TECNICAS PARA EL EXAMEN INMUNODIAGNOSTICO

1. TECNICAS
INMUNOLOGICAS
Dr. Oscar Walter Torres

2. Técnicas inmunológicas
– Fundamento: reacción específica entre Ags-Acs.
– Utilidad :
• Detección, identificación, tipificación y cuantificación de
microorganismos, Ags y Acs. de grupos sanguíneos
• Detección y cuantificación de enzimas microbianas y toxinas de
origen microbiano
– Clasificación
• Lectura directa
– Aglutinación
– Precipitación
• Lectura indirecta
– Reacción de Fijación de Complemento
– Neutralización
– Inmunomarcado
» Radioinmunoensayo (RIE)
» Enzimoinmunoensayo (ELISA)
» Inmunofluorescencia

3. Técnicas inmunológicas
• Sensibilidad: capacidad para detectar
pequeñas cantidades de Ags ó Acs.
• Especificidad: capacidad para distinguir
entre Ags o microorganismos diferentes y
no dar falsos negativos
• Uso de Testigos +/-

4. Técnicas inmunológicas
•
•
•
•
Aglutinación
Definición: técnica de lectura directa, efectuada “in vitro”
en medio líquido o sólido.
Clasificación
– Activa (Ag. particulado natural: GR, virus, bacteria, hongo,
parásito, etc.)
– Pasiva (Ag particulado artificial: GR, látex, gelatina)
– Reversa pasiva: se adsorbe el Ac a un soporte sólido
Anticuerpo: aglutinina
Característica: técnica cualitativa y/o cuantitativa (por
titulación)
Título: máxima dilución que da positiva una reacción

5. Técnicas inmunológicas
Aglutinación: etapas
• Sensibilización
– Temperatura, afinidad Ag-Ac, pH, tiempo de
incubación, concentración relativa entre Ag y
Ac y fuerza iónica del medio
• Aglutinación
– Potencial Z, tipo de Ig y densidad del Ag

7. AGLUTINACION

8. Técnicas inmunológicas
Precipitación
• Definición: técnica de lectura directa,
efectuada “in vitro” en medio líquido o
semisólido (inmunodifusión).
• Ag: soluble
• Ac: precipitina
• Ejemplos: ID radial, inmunoelectroforesis

9. Técnicas inmunológicas
Precipitación

10. Técnicas inmunológicas
Precipitación

11. Técnicas inmunológicas
Precipitación

12. Técnicas inmunológicas
Reacción de Fijación de Complemento (RFC)
• Definición: técnica de lectura indirecta,
efectuada “in vitro” en medio líquido.
• Ag: soluble
• Ac: fijador de complemento
• Fundamento: 2 sistemas Ag-Ac.
– Problema
– Detector o mezcla hemolítica

13. Técnicas inmunológicas
Reacción de Fijación de Complemento

14. Técnicas inmunológicas
Reacción de Fijación de Complemento
Reacción Positiva Reacción Negativa

15. Técnicas inmunológicas

16. Técnicas inmunológicas

17. Técnicas inmunológicas

18. Técnicas inmunológicas

19. Técnicas inmunológicas