pGLO tutorial en español
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Este documento proporciona instrucciones para un taller sobre la transformación de bacterias con el plásmido pGLO y la posterior purificación de la proteína GFP. El taller se llevará a cabo en dos días, comenzando con la transformación bacteriana con pGLO para inducir la resistencia a ampicilina y la expresión de GFP, seguido del cultivo bacteriano y la inducción de GFP con arabinosa.
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Pasos para PCR
La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) permite amplificar grandes cantidades de segmentos específicos de ADN mediante la repetición cíclica de calentamiento, enfriamiento y alargamiento. La PCR utiliza cebadores, nucleótidos, ADN molde y la enzima Taq polimerasa para sintetizar copias del fragmento de ADN de interés, lo que permite su detección e identificación. La PCR ha revolucionado la biología molecular al permitir el análisis de ADN incluso a partir de pequeñas cantidades de m
Metabolismo de las purinas y porfinas
Las purinas tienen una estructura de doble anillo y cumplen funciones como componentes estructurales del ADN y ARN, componentes de cofactores y reguladores de enzimas. Se sintetizan principalmente en el hígado en un proceso de 10-11 reacciones que forman inosinamonofosfato, el cual puede convertirse en AMP o GMP. Las pirimidinas como la timina y citosina están presentes en el ADN, mientras que la citosina y uracilo en el ARN. Se sintetizan en tres etapas
Imnunidad humoral
La inmunidad humoral implica la producción de anticuerpos por los linfocitos B que marcan antígenos para su destrucción. Tiene tres etapas: reconocimiento del antígeno por los linfocitos B, producción y liberación de anticuerpos para atacar el antígeno, y generación de memoria inmunitaria. Los anticuerpos utilizan mecanismos como la neutralización, fijación del complemento, aglutinación y precipitación para hacer que los antígenos sean inofensivos.
Transporte a través de membranas
Las membranas celulares tienen funciones importantes como separar la célula del medio externo y compartimentalizar su interior. Existen dos tipos principales de transporte a través de membranas: mediado y no mediado. El transporte mediado implica proteínas transportadoras como canales iónicos, porinas y bombas de iones que activamente transportan sustancias contra gradientes. El transporte no mediado incluye difusión pasiva según gradientes de concentración.
Ontogenia del "Linfocito B" y "BCR"
El documento describe la ontogenia del linfocito B, la cual ocurre en dos fases: 1) Independiente del antígeno en la médula ósea, donde se produce la maduración del linfocito B desde la etapa Pro-B hasta B maduro. 2) Dependiente del antígeno en los órganos linfoides secundarios, donde el linfocito B maduro encuentra su antígeno específico y se diferencia a célula plasmática o linfocito B de memoria a través de la hipermutación somática y la maduración
Tema 9
Este documento describe los procesos metabólicos de catabolismo en quimioheterótrofos, incluyendo las rutas de respiración aeróbica y anaeróbica y la fermentación. Explica las principales rutas glucolíticas como la ruta de Embden-Meyerhof-Parnas, la ruta de Entner-Doudoroff y la ruta de las pentosas fosfato, así como la transformación del piruvato a CO2 a través del ciclo del ácido cítrico. También describe el transporte de electrones en la
2.8 ciclo de krebs
El ciclo de Krebs (también conocido como ciclo del ácido cítrico) es la vía final de oxidación de carbohidratos, grasas y proteínas en la mitocondria. Consiste en 8 reacciones que generan intermediarios energéticos como ATP, NADH, FADH2 y GTP. Estos intermediarios se utilizan luego en la cadena transporte de electrones y la síntesis de ATP a través de la fosforilación oxidativa.
Unidad VIII Metabolismo de aminoácidos
Este documento trata sobre el metabolismo de aminoácidos. Brevemente resume que los aminoácidos se absorben en el intestino después de la digestión de proteínas y pueden usarse para la síntesis de proteínas, energía o como precursores de otros compuestos. Explica que existen aminoácidos esenciales y no esenciales, y que la degradación de aminoácidos implica reacciones de transaminación y desaminación oxidativa para eliminar el amonio como urea en el hígado.
