la hematología.  Costo de los equipos solventados por la alta productibilidad del laboratorio  Resultados confiables y precisos sometidos a un intenso control de calidad  Rol del Profesional es Indispensable para la evaluación de los resultados y la validación del examen
  • 30. Universidad de Concepción Facultad de Medicina Carrera de Tecnología Médica Mención Bioanálisis Clínico, Hematología y Banco de Sangre Seminario Teórico Nombre :Sergio Carrasco Anabalón Asignatura :Hematología I Docente :T.M Marianela De La Luz Agurto T.M Danilo Andres Henriquez