2. Colorantes y Coloraciones
O Coloración: es el proceso mediante el
cual un cuerpo es teñido por una
sustancia colorante sin perder el color
cuando es lavado con el disolvente
utilizado al preparar la solución colorante.
O Colorante: son aquellas sustancias que
pueden conferir color a otros cuerpos. Es
una estructura molecular no saturada
(sales neutras)
3. Tipos de Coloración
O Progresiva: es aquella en donde se hace
actuar el colorante hasta que llegue a su
punto optimo teniendo un control en los
tiempos de coloración (Hematoxilina de
Mayers)
O Regresiva: es en donde se realiza
primero una sobre coloración y luego se
elimina el resto del colorante por medio d
diferenciadores. (Diferenciación)
4. O El mecanismo fisicoquímico de la coloración
tisular esta vinculado a la formación de uniones
intermoleculares por atracción electrostática
(entre cargas contrarias-electro adsorción) o por
fuerzas d tensión superficial (interacción
molecular entre los líquidos por fuerzas de
gravitación generadas al dispensar las moléculas
muy próximas entres si)
5.
6. Tinciones de Romanowsky
O Tinción Giemsa (protozoos)
1g colorante, 66ml metanol y 66 ml
glicerol
Buffer a pH 6.8
O Tinción Wright
0.3g colorante, 97ml metanol y 3 ml
de
glicerol.
Buffer a pH 7.2
7. O Tinción de May-Grünwald o Jenner
(variante del Wright), no produce efecto
cromático pero si ayuda a observar las
granulaciones leucocitarias.
8.
9. Característica General
O 1879: Paul Ehrlich comenzó con una
O
O
O
O
O
O
combinación de colorantes básicos y ácidos
1891: Ernst Malchowski y Dimitry Leonidovich
Romanowsky
Conformados por:
Colorante catiónico (Azur B)
Colorante aniónico (Eosina)
Metanol (disolvente) – Fijación => Leishman y
Wright
Adición de glicerol => Giemsa (aumentar
estabilidad)
10.
11.
12. Anticoagulantes usados en
Hematología
O Anticoagulante: sustancia que bloquea el
O
O
O
O
mecanismo de coagulación evitando la
formación de fibrina (coagulo)
Uso: obtención de plasma
Mantienen la morfología y fisiología
sanguínea.
No usarlo por mas de 24h a 4°C
Los mas usado son: EDTA, Heparina sódica,
Heparina de litio, citrato trisodico, ACD,
Oxalato de potasio.
13. EDTA (C10H16N2O8)
O Presentación: disodica, dipotasica o tripotasica.
O
O
O
O
O
O
(etilendiaminotetraacético)
Acción quelante (Ca++)
Uso: recuentos celulares, Hematocrito y frotis
sanguíneo.
Sales de potasio tienen ventaja sobre las de sodio
(solubilidad)
ICSH recomienda la sal dipotasica
K2EDTA .2H2O (PM:404,1g) 1g quela 100 mg de
calcio iónico y el pH para una solución al 1% es
de 4.8+/-1,0
Cantidad: 1.5 – 2.2 mg por ml de sangre
14. HEPARINA SODICA,
HEPARINA DE LITIO
O Anticoagulante fisiológico
O Impide la transformación de protrombina a
trombina.
O No es recomendado para el usado de
frotis sanguíneo.
O Proporción es de 0.1 ó 0.2 mg a 1mg por
ml de sangre
O Usado para pruebas de fragilidad
osmótica.
15. Citrato Sódico (C6H5O7Na3)
O Impide que el calcio se ionice.
O Utilizado para las pruebas de hemostasia
y pruebas de sedimentación
O Proporción 9: 1 (hemostasia)
O Proporción 4:1 (pruebas de
sedimentación)
O Se utiliza en una concentración de de
0.106 mol/l (31,3 g/L de
C6H5O7Na3.2H2O).
16. ACD
O Usado fundamentalmente en Banco de
Sangre para la conservación de unidades.
O Proporción usada: un volumen de ACD
con 4 volúmenes de sangre
O Composición:
O Acido Cítrico 0.9 g, Citrato disódico 2 g,
Dextrosa 2 g, H2O destilada 120 ml.