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Sistema de Complemento Parte I
El documento resume los antecedentes históricos, definición, funciones, clasificación, nomenclatura y vías del sistema del complemento. Butchner y Pfeiffer descubrieron que el suero de animales infectados podía lisar microorganismos. Jules Bordet descubrió que esta propiedad dependía de dos factores, uno termoestable (Ab) y otro termolábil (complemento). El complemento es un conjunto de 30 proteínas que interactúan formando una cascada enzimática para amplificar la respuesta inmunitaria. Posee funciones como lisar bacter
Clase 7 de BQE
1) El documento describe las etapas de la glucólisis y la fermentación láctica, incluyendo los intermediarios y enzimas involucrados. 2) Explica que el fosfato mantiene fosforilados los intermediarios de la glucólisis para retenerlos en la célula y conservar la energía. 3) También compara las diferencias entre el músculo rojo y blanco en términos de su metabolismo y fuentes de ATP.
Inmunidad Innata
El documento describe las características de la inmunidad innata o inespecífica. Reconoce lo propio de lo extraño a través de receptores de reconocimiento de patrones (PRRs) que reconocen moléculas asociadas a patógenos (PAMPs). Cuenta con barreras mecánicas, químicas y células como mecanismos de defensa. Factores genéticos, edad, hormonales y nutricionales la afectan.
Amilasa y lipasa
Este documento proporciona información sobre la amilasa (AMS) y la lipasa (LPS), dos enzimas pancreáticas. La AMS es una pequeña hidrolasa que cataliza la descomposición del almidón y el glucógeno mediante la ruptura de enlaces glucosídicos α-1,4. La LPS hidroliza los enlaces éster de los triglicéridos en ácidos grasos y alcohol. Ambas enzimas se elevan en condiciones como la pancreatitis aguda.
Vectores yacs,ba cs y pacs
Vectores YACs (Cromosoma artificial de levadura; Yeast Artificial Chromosome), BACs (Cromosoma Atificial Bacteriano, Bacterial Artificial Chromosome) y PACs (Cromosoma artificial derivado del fago P1).
Restricción de purinas
El documento habla sobre la restricción de purinas en la dieta para tratar la gota. Explica que las purinas se degradan a ácido úrico y que niveles altos de este causan gota. Detalla el catabolismo de las purinas y tratamientos para la gota, incluyendo medicamentos y dieta baja en alimentos ricos en purinas como carnes y mariscos. Resalta que la mayoría de purinas provienen del metabolismo y solo una tercera parte de la dieta.
Enzimología
Este documento describe las diferentes clases de enzimas y sus funciones en el cuerpo. Explica que las enzimas son proteínas que catalizan reacciones químicas en las células sin destruirse a sí mismas. Luego clasifica las enzimas y describe ejemplos específicos de enzimas, incluidas las transaminasas del hígado, la fosfatasa alcalina y la amilasa pancreática. Finalmente, discute el uso de biomarcadores enzimáticos como la mioglobina y las troponinas para diagnosticar enfermed
Clase 14 glucosidos
El documento describe los glucósidos, compuestos formados por la unión de un azúcar (glicona) a otra molécula (aglicona). Los glucósidos se clasifican según la estructura de la aglicona, como los glucósidos antraquinónicos, fenólicos, flavónicos o cardíacos. La unión entre la glicona y aglicona suele ser un enlace O-glucosídico y los glucósidos se hidrolizan mediante enzimas para separar sus componentes.
Resumen Legendario Bioquimica - Aminoacidos 2016
1) El documento describe los procesos de degradación de aminoácidos y producción de urea en el hígado. Los aminoácidos son metabolizados en el hígado formando amoniaco que puede ser reciclado para formar nuevos aminoácidos o excretado como urea. 2) También describe los sistemas de transporte de aminoácidos a través de las membranas y algunos trastornos de malabsorción como la cistinuria y la enfermedad de Hartnup. 3) Finalmente, resume los procesos de transaminación,
Ontogenia del "Linfocito T" y "TCR"
El documento describe la maduración y desarrollo de los linfocitos T. Los linfocitos T se originan en la médula ósea y maduran en el timo, donde pasan por diferentes etapas definidas por cambios fenotípicos. En el timo, los linfocitos T doblemente negativos se convierten en doblemente positivos y son sometidos a selección positiva y negativa para eliminar los linfocitos autoreactivos antes de migrar como linfocitos T maduros CD4+ o CD8+.
Ciclo de la urea
La urea se produce en el hígado a través del ciclo de la urea, que convierte el amoníaco en urea mediante una serie de reacciones que tienen lugar en las mitocondrias y el citosol. La urea se elimina del cuerpo a través de la orina.
