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OBJETIVOS
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Volumen Hematocrito
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.- Cuantificación de los procedimientos en laboratorio
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REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
“Principios de la Fisiología Animal” – Cristopher D. Moyes – PEARSON EDUCACIÓN
S.A – Madrid, Es...
ANEXO
Figura1. Extracción de sangre Método: Puntura de una vena Superficial (Fuente: Miguel
Ortega)
Figura2. Extraccion de sangre, para colocar en las diferentes pipetas. (Fuente: Miguel
Ortega)
Figura3. Sangre diluida con...
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Recuento globular, hematocrito, Dosaje de hemoglobina, Constantes Corpusculares y velocidad de sedimentación en vertebrados

  1. 1. “Recuento globular, hematocrito, Dosaje de hemoglobina, Constantes Corpusculares y velocidad de sedimentación en vertebrados” AUTOR(es): ORTEGA RAMOS Miguel PHOCO Magali RUBIO GONZALES Wilson PROFESOR: Dr. CASTILLO VIERA SEGUNDO FELIX CURSO: FISIOLOGÍA ANIMAL INSTITUCIÓN: Universidad Nacional de Trujillo – Facultad de CIENCIAS BIOLÓGICAS Trujillo – Perú 2014
  2. 2. INTRODUCCIÓN La sangre es un fluido orgánico de gran importancia, debido a que es un valioso medio usado para la valoración del desempeño normal del organismo, teniendo como fundamento que no existe afección que deje de comprometer sus características. En el desarrollo de la presente práctica, observaremos las técnicas más comunes que son utilizadas para cuantificar y valorar sus componentes., de los cuales se realizaron los análisis hematológicos en humanos. Recuento globular: Procedimiento que sirve para determinar el número de elementos formes por mm cubico de sangre, este recuento se da para glóbulos rojos, glóbulos blancos y plaquetas. Hematocrito: Es la relación porcentual que existe entre el volumen del glóbulo rojo y el plasma sanguíneo. Dosaje de Hemoglobina: Sirve para poder determinar la cantidad porcentual de hemoglobina en la sangre. Existen diferentes métodos, de los cuales, el de mayor uso por su grado de simplicidad y eficiencia es el Método de la hematina alcalina. Constantes Corpusculares: Son los valores promedios de: Volumen del hematíe, cantidad de hemoglobina dentro del hematíe y la concentración de la hemoglobina dentro de los glóbulos rojos. Es importante, ya que permite precisar algunos cuadros de anemia. Velocidad de Eritrosedimentación: Es la velocidad por la cual sedimentan los glóbulos rojos cuando la sangre extravasada se le coloca algún tipo de anticoagulante. Es importante precisar que la velocidad de Eritrosedimentación se fe afectada por diferentes factores como: temperatura, fibrinógeno, tamaño del eritrocito, etc.
  3. 3. OBJETIVOS .- Observar e identificar las características y los mecanismos de la coagulación sanguínea. .- Determinar los factores de coagulación en la sangre. .- Cuantificar por procedimientos de laboratorio El número de Glóbulos Rojos y Glóbulos Blancos, el Volumen hematocrito, el Dosaje de Hemoglobina, la Lectura en fotocolorímetro Beckman y los Constantes Corpusculares presentes en la sangre. MATERIALES .- Anticoagulantes EDTA: ácido etilendiaminotetraacético; forma un compuesto con el Calcio evitando la coagulación. Citratos: De acción semejante a la anterior. Heparina: Posee afinidad por las proteínas, como una antitrombina y antitromboplastina. .- Soluciones Solución de Hayem´s: Líquido diluyente para glóbulos rojos. (200 ml) Solución de türk: Líquido diluyente para glóbulos blancos (100 ml) Solución de Hidróxido de Amonio al 0.4 %. .- Lanceta de punción y jeringa hipodérmica. .- Pipetas para glóbulos blancos y rojos. .- Cámara cuenta glóbulos .- Tubos de Hematocrito .- Micropipetas para el dosaje de hemoglobina .- Tubos para determinar la velocidad de sedimentación .- Centrifuga .- Fotocolorímetro .- Microscopio .- Pipetas Pasteur
  4. 4. .- Laminillas cubreobjetos .- Tubos de ensayo .- Animales de Experimentación Para el desarrollo de esta práctica, se optó por la utilización de sangre humana. MÉTODOS Obtención de la muestra de sangre: La técnica de obtención de muestra sanguínea que se desarrollo fue: Puntura de cualquier vaso sanguíneo superficial. Para eso, la zona elegida (zona del brazo) se desinfecta con alcohol yodado, y después, una vez de extraer la sangre, protegemos para proteger de la contaminación el instrumental punzante. Para evitar la coagulación de la sangre, se hace uso de un anticoagulante. Recuento de glóbulos rojos Agitar cuidadosamente el frasco con sangre. Aspirar la sangre hasta la marca de 0.5 y limpiar cualquier exceso de sangre. Llenar la pipeta con la solución Hayem´s, quedando así una disolución de la sangre de 1/200. Luego, sacar el tubo de goma de la pipeta, y mezclamos muy cuidadosamente. Poner en contacto una gota en el borde del cubreobjetos que se ha colocado sobre la cámara, de manera que el líquido llene la cámara. Colocar la cámara en el microscopio, y localizar el campo de visión. Contar las células en los cuatro campos de las esquinas el del centro el de 16 cuadritos cada uno. Incluir en cada cuadrado las células que se encuentran en la línea superior e izquierda de cada cuadrado. Calcular el número promedio de células por cada cuadrado pequeño. Recuento de glóbulos blancos La técnica de tomar la muestra es la misma que para eritrocitos, pero la pipeta usada tiene mayor diámetro y cuando se llena con sangre hasta la marca 0,5, se diluye con la solución de türk, quedando una dilución de 1/20 Colocar el líquido en la cámara y contar los leucocitos de los cuatro mm. De las esquina, y luego sumarlos. Realizar el cálculo correspondiente para glóbulos blancos.
