2. Diagnostico viral.
• El diagnóstico virológico comprende la detección e identificación del agente
etiológico de una infección viral, clínica o inaparente, y /o de la respuesta inm
une específica del huésped.
• El diagnostico clínico ayuda a la orientación de la prueba mas apropiada a realizar.
5. Métodos diagnósticos directos.
• Demuestra la presencia del virus en la muestra clínica o de alguno
de sus constituyentes antígeno o genoma viral.
Va a detectar:
• El virus como agente infeccioso.
• La presencia de antígenos
virales.
• La presencia de ácidos nucleicos
virales.
• El virus como partícula viral.
6. Métodos diagnósticos directos.
Método. Definición / Objetivo. Ejemplo.
Microscopia electrónica. Mediante el microscopio electrónico es
posible observar la morfología de los
viriones presentes en muestras clínicas.
Herpes simple.
Varios tipos de herpes.
Rotavirus.
Parvovirus.
Virus ebola.
VIH.
Adenovirus.
Hepatitis B.
Aislamiento viral – cultivos celulares. Va a detectar el virus como agente
infeccioso, existen tres tipos de cultivos
celulares: * cultivos primarios, * líneas
celulares diploides, * líneas celulares
continuas.
7. Métodos diagnósticos directos.
Método. Definición / Objetivo. Ejemplo.
PCR
Reacción en cadena de la polimerasa.
Es una técnica de laboratorio que
permite amplificar pequeños fragmentos
de ADN para estudiarlos e identificar
gérmenes microscópicos que causan
enfermedades.
Retrovirus
VIH
Hepatitis B
VPH
Herpes virus
Virus del ebola
Etc…
IFD
Inmuno fluorescencia directa
Es una de las técnicas más antiguas y de
uso más difundido en el laboratorio
clínico.
Esta técnica se puede utilizar para una
identificación rápida del virus
directamente sobre la muestra.
Virus influenza
VIH
Virus respiratorios
Rabia
Herpes virus
Etc…
8. Métodos diagnósticos directos.
Método. Definición / Objetivo. Ejemplo.
ELISA
Ensayo por inmunoabsorción ligado a
enzimas.
– Pueden detectar tanto la presencia de
Ac específicos como de antígenos virales.
– Enzima reacciona con un sustrato para
convertirlo en un producto coloreado.
*Muy sensible
Virus del ébola, herpes simple
Varicela, parotiditis, sarampión
VIH
Virus Hepatitis B
Citomegalovirus, enterovirus, arbovirus
Influenza, parainfluenza
Etc.
ELECTROFORESIS Es un método de separación de
moléculas al ser sometidas una corriente
eléctrica.
VIH
9. Otros métodos diagnósticos directos.
Test de aglutinación
Radioinmunoensayo (RIA)
Sondas de ácidos nucleicos
Sondas sintéticas
10. Métodos diagnósticos indirectos.
• Son aquellos que reconocen la respuesta inmune (humoral o celular) por parte
del huésped:
• Detección de anticuerpos
específicos antivirales mediante
técnicas inmunológicas.
• Producción de anticuerpos in vitro.
• IgM específica o Conversión
serológica por IgG para inf. Agudas.
• IgG en inf. crónicas o para
diagnóstico retrospectivo
11. Método Definición/objetivo Ejemplos
HA
Prueba de la hemaglutinación
Eritrocitos se pueden sensibilizar con
diversos Ag y se pueden utilizar como
sistema indicador. Si se descubren Ac,
la reacción se revelará como una
hemoaglutinación que se puede
advertir fácilmente a simple vista.
Virus del dengue, fiebre amarilla
Virus influenza, parainfluenza
Parotiditis.
Sarampión.
Varicela
MHA
Prueba microhemaglutinacion
Permite detectar Ac por técnica de
hemaglutinación, usando glóbulos rojos
IFI
Inmunofluorescencia indirecta
Método rápido y confiable para la
determinación de Ac antivirales en el
suero del paciente.
