El documento trata sobre las micobacterias, un género de bacterias que incluye a M. tuberculosis, el agente causante de la tuberculosis. Describe las características microbiológicas, ecológicas y clínicas de las micobacterias, incluyendo su clasificación, patogenicidad, cuadros clínicos, diagnóstico y tratamiento de las enfermedades que causan como la tuberculosis y la lepra.
1. MICOBACTERIAS
Mycobacterium es el único género de la familia de bacterias Mycobacteriaceae. El
género Mycobacterium está formado por bacilos aerobios inmóviles y no
esporulados con un tamaño de 0,2 a 0,6 x 1 a 10mcm algunos de los cuales son
patógenos que causan graves enfermedades en los mamíferos; tuberculosis y
lepra.
La palabra Mycobacterium deriva del prefijo griego "myces" que significa
tanto hongo como cera y "bakterium" que significa pequeña varilla. Su significado
literal es: Bacilo semejante a un hongo.
Las bacterias se clasifican en el género Mycobacterium en función de:
Su capacidad de acidorresistencia
La presencia de ácidos micólicos con 70 a 90 átomos de carbono.
Un contenido elevado (61-71% de guanosina + citosina (G + C) en su ADN.
CARACTERÍSTICAS MICROBIOLÓGICAS
Las micobacterias son bacterias aerobias y no móviles (con excepción de la
especie M. marinum, que ha mostrado ser móvil dentro de los macrófagos).
Tienen ácido-alcohol resistencia, no producen endosporas ni cápsulas y suelen
considerarsegrampositivas.
Las micobacterias no parecen encajar en la categoría Gram-positiva desde un
punto de vista empírico (es decir, que no retienen el tinte violeta), se clasifican
como bacterias ácido-resistentes Gram-positivas. Todas las especies
deMycobacterium comparten una característica pared celular, más gruesa que la
de
muchas otras bacterias, hidrofóbica,
cerosa,
y rica
en ácidos
micólicos/micolatos. La pared celular es rica en lípidos, lo que hace que su
superficie sea hidrófoba y confiere a las micobacterias resistencia frente a muchos
desinfectantes
y
las
tinciones
de
laboratorio.Las
proteínas
constituyen antígenos importantes para estimular la respuesta del anfitrión a la
infección y pueden usarse como prueba pronóstica.
CARACTERIZACIÓN ECOLÓGICA
Las micobacterias son microorganismos ampliamente distribuidos, típicamente se
les encuentra en el agua (incluyendo el agua del grifo tratada con cloro) y en los
alimentos. Algunas especies, sin embargo, son patógenos intracelulares
obligados, tales como las causantes de tuberculosis y lepra y no se las encuentra
viviendo en el agua.
2. CLASIFICACIÓN MÉDICA
Las micobacterias pueden clasificarse con base en sus características de
crecimiento y pigmentación con objeto de diagnóstico y tratamiento. La
clasificación de Runryon, primera en clasificar a las micobacterias con objeto
diagnóstico, inicialmente incluyó 4 grupos:
Fotocromógenos de crecimiento lento (fotocromógeno significa que produce
pigmentos carotenoides intensamente amarillos en presencia de luz) que
incluye a: M. kanasii, M. marinum.
Escotocromógenos de crecimiento lento (fotocromógeno significa que
produce pigmentos carotenoides intensamente amarillos en ausencia de
luz) que incluye a: M. gordone, microorganismo no patógeno aislado con
frecuencia.
Micobacterias no pigmentadas de crecimiento lento, que incluye a: M.
avium y M. intracelullare.
Micobacterias de crecimiento rápido, que incluye a M. fortuitum, M.
chelonae y M. abscessus.
CLASIFICACIÓN CIENTIFICA
Dominio: bacteria
Filo: Actinobecteria
Orden: Actinomycetales
Suborden: Corynebacterineae
Familia: Mycobacteriaceae
Género: Mycobacterium
PATOGENICIDAD
Las micobacterias colonizan a sus huéspedes sin que estos muestren signos de
enfermedad. Miles de personas están infectadas por M. tuberculosis pero nunca lo
sabrán puesto que no desarrollarán síntomas.Esto es debido a que en gran parte
de los países la cepa de M. tuberculosis está circulando en el medio ambiente
produciendo una primo infección, que permite desarrollar una respuesta inmune
pero sin presentar los síntomas específicos creando así células de memoria las
3. que mantienen vigilancia específica en el organismo, al transitar por la calle el
paciente está expuesto a una reinfección de M. tuberculosis pero no desarrollará
la infección por que al tener las células de memoria éstas se encargan de
neutralizar al patógeno. Las infecciones micobacteriales son notoriamente difíciles
de tratar. Su pared celular, que no es realmente ni Gram-negativa ni Grampositiva, las hace muy resistentes. Son naturalmente resistentes a
varios antibióticos que destruyen las paredes celulares, tales como la penicilina.
