El aumento general de las enfermedades degenerativas crónicas asociadas con el envejecimiento hace que el cuidado de las heridas sea una tremenda carga socioeconómica. Por lo tanto, existe una necesidad creciente de desarrollar nuevas terapias para mejorar la cicatrización de heridas cutáneas. El uso de terapias regenerativas es cada vez más popular debido a los procedimientos poco invasivos necesarios para aplicarlos. El plasma rico en plaquetas (PRP) está ganando interés debido a su potencial para estimular y acelerar el proceso de cicatrización de heridas.

1. Revisión
PLASMA RICO EN PLAQUETAS: NUEVAS PERSPECTIVAS PARA EL MANEJO DE
LA CICATRIZACION DE HERIDAS CUTANEAS
Deborah Chicharro-Alcántara 1,2, Mónica Rubio-Zaragoza 1,2,* ID, ElenaDamiá-Giménez 1,2, José M. Carrillo-
Poveda 1,2, Belén Cuervo-Serrato 1,2 ID, Pau Peláez-Gorrea 1,2 and Joaquín J. Sopena-Juncosa 1,2 ID
1 Grupo de Investigación en Medicina Biorregenerativa y Cirugía Aplicada, Departamento de Medicina y
Cirugía Animal, Facultad de Veterinaria, Universidad Cardenal Herrera-CEU, Universidades CEU, 46115
Valencia, España;
debora.chicharro@uchceu.es (D.C.-A.); elena.damia@uchceu.es (E.D.-G.); jcarrill@uchceu.es (J.M.C.-
P.); belen.cuervo@uchceu.es (B.C.-S.); pau.pelaez@uch.ceu.es (P.P.-G.); jsopena@uchceu.es (J.J.S.-J.)
2 Fundación García Cugat de Investigación Biomédica, 08006 Barcelona, España
* Correspondence: mrubio@uchceu.es; Tel.: +34-9613-69000-66015
Recibido: 29 de diciembre de 2017; Aceptado: 15 de enero de 2018; Publicado: 18 de enero de 2018
Resumen: El aumento general de las enfermedades degenerativas crónicas
asociadas con el envejecimiento hace que el cuidado de las heridas sea una tremenda
carga socioeconómica. Por lo tanto, existe una necesidad creciente de desarrollar
nuevas terapias para mejorar la cicatrización de heridas cutáneas. El uso de terapias
regenerativas es cada vez más popular debido a los procedimientos poco invasivos
necesarios para aplicarlos. El plasma rico en plaquetas (PRP) está ganando interés
debido a su potencial para estimular y acelerar el proceso de cicatrización de heridas.
Las citoquinas y los factores de crecimiento que forman el PRP juegan un papel
crucial en el proceso de cicatrización. Este artículo revisa el campo emergente de las
terapias regenerativas en la cicatrización de heridas de la piel con énfasis particular en
PRP y el papel de los factores de crecimiento en el proceso de cicatrización de las
heridas.
1. Introducción
La piel es el órgano más grande en vertebrados, comprende el 10% de la masa corporal
total y cubre toda la superficie del cuerpo1,2. Tiene un papel crucial en defensa y
supervivencia gracias a su capacidad de autorreparación y autorrenovación, que actúa
como una importante barrera desde el entorno exterior al entorno interior3. Una alteración
de la estructura anatómica normal y la integridad funcional de la piel se puede describir
como una herida4. La cicatrización de heridas es un proceso dinámico y coordinado de
reparación de tejidos, que implica la interacción de múltiples tipos de células, factores de
crecimiento, citoquinas y quimiocinas5,6. Si se interrumpe este mecanismo, pueden
aparecer heridas crónicas que no cicatrizan o una formación excesiva de tejido de
granulación llevando a la detención en la fase inflamatoria crónica7.
En los últimos años, la prevalencia general de enfermedades crónicas degenerativas
asociadas con el envejecimiento ha aumentado dramáticamente; de esta forma, las
heridas crónicas representan una carga biomédicasignificativa. Millones de pacientes en
todo el mundo se ven afectados por heridas agudas y crónicas como resultado de
cirugías, quemaduras, infecciones, úlceras por presión y úlceras diabéticas y venosas4.
En los Estados Unidos, más de 6 millones de personas sufren heridas crónicas con un

2. costo anual de $ 25 mil millones8. De los 150 millones de pacientes con diabetes en el
mundo, las ulceraciones del pie que con frecuencia se convierten en heridas que no
cicatrizan representan el 15%9. Casi el 2% de los presupuestos de salud en Europa se
gastan en el tratamiento de heridas crónicas10. La eficacia del tratamiento actual de la
herida crónica se estima en un 50% y es costosa, ya que se necesitan tratamientos
repetitivos11.
A pesar de los avances significativos en la atención médica y la nutrición, existe una
necesidad creciente de desarrollar nuevas estrategias para mejorar la cicatrización de la
herida cutánea. El campo de la medicina avanza rápidamente hacia el desarrollo de
procedimientos poco o no invasivos y tratamientos acelerados que pueden lograr una
morbilidad reducida y una buena recuperación funcional en nuestros pacientes para
mejorar su calidad de vida.
En los últimos años, estos procedimientos simples y rentables han tenido un impacto
potencial reduciendo los costos económicos de los tratamientos médicos generales
estándar12. La medicina regenerativa se puede definir como un campo interdisciplinario
emergente en la investigación biomédica que tiene como objetivo restaurar, regenerar y
reemplazar tejidos y células dañadas13.
El plasma rico en plaquetas (PRP) es una tecnología terapéutica endógena que está
ganando interés en la medicina regenerativa debido a su potencial para estimular y
acelerar la curación de los tejidos14. El PRP se define como un producto biológico
autólogo derivado de la sangre del paciente, y en el que después de un proceso de
centrifugación se obtiene una fracción plasmática con una concentración de plaquetas
superior a la de la sangre circulante15. Las plaquetas desempeñan un papel crucial en el
proceso de curación de heridas gracias a su función hemostática y a la presencia de
citoquinas y factores de crecimiento 16. Hay varios factores de crecimiento que se sabe
están involucrados en el proceso de cicatrización de heridas, como el factor de
crecimiento derivado de plaquetas (PDGF), factor de crecimiento epidérmico (EGF),
factor de crecimiento de fibroblastos (FGF), factor de crecimiento similar a la insulina
(IGF1, IGF2), factor de crecimiento vascular endotelial (VEGF), factor de crecimiento
transformante beta (TGF-β) y factor de crecimiento de queratinocitos (KGF)17-20 (Figura
1).

