Realizado para el Curso: Genética Animal - UNT - ZOOTECNIA - 2014. IMPORTANTE: Este documento ha sido realizado con libros de consulta y documentos físicos y/o en línea. Si no se encuentra debidamente referenciado, las disculpas respectivas a los autores. Referénciame en tu Bibliografía si te ha servido el material. Recomienda este documento.

1. “Determinación de la presencia de
DNA en cromosomas eucarióticos
vegetales”
AUTOR(es): Ortega Ramos Migue Angel
PROFESOR: Mg. Manuel Fernando Pesantes Vera
CURSO: Genética General
INSTITUCIÓN: Universidad Nacional de Trujillo – Facultad de
CIENCIAS BIOLÓGICAS
Trujillo – Perú
2014

2. INTRODUCCIÓN
La reacción de Feulgen es una reacción de estequiometria y especifica del ADN.
El fundamento de este método se basa en la identificación altamente específica de ácidos
nucleicos de ADN a partir del reconocimiento de los grupos aldehídos de la pentosa.
Para esto, se realizan dos pasos fundamentales:
.- Hidrolisis Acida
Se utiliza para romper los puentes de hidrógenos que unen a la doble hélice, mediante
la desnaturalización de la cadena. Para esto se utiliza HCl, que es el componente reactivo
más crítico del método, controlando la concentración de ácido, temperatura y tiempo, que
depende del tipo de tejido (compactación de cromatina) y fijador empleado.
Durante la hidrolisis acida, la mayor parte del ARN se divide en sustancias solubles
y se pierde del tejido; por su parte el DNA es parcialmente hidrolizado, siendo removidas y
liberadas las bases púricas (A y G) de los residuos de desoxirribosa (depurinización)
formando ácido apurínico y generando grupos aldehído (CHO).
.- Tinción con reactivo de Schiff
Los grupos aldehídos liberados por la hidrolisis de Feulgen son teñidos con reactivos de
Schiff.
Los resultados son DNA (cromatina nuclear, cromosomas) teñido color fucsia y fondo
incoloro.
Solamente el método de Feulgen puede considerarse estequiométrico en donde es posible
observar una intensidad de coloración proporcional a la concentración de DNA.
(J.A. Kiernan; 1999)
OBJETIVO
.- Determinar la presencia de ADN en las raíces de cebollas.

3. MATERIALES
.- Material Biológico:
Raíces de Cebolla
.- Material de Laboratorio:
Ácido Clorhídrico
Agua Destilada
Reactivo de Schiff
01 Lamina
01 Laminilla
01 Matraz
01 Microscopio
01 Navaja
01 Tubo de ensayo
MÉTODO
Colocar las cebollas en el periodo de brote de raíces. Una vez brotadas las raíces de la cebolla,
seccionarlas y separarlas, las cuales serán colocadas en un tubo de ensayo, para así darles el
procedimiento de fijado de raíces; el fijado de las raíces tiene por finalidad el de integrar el
reactivo de tinción, y de esa manera poder reconocer después del proceso de experimentación
la presencia de ADN en sus diferentes fases.
Una vez fijadas las raíces, se debe proceder al lavar las raíces fijadas con agua destilada por
un espacio no menor a tres veces.
Esperar el periodo de secado por aireación de las raíces de cebolla, y realizar el proceso de
hidrolisis Ácida del ADN; procedimiento el cual se realizara con Ácido clorhídrico (HCl).
Este procedimiento se realiza a una temperatura de 55 °C, y en un periodo de tiempo de 8
minutos.
Pasado los procedimientos anteriores, y el tiempo requerido, se procede a realizar una
segmentación de la zona coloreada de las raíces en experimentación, las cuales, serán luego
llevadas a observación en microscopio, mediante el proceso de “SQUASH” (Proceso de

4. fijación de la muestra entre lámina y laminilla). Con la finalidad de observar los cromosomas
en su expresión de tinción en microscopio.
RESULTADO
Se observa las células en las principales etapas de mitosis Metafase, Anafase y Telofase.
Figura 1. Observación en microscopio de células de raíces de cebolla en proceso de
mitosis. (Fuente: Miguel Ortega)
DISCUSIÓN
Los resultados, reportan la observación especifica de los Ácidos nucleicos de DNA, lo cual,
como se observa en la Figura 1. Se muestran en medio del proceso de mitosis.
Esto, presenta una correlación unánime con lo expuesto sobre la tinción de Feulgen, en la
que se expresa la diferenciación mediante la tinción de ADN en células eucariontes.

5. CONCLUSIÓN
Mediante la tinción de Feulgen se logró determinar la presencia de ADN en las raíces
de cebollas, las cuales se logran identificar en la observación en microscopio, ya que estas se
encuentran realizando el proceso de Mitosis, lo cual indica que en su efecto son cromosomas
de DNA.
REFERENCIAS WEB
.- Reacción de Feulgen: http://www.fisicabiologica.com.ar/curso-criopreservacion-de-
gametas-2009/ppt/REACCION%20DE%20FEULGEN.pdf
.- Método de Feulgen y Rossenberg – Tecnología Médica mención morfofisiopatología y
citodiagnóstico: http://morfoudec.blogspot.com/2008/10/mtodo-de-feulgen-y-rossenberg-
1921.html