También, gracias a esta pared celular, pueden sobrevivir a largas exposiciones a
ácidos, bases, detergentes, ráfagas oxidativas, lisis por complemento y pueden
desarrollar naturalmente resistencia a los antibióticos. La mayoría de las
micobacterias son susceptibles a los antibióticos claritromicina yrifampicina, pero
se conocen cepas resistentes a estos antibióticos.
CUADRO CLINICO
Se consideran tres tipos de cuadros clínicos entre los que destacan la tuberculosis
y la lepra. El tercer tipo de cuadro clínico son las micobacteriosis, término que se
usa para encuadrar una serie de procesos de las enfermedades infecciosas
humanas ocasionados por micobacterias diferentes a Mycobacterium
tuberculosis y M. leprae.
Denominación genérica de micobacteriosis: por el territorio orgánico implicado con
el proceso (broncopulmonar, ganglionar, cutánea, osteoarticular, diseminada, etc).
ENFERMEDADES POR MICOBACTERIAS:
Mycobacterium tuberculosis
Mycobacteriumleprae
Micobacteriosis
PRINCIPALES ESPECIES DE GÉNERO
Myccobacterium tuberculosis, M bovis, M africanum son agentes etiológicos de la
tuberculosis en el hombre y forman el llamado “complejo tuberculosis”.
M leprae, es el causante de la lepra y las micobacterias atípicas, son
micobacterias distintas de las anteriores, algunas de las cuales, son capaces de
producir enfermedades en el hombre.
4. CARACTERISTICAS TINTORIALES
Existen tres procedimientos distintos para la coloración de bacterias ácido
resistentes:
Tinción de Ziehl-Neelsen
Tinción de Kinyoun en frío
Tinción con fluorocromoauramina.
La tinción de Ziehl-Neelsen y Kinyoun, utilizan prácticamente los mismos
reactivos y colorantes (Carbol fuscina, alcohol ácido), así como el mismo colorante
de contraste (azul de metileno). La diferencia esta, en la preparación de estos
reactivos y en el procedimiento empleado de cada técnica. Para la tinción de
ZiehlNeelsen se tiene que calentar la preparación o portaobjeto, mientras que en
la de Kinyoun (coloración en frío) no se tiene que calentar la preparación.
El por qué se debe de calentar la preparación en el método de ZiehlNeelsen, es
porque el calor logra ablandar la capa de lípidos o capa cérea de las micobacterias
dejando entrar a la carbolfuscina fácilmente.
En la técnica de Kinyoun se utiliza un agente tenso activo (alta concentración de
fenol en la carbol fuscina) que aumenta la permeabilidad del colorante a través de
la capa cérea. Esta alta concentración de fenol permite disolver el material lipídico
de la pared celular de la micobacteria, lo cual ocasiona la penetración de la
carbolfuscina sin la necesidad de calor.
La coloración con fluorocromoauramina, en ves de utilizar la fuscina, utiliza
auramina fenólica, la cual al igual que la fuscina tiene la capacidad de unirse a los
lípidos de la pared de la micobacteria. Las bacterias ácido resistentes teñidas con
fluorocromos son coloreadas de color amarillo brillante (si se utiliza auramina) o
naranja-rojo (utilizando rodamina). La coloración de contraste utilizada en esta
tinción es el permanganato de potasio, el cual produce un fondo negro de
contraste.
MEDIOS SELECTIVOS DE AISLAMIENTO
Baciloscopias:
Todas las muestras deben ser examinadas mediante tinción de Ziehl-Neelsen
antes de proceder a su descontaminación. Aunque el hallazgo de BAAR en un
frotis no es un diagnóstico definitivo de infección micobacteriana, permite un
diagnóstico presuntivo muy precoz de tuberculosis, un seguimiento de los
pacientes en tratamiento y una confirmación de que los aislamientos obtenidos.
Una buena baciloscopia comienza con la realización de un buen frotis. Debe
realizarse a partir de la parte más purulenta del esputo, efectuándose una
extensión de grosor adecuado.
5. La fijación debe hacerse durante 30 minutos al calor seguido de alcohol metílico.
La observación debe hacerse siempre con objetivo de inmersión,
recomendándose hacer una valoración cuantitativa de los bacilos presentes en la
muestra.
