1. UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN MARTIN
FACULTAD DE CIENCIAS
AGRARIAS
ESCUELA PROFESIONAL DE
MEDICINA VETERINARIA
ASIGNATURA: ENFERMEDADES INFECCIOSAS
TEMA: BRUCELLA
DOCENTE: M.V. M.SC. MILTER ROJAS
CICLO: VII
ESTUDIANTE:
DIANA ALEJANDRA HIDALGO VILLACORTA
TARAPOTO- PERU
2021-II
2. INDICE:
1. INTRODUCCION:...................................................................................................... 3
2. ETIOLOGÍA: .............................................................................................................. 4
3. TIPOS........................................................................................................................ 6
4. TRANSMISION.......................................................................................................... 6
5. PERIODO DE INCUBACION: ................................................................................... 7
6. PATOGENECIDAD: .................................................................................................. 8
7. ZOONOSIS:............................................................................................................... 9
8. REPORTES MUNDIALES DE BRUCELLOSIS EN LOS ULTIMOS AÑOS: ......... 10
9. REPORTES EN PERU:........................................................................................... 10
10. SIGNOS CLÍNICOS............................................................................................. 11
11. PATOLOGIA: ....................................................................................................... 11
11.1 Las lesiones en Vacas:.................................................................................... 11
11.2 Lesiones en Toros: .......................................................................................... 11
11.3 Lesiones en Caninos y Feto: ........................................................................... 12
