2. Proceso histopatológico.
1º Paso: Obtención un
tejido.
Mediante:
• Biopsia; tejido vivo.
•Autopsia; tejido muerto.
*Tomando en cuenta
factores de pronostico y
riesgo.
3. 2º Paso: Fijación.
• En general obtenida mediante el empleo de sustancias químicas
individuales o mezclas de estas.
• El fijador de uso más común es la formalina (formol/formaldehído). Al
10%, penetra 1 cm cada 24hrs. Este fijador no reacciona con los lípidos,
por lo tanto es un mal fijador de las membranas.
• El líquido de Bouin es una solución alternativa.
Se utiliza para:
• Suspender el metabolismo celular
• Impedir la degradación
• Destruir los microrganismos patógenos como las bacterias, hongos o los
virus.
¿Por qué el formaldehído preserva la estructura general de la célula?
*Lo logra como consecuencia de la formación de enlaces cruzados o la
desnaturalización de los grupos aminos de las proteínas (con frecuencia, de
lisina)
4. 3º Paso: Inclusión. Elección del corte o muestra
adecuada de una biopsia.
4º Paso: Deshidratación. En una serie de
soluciones alcohólicas (alcohol absoluto).
5º Aclarado. Se utilizan solventes orgánicos
(xileno o tolueno).
6º Parafinización.
5. Histoquinete
• Es un instrumento que
hace más ágil el
proceso de los métodos
histológicos, realiza los
pasos de fijación,
deshidratación,
aceleración e inclusión.
6. 7º Paso: Corte y tinción.
• Una vez para realizada
la parafinización, se
crea un bloque llamado
taco.
• El taco se coloca en el
microtomo, que es una
maquina cortadora
especial. (corte delgado
de 5 a 15 micrómetros)
Bloque
(taco)
celda
7. • Los cortes se montaran sobre portaobjetos
con albumina (Pegamento).
• De nuevo deben disolverse en xileno y
tolueno.
• Luego se tiñen.
8. • La hematoxilina y la eosina, se utilizan en histología
principalmente para poner en evidencia las características
principales estructurales. Excepto:
• Elastina.
• Fibras reticulares.
• Membranas basales.
• Lípidos.
Y pueden usarse otros métodos.
8º Paso: Interpretación (resultados).
9. Histoquimica y citoquimica
• Tienen fundamento en la union especifica de un colorante
fluorescente en la celula.
Composición química de un tejido:
Elementos que perduran luego de la fijación
• Nucleoproteínas
• Proteínas intracelulares del cito esqueleto
• Proteínas extracelulares
• Complejos de fosfolipidos y proteínas(o carbohidratos) en
las membranas.
*Todas ellas macromoleculas.
10. Que desaparecen luego de la
fijación:
• Glucogeno
• Proteoglucogenos y
glucosaminoglucanos
Colorantes ácidos y básicos.
• La capacidad de reaccionar a un
colorante básico (de carga
negativa) se llama basofilia.
• Y, los que reaccionan con
colorantes ácidos (de carga
positiva) se llaman acidofilia.
• Metacormasia.- Es el fenómeno
por el cual un colorante cambia,
por altas concentraciones de
polianiones. polímero que posee
electrolitos
12. • Inmunocitoquímica.- técnicas que permiten
demostrar la reacción entre un antígenos y un
anticuerpo. Se emplea para la diferenciación de
tumores.
• Técnicas de hibridación.- se utiliza para
identificar y localizar secuencias de ADN en una
mezcla compleja y que son complementarias a
otro fragmento de ADN llamado sonda.
• Radioautografía.-Se utiliza para localizar material
radiactivo en los tejidos.
13. Microscopia Óptica
• Microscopio de campo claro:
es actualmente el microscopio
más utilizado por los
estudiantes, ello es el
microscopio descendente de
los utilizados en el siglo XIX.
Otros microscopios:
• ME
• MET la resolución
. aumenta
• MEB