3. Figura 1. FACTORES DE CRECIMIENTO Y CITOCINAS INVOLUCRADAS EN EL PROCESO
DE CICATRIZACION DEHERIDAS (G-CSF:factor estimulante de colonias de granulocitos; TGF:
factor de crecimiento transformante; MMPS: metaloproteinasas de la matriz; TIMPS: inhibidores
tisulares de las metaloproteinasas; IL: interleucina; PDGF: factor de crecimiento derivado de
plaquetas; FGF: factor de crecimiento de fibroblastos; VEGF: factor de crecimiento endotelial
vascular; EGF: factor de crecimiento epidérmico; KGF: factor de crecimiento de queratinocitos;
GM-CSF: factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos).
Hasta ahora, solo el PDGF (factor de crecimiento derivado de plaquetas) ha sido
aprobado por la Administración de Alimentos y Medicamentos de los Estados
Unidos (FDA) y por las Agencia Europea de Medicamentos (EMEA) para la aplicación
clínica en pacientes. Los factores de crecimiento son un grupo de sustancias
polipeptídicas solubles y difusibles que regulan el crecimiento, la diferenciación, la
proliferación y el metabolismo celular de numerosos tipos celulares. Promueven la
regeneración endotelial y epitelial, estimulan la angiogénesis, la síntesis de colágeno, la
curación de tejidos blandos y la hemostasia.
El uso de factores de crecimiento para promover la cicatrización cutánea ha existido
desde la década de 1940, y se pueden aplicar en una amplia gama de formas, ya sea
mediante la administración tópica o intralesional tradicional o mediante el uso de
andamios específicos o incluso la terapia génica25. Ensayos en animales y humanos han
reportado aplicaciones clínicas exitosas de PRP para úlceras cutáneas crónicas26,27,
heridas cutáneas agudas28,29, quemaduras30 y cirugía plástica y cosmética31,32.
Independientemente de los diferentes enfoques terapéuticos convencionales dirigidos a
la mejora de la cicatrización de heridas, el uso de nuevos tratamientos sigue siendo un
desafío clínico. Hay una búsqueda continua hacia terapias regenerativas para reducir la
carga de atención médica. Los estudios clínicos y experimentales in vivo e in vitro sobre
terapias regenerativas de heridas cutáneas tales como PRP y células madre están
proporcionando resultados alentadores. Por todas las razones mencionadas
anteriormente, este artículo tiene como objetivo revisar el campo regenerativo de la
cicatrización de la herida de la piel enfocado en el plasma rico en plaquetas como un
enfoque terapéutico rentable.

4. 2. Etapas de la cicatrización de heridas
Una profunda comprensión de la base fisiopatológica de la cicatrización de heridas ha
resultado en una mejor atención clínica a lo largo de los años25. La cicatrización de
heridas es uno de los procesos más complejos en organismos multicelulares, que implica
numerosas vías de señalización intra e intercelulares en diversos tipos de células33. Es
un proceso biológico en el que los factores físicos, químicos y celulares están
relacionados con el objetivo principal de la reparación de heridas5.
Las heridas cutáneas pueden curarse por reparación o regeneración y existe una clara
e importante diferencia entre estos dos tipos de curación. La reparación de heridas es un
proceso fisiológico cuyo objetivo es obtener un tejido con características inferiores en
comparación con el original, mientras que la regeneración de heridas tiene como objetivo
reconstruir el tejido lesionado con una copia exacta del original restaurando la morfología
y la función del tejido afectado34,35.
El proceso de cicatrización de heridas típicamente se divide en tres/cuatro fases
superpuestas: hemostasia/inflamación, proliferación celular y remodelación, que están
reguladas por varias células, citocinas y factores de crecimiento que pueden actuar
directamente sobre las células responsables de su liberación, células cercanas o incluso
células distantes25,36,37.
Inmediatamente después de la lesión cutánea, las plaquetas son estimuladas para que
se agreguen y formen un coágulo de fibrina, proporcionando hemostasia y reclutando
varias células diferentes a la herida38,39. La secreción de factores de crecimiento,
citoquinas y otros factores homeostáticos para la cascada de coagulación también tienen
lugar durante esta primera fase24. La etapa inflamatoria se desencadena por la
coagulación y la desgranulación de plaquetas. Esta fase se caracteriza por liberación de
serotonina, histamina y factores bioactivos, lo que permite la llegada de células
inflamatorias como neutrófilos, leucocitos y macrófagos a la zona herida, gracias a un
aumento de la permeabilidad capilar40. Las concentraciones más altas de neutrófilos se
encuentran a partir de 1-2 días después de la lesión, desempeñando un papel principal
en la prevención de infecciones bacterianas con la ayuda de los macrófagos, y también
activan queratinocitos, fibroblastos y células inmunes38. Al final de la fase inflamatoria,
los macrófagos desarrollan un fenotipo profibrótico y antiinflamatorio y secretan TGF-β,
interleucinas y factores de necrosis tumoral5. Estos factores de crecimiento estimularán
el comienzo de la etapa proliferativa en la que tendrán lugar fibroplasia, deposición de
matriz, angiogénesis y procesos de reepitelización35. Durante la etapa proliferativa se
logra el reclutamiento de fibroblastos del tejido circundante no lesionado y la formación
de nuevos vasos sanguíneos gracias a la migración de células endoteliales a través de
la producción de VEGF41. Los fibroblastos activados son responsables de la secreción
de una matriz extracelular que contiene niveles aumentados de colágeno inmaduro tipo
III, que será completamente diferente del colágeno tipo I maduro que se encuentra en la
piel normal y cicatrices maduras38,42. La mayor concentración de colágeno en la herida
está presente aproximadamente tres semanas después de la lesión inicial25. Mientras
tanto, el tapón de fibrina comienza a ser reemplazado por tejido de granulación de 3 a 5
días después de la lesión y la herida comienza a contraerse39. Finalmente, se produce
la última etapa del proceso de cicatrización de heridas conocido como remodelación o
maduración, se observa una disminución en el contenido celular en el área herida como
resultado de la migración y la apoptosis43. La remodelación es una fase dinámica durante
la cual el colágeno forma enlaces cruzados estrechos con otro colágeno y con otras
moléculas de proteína, aumentando la resistencia a la tracción de la cicatriz madura
hasta un máximo del 80% en comparación con la piel no dañada38. Además, la
proporción de colágeno de tipo III a tipo I disminuye como resultado de la conversión de