Degradacion de los lo aminoacidos
La degradación de proteínas endógenas implica la degradación de proteínas una vez que han cumplido su ciclo vital o han sufrido alteraciones. Los aminoácidos resultantes se incorporan a la reserva de aminoácidos del organismo. Las proteasas lisosomales y proteasomas degradan proteínas de vida media larga y corta respectivamente.
Bioquimica de la vision
El documento resume la bioquímica de la visión. La retina contiene fotorreceptores llamados conos y bastones que detectan la luz y la convierten en señales eléctricas a través de un proceso llamado fototransducción. Estas señales viajan a través de varias células de la retina y el nervio óptico hasta el cerebro, donde se perciben los objetos. La fototransducción involucra pigmentos visuales como la rodopsina, la transducción y la cascada de señales mediada por GMPc.
Biosíntesis de glucógeno
El documento describe los procesos de biosíntesis y degradación del glucógeno. La biosíntesis implica la fosfoglucomutasa, UDP-glucosa pirofosforilasa y glucógeno sintasa para activar la glucosa y agregarla al glucógeno, y la enzima ramificante para generar ramificaciones. La degradación implica la glucógeno fosforilasa para producir glucosa-1-fosfato, la enzima desramificante para permitir la reacción completa, y la fosfoglucomutasa para
Glicolipidos.pdf
Este documento describe la composición y función de la membrana celular. La membrana está compuesta de lípidos, proteínas y carbohidratos. Los fosfolípidos son los lípidos más abundantes y forman una bicapa anfipática con regiones polares e hidrófobas. Esta estructura le permite a la membrana ser permeable selectivamente, dejando pasar moléculas pequeñas y no polares pero no grandes moléculas polares. Los glicolípidos son lípidos que se proyectan de la superficie celular y
Inmunidad celular
Este documento describe la inmunidad celular mediada por linfocitos T. Explica que los macrófagos fagocitan y digieren antígenos invasores, presentando fragmentos de péptidos en moléculas MHC en su superficie. Los linfocitos T reconocen estos complejos MHC-péptido y se activan, diferenciándose en diferentes tipos de linfocitos T efectores que atacan el antígeno. También describe los roles de los linfocitos T citotóxicos, colaboradores y de memoria en la
Practica 3 gluconato de calcio por complexometria
Este documento presenta el resumen de una práctica de laboratorio sobre el control de calidad de una ampolla de gluconato de calcio 10% mediante titulación complexométrica. El resumen incluye los objetivos, materiales, procedimiento, cálculos y resultados de la práctica, determinando que la concentración de gluconato de calcio en la ampolla (93.18%) cumple con los parámetros de referencia establecidos.
Anemia hemolitica por deficiencia de piruvato kinasa
Este documento describe la deficiencia de piruvato kinasa, una enfermedad hereditaria causada por mutaciones en el gen PKLR que codifica la enzima piruvato kinasa. La deficiencia de esta enzima provoca la descomposición excesiva de los glóbulos rojos y anemia hemolítica. Los síntomas incluyen ictericia, fatiga y piel pálida. El diagnóstico se basa en pruebas de sangre y genéticas. El tratamiento puede incluir transfusiones de sangre, extirpación del bazo o trasplan
Linfocitos T
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Proteinas recombinantes, Insulina recombinante
1) El documento describe los métodos para producir insulina humana recombinante utilizando ingeniería genética, incluyendo la inserción de los genes de la insulina humana en bacterias para que las produzcan a gran escala.
2) También resume los pasos históricos para dilucidar la estructura de la insulina y desarrollar la insulina recombinante, como un tratamiento más seguro para la diabetes.
3) La insulina recombinante producida por bacterias modificadas genéticamente es químicamente idéntica a la insul
Tecnicas moleculares brasil
Este documento describe varias técnicas moleculares útiles en investigación industrial, incluyendo la extracción de ADN, reacción en cadena de la polimerasa (PCR), clonación, transformación, Western Blot, purificación de ADN plasmídico, electroforesis en gel de agarosa y poliacrilamida, y procedimientos para obtener proteínas. Estas técnicas son utilizadas para amplificar, clonar y analizar fragmentos de ADN y proteínas en laboratorios de genética y bioquímica.
