El reporte describe un experimento para cuantificar las bases totales en una muestra de pescado a través de la destilación y titulación. Los resultados mostraron que la muestra contenía 140 mg de nitrógeno por cada 100 gramos de pescado, excediendo el límite máximo permitido de 25-35 mg según las normas europeas, por lo que la muestra no era apta para el consumo humano. El objetivo del experimento fue determinar el contenido de bases volátiles totales en el pescado y evaluar su grado de deterioro.

1. DEPARTAMENTO DE BIOTECNOLOGIA
Reporte practica 7 “Cuantificacion de bases totales
por volumetria.”
Equipo: Biotecnologos
Khatia Berenice López Ahumada. ID: 165404
Itzel A. Gómez Leyva ID: 163840
Carmen M. Félix Pablos ID: 165161
Ángel J. Félix Sastre ID: 165165
José Emilio González Jara ID: 165274
Víctor Estrella Salazar ID: 165105
Roberto García Rodríguez.
Equipo 1
Lab. Química Analítica (Miércoles 7am-10am)
Cd. Obregón, Sonora a 26 de Abril del 2017

2. Introducción
La estimación de bases volátiles totales (BVT-N) es un método aplicable para la evaluación
de la calidad sanitaria de un alimento, ya que durante el deterioro de un alimento, la
actividad enzimática endógena y bacteriana produce compuestos como las bases volátiles.
Durante el desarrollo de la técnica, las bases volátiles contenidas en la muestra son
destiladas en un medio alcalino (MgO), posteriormente son disultas en H3BO3. Durante la
destilación, el ácido bórico es neutralizado por la presencia de bases volátiles,
posteriormete la solución se valora con un ácido fuerte (a baja concentración), esto con el
fin de determinar la cantidad de bases destiladas contenidas en la muestra.

3. Materiales
Material por equipo:
• 1 vidrio de reloj
• 2 espátulas
• 1 pipeta serológica de 10 mL
• 1 perilla
• 1 pipeta volumétrica de 25 mL
• 5 matraces bola de fondo redondo de 1000 mL
• 1 tela de alambre con asbesto
• 1 anillo de hierro
• 2 tapones bihoradados (para matraces bola)
• 1 tapón monohoradado (para refrigerante)
• 1 pinza para refrigerante
• 3 nueces de laboratorio
• 4 soportes universales
• 1 mechero de Bunsen
• 2 mangueras para refrigerante
• 5 matraces Erlenmeyer de 250 mL
• 1 par de guantes con asbesto
• 1 par de lentes de seguridad
• 1 bureta de vidrio de 50 mL
• 1 pinza para bureta
Reactivos:
•10 g de MgO
•25 ml de solución de NaOH al 20%
•100 ml de solución de ácido perclórico al
6%
•150 ml de disolución al 2% de H3BO3
•100 ml de disolución valorada 0.05 N de
H2SO4
•10 ml de solución indicadora: rojo de
metilo al 0.05% y 0.075% verde de
bromocresol en etanol
•Fenolftaleína al 0.1 % enetanol
Equipo
•Balanza analítica
•Licuadora
•Manta de calentamiento
Otros:
• Perlas de vidrio
• 10 mL de aceite comestible de
cocina
• 100 g de pescado fresco
(alumno). Con 48 horas de
anticuipación adquirirlo en
pescaderías. Una porción en
refrigerador, la otra porciónal
medio ambiente.

