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Colorante.
Coloraciones y
Anticoagulantes
Lic, Christiam Albornos Andrade
Instituto Superior Tecnológico Daniel A.
Carrión
Curso: Hematología I
Colorantes y Coloraciones
O Coloración: es el proceso mediante el
cual un cuerpo es teñido por una
sustancia colorante sin perder el color
cuando es lavado con el disolvente
utilizado al preparar la solución colorante.
O Colorante: son aquellas sustancias que
pueden conferir color a otros cuerpos. Es
una estructura molecular no saturada
(sales neutras)
Tipos de Coloración
OProgresiva: es aquella en donde se hace
actuar el colorante hasta que llegue a su
punto optimo teniendo un control en los
tiempos de coloración (Hematoxilina de
Mayers)
ORegresiva: es en donde se realiza
primero una sobre coloración y luego se
elimina el resto del colorante por medio d
diferenciadores. (Diferenciación)
O El mecanismo fisicoquímico de la coloración
tisular esta vinculado a la formación de uniones
intermoleculares por atracción electrostática
(entre cargas contrarias-electro adsorción) o por
fuerzas d tensión superficial (interacción
molecular entre los líquidos por fuerzas de
gravitación generadas al dispensar las moléculas
muy próximas entres si)
Tinciones de Romanowsky
O Tinción Giemsa (protozoos)
1g colorante, 66ml metanol y 66 ml
glicerol
Buffer a pH 6.8
O Tinción Wright
0.3g colorante, 97ml metanol y 3 ml
de glicerol.
Buffer a pH 7.2
O Tinción de May-Grünwald o Jenner
(variante del Wright), no produce efecto
cromático pero si ayuda a observar las
granulaciones leucocitarias.
Característica General
O 1879: Paul Ehrlich comenzó con una
combinación de colorantes básicos y ácidos
O 1891: Ernst Malchowski y Dimitry Leonidovich
Romanowsky
O Conformados por:
O Colorante catiónico (Azur B)
O Colorante aniónico (Eosina)
O Metanol (disolvente) – Fijación => Leishman y
Wright
O Adición de glicerol => Giemsa (aumentar
estabilidad)
Anticoagulantes usados en
Hematología
O Anticoagulante: sustancia que bloquea el
mecanismo de coagulación evitando la
formación de fibrina (coagulo)
O Uso: obtención de plasma
O Mantienen la morfología y fisiología
sanguínea.
O No usarlo por mas de 24h a 4°C
O Los mas usado son: EDTA, Heparina sódica,
Heparina de litio, citrato trisodico, ACD,
Oxalato de potasio.
EDTA (C10H16N2O8)
O Presentación: disodica, dipotasica o tripotasica.
(etilendiaminotetraacético)
O Acción quelante (Ca++)
O Uso: recuentos celulares, Hematocrito y frotis
sanguíneo.
O Sales de potasio tienen ventaja sobre las de sodio
(solubilidad)
O ICSH recomienda la sal dipotasica
O K2EDTA .2H2O (PM:404,1g) 1g quela 100 mg de
calcio iónico y el pH para una solución al 1% es
de 4.8+/-1,0
O Cantidad: 1.5 – 2.2 mg por ml de sangre
HEPARINA SODICA,
HEPARINA DE LITIO
O Anticoagulante fisiológico
O Impide la transformación de protrombina a
trombina.
O No es recomendado para el usado de
frotis sanguíneo.
O Proporción es de 0.1 ó 0.2 mg a 1mg por
ml de sangre
O Usado para pruebas de fragilidad
osmótica.
Citrato Sódico (C6H5O7Na3)
O Impide que el calcio se ionice.
O Utilizado para las pruebas de hemostasia
y pruebas de sedimentación
O Proporción 9: 1 (hemostasia)
O Proporción 4:1 (pruebas de
sedimentación)
O Se utiliza en una concentración de de
0.106 mol/l (31,3 g/L de
C6H5O7Na3.2H2O).
ACD
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Sangre para la conservación de unidades.
