Este documento describe la citología de la médula ósea. Explica las indicaciones para realizar un examen de médula ósea, como el diagnóstico de enfermedades hematopoyéticas y la evaluación de neoplasias y enfermedades infecciosas. Detalla el procedimiento para la obtención y procesamiento de la muestra de médula ósea, así como los tipos de tinción utilizados. Finalmente, ofrece información sobre la interpretación citológica, incluyendo la evaluación de las series eritroide, mieloide, mon

1. CITOLOGÍA DE LA MEDULA ÓSEA
Natalia molina
Juan Fernando Ruiz
Sara cristina Londoño
Julián Vasco

2. INDICACIONES
• Diagnostico de enfermedades
hematopoyéticos
• Aporta información sobre la capacidad
hematopoyética
• Evaluación de enfermedades infecciosas y
neoplasias

3. • Indicado cuando en sangre periférica
aparecen aumentos o descensos persistentes
del # de células o anormalidad celular sin
causa aparente
• Examen de medula ósea: evaluación
citológica (ppal por aspiración) o biopsias para
obtener un diagnostico completo

4. Causa más frecuentes
Citopenias Anemias no regenerativas,
trombocitopenias,
leucopenias(neutropenias, linfopenias)
Bicitopenias, pancitopenas
Aumento persistente del # celular en
sangre circulante
Eritrocitosis, leucocitosis, trombocitosis
Presencia de células anormales en sangre
circulante
Leucemias, linfosarcomas, alteraciones
morfológicas de GR
Dx o control de evolución de neoplasias
hematopoyéticas
Leucemias (linfocitica, granulocitica,
monocitica)
Evaluación de la afectación de la MO en
ciertas neoplasias
Linfoma, mastocitoma
DX y evolución de enfermedades
infecciosas
Leishmaniosis, ehrlichiosis,
Histoplasmosis, toxoplasmosis
Control de los depósitos de hierro en MO Dx diferencial de anemias ferropenicas
Otras patologías Hiperproteinemia( sugestiva de mieloma)
Fiebre de origen desconocido
Hipercalcemia de origen desconocido

5. Obtención y procesamiento
• Agujas Para punción:
 1. Agujas de Rosenthal
 2. Agujas de
Jamshidi/illinois
• Son firmes para atravesar
la superficie ósea
• Tienen un fijador interno
que impide su
obstrucción
• Calibre 16G(Perros
medianos a grandes) 18G
( perros pequeños o
gatos)

6. • CRESTA DEL ÍLEON
• Colocación del
paciente: decúbito
lateral o esternal
• Localizar por palpación:
cresta iliaca
• Punto de inserción:
parte dorsal del íleon
HUESOS CON ACTIVIDAD
HEMATOPOYÉTICA

7. • ALA DEL ÍLEON
• Colocación del
paciente: decúbito
lateral
• Localizar por palpación:
cresta y ala del íleon
• Punto de inserción:
depresión central del
ala del íleon

8. • COSTILLA
• Colocación del paciente:
decúbito lateral.
• Localizar por palpación:
unión costocondral (7, 8,
9 costilla).
• Punto de inserción:
unión costocondral, en
dirección ascendente al
eje longitudinal
• ESTERNÓN
• Colocación del
paciente: decúbito
supino.
• Localizar por palpació
3, 4 o 5 esternebra.
• Punto de inserción:
línea media de la
esternebra

9. • FÉMUR
• Colocación del
paciente: decúbito
lateral.
• Localizar por palpación:
trocanter mayor del
fémur.
• Punto de inserción:
fosa trocanterica (cara
medial)

10. • HÚMERO:
• Colocación del paciente:
decúbito lateral
• Localizar por palpación:
tuberosidad proximal
• Punto de inserción:
superficie plana
adyacente a la
tuberosidad dorsal

11. PROCEDIMIENTO
• Infiltrar: piel, tejido subcutáneo, músculo,
periostio Anestésia local 1-3ml (lidocaína
2%)
• Incisión hoja bisturí (#11) Introducir aguja
(3-5mm en el hueso) Retirar fijador
Acoplar Jeringa (10ml) Aspirar.
• Obtener sólo unas gotas de MO (mucho vlm
de muestra se diluye con sangre).