Seminario Bio Mol
Este documento describe un estudio sobre la clonación y expresión de genes de la α-amilasa de Bacillus subtilis mutados aleatoriamente en la cepa HB101 de Escherichia coli. Se aisló el gen de la α-amilasa de B. subtilis y se sometió a mutación aleatoria mediante PCR errónea. Luego se insertó en el vector pET-15b y se transformó en E. coli HB101. Finalmente, se comparó la actividad enzimática de la α-amilasa antes y después de la mutación.
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Repaso 2do parcial 2017
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1. También se le llama ciclo del ácido cítrico.
3. El ciclo produce 2 moléculas de CO2, 3 moléculas de NADH y 1 molécula de GTP por cada vuelta completa.
4. Es la vía final común de la oxidación aeróbica de todos los sustratos de la dieta.
La afirmación incorrecta es la 2.
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3) Los resultados muestran que la somatostatina sintetizada presentó la misma actividad biol
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El folleto describe dos días de prácticas de biología molecular que incluyen técnicas como PCR, transformación por electroporación, y purificación de plasmidios. El cronograma detalla las actividades de cada día, que combinan trabajo de laboratorio y discusión teórica. El documento también explica los conceptos teóricos fundamentales detrás de las técnicas practicadas.
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P glo worksheet
This student worksheet contains questions about a pGLO bacteria transformation experiment. It asks the student to define terms related to the experiment such as GFP, transgenic, E. coli, plasmids, ampicillin, and arabinose. It also asks how the student will know if the experiment was successful.
P glo presentation
The Spiller Lab at Rutgers University studies transgenic organisms. Their goal is to create a transgenic bacteria that glows in the dark by taking the GFP gene from jellyfish and inserting it into E. coli bacteria. The GFP gene will be inserted into the bacterial DNA using a plasmid called pGLO. This will allow the bacteria to produce green fluorescent protein and glow, while also conferring resistance to ampicillin, allowing the bacteria to grow on nutrient plates containing the antibiotic.
P glo lab kinesthetic
1. The document provides instructions for a PGLO lab practice involving transforming E. coli bacteria with plasmid DNA.
2. The instructions include labeling micro test tubes, spreading bacteria on agar plates, heat shocking bacteria to allow plasmid entry, and incubating plates overnight to allow bacterial growth.
3. Students are asked to cut out descriptions of 12 steps and match them to diagrams showing how to complete the bacterial transformation protocol.
Match ups answers
The document is a worksheet that asks a student to determine which of 10 animals are most closely related by matching them in pairs. It provides the names of 10 animals - African elephant, kangaroo, horseshoe crab, dugong, crocodile, mountain gorilla, ring-tailed lemur, nine-banded armadillo, three-toed sloth, brown recluse spider, emperor penguin, and possum. The student is instructed to match the animals in pairs of the most closely related.
Manatee fact sheet
Manatees are large, slow-moving aquatic mammals that inhabit coastal waters and rivers. They can grow up to 13 feet long and weigh over 1,300 pounds. Despite their massive size, manatees are graceful swimmers that typically glide at 5 miles per hour but can burst up to 15 miles per hour. Manatees give birth underwater and mothers help their calves reach the surface for their first breath. Manatees are herbivores that consume large amounts of water plants. They are classified as endangered due to hunting and accidental collisions with boats.
Match ups
The document provides instructions for an activity where students are asked to match animals based on which are most closely related. It lists 12 animals and has students work with a partner to determine relationships between the animals. It then has them write down the correct matches.
Elephant evolution tree
Elephants have evolved over millions of years from small forest-dwelling animals to the large land mammals we know today. Early elephant ancestors were about the size of a dog and lived in forests in Africa and Asia as far back as 60 million years ago. Over generations, natural selection led to elephants growing larger in size to survive in more open grassland habitats, developing trunks and tusks, and living in herds for protection and survival.
Dugong fact sheet
Dugongs are large marine mammals that graze on seagrasses along coastlines from East Africa to Australia. They can stay underwater for up to six minutes and breathe either by fully surfacing or standing on their tails. Dugongs spend most of their time alone or in small groups but sometimes gather in large herds, and mothers care for calves for around 18 months. Although now protected, dugongs were historically hunted for their meat and other products, and their populations remain vulnerable.
Evolution beaks modified worksheet
Birds have different types of beaks adapted for eating different kinds of food. The worksheet matches bird beaks to tools that represent their beak functions and has students hypothesize what each bird eats based on its beak. To test their hypotheses, students will need to research each bird species to determine if their predictions about the birds' diets match the actual types of food each bird eats in the wild.