La presencia de Ac se evidencia por la
aparición de fluorescencia en el
citoplasma y superficie de las células
infectadas, mientras que las células
control no fluorescen.
Rubéola, sarampion, parotiditis
VIH.
Citomegalovirus, arbovirus.
Virus del herpes simple
Varicela
(ELISA la ha desplazado porque ofrece
mayor especificidad)
12. Vigilar antisueros o
sobrenadantes que contienen
acs específicos cuando las
cantidades de ags están en gran
proporción.
MATERIALES ORGANICAS
• Del paciente :saliva, orina,
heces, sangre ETC.
• Ags
• Acs
MATERIALES NO ORGANICOS.
• Microplacas.
• Espectrofotómetro.
FASES
Fijación al soporte de Ags
específicos para los Acs de
estudio se hace lavado de Ags.
Adición del suero problema
donde reaccionaran los Acs
con los Ags específicos fijados.
método de elección para
detectar la presencia de
anticuerpos séricos contra el
VIH.
13. Fármacos usados para el tratamiento de
infecciones producidas por virus.
Antiviral Interferón Profiláctico
RetroviralesNo
retrovirales
Vacunas
14. No retrovirales
• Inhibidores de la síntesis de proteínas
virales: Interferón alfa
• Inhibidores de síntesis de ARNm:
Ribavirina
• Inhibidores de DNA polimerasa: aciclovir
, ganciclovir.
• Inhibidores de la liberación del genoma
viral: amantadina, rimantadina.
Retrovirales
• Inhibidores de transcriptasa reversa
nucleótidos: Zidovudina
• Inhibidores de la transcriptasa reversa no
nucleótidos: neviparina
• Inhibidores de la proteasa : saquinavir
15. Son citosinas potentes con
actividad
inmunomoduladora
antiprolifetativa
antiviral
Son proteínas
sintetizadas por casi
todas las células del
organismo
Reaccionan a diversos
factores inductores
herida
traumatismo
infección viral
Los interferones con
potencia antiviral se
denominan INF
antivirales o INF tipo 1:
INFα
INFβ
16. CLICLO VIRAL-MACANISMO DE ACCION
Rivavirina Aciclovir Ganciclovir* Amantadina
rimantadina
Inhibe síntesis de RNAm Inhiben la síntesis de ADN:
• Inhibición competitiva de la
ADN-polimerasa del HSV.
• Terminación de la cadena
del ADN viral.
• Inhibición no competitiva
de la ADN-polimerasa del
HVS.
Compite por la inhibición viral
de la ADN-polimerasa
Inhiben liberación del genoma
viral
• Hepatitis C crónica
(Flavivirus)
• Bronquiolitis y neumonía
(Paramixovirus)
• Infecciones recurrentes de
herpes labial y genital.
• Encefalitis en infección
neonatal por HSV.
• CMV - Citomegalovirus
• HSV - Virus del herpes
simple.
• VZV- Virus de varicela
zoster.
• EBV- Virus Epstein Barr
• Influenza A
17. ATENUADAS:
Son derivadas del agente que causa la enfermedad.
INACTIVAS:
Son producidas por el crecimiento de virus en medio de
cultivo luego se inactivan en calor y productos.
1. Triple viral 1. Salk polio
2. Doble viral 2. Anti hepatitis A
3. Sabin o polio 3. Anti hepatitis B
4. Anti Amarilla 4. Antirrabica
5. Anti Sarampión
Que es diagnostico?. es el procedimiento por el cual se identifica una enfermedad, entidad nosológica, síndrome o cualquier estado patológico o de salud.
Microscopia electrónica: La limitación del método además del costo del microscopio, es que necesita de una alta concentración de viriones (aproximadamente 109 partículas virales/ml, dependiendo del virus) presentes en la muestra, por ello es poco sensible. Esto hace que sea una técnica poco utilizada, más aún con el desarrollo de técnicas alternativas de utilidad similar.