Se observará todo un largo de la extensión finalizando el recuento si hay más de
10 bacilos por línea. Si hay menos de 10 bacilos por línea se efectuará el recuento
en dos líneas más y se expresará el resultado como bacilos x 3L
Si en la primera línea realizamos un recuento de más de 50 bacilos, no se
continua el recuento y se informa como más de 50 BAAR / 1 L
Pruebas para identificación de especies de mycobacterium
- Gran poder patógeno
- Crecimiento lento de las colonias (más de 7 días)
- No producen pigmento.
- No dan positova la prueba de la catalasa a 68°C
DIAGNOSTICO BACTERIOLOGICO
La prueba empleada normalmente para evaluar la respuesta del paciente a la
exposición de la bacteria es mediante la prueba cutánea de tuberculina.
Usualmente la prueba de la tuberculina es positiva después de 3 a 4 semanas de
la exposición. Esta prueba ha dejado de considerarse diagnóstica ya que indica el
contacto previo del individuo con la bacteria pero no denota una infección activa,
además de que la vacuna profiláctica con el bacilo de Calmette-Guérin (BCG)
tienen resultados positivos a la prueba.
La detección microscópica de los bacilos acidorresistentes en muestras clínicas es
el método más rápido para confirmar una infección por micobacterias. La muestra
clínica se tiñe con carbolfucsina (Ziehl-Neelsen y Kinyoun) o con
colorantes fluorescentes de auramina y rodamina (Truant), se decolora con una
solución de ácido alcohol y se aplica una tinción de contraste. Las muestras se
examinan al microscopio de campo blanco, campo oscuro o fluoresencia (en caso
de usar colorantes fluorescentes). La sensibilidad de la microscopía está entre 30
y 50% y la especificidad del 95%.
La proliferación in vitrode las micobacterias se ve dificultada por su velocidad de
crecimiento. Las muestras que vayan a cultivarse deben de tratarse con reactivos
descontaminantes NaOH, para evitar la confusión con otras bacterias de
crecimiento rápido. Anteriormente, estas muestras se inoculaban en medios con
huevo (Lowenstein-Jensen) y con agar (Middle-brook) pero esta prueba tomaba un
tiempo prolongado; sin embargo, la introducción de los caldos de cultivo facilitan el
crecimiento de la bacteria acortando el tiempo de crecimiento de 3 a 4 semanas a
tan solo 10-14 días.
En los cultivos de la especie M. tuberculosis cabe destacar la falta de color en la
superficie, característica morfológica típica observada en el crecimiento de la
misma. La identificación macroscópica con base en la morfología colonial continúa
como una de las maneras más frecuentes para identificarlo.
6. CONTROL DE LA INFECCION
La terapia antituberculosa exige un tiempo muy largo de tratamiento (de 6 a 18
meses). Desde el comienzo del tratamiento el paciente deja de ser contagioso y el
aislamiento prolongado se vuelve innecesario.
Un factor muy importante a tener en cuenta es el alto grado de mutagenicidad y
resistencia que presenta los bacilos durante el tratamiento. Se debe atender la
forma del comportamiento de las micobacterias, el tratamiento debe constar de
dos fases:
A) una fase inicial en la que se persigue eliminar lo más rápidamente el mayor
número de bacilos de multiplicación rápida (acción bactericida), para lo cual deben
emplearse al menos tres fármacos para evitar la selección de mutantes.
B) una fase de consolidación que permitirá eliminar los microorganismos de
crecimiento lento e interminente.
Clásicamente, los fármacos utilizados para el tratamiento han sido divididos en
agentes de primera y de segunda línea.
TRATAMIENTO
ISONIACIDA: Es el fármaco clave en el tratamiento antituberculoso. Es
bactericida a nivel intra y extracelular y se utiliza también como terapia
preventiva.
RIFAMPICINA: Tiene efecto bactericida sobre microorganismos intra y
extracelulares. Es más eficaz que Isoniacida frente a microorganismos de
crecimiento lento.
PIRAZINAMIDA: Efecto bactericida sobre microorganismos intracelulares.
Altamente eficaz en la fase inicial del tratamiento.
ETAMBUTOL: Efecto bacteriostático intra y extracelular. Pude ser
bactericida intracelularmente a concentraciones elevadas.
ESTREPTOMICINA: Es un agente bactericida sobre bacilos extracelulares,
aunque elevando la dosis puede ser bacteriostático a nivel intracelular.