Bird beaks lesson
This document describes the beaks, diets, and habitats of various bird species from around the world. It discusses African spoonbills, lesser flamingos, yellow-naped amazon parrots, speckled pigeons, white-faced whistling ducks, griffon vultures, red-billed hornbills, hammerkops, Egyptian geese, chestnut mandibled toucans, blue and yellow macaws, king penguins, and Magellanic penguins. Each entry provides details about the bird's taxonomy, geographical range, habitat, and diet that is adapted to its particular beak type.
pGLO Tutorial - English
Are you interested in the pGLO™ experiment? Learn more about this hands-on laboratory activity with a FREE download of BioRad’s pGLO™ experiment power point.
Barrett rosa meza-acevedo & lingou
The researchers aimed to bioengineer a new red fluorescent protein tag from cyanobacteriochromes in Thermosynechococcus elongatus. They transfected Jurkat cells with plasmids containing fluorescent protein tags for visualization under advanced microscopes. Electroporation and the plasmid pAcGFP1-Tubulin were found to be most efficient for transfection. Future goals include optimizing expression of their engineered 569 fluorescent tag in mammalian cells.
Barrett presentation valerie metea
The document summarizes steps taken to purify a fluorescent protein tag from a cyanobacteriochrome found in Thermosynechococcus elongatus, including:
1) Transforming E. coli with the gene for the cyanobacteriochrome tag and inducing protein expression.
2) Lysing the cells using a microfluidizer and centrifuging to remove cell debris.
3) Purifying the fluorescent tag protein using a chitin bead column.
4) Analyzing purity using SDS-PAGE gel electrophoresis and a spectrophotometer.
Stefanie yoshizuka pzazz
The document discusses engineering a red fluorescent protein tag from the cyanobacterium Thermosynechococcuselongatus for use as an easily detectable protein marker. The tag would respond to different light wavelengths and could be used to study protein expression and transformation in T. elongatus cells. Existing green fluorescent protein tags from jellyfish require a different light wavelength to be detected. The engineered red tag would use the GAF domain protein and phycocyanobilin chromophore from T. elongatus to fluorescently label and image proteins when expressed in host cells.
Monica's Barrett Presentation
This document summarizes a student research project on bioengineering fluorescent protein tags from cyanobacteriochromes found in Thermosynechococcus elongatus BP-1. The student presented on expressing genes from T. elongatus that produce cyanobacteriochromes, which are light-sensitive blue/green pigments, in E. coli cells. The goal was to engineer red fluorescent cyanobacteriochromes by using a two-plasmid system involving genes for heme oxygenase and reductase in E. coli cells containing the cyanobacteriochrome genes.
Mo's Barret Presentation
The researcher expressed the wrong fluorescent protein from Thermosynechococcus elongatus, with the pelleted proteins being blue instead of the expected yellow. Through DNA sequencing and comparison to published sequences, they determined the expressed protein was gene 0569 instead of the target gene 0911. Contamination of samples or mislabeling likely occurred. The researcher took steps to verify the correct gene, such as sequencing plasmid DNA from older stock and improving lab techniques, to obtain the expected yellow fluorescent protein in future expressions.
Congreso de Biotecnología Arequipa Perú June 2011
This document summarizes research to bioengineer a new red fluorescent protein tag from a cyanobacteriochrome found in Thermosynechococcus elongatus. The researchers aim to develop a small, photostable red tag as an alternative to commonly used green and yellow fluorescent proteins from jellyfish. They use molecular biology techniques like PCR, site-directed mutagenesis, and transfection of E. coli and mammalian cells to express and purify the mutated protein, which they characterize through spectroscopy and microscopy. The goal is to create a useful new tool for cellular imaging applications.
NSF highlight
Stay informed! Mills CBST is funded by the National Science Foundation, Chemical, Bioengineering, Environmental, and Transport Systems (CBET) division. This highlight describes in detail the work of Mills CBST, led by Dr. Susan Spiller.
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Mills CBST power point presentation for the Teachers Teaching Teachers conference held in Lima, Peru, April 2011.
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- 19. Regulación de la expresión del gen ARN Polimerasa araC Operón GFP Gen de GFP araC Gen de GFP araC Gen de GFP Efector (Arabinosa) B A D araC B A D araC ARN Polimerasa Efector (Arabinosa) araC B A D Operón ara
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