12. • Procesar muestra
rápidamente
(coagulación en menos
de 30sg) Mezclar con
EDTA
• Técnica de extensión:
método squash o de
aplastamiento

13. TIPOS DE TINCIÓN
1. Evaluación citológica simple
 Técnica Romanowsky (May-Grünwald, Wright-
Giemsa o tinción rápida)
 Áreas densas (teñidas de color azul-púrpura):
partículas medulares.
 Zonas claras o vacías: gotas de grasa
2. Evaluación depósitos de Fe
 Tinción: Azul de Prusia
 Hemosiderina dentro de los macrófagos (se tiñe
de azul)

14. 3. Tinciones citoquímicas especiales
 Realizar Dx diferenciales de leucemias
Tinción Leucemia
linfoide
Laucemia
Mieloide
Leucemia
Monocítica
Laucemia
Mielo-
Monocítica
Peroxidasa - + - +
Sudán Negro - + + +
Fosfatasa
Ácida
- + + +
Esterasas no
específicas
- - + +
Cloro-acetato-
esterasa
- + + +

15. INTERPRETACIÓN CITOLÓGICA
• SERIE ERITROIDE
Células de contorno muy redondeado con
citoplasma intensamente basófilo que se va
aclarando con su maduración
Maduración:
 tamaño celular y relación núcleo-citoplasma disminuye
 Cromatina nuclear se condensa

16. MADURACIÓN SERIE ERITROIDE
1. Rubiblasto
(proeritroblasto)
2. Prorrubricito
(eritroblasto basófilo)
3. Rubricito (eritroblasto
policromatófilo)
4. Metarrubricito
(eritroblasto
ortocrómatico o
acidófilo)
5. Reticulocito
6. Eritrocito Maduro
❶
❷ ❸
❸ ❹
❹

17. INTERPRETACIÓN CITOLÓGICA
• SERIE GRANULOCÍTICA O MIELOIDE
Producción: neutrófilos, eosinófilos, basófilos
Maduración:
 tamaño celular y relación núcleo-citoplasma disminuye
 Cromatina nuclear se condensa
 Núcleo pasa de ser redondeado a indentarse y
segmentarse
 Basofília citoplasmática disminuye

18. MADURACIÓN SERIE MIELOIDE
1. Mieloblasto
2. Promielocito
(progranulocito)
3. Mielocito
4. Metamielocito
5. Célula en banda
6. Célula segmentada
❶ ❷
❸
❹
❺

19. INTERPRETACIÓN CITOLÓGICA
• SERIE MONOCÍTICA
No son abundantes en MO (<5%)
Prácticamente imposible diferenciar las fases
inmaduras
Maduración:
 Monoblasto
 Promonocito
 Monocito
 Macrófago

20. INTERPRETACIÓN CITOLÓGICA
• SERIE MEGACARIOCÍTICA
Formación de plaquetas (trombocitos)
Células de mayor tamaño en el aspirado
División celular por endomitosis: reduplicaciones
del núcleo que no se acompañan de divisiones de
la célula

21. MADURACIÓN SERIE
MEGACARIOCÍTICA
1. Megacarioblasto
2. Promegacariocito
3. Megacariocito basófilo
4. Megacariocito
5. Trombocito ó plaqueta
❷
❸
❹

22. INTERPRETACIÓN CITOLÓGICA
• SERIE LINFOCÍTICA
 Numero de células
escaso en comparación
con las demás
 Prácticamente
imposibles de identificar
morfológicamente
(inmaduros)
 Superior en gatos (10-
15%) que en perros (4-
5%)

23. OTRAS CÉLULAS
• OSTEOCLASTOS
 Múltiples núcleos claramente
separados
 Citoplasma teñido de azul con
granulaciones rojizas-
magenta.
 Ocasional en adultos,
frecuente en jóvenes
 adultos: sospechar de
patologías con aumento de la
osteólisis (hipercalcemia
asociada a patologías
malignas).