  5. 5. Volumen Hematocrito En un tubo de Wintrobe para hematocrito, llenar con sangre citratada hasta la marca 100, centrifugar por 30 min, hasta que el volumen de eritrocito permanezca invariable, y luego realizar la lectura. Dosaje de Hemoglobina Con una micropipeta para Hemoglobina, tomar 0,02 ml de sangre, y luego pasarlo varias veces por un tubo, el cual contiene una solución de NH4(OH), luego aflorar con a 5 ml con dicha solución. Dejar en reposos por un periodo de 5 min, después, leer en fotocolorímetro. RESULTADOS Recuento de Glóbulos Rojos: N: Numero de hematíes en los 80 cuadritos contados (N = 531) Factor por mm cubico: 10000 N x 10000 Resultado: 5310000 (número de glóbulos rojos por mm cubico). Recuento de Glóbulos Blancos: N: Numero de glóbulos blancos contados en los cuatro milímetros cuadrados. (N = 108) Factor por milímetro cubico: 50 N x 50 Resultado: 5400 (número de glóbulos blancos por mm cubico). Volumen hematocrito Dosaje de Hemoglobina Lectura en fotocolorímetro Beckman: 11.6 (cantidad de gramos por cada 10ml) Constantes Corpusculares V.C.M: Volumen medio correspondiente a un eritrocito: 101.69 micras cubicas Hb.C.M:
  6. 6. Cantidad media de Hemoglobina correspondiente a un eritrocito: 22.02 microgramos C.Hb.C.M: Concentración de la Hemoglobina dentro del eritrocito: 21.65 % Velocidad de Eritrosedimentación 11:35 am (Inicio del procedimiento) 12:02 pm (Finalizado del procedimiento) 4mm en 30 min Resultado: 8 mm en 1 hora (Resultado de Eritrosedimentación). CONCLUSIONES .- Los mecanismos que dan resultado para la coagulación de la sangre son: Vasoconstricción Formación del tapón plaquetario Producción de una malla de fibrina, el cual envuelve el tapón plaquetario. .- Los factores de coagulación de mayor importancia son: Factores F I Fibrinógeno: Proteína soluble al plasma F II Protrombina: Adherida a la membrana plaquetaria F III Se libera del endotelio vascular a causa de una lesión. F IV Calcio F V Proacelerina, adherida a la membrana plaquetaria. F VI -Sin Datos- F VII Proconvertina F VIII Factor antihemofílico. Adherido a la membrana plaquetaria. F IX Antihemofílico B. Adherido a la membrana plaquetaria. F X Factor de Stuart-Power. Adherido a la membrana plaquetaria. F XI Factor antihemofílico C F XII Factor de Hageman. F XIII Factor estabilizante de la fibrina.
  7. 7. .- Cuantificación de los procedimientos en laboratorio Recuento de Glóbulos Rojos 5310000 (número de glóbulos rojos por mm cubico) Recuento de Glóbulos Blancos 5400 (número de glóbulos blancos por mm cubico) Dosaje de Hemoglobina 11.6 (cantidad de gramos por cada 10ml) Constantes Corpusculares V.C.M 101.69 micras cubicas Hb.C.M 22.02 microgramos C.Hb.C.M 21.65 % Velocidad de Eritrosedimentación 8 mm en 1 hora (Resultado de Eritrosedimentación)
  8. 8. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS “Principios de la Fisiología Animal” – Cristopher D. Moyes – PEARSON EDUCACIÓN S.A – Madrid, España, 2007 “Fisiología Animal Mecanismos y Adaptaciones” – 4° Edición – David Randall – PANAMERICANA – Madrid, España, 2002 REREFERENCIAS DE PÁGINAS WEB Cátedra de Fisiología I – Facultad de Medicina U.A.E.M: http://www.kardiagnostx.com/documentos/Hemato_36.pdf Tema 02. Coagulación sanguínea: http://ocw.um.es/cc.-de-la-salud/fisiologia-animal/Material%20de%20clase/bloque- 1-cap-2-tema-2.-coagulacion-sanguinea.pdf Estado Actual del mecanismo de la coagulación sanguínea – Instituto de Hematología e Inmunología: http://bvs.sld.cu/revistas/hih/vol17_2_01/hih01201.pdf
  9. 9. ANEXO Figura1. Extracción de sangre Método: Puntura de una vena Superficial (Fuente: Miguel Ortega)
  10. 10. Figura2. Extraccion de sangre, para colocar en las diferentes pipetas. (Fuente: Miguel Ortega) Figura3. Sangre diluida con Nh4(OH) (Fuente: Miguel Ortega)

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