5. colágeno de tipo III inmaduro en colágeno tipo I maduro y este proceso puede durar hasta
dos años38,43.
Existen varios factores de crecimiento (FC), citoquinas, integrinas, queratinas,
metaloproteinasas de la matriz, quimiocinas y macromoléculas extracelulares que
ayudarán a regular todos estos procesos durante la cicatrización de la herida44,45. Los
factores de crecimiento involucrados en cada una de las fases de curación de heridas se
muestran en la Tabla 146.
Tabla 1. Factores de crecimiento involucrados en las etapas de cicatrización de heridas.
Etapas de cicatrización de heridas Factores de crecimiento
Fase inflamatoria G-CSF, TGF-β1, TGF-β2
Fase proliferativa PDGF, FGF, VEGF
Epitelización EGF, KGF, GM-CSF
Fase de remodelación TGF-β3
G-CSF: factor estimulante de colonias de granulocitos, TGF: factor de crecimientotransformante,
PDGF: factor de crecimiento derivado de plaquetas, FGF: factor de crecimiento de fibroblastos,
VEGF: factor de crecimiento endotelial vascular, EGF: factor de crecimiento epidérmico,
KGF: factor de crecimiento de queratinocitos, GM-CSF: factor estimulante de colonias de
macrófagos y granulocitos.
Cicatrización en heridas patológicas
Existen varias condiciones fisiopatológicas y metabólicas que pueden alterar el proceso
normal de cicatrización de la herida, provocando una cicatrización retardada de la herida
y, como resultado, heridas crónicas que pueden persistir durante más de seis
semanas47,48.
A pesar del origen de la cicatrización patológica de la herida, van a dar lugar a trastornos
fibroproliferativos. Estos trastornos se pueden clasificar básicamente en dos tipos:
cicatriz hipertrófica y cicatriz queloide que representan una respuesta de "sobre-
cicatrización" y úlceras o heridas crónicas que muestran exactamente lo contrario y una
respuesta de "pobre cicatrizacion"49. Las cicatrices hipertróficas se asocian con una fase
inflamatoria prolongada y en las úlceras se observa un aumento de la proteólisis junto
con alteraciones en la proliferación celular y la migración25,50.
3. El papel de los factores de crecimiento en el proceso de cicatrización de heridas
Los factores de crecimiento (FC) desempeñan un papel esencial en el complejo
proceso de cicatrización de heridas y regeneración tisular51. Son proteínas de
señalización que influyen en el metabolismo de otras células52. Cada FC tiene más de
un efecto en el proceso de cicatrización y actúa uniéndose a receptores específicos en
las membranas celulares de las células diana53. Estos efectos incluyen la promoción de
la quimiotaxis (atraer células a la herida), inducir la migración y proliferación celular, y
estimular a las células para que aumenten la producción de proteínas54. Estos FC no
solo regulan la migración celular y la proliferación, sino que también remodelan la matriz
extracelular y promueven la angiogénesis, creando un entorno ideal que favorece el
proceso de cicatrización de la herida cutánea55.
Casi todos los tipos de células en la piel participan en la producción de FC y varias células
liberan muchos tipos diferentes de FC durante el proceso de cicatrización de las
heridas56.
Mediante la desgranulación de los gránulos alfa de las plaquetas, el PRP puede secretar
varios FC, incluyendo PDGF, VEGF, FGF, factor de crecimiento de hepatocitos (HGF) y

6. TGF-β, que se ha documentado como iniciadores del proceso de cicatrización de
heridas57 (Tabla 2).
Tabla 2. Factores de crecimiento involucrados en el proceso de cicatrización de la
herida y su origen.
FC Origen
PDGF Plaquetas, macrófagos, células endoteliales, queratinocitos,
células musculares
VEGF Plaquetas, queratinocitos, macrófagos, fibroblastos
FGF Macrófagos, linfocitos T, mastocitos, células endoteliales,
fibroblastos, diferentes tejidos
HGF células mesenquimales
TGF- β Plaquetas, linfocitos T, macrófagos, células endoteliales,
queratinocitos, fibroblastos, células musculares
PDGF: factor de crecimiento derivado de plaquetas, VEGF: factor de crecimiento endotelial
vascular, FGF: factor de crecimiento fibroblástico, HGF: factor de crecimiento de hepatocitos,
TGF: factor de crecimiento transformante.
Los principales FC que actualmente se sabe están implicados en el proceso de
cicatrización de heridas son PDGF, EGF, FGF, IGF, VEGF, TGFβ, HGF y KGF18. Sus
roles en el proceso de curación de heridas se describen en las siguientes secciones.
3.1. Factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF)
Es uno de los primeros factores secretados después de una lesión y promueve las
reacciones celulares en todas las fases del proceso de cicatrización de la herida58. El
PDGF estimula muchos procesos metabólicos, como la síntesis de proteínas y colágeno,
y la actividad de la colagenasa, la quimiotaxis de los fibroblastos y las células del músculo
liso59. Además, también promueve la proliferación y la migración de las células
endoteliales, ejerciendo así efectos angiogénicos60 y la producción de TGF-β, que inicia
la síntesis de colágeno61. Además, se ha demostrado que PDGF estimula la producción
de IGF-I59.
Además del hecho de que PDGF tiene un fuerte efecto quimiotáctico para monocitos,
neutrófilos y células de músculo liso que promueven la mitosis de fibroblastos, células
endoteliales y de músculo liso, también estimula el proceso de angiogénesis, la
contracción de la herida, la formación de tejido de granulación y la remodelación de la
herida59.
El uso de PDGF humano recombinante ha mostrado resultados satisfactorios en el
tratamiento de las úlceras del pie diabético62. Sedemostró que la concentración de PDGF
era menor en ratones diabéticos y ancianos que, como resultado, mostraban una
respuesta tardía a la lesión63. Se obtuvieron resultados similares en un estudio con
úlceras humanas no curativas64.
3.2. Factor de crecimiento epidérmico (EGF)
El EGF es secretado principalmente por las plaquetas, aunque los macrófagos,
fibroblastos y células madre mesenquimales también pueden liberarlo, una
concentración más alta del FC mencionado se encuentra al comienzo del proceso de
cicatrizacion61.

