Este documento describe un estudio sobre la biorremediación del hexadecano en suelos contaminados utilizando el hongo Aspergillus niger. El estudio evaluó el efecto de la aplicación de una corriente eléctrica de baja intensidad (0,42 mA/cm2) sobre la degradación del hexadecano por A. niger. El método involucró la preparación del inóculo de A. niger a partir de un suelo contaminado con petróleo, la contaminación de un suelo inerte con hexadecano, y la aplicación de una
1. L A I N T E N S I D A D
E L É C T R I C A Y L A
B I O R R E M E D I A C I Ó N D E
“ A S P E R G I L L U S N I G E R ”
E N S U E L O S
C O N TA M I N A D O S C O N
H E X A D E C A N O , E N
L O R E TO , P E R Ú
2. INTRODUCCIÓN
El (HXD), es un hidrocarburo alifático incoloro e insoluble en agua. Esta molécula se utiliza
para investigación en biorremediación.
Los hongos de tipo filamentosos se han sugerido como buenos candidatos para la
degradación de hidrocarburos, dentro de estos hongos destaca Aspergillus niger.
La EK-BIO es una tecnología prometedora para el tratamiento in situ y remediación de
muchos contaminantes orgánicos e inorgánicos en el suelo y las aguas subterráneas (Gill et
al., 2014).
La ruta metabólica consiste en la contabilización del hexadecano en acido palmítico y esta
acción es catalizada por proteínas nombradas alcano hidroxilasas el Palmitoil – CoA es el
compuesto final de esta fase.
La corriente eléctrica al ser aplicada en baja intensidad (0,42 mA/cm2) estimula el
metabolismo catabólico de A. niger, el cual es capaz de degradar altos niveles de hexadecano
en un corto período de tiempo (Velasco et al., 2010).
Hasta la fecha los estudios han estado dirigidos al uso de bacterias y en menor proporción a
hongos de tipo filamentosos, microorganismos que han mostrado tener un elevado potencial
de aplicación en la biorremediación ambiental
La degradación microbiana de HXD y
sus derivados son un importante
campo de investigación, donde el pH,
la temperatura y otros factores de
crecimiento requerido por los
organismos deben ser óptimos (Abdel
et al., 2010).
3. MATERIALES Y MÉTODOS
El método utilizado se puede observar en la Figura 1, tiene
como base el usado por Velasco (2006) en su investigación
titulada “Efecto de un campo eléctrico en la degradación de
hexadecano por Aspergillus niger en un soporte inerte”
Preparación del Aspergillus niger
se pesaron 10 g de suelo contaminado con petróleo en la comunidad
nativa de Monte Rico (Coordenadas UTM 449934N – 9462362E), se
diluyó en 100 ml de solución salina estéril. Se homogenizó y se dejó
reposar por 15 minutos.
Se inoculó 100 μL` en una placa Petri conteniendo agar papa dextrosa,
se sembró por superficie y se incubó a 30 °C por 5 días.
4.
5. Preparación del suelo inerte
Se colocaron cuatro kilogramos de suelo en bandejas y se
dejó secar a temperatura ambiente (30 ± 2 °C); luego, se
tamizó con una malla N°10 con un tamaño de poro de 2,00
mm. Luego se procedió a realizar los análisis físico-químico,
luego se procedió a la esterilización de la muestra.
se solubilizo el compuesto en “n-heptano”, en una relación
de 1,90 mL por cada 180 mg de hexadecano Se impregnó y
homogenizó el suelo con la solución de HXD – n- heptano.
El suelo contaminado se extendió en un recipiente de metal y
se dejó evaporar el heptano a temperatura ambiente (30 ± 2
°C).
Preparación del inoculo
Reactivación del cultivo de Aspergillus niger: El cultivo
refrigerado fue reactivado en caldo Sabouraud glucosado y
se incubó a 30 ºC durante 72 horas. Cumplido este tiempo se
sembró por estrías en placas Petri conteniendo PDA (Agar
Papa Dextrosa)
Se verificó la pureza macroscópica y microscópica. A partir
del cultivo puro se sembraron tubos conteniendo PDA.
Luego de la incubación se conservó hasta el momento de su
uso.