4. Procedimiento
Deterioro de la muestra a analizar (realizar antes de la práctica):
• Adquirir 100 g de pescado fresco, picar o cortar en fragmentos pequeños, mezclar los trozos y dividir en dos partes iguales
de 50 g (aproximadamente). Numerar las bolsas (1 y 2), almacenar la bolsa 1 en el refrigerador y la bolsa 2 se dejará a
temperatura ambiente durante 48 h o 24 h en un sitio cálido. (Los tiempos son aproximados).
• Llevar a la sesión de laboratorio la bolsa 1 y 2, verificar que la bolsa de transporte no esté rota, ya que el pescado
deteriorado tiende a perder agua y puede derramarse.(cuidar que no se pierda agua)
Preparación de la muestra para análisis. Tratamiento con HClO4 al 6% p/v
• Sobre un vidrio de reloj pesar 10 g de muestra, registrar el peso con 3 decimales, depositar en el vaso de la licuadora y
adicionar 100 ml de la disolución de ácido perclórico al 6% p/v; a baja velocidad durante 1 min, esperar 1 min y licuar
durante otro minuto.
• Vaciar 50 ml del filtrado en un matraz bola de fondo redondo de 1 L, (con la ayuda de 50 ml de agua destilada recuperar los
remanentes de la mezcla en el vaso de licuadora, si es necesario usar otros 50 ml).
• Añadir 6 gotas de fenolftaleína al 0.1% en solución alcohólica, 2 g de MgO en el matraz (evitar que se adhiera a las
paredes), agitar con movimiento oscilatorio para mezclar. Adicionar aproximadamente 2 ml de aceite de cocina y 15 perlas
de vidrio, por último, adicionar 20 ml de solución de NaOH al 20% (observar si da reacción alcalina la solución, color rosa.
mezclar otra vez con movimientos oscilatorios.

5. Procedimiento
Extracción de bases volátiles por destilación:
• En el matraz 2 se coloca la porción de muestra homogenizada y filtrada, (mantenerse cerca de la ebullición) suficiente para
que el vapor de agua entrante, sobresature el medio y así salga por la presión hacia el condensador, en el matraz 1 se
colocan 300 ml de agua destilada que deberá mantenerse caliente (ebullición) durante la destilación.
• El destilado se recibe en el matraz Erlenmeyer de 250 ml, con 50 ml de ácido bórico al 2% y 3 gotas de cada indicador (rojo
de metilo y verde de bromocresol). Durante la destilación la presencia de las BV´s se evidencian con el cambio de color en la
solución del ácido bórico . Una vez terminada la destilación (100 ml), se retira la fuente de calor se esperan 5 min y se retira
el matraz Erlenmeyer para titular.
• El proceso anterior se realiza por duplicado para cada muestra (refrigerada y deteriorada). Como blanco será necesario
realizar un procedimiento sin muestra.

6. Titulación de las bases volátiles destiladas
Titular con la solución valorada de HCl cada muestra de H3BO3 con las BV´s. Al adicionar la solución valorante el
color cambiará, el punto de equilibrio se alcanza cuando el color de la solución de ácido bórico regresa a su color
original y se mantiene durante más de 30 s. Anotar el volumen gastado de HCl

10. ResultadosResultados y discusión
• 9.486 g en 100 ml HClO4 6%
• 4.743 g en 50 ml
• Se valoro con H2SO4 0.045 N
• Se gastaron 11.2 ml para titular esta mezcla.
• El Meq de H2SO4 = 0.504 meq esto quiere decir que la muestra BVT tiene un meq de 0.504
• 0.504 meq de BVT en 4.743 g
.504 4.743
10.626 100
10,626 meq cada 100 g de pescado. 1 meq 0.014 g
1 eq N 14 g 1000 meq 10.626 0.14 g N / 100 g producto
0.014 g 1 meq = 140 mg N/100g.

11. Comparacion de resultados con la cantidad maxima permitida de NVBT en pescado.
El equipo obtuvo como resultado que el pescado utilizado como muestra contiene una cantidad de 140 mg
N/100g.
Según la normativa europea la máxima cantidad de NVBT permitida para el consumo humano es de entre
25 y 35 mg variando según las especies de pescado.
Por lo que en conclusión el pescado utilizado para el experimento no es apto para el consumo humano
según la normativa europea, ya que excede por mucho el limite (25-35mgN por cada 100g) al poseer 140
mgN por cada 100g
Fuente: https://www.boe.es/buscar/doc.php?id=DOUE-L-1995-80457

12. Conclusiones
. Se determino el contenido de bases nitrogenadas volátiles totales
(TVBN) por el método de destilación en una muestra de pescado
para establecer el grado de su deterioro a partir de su contenido;
ademas de adquirir habilidad y destreza en las operaciones
analíticas.
Así también se concluye que el pescado utilizado para el
experimento no es apto para el consumo humano, al poseer
140mgN/100g ya que el limite aceptado para el consumo por la
union europea es de entre 25-35mg.