7. Este FC juega un papel vital en la proliferación, diferenciación, crecimiento y migración
de células epiteliales y de queratinocitos. Se considera que juega un papel crucial en el
proceso de cicatrización de heridas, ya que promueve la angiogénesis65. Se ha
informado que el EGF es eficaz para inducir la epitelización de quemaduras de espesor
parcial y heridas de granulación46,66. Por otra parte, Kim et al.67 observó la mejora de la
cicatrización de heridas y la reducción de cicatrices cutáneas en heridas de espesor total
en ratones.
3.3. Factor de crecimiento fibroblástico (FGF)
El FGF contribuye a la reepitelización, la angiogénesis y la formación de tejido de
granulación68. Además, a su papel directo en la cicatrización de heridas, también actúa
indirectamente, apoyando la epitelización estimulando la liberación de TGF-α69. Junto
con el VEGF, están activos durante la fase de proliferación. El FGF estimula la
proliferación de fibroblastos, la acumulación de colágeno y acelera la formación de tejido
de granulación46. Los estudios de investigación en modelos animales han observado
resultados positivos, que muestran la cicatrización acelerada de heridas en un modelo
de ratón diabético70. Además, se ha sugerido que el FGF influye positivamente en el
manejo de la cicatriz hipertrófica, lo que resulta en cicatrices reducidas 71.
3.4. Factor de crecimiento insulinico (IGF)
El IGF participa activamente principalmente en la fase inflamatoria y proliferativa72. Los
fibroblastos secretan IGF-1 que ejercen efectos autocrinos sobre ellos mismos58. Se han
observado concentraciones bajas de IGF en heridas crónicas diabéticas. Además, los
estudios de investigación llevados a cabo en ratas diabéticas, ratas sanas y conejos
sugieren que la aplicación exógena de IGF-1 acelera la curación de heridas73-75.
Se obtiene un efecto más fuerte de IGF cuando se usa en combinación con otros factores
de crecimiento, como PDGF y EGF, promoviendo la migración de queratinocitos y
mejorando la reparación tisular76,77.
3.5. Factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF)
Durante la cicatrización de heridas, VEGF ejerce un fuerte efecto paracrino sobre las
células endoteliales y, por lo tanto, promueve y apoya el proceso de angiogénesis de la
herida, convirtiéndose en el principal factor de crecimiento responsable para iniciar el
proceso de angiogénesis en el tejido de granulación63,78. Se ha demostrado que la familia
del factor de crecimiento VEGF representa los reguladores clave de la vasculogénesis
fisiológica y patológica, la angiogénesis, la linfangiogénesis y la permeabilidad
vascular79. Hasta la fecha, la aplicación de VEGF ha sido reportada en estudios
experimentales y clínicos con resultados exitosos acelerando la reparación de heridas al
aumentar la epitelización, angiogénesis y formación de tejido de granulación en un
modelo de herida diabética en ratones80, colgajos cutáneos en perros81, úlceras
isquémicas46, y las úlceras diabéticas en pacientes82.
3.6. Factor de crecimiento transformante-β (TGF-β)
El TGF-β tiene tres isoformas diferentes: TGF-β1, -β2, -β3 que van a llevar a cabo la
superposición, pero diferentes funciones en el proceso de cicatrizacion de heridas25. La
isoforma TGF-β1 está presente en una concentración más alta durante el proceso de
cicatrización de la herida44.
El TGF-β3 está relacionado con la angiogénesis y TGFβ1 y -β2 se asocian con
cicatrización y fibrosis, promueven la diferenciación de fibroblastos y miofibroblastos, la
deposición de la matriz extracelular, la contracción de la herida y la formación de
cicatrices83. El TGF-β ejerce un efecto quimiotáctico para macrófagos, induce la
producción de colágeno y fibronectina e inhibe la actividad metaloproteinasa46. Es
importante destacar el papel principal del TGF-β3 en la reducción de la deposición de
colágeno durante las fases proliferativa y de remodelación, reduciendo así la formación

