Este documento describe el protocolo para la organogénesis directa de cebolla (Allium cepa) mediante cultivo de tejidos. Explica que la organogénesis es la formación directa de órganos en explantos cultivados sin la formación de callo. Detalla los pasos para el establecimiento del cultivo, incluyendo la desinfección y cultivo de explantos de bulbo en medio de Murashige-Skoog. También cubre la aclimatación de las plantas regeneradas e indica que este método permite obtener 9

1. ORGANOGÉNESIS
DIRECTA

2. ¿QUÉ ES
ORGANOGÉNESIS?

5. Evento morfo
genético que se
caracteriza por
su desarrollo
unipolar.

9. ORGANOGÉNESIS
DIRECTA

12. Formación de órganos
directamente sobre la
superficie
de explantos cultivados
intactos. El proceso no
implica la formación
de callo.

13. APLICACIÓN DE
ORGANOGENESIS
DIRECTA

14. PROTOCOLO PARA
CULTIVO DE
"ALLIUM CEPA"
(CEBOLLA)

15. "ALLIUM CEPA" (CEBOLLA)

16. ESPECIE: Allium cepa L.
, cebolla
VÍA DE REGENERACIÓN:
Organogénesis directa

17. ESTABLECIMIENTO DE LOS
CULTIVOS:
a) Explante utilizado
§ § Bulbos procedentes de campo.
§ § Se corta el bulbo en 4 porciones y
luego se eliminan las catáfilas más
externas. Se siembra la porción basal (>1
cm) del bulbo conteniendo yemas
axilares.
§ § Variedades empleadas: Valcatorce
INTA, Refinta INTA.

18. B) DESINFECCIÓN DEL
EXPLANTE
1. Dos lavado con H20 corriente con 0.04
% Tween.
2. Alcohol 70º durante 1 minuto
3- Desinfección con ClONa (lavandina
comercial: 55,5 g.L-1) 30% 1 hora
adicionado con 0.04% de Tween 20 en
agitación.
4- En condiciones de asepsia, enjuagar
tres veces con agua destilada estéril, 2
minutos cada uno.

19. c) MEDIO DE CULTIVO PARA EL
ESTABLECIMIENTO: (EN TUBOS)
Macronutrientes de Murashige-Skoog
(1962):
(NO3)2NH4 1.650 mg.L-1,
NO3K 1.900 mg.L-1
SO4Mg. 7H20 370 mg.L-1
PO4H2K 170 mg.L-1
SO4Fe. 7H20 27,85 mg.L-1
EDTA Na2. 37,3 mg.L-1

21. ACLIMATACIÓN:
Se lleva a cabo en condiciones de
invernáculo a 20- 25 ºC y 50 % humedad
relativa. Las plantas provenientes del
cultivo in vitro son sumergidas en una
solución de Captan 2 g.L-1 y Benomil 0,5
g.L-1. Con este procedimiento se elimina
el agar de las raíces y a su vez se somete
a las plantas a un tratamiento preventivo
de fungicidas. Posteriormente, se llenan
macetas con vermiculita o perlita estéril.

22. Separan las plantas en forma
individual y se plantan. Durante
los primeros 5 días las macetas se
ubican debajo de un túnel
plástico transparente con el
objeto de mantener la humedad
relativa cerca del 100%.

24. Luego se va levantando el
plástico gradualmente para
lograr la aclimatación progresiva
a la humedad relativa del
ambiente Luego de 4- 5 semanas
las macetas se transfieren a
condiciones a campo con tela
media sombra por 1-2 semanas y
luego al suelo definitivo.

26. RENDIMIENTO DE ESTE PROTOCOLO:
En 90 a 120 días de cultivo in vitro se
obtiene una tasa de multiplicación de 9-
12 plantas/explanto y 36 a 48
plantas/bulbo.
OBSERVACIONES:
La aclimatación de la cebolla a
condiciones ex vitro tiene un porcentaje
de éxito del orden del 90-95%.

27. WEB GRAFÍA
*http://www.ecured.cu/index.php/Organog%C3%A9nesis_(Biote
cnolog%C3%ADa_Vegetal)
* http://www.fao.org/docrep/004/y2775s/y2775s0c.htm
* http://mrsalazar.blogspot.com/2008/09/protocolo-para-
cultivo-de-allium-cepa.html
* http://www.infojardin.com/foro/showthread.php?t=157549
* http://cv.udl.cat/cursos/76304/t7/t7.htm
* http://www.scielo.org.mx/scielo.php?pid=S0186-
29792008000300006&script=sci_arttextt

28. EQUIPO DE
PRODUCCIÓN:
Estefanía Espinosa Soto
Natalia Andrea López Díaz
Andrés Camilo Ramírez Pérez
Juan Camilo Mejía Castro
Sebastián Montoya Restrepo
10°2

29. GRACIAS
2012