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con 4 volúmenes de sangre
O Composición:
O Acido Cítrico 0.9 g, Citrato disódico 2 g,
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  • 1. Colorante. Coloraciones y Anticoagulantes Lic, Christiam Albornos Andrade Instituto Superior Tecnológico Daniel A. Carrión Curso: Hematología I
  • 2. Colorantes y Coloraciones O Coloración: es el proceso mediante el cual un cuerpo es teñido por una sustancia colorante sin perder el color cuando es lavado con el disolvente utilizado al preparar la solución colorante. O Colorante: son aquellas sustancias que pueden conferir color a otros cuerpos. Es una estructura molecular no saturada (sales neutras)
  • 3. Tipos de Coloración OProgresiva: es aquella en donde se hace actuar el colorante hasta que llegue a su punto optimo teniendo un control en los tiempos de coloración (Hematoxilina de Mayers) ORegresiva: es en donde se realiza primero una sobre coloración y luego se elimina el resto del colorante por medio d diferenciadores. (Diferenciación)
  • 4. O El mecanismo fisicoquímico de la coloración tisular esta vinculado a la formación de uniones intermoleculares por atracción electrostática (entre cargas contrarias-electro adsorción) o por fuerzas d tensión superficial (interacción molecular entre los líquidos por fuerzas de gravitación generadas al dispensar las moléculas muy próximas entres si)
  • 5.
  • 6. Tinciones de Romanowsky O Tinción Giemsa (protozoos) 1g colorante, 66ml metanol y 66 ml glicerol Buffer a pH 6.8 O Tinción Wright 0.3g colorante, 97ml metanol y 3 ml de glicerol. Buffer a pH 7.2
  • 7. O Tinción de May-Grünwald o Jenner (variante del Wright), no produce efecto cromático pero si ayuda a observar las granulaciones leucocitarias.
  • 8.
  • 9. Característica General O 1879: Paul Ehrlich comenzó con una combinación de colorantes básicos y ácidos O 1891: Ernst Malchowski y Dimitry Leonidovich Romanowsky O Conformados por: O Colorante catiónico (Azur B) O Colorante aniónico (Eosina) O Metanol (disolvente) – Fijación => Leishman y Wright O Adición de glicerol => Giemsa (aumentar estabilidad)
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  • 12. Anticoagulantes usados en Hematología O Anticoagulante: sustancia que bloquea el mecanismo de coagulación evitando la formación de fibrina (coagulo) O Uso: obtención de plasma O Mantienen la morfología y fisiología sanguínea. O No usarlo por mas de 24h a 4°C O Los mas usado son: EDTA, Heparina sódica, Heparina de litio, citrato trisodico, ACD, Oxalato de potasio.
  • 13. EDTA (C10H16N2O8) O Presentación: disodica, dipotasica o tripotasica. (etilendiaminotetraacético) O Acción quelante (Ca++) O Uso: recuentos celulares, Hematocrito y frotis sanguíneo. O Sales de potasio tienen ventaja sobre las de sodio (solubilidad) O ICSH recomienda la sal dipotasica O K2EDTA .2H2O (PM:404,1g) 1g quela 100 mg de calcio iónico y el pH para una solución al 1% es de 4.8+/-1,0 O Cantidad: 1.5 – 2.2 mg por ml de sangre
  • 14. HEPARINA SODICA, HEPARINA DE LITIO O Anticoagulante fisiológico O Impide la transformación de protrombina a trombina. O No es recomendado para el usado de frotis sanguíneo. O Proporción es de 0.1 ó 0.2 mg a 1mg por ml de sangre O Usado para pruebas de fragilidad osmótica.
  • 15. Citrato Sódico (C6H5O7Na3) O Impide que el calcio se ionice. O Utilizado para las pruebas de hemostasia y pruebas de sedimentación O Proporción 9: 1 (hemostasia) O Proporción 4:1 (pruebas de sedimentación) O Se utiliza en una concentración de de 0.106 mol/l (31,3 g/L de C6H5O7Na3.2H2O).
  • 16. ACD O Usado fundamentalmente en Banco de Sangre para la conservación de unidades. O Proporción usada: un volumen de ACD con 4 volúmenes de sangre O Composición: O Acido Cítrico 0.9 g, Citrato disódico 2 g, Dextrosa 2 g, H2O destilada 120 ml.