8. de cicatrices, como se muestra en estudios preclínicos después de la inyección
intradérmica del factor mencionado en ratas84. Además, bajas concentraciones de TGF-
β1 se han asociado con trastornos fibroproliferativos de cicatrización hipertrófica y
formación de queloides83. Además, un estudio diferente demostró que el TGF-β3 era
necesario para la reepitelización de heridas de escisión debido al efecto paracrino que
ejercen sobre los queratinocitos85.
3.7. Factor de crecimiento de hepatocitos (HGF)
Este factor de crecimiento es secretado por células mesenquimales y tiene un papel
principal que regula el crecimiento celular, la motilidad y la morfogénesis en células tales
como las células epiteliales y endoteliales. Por lo tanto, está directamente relacionado
con la reparación epitelial, la formación de tejido de granulación y la
neovascularización86. Además, se ha demostrado un efecto sinérgico entre HGF y VEGF
sobre las células endoteliales, proporcionando un efecto angiogénico más intenso en el
área de la herida87.
3.8. Factor de crecimiento de queratinocitos (KGF)
KGF induce la proliferación y migración de queratinocitos durante el proceso de
cicatrización, principalmente en la fase de remodelación. La potenciación de la
proliferación de células epiteliales también se ha demostrado mediante el KGF-2 humano
recombinante y la aceleración del proceso de cicatrización en las úlceras venosas46.
4. Plasma rico en plaquetas: métodos de preparación y formulaciones terapéuticas
El plasma rico en plaquetas se puede definir como una fracción de plasma que contiene
concentraciones más altas de plaquetas en comparación con la sangre completa y, como
resultado, una mayor concentración del factor de crecimiento88. Hoy en día, el PRP se
aplica ampliamente en diferentes aplicaciones clínicas para promover la cicatrización en
ortopedia89, cicatrizacion de tejidos blandos90, tejido nervioso91, úlceras crónicas de la
piel92, oftalmología93 y odontología94. El PRP está categorizado por la Administración de
Alimentos y Medicamentos (FDA) como un tejido mínimamente manipulado y como un
producto sanguíneo autólogo95. Una de las ventajas de estas preparaciones es que se
obtienen fácilmente de la sangre del paciente después de un simple proceso de
centrifugación, por lo tanto, es un producto seguro, simple y rentable96,97. Al controlar los
parámetros de centrifugación y el protocolo de activación, es posible controlar la dosis
de GF y proteínas que se liberan tras la activación98.
Por el momento, no existe un protocolo estándar de oro claro para la generación de PRP,
poca caracterización realizada en los productos obtenidos y la falta de regulación y
estandarización96. Para caracterizar los componentes principales que juegan un papel
clave en la regeneración tisular y formular una preparación adecuada para cada situación
fisiopatológica específica, es necesario un procedimiento simple bien definido, donde las
condiciones de centrifugación son fundamentales para obtener una alta calidad de PRP
junto con la cuantificación e identificación de plaquetas y linfocitos96,99.
En los últimos años ha habido una gran controversia con respecto a la nomenclatura y
la definición de PRP100,101. Según Anitua y sus colegas (2007), la nomenclatura "plasma
rico en plaquetas" es un término vago e impreciso. Existe una gran cantidad de
preparaciones de sangre autólogas que difieren en cuanto a sus protocolos de
procesamiento y preparación y, por lo tanto, en características cuantitativas y cualitativas.
Por lo tanto, se requiere una descripción detallada, precisa y gradual del protocolo de
preparación de PRP (condiciones de centrifugación, concentración de plaquetas, tipo de
anticoagulante utilizado, activador plaquetario y presencia o ausencia de leucocitos) para
permitir una comparación entre los estudios95,101. Además, es importante preservar la
integridad y la calidad de las plaquetas para prevenir el daño o la lisis de las plaquetas
para permitir que secreten por completo los factores de crecimiento96.

9. Como resultado de todas las razones mencionadas anteriormente, el Instituto de
Biotecnología, BTI, el Plasma Rico en Factores de Crecimiento, conocido como PRGF-
Endoret®, desarrolló un sistema avanzado de PRP autólogas. Está certificado por las
autoridades sanitarias europeas y ha sido aprobado en Europa para la producción de
PRP y su aplicación en varios campos médicos. El PRGF es un producto autólogo con
una concentración moderada de plaquetas, ausencia de leucocitos y proporciona la
formación de un andamio biológico formado por fibrina para la adhesión celular que
ayudará al proceso de cicatrizacion99. La tecnología mencionada junto con otros métodos
de preparación de PRP se describe en las siguientes secciones.
4.1. Métodos de preparación
Dentro de los métodos existentes para la preparación de PRP hay discrepancia en los
detalles técnicos, tales como la inclusión de leucocitos o glóbulos rojos, la velocidad y el
tiempo de centrifugación. Aunque parece que los resultados son similares102.
Anitua (2004) defiende la no inclusión de leucocitos, porque pueden alterar la función de
algunos FG e interferir en la acción antiinflamatoria103. Otros, como la corporación
Harvest Technologies, afirman que estos detalles no son importantes y que su PRP
contiene algunos glóbulos rojos. Además, otros autores prefieren la inclusión de
leucocitos para el tratamiento de úlceras u otras cirugías, ya que consideran que tiene
un efecto antimicrobiano104,105.
4.1.1. PRGF-System® (Instituto de Biotecnología BTI, Vitoria, España)
El PRP clínicamente valioso contiene al menos un millón de plaquetas por microlitro100.
De acuerdo con Anitua et al. (2004), el PRGF es una nomenclatura más precisa para
referirse a esta terapia regenerativa y debe tener una concentración de plaquetas de
aproximadamente 1,5 veces la concentración en sangre total103. Las principales ventajas
que ofrece el PRGF incluyen las siguientes: es un producto biocompatible, versátil y
seguro, no hay leucocitos presentes para prevenir los efectos proinflamatorios, la
activación estandarizada de plaquetas con cloruro de calcio se utiliza para causar la
liberación de factores de crecimiento, un protocolo simple y rápido con solo una
centrifugación a 460 × g durante 8 minutos, tiene propiedades bacteriostáticas y un
potente potencial terapéutico sin efectos secundarios99. Después de la centrifugación
simple, se obtienen glóbulos rojos en el fondo del tubo, justo por encima de los glóbulos
blancos y finalmente dos fracciones de plasma, el 60% superior corresponde a la fracción
pobre en FC, y por debajo del 40% corresponde al PRGF99 (Figura 2).
4.1.2. Sistema de recolección de concentrados de plaquetas (PCCS®Kit) (3i-
Implant Innovations, Palm Beach Gardens, FL, EE. UU.)
Esta técnica permite una concentración de plaquetas entre 1.100.000 y 2.200.000/μL e
incluye leucocitos, con una concentración entre 5500 y 14.800/μL. Como anticoagulante,
usa ACD-A9 y se somete a dos centrifugaciones: los primeros 3 minutos y 45 segundos
a 3000 rpm y los segundos 13 minutos a 3000 rpm106,107.
4.1.3. Separación Gravitacional de Plaquetas (Sistema GPS®) (Biomet Merck
Biomaterials, Darmstadt, Alemania)
Con este método, se obtiene una concentración de plaquetas de 1.600.000/μL y niveles
de leucocitos de 31.100/μL. Se usa una jeringa de 60 ml, en la que 6 ml son
anticoagulantes (ACD-A) y 54 ml de sangre del paciente. La sangre se somete a
centrifugación a 3200 rpm durante 12 minutos en tubos GPS®16,108.