24. • OSTEOBLASTOS
 FRECUENTES EN ANIMALES
JÓVENES
 CITOPLASMA BASÓFILO Y
ABUNDANTE, ASPECTO
ESPUMOSO,
NORMALMENTE CON
NUCLEOLO VISIBLE.
 APARECEN VARIOS JUNTOS
FORMANDO GRUPOS.

25. • MISCELÁNEA
Células vasculares (células endoteliales de los
capilares medulares)
Células conjuntivas (células reticulares)
Adipocitos
Mastocitos (procesos inflamatorios, aplasias
medulares o mielofibrosis, mastocitomas
sistémicos).

26. • CÉLULAS DEGENERADAS Y NÚCLEOS LIBRES:
 Frecuente núcleos libres rotos por la obtención de la
muestra(granulocitos).
 También núcleos redondos y picnoticos por los
metarrubricitos.
• FIGURAS MITÓTICAS:
 Normal por ser un órgano hematopoyético
 la proporción no debe ser superior al 2%.

27. EVALUACIÓN CLÍNICA DE ASPIRADOS
• Evaluación conjunta de muestra de sangre periférica
obtenida simultáneamente (recuento celular y examen de
frotis).
1. Calidad de la muestra
2. Celularidad
3. # Relativo y morfología de los megacariocitos
4. Relación mieloide: eritroide y recuento diferencial
5. Maduración y morfología de las series eritroide y mieloide
6. Presencia y morfología de otros tipos celulares habituales
en M.O
7. Presencia de otras células, microorganismos

28. 1. CALIDAD DE LA MUESTRA
• Poca contaminación con sangre periférica.
• Zonas gruesas (partículas medulares): evaluar
celularidad.
• Zonas finas (células disgregadas): evaluación
de morfología

29. 2. CELULARIDAD
• Poco aumento: 20x – 40x
• Se estima la proporción de
células hematopoyéticas
nucleadas en comparación
con la cantidad de tejido
adiposo.
 Jóvenes 75% tejido
hematopoyético, 25%
tejido adiposo.
 Adultos: 25% tejido
hematopoyético, 75%
tejido adiposo

30. HIPOCELULARIDAD
• Tejido hematopoyético inferior
al porcentaje normal.
• CAUSAS
 Técnica de aspirado incorrecta.
 Contaminación excesiva de
sangre periférica.
 Verdaderas patologías.
• No es confiable para
diagnostico definitivo.
• Se recomienda repetir
extracción.
• Si persiste: posible patologías
medulares.
• Se recomienda biopsia.

31. HIPERCELULARIDAD
• Excede el porcentaje
normal (25% o 75%) de
células hematopoyéticas.
• Asociado casi siempre a
un aumento de la
actividad hematopoyética
(benigna o neoplásica) o a
metástasis de neoplasias
extramedulares.

32. 3. EVALUACIÓN DEL NÚMERO RELATIVO Y
MORFOLOGÍA DE LOS MEGACARIOCITOS
• Objetivo 10x.
• Normal encontrar 50 a 100 en una extensión
(2 a 7 por cada partícula medular).
• Es frecuente encontrar neutrófilos dentro de
algún megacariocito (emperipolesis), sin
importancia patológica.

33. • como respuesta
compensatoria a una
trombocitopenia por
causas extramedulares
 Hiperplasia
megacariocítica:
proporcional de todas
las fases de maduración.
 Laucemia
megacariocítica:
desproporcionado de las
fases inmaduras

34. 4. EVALUACIÓN DE LA RELACIÓN MIELOIDE: ERITROIDE
(RATIO M:E) Y RECUENTO DIFERENCIAL
• Se realizan cálculos de las proporciones relativas de las series
mas abundantes en MO (relación o ratio mieloide: eritroide,
ME) junto con una estimación de sus fases de maduración.
• Se cuentan 500 células nucleadas a 100x, (incluyendo
granulocitos maduros) y se divide entre el numero de células
eritroides.
• Valores normales:
 Perro: 0.75 – 2.53
 Gato: 1.21 – 2.16

35. 5. MADURACIÓN Y MORFOLOGÍA DE
LAS SERIES ERITROIDE Y MIELOIDE:
• Necesario examinar 3 extensiones distintas de
la misma muestra.
• En la morfología se evalúan cambios
citoplasmáticos y nucleares.
• la mayoría de alteraciones morfológicas
reflejan alteraciones en la maduración celular
(displasia).