10. Figura 2. Metodología para la preparación de PRGF®.
- (A) Después de la recogida de sangre en condiciones estériles en tubos de citrato de
sodio al 3,8% (tubo de recogida de PRGF® 5 ml, BTI Biotechnology Institute, Álava,
España), los tubos se centrifugan a 460 × g (2300 rpm) durante 8 min (Sistema PRGF®,
BTI Biotechnology Institute , Álava, España);
- (B) Separación de sangre en tres fracciones: plasma que contiene principalmente
plaquetas (capa superior), la capa de leucocitos "leucocito" (capa intermedia) y glóbulos
rojos (capa inferior);
- (C) Procedimiento de pipeteo bajo una campana de flujo laminar;
- (D, E) La fracción Plasma pobre en factores de crecimiento (PPGF-parte superior de la
primera fracción) y la fracción Plasma Rico en Factores de crecimiento (PRGF-justo por
encima de la "capa leucocítica") se transfieren a tubos individuales de fraccionamiento
sin aditivo (PRGF ® tubos de fraccionamiento, BTI Biotechnology Institute, Álava,
España);
- (F) El activador de PRGF® (cloruro de calcio) se agrega a la preparación de PRGF (50
μL de activador de PRGF® por ml de preparación) para lograr la desgranulación de las
plaquetas y la liberación de los factores de crecimiento.

11. 4.1.4. Sistema Smart PReP® (Harvest Technologies Corporation, Munich,
Alemania)
La cantidad de sangre necesaria con este protocolo es de 52 ml en mujeres y 48 ml en
hombres. Se realiza una doble centrifugación de la sangre durante 12 min, obteniéndose
un PRP con una concentración cercana de plaquetas a 1.250.000/μL y una
concentración de leucocitos de 19.261/μL109.
4.1.5. Plateltex® (Plateltex, Bratislava, Eslovaquia)
La concentración de plaquetas obtenida con este método es de aproximadamente
1.600.000/μL y se lleva a cabo mediante una doble centrifugación. La sangre se obtiene
en tubos de ensayo de 8,0 ml, que contienen ACD-A como anticoagulante, y se someten
a una primera centrifugación suave a 180 × g (900 rpm) durante 10 minutos. Después de
aspirar el plasma sobrenadante, se realiza una segunda centrifugación a 1000 × g (5000
rpm) durante 10 min110.
Existe una amplia gama de productos de PRP obtenidos por diferentes protocolos de
preparación de centrifugado de sangre, todos ellos apuntan a obtener el rico "cóctel" en
los GF (Tabla 3). Sin embargo, para tener éxito se deben completar varios desafíos,
como una caracterización completa de los factores de crecimiento y las proteínas
liberados por plaquetas, evaluando las razones individuales que hacen que algunos
productos sean más efectivos que otros y diseñando nuevas asociaciones con
biomateriales u otras terapias regenerativas, como las células madre34,99.
Tabla 3. Métodos de preparación de plasma rico en plaquetas y características
principales.
4.2. Formulaciones terapéuticas
Una característica muy importante que hace que la tecnología PRGF sea diferente del
resto de los productos PRP es su versatilidad. El PRGF se puede obtener en cuatro
formulaciones diferentes de la sangre del paciente con fuertes efectos terapéuticos,
dependiendo del grado de coagulación y activación de las muestras, y adaptado a las
necesidades clínicas en cada caso. Estas formulaciones terapéuticas implican:
sobrenadante de PRGF, utilizado para colirio convencional y medios de cultivo celular87,
PRGF líquido comúnmente utilizado en cirugías y superficies de implantes dentales111,

12. el PRGF (coágulo) andamiaje formado por componentes fibrilares y celulares se usa con
frecuencia en las úlceras cutáneas112 y en la membrana de fibrina elástica y densa, que
es excelente para lesiones de tejidos blandos y para sellar heridas quirúrgicas (Figura
3).
Figura 3. Formulaciones terapéuticas de Plasma Rico en factores de Crecimiento (PRGF). (A)
PRGF líquido en una úlcera cutánea canina; (B) PRGF similar a andamios mezclado con tejido
óseo esponjoso; (C) membrana de fibrina PRGF para herida traumática durante cirugía
ortopédica.
5. El uso de plasma rico en plaquetas en la cicatrización cutánea
En las últimas décadas, el uso de terapias celulares emergentes, como PRP, ha reunido
más atención en una amplia gama de enfermedades y entornos para su uso potencial en
el campo de la medicina regenerativa. como agente terapéutico y puede tener un papel
complementario en un plan de tratamiento estandarizado y de calidad113. El campo de la
medicina avanza hacia el desarrollo de tratamientos menos invasivos y rentables para
mejorar la recuperación funcional99. El uso de PRP ha tenido un impacto potencial en la
reducción de los costos económicos de los tratamientos médicos estándar, aunque no
debe considerarse como una terapia que reemplaza ciertos tratamientos convencionales
esenciales, como el desbridamiento del tejido necrosado, sino como una terapia
complementaria34,99. Se crea un entorno interno biológico para la restauración de la
homeostasis tisular con terapia de PRP proporcionando al área herida varias citocinas y
factores de crecimiento que desempeñan un papel crucial en el proceso de reparación
del tejido regulando la inflamación, estimulando la angiogénesis y la síntesis junto con la
remodelación de nuevos tejidos113,114. Las ventajas adicionales del tratamiento con PRP
en la cicatrización de heridas cutáneas incluyen una metodología fácil, un tratamiento
rentable, un efecto más duradero en comparación con la terapia convencional y un
tratamiento seguro con un producto autólogo obtenido del propio paciente 115,116.
El uso de PRP tanto en humanos como en animales está aumentando constantemente,
y sus propiedades curativas en heridas cutáneas han sido reportadas en muchos
estudios clínicos y experimentales con perros36,117, caballos118, humanos114,119 y otras
especies29,120. Las plaquetas desempeñan un papel importante en el proceso de
cicatrización de la herida gracias a las funciones hemostáticas y los niveles concentrados
de factores de crecimiento y citocinas121. Una mayor concentración de factores de
crecimiento promueve la regeneración de células epiteliales y endoteliales, estimula la
angiogénesis, la deposición de colágeno y acelera el proceso de curación36. La primera
aplicación clínica de la preparación rica en plaquetas se llevó a cabo en úlceras crónicas
de pierna y se observó una estimulación en la formación de tejido conectivo
vascularizado122.

13. El uso principal de PRP en ensayos clínicos en humanos se relaciona con afecciones
crónicas, tales como úlceras diabéticas, en las que la cicatrización se ve afectada y se
caracterizan por inflamación persistente debido a un desequilibrio entre citoquinas
proinflamatorias y antiinflamatorias y baja concentración del factor de crecimiento o
incluso debido al exceso de especies reactivas de oxígeno115. En este sentido, los
factores de crecimiento y las citoquinas juegan un papel crucial en el control del daño
oxidativo123. La capacidad regenerativa de FC en PRP ayuda a acortar el tiempo de
recuperación de heridas y diversas lesiones tisulares en mamíferos96. De acuerdo con la
declaración antes mencionada, Babaei et al. observó la formación de tejido de
granulación sano y el cierre completo temprano de cada herida en 150 pacientes con
úlceras del pie diabético después de la aplicación tópica de PRP124. Las úlceras no
curativas de diferentes etiologías se trataron con inyecciones de PRP autólogas
subcutáneas junto con la aplicación tópica de gel de PRP y demostraron la seguridad
potencial y eficacia del PRP autólogo para las úlceras no curativas crónicas, apreciando
una reducción significativa en el tamaño de la herida en todos los pacientes tratados con
sin efectos secundarios, y adicionalmente una reducción del dolor y la inflamación en el
sitio de la lesión gracias a la supresión de la liberación de citoquina114. Se obtuvieron
resultados positivos similares en heridas secundarias a infecciones necrotizantes de
tejidos blandos después del uso tópico de PRP autógenos125, e incluso en pacientes con
SIDA con úlceras crurales crónicas donde la neovascularización y reepitelialización
potenciadas se han apreciado 126. Además, un estudio llevado a cabo por Man et al.127
sugirieron mejoras cuantitativas de la curación de heridas de la piel humana después de
tratar tópicamente colgajos cutáneos con PRP autólogo. Como se muestra, se han
realizado varios estudios en medicina humana para el tratamiento de heridas crónicas,
que muestran algún grado de mejoría, que se refleja en la reducción del área de la herida,
el volumen y el cierre de la herida128-130. Usando enfoques experimentales in vitro,
Roubelakis et al.53 estudiaron el efecto del PRP sobre las propiedades de proliferación y
migración de las células madre mesenquimales (MSC) y los fibroblastos cutáneos que
demuestran una inducción significativa de la capacidad de migración y la tasa de
proliferación de MSC y fibroblastos. Además, también mostraron una curación acelerada
de las úlceras después del tratamiento con apósitos PRP y una neovascularización más
rápida del área afectada en pacientes clínicos reales. Resultados que también fueron
obtenidos por otros investigadores en estudios aleatorizados, prospectivos y
retrospectivos. Por lo tanto, el uso de plaquetas parece lograr una curación más rápida
en comparación con los métodos tradicionales27,131,132. Un metaanálisis sobre el uso de
PRP en heridas cutáneas en comparación con la terapia de control de heridas mostró
que PRP mejoró el proceso de curación de heridas y mejoró significativamente las
úlceras en heridas agudas y crónicas pequeñas y difíciles de curar, y adicionalmente
PRP ejerce actividad antimicrobiana contra Staphylococcus aureus y Escherichia
coli99,133. Además, también hay pocos estudios que hayan evaluado el beneficio clínico
del PRP en el envejecimiento cutáneo mostrando una acción biorregenerativa,
estimulando la proliferación de fibroblastos, aumentando los factores antiinflamatorios,
factores angiogénicos y proteínas relacionadas con la remodelación de la matriz
extracelular134. En un estudio en el que los pacientes fueron tratados con láser de dióxido
de carbono fraccional ablativo, el uso de PRP mostró una reducción del eritema y la
aceleración del proceso de curación135. El uso de PRP también se puede considerar
como un procedimiento eficaz para el rejuvenecimiento de la piel facial, que muestra en
un estudio clínico una mejora en el aspecto general, la flacidez y el estado de las
arrugas136. Además, también se ha demostrado el papel del PRP en la promoción de la
supervivencia del cabello137.

14. Las propiedades curativas de PRP se basan en el hecho de que las plaquetas en
condiciones fisiológicas contienen una amplia variedad de factores de crecimiento con
una función curativa crucial, que juegan un papel importante en la regeneración tisular113.
El uso de PRP en modelos animales sigue siendo el estándar de oro para probar nuevas
terapias regenerativas y estos son útiles para su posterior aplicación clínica en medicina
veterinaria y humana. Hay una serie de estudios in vivo en perros y caballos con respecto
al uso de PRP en la terapia de heridas cutáneas. Farghali et al.45 probaron el efecto de
la infiltración de PRP autóloga subcutánea perilesional en heridas cutáneas de espesor
total en perros. En cuanto a su evaluación clínica, se encontraron porcentajes de
contracción de la herida y tasa de re-epitelización significativamente mayores. Además,
se observó una deposición de colágeno más alta, la aceleración de la maduración del
tejido de granulación y una formación de cicatriz reducida gracias a las fibras de colágeno
bien organizadas en comparación con las heridas de control. El PRP estimula el colágeno
tipo I, la metaloproteinasa I de la matriz, y aumenta los reguladores de la progresión del
ciclo celular para acelerar la cicatrización de la herida138. Una mejor organización del
colágeno dérmico en las heridas tratadas con PRP podría deberse a un aumento de la
gelatinasa B (MMP-9) ya que parece ser crucial para el ensamblaje de la fibra de
colágeno. De acuerdo con el estudio mencionado anteriormente, se apreció una
diferenciación epitelial más rápida y una mejor organización del colágeno dérmico en
otros dos estudios clínicos en heridas equinas118,139. Además, un estudio reciente llevado
a cabo una vez más en perros estudió la eficacia de la inyección intralesional de PRP a
heridas cutáneas agudas36. Las heridas tratadas con PRP mostraron curación
macroscópica y microscópicamente más rápida que los grupos control, con angiogénesis
y mejoramiento de la formación de granulación superior en el día 7, además de una
mayor deposición de colágeno, reepitelización acelerada y diferenciación epitelial. Por
otro lado, Kim et al.140 estudiaron el efecto curativo de PRP autólogo con resultados muy
positivos en un gran defecto de piel en un perro.
La segunda intención de curación de la piel ocurre cuando los bordes de la herida no se
pueden aproximar como resultado de varios factores del huésped como suministro
sanguíneo deficiente, tamaño de defecto, presencia de infección, enfermedades
sistémicas, entre otros, que dañan la herida141. Se necesita una potente formación de
tejido de granulación promovida por la angiogénesis y la producción de colágeno por los
fibroblastos, la epitelización y la contracción para el cierre de los defectos cutáneos de
segunda intención142. Con este propósito, Karayannopoulou et al.143 evaluaron el uso de
PRP intralesional en la segunda intención de curación de heridas de defectos agudos de
piel completa en perros y destacaron un aumento significativo en la perfusión tisular que
ayuda a la formación de tejido de granulación y cicatrización de heridas por la atracción
de nutrientes y oxígeno al área herida, una mejor arquitectura de colágeno en las heridas
tratadas con PRP también se mostró. El uso de PRP inyectado localmente en la
supervivencia de colgajos de piel en perros se evaluó en un estudio de investigación
llevado a cabo por los mismos autores mencionados en el estudio anterior81. Tanto en
medicina humana como veterinaria, una de las principales complicaciones con respecto
a los colgajos de piel es la necrosis en su parte distal, principalmente debido a la
vascularización insuficiente y el suministro de sangre144. Los resultados del presente
estudio mostraron que la supervivencia del colgajo se mejoró significativamente en los
colgajos tratados con PRP en comparación con los de control y también se apreció una
disminución del edema. El PRP también mejoró la supervivencia de colgajos de piel
aleatorios isquémicos en ratas145,146.
Con respecto al uso tópico experimental de PRP en conejos y otros pequeños modelos
de investigación, Ostvar et al.28 diseñaron un estudio de investigación en heridas