36. Hiperplasia granulocítica
(neutrófilos), en perra con píometra.
Hiperplasia granulocítica
(eosinófilos) en perra con linfoma
mediastínico.

37. CLASIFICACIÓN DE LA MADURACIÓN
• Normal y ordenada: proporción normales de
todas las fases de maduración.
• Desordenada: casi siempre un aumento de las
fases mas inmaduras o cambios displásicos.
• Detenida: maduración se detiene en
determinada fase.
• Neoplásica: severo aumento de la población
de blastos.

38. MORFOLOGÍA Y MADURACIÓN DE LA SERIE
ERITROIDE
• Deben de estar presentes todas las fases de
maduración eritroide y en las proporciones
adecuadas, y asimismo la morfología celular
normal.
• proporcional de fases inmaduras y maduras, es
una respuesta adecuada a una anemia por causas
periféricas (anemia regenerativa).
• fases Inmaduras pero no las maduras, sugiere
una alteración en la proliferación de esta serie.

39. Hiperplasia eritroide en paciente con
anemia inmunomediada

40. MORFOLOGÍA Y MADURACIÓN DE LA SERIE
GRANULOCÍTICA
• Se valora si la maduración es completa y ordenada,
presencia de posibles alteraciones morfológicas como
vacuolas citoplasmáticas, aumento anormal del tamaño
celular etc.
• Posibles aumento patológicos de basófilos o eosinófilos
asociados a procesos inflamatorios o alérgicos.
• Para evaluar objetivamente: calcular índice maduración
eritroide (IME) y mieloide (IMM)

41. ÍNDICES DE MADURACIÓN
Índice IME
• Es la suma de células
eritroides nucleadas en fase
de maduración dívidido la
suma de células eritroides
en fase de proliferación.
• IME = Metarrubricitos /
rubiblastos + prorrubricitos
+ rubricitos
• IME = 5,2±1,7
Índice IMM
• Es la suma de células
mieloides en maduración
divido la suma de células
mieloides en proliferación.
• IMM = metamielocitos +
bandas + células
segmentadas / mieloblastos
+ promielocitos + mielocitos
• IMM= 4,4±1,4

42. 6. Presencia y morfología de otros
tipos celulares habituales en M.O
• SÍNDROME MIELODISPLÁSICO: 5-30% de todas las células nucleadas
son blastos.
• ENFERMEDADES PROLIFERATIVAS AGUDAS: blastos superan el 30%
del total de células nucleadas.
• LEUCEMIAS CRÓNICAS: aumento marcado de las fases maduras de
la serie afectada (incremento significativo del numero de células
maduras en sangre periférica)
• Las neoplasias hematopoyéticas se dividen en general en
mieloproliferativas y linfoproliferativas, su diferenciación y
clasificación es compleja por eso se requiere de tinciones
especiales, biopsias e incluso inmunofenotipado.

43. 7. EVALUACIÓN DE LA PRESENCIA DE OTRAS
CÉLULAS O MICROORGANISMOS
• Evaluar posible presencia de células extrañas o
poco habituales en MO (metástasis de
neoplasias extramedulares).
• Metástasis medular: presencia de una
población celular ajena a la MO con criterios
de malignidad (poco común en veterinaria).

44. • Mielofibrosis:
sustitución del Tejido
hematopoyético por
fibroblastos y colágeno.
• Paciente con aplasia
medular por moquillo

45. Presencia de abundantes
amastigotes de
Leishmania en
macrófago medular

46. ALTERACIONES MÁS FRECUENTES

51. BIBLIOGRAFÍA
• MARTÍNEZ DE MERLO, Elena M. Atlas de
Citología Clínica del Perro y del gato. ED:
SERVET. P:364-407 capitulo: citología de
medula ósea.