15. cutáneas de espesor total en conejos y se obtuvieron resultados importantes tales como
tasas de curación más rápidas y formación de tejido de granulación adecuada en heridas
tratadas con PRP. Además, el gel de PRP también demostró potenciar la angiogénesis,
en base a un aumento significativo en la densidad vascular, fibroblastos abundantes y
haces de colágeno bien organizados que también fueron aparentes en las heridas
tratadas con PRP. Resultados similares fueron observados por Lee et al.29 en heridas de
conejo de espesor total, con tasas de epitelización aumentadas y angiogénesis, juntas
con una regresión del proceso inflamatorio agudo y la formación de tejido de granulación.
Además, usando el Sistema PRGF® en un estudio experimental en conejos, Molina-
Miñano et al.147 observó una aceleración significativa del proceso de reepitelialización y
una reducción significativa del proceso de inflamación en el área herida. Además, se
obtuvieron los mismos resultados después de la infiltración de PRGF en heridas linguales
experimentales148. También se han notificado efectos beneficiosos con el uso de sangre
heteróloga para la preparación de PRP en conejos que no muestran efectos adversos149.
Se ha sugerido que PRP desempeña un papel fundamental en la expansión tisular y la
proliferación de la piel150, mejorando la proliferación celular, la síntesis de colágeno y la
neovascularización. El uso combinado de PRP con otros tratamientos para ofrecer
mejores resultados también ha sido reportado. De acuerdo con esto, Lian et al.151 mostró
un efecto sinérgico cuando el PRP se asoció con células madre mesenquimales
derivadas de médula ósea (BMSC). De la misma manera, Park et al.152 describió una
cicatrización de heridas mejorada en heridas tratadas con hidrogel PRP + en ratón en
comparación con heridas de control y tratadas individualmente, dando como resultado
un acortamiento significativo del período de curación y una angiogénesis potenciada. La
miel de manuka (MH) también es conocida debido a su capacidad inherente de curación
de heridas. Se diseñó un estudio in vitro para determinar la respuesta de fibroblastos,
células endoteliales y macrófagos cuando se somete a medios de cultivo suplementados
con MH, PRGF o una combinación de ambos153, se demostró un mayor aumento en la
actividad celular en presencia de PRGF + MH, siendo los fibroblastos las células con
mayor capacidad de respuesta positiva.
En la Tabla 4 se resume una visión general de algunos de los estudios más relevantes
sobre el uso de PRP para el tratamiento de heridas de la piel.
Tabla 4. Descripción general de algunos de los estudios más relevantes sobre el uso de
PRP para el tratamiento de heridas cutáneas.
6. Perspectivas futuras en la reparación de heridas
El campo de la medicina regenerativa ha ido aumentando constantemente en los últimos
años proporcionando una comprensión más específica de los mecanismos de

16. cicatrización de heridas cutáneas. Sin embargo, varios problemas con respecto al uso
de PRP en varios campos médicos todavía no están claros. Se requiere establecer una
descripción paso a paso del protocolo de preparación del PRP para obtener un PRP de
alta calidad y, por lo tanto, una estandarización clara para permitir la comparación entre
los estudios y permitir la reproductibilidad. La cuantificación e identificación de plaquetas
y linfocitos como el resto de la composición de la muestra de sangre inicial y el producto
final también es deseable junto con métodos de centrifugación y activación para obtener
el PRP. También hay una falta de información sobre los resultados a largo plazo de la
cicatrización cutánea con PRP. Además, se necesitan estudios controlados con
muestras suficientes para demostrar la eficacia del PRP para tratar heridas.
Las células madre con sus propiedades únicas de autorregenerarse y diferenciarse en
otras células están emergiendo como un candidato prometedor para el tratamiento de
heridas agudas y crónicas. El papel de las células madre en el proceso de cicatrización
de heridas está siendo ampliamente investigado por su capacidad de cicatrización de
heridas cutáneas. Específicamente, las células madre mesenquimales (MSC) están
involucradas en cada fase del proceso de cicatrización de heridas y también influyen en
la capacidad de la herida para progresar más allá de la fase inflamatoria y no retroceder
a un estado de herida crónica, aumentando así su interés en el tratamiento de heridas
crónicas6,154.
7. Conclusiones
Las terapias regenerativas son, hoy en día, el estándar de oro para acelerar la
cicatrización de heridas tanto en humanos como en diferentes especies de animales ya
que se prefieren los procedimientos bajos o no invasivos. La opinión de los autores revela
que el PRP podría ser un tratamiento seguro y rentable para el proceso de curación de
heridas cutáneas, logrando acortar el período de recuperación y, por lo tanto, mejorar la
calidad de vida de nuestros pacientes.
Conflictos de interés: los autores declaran no tener conflicto de intereses.
file:///C:/Users/Usuario/Downloads/jfb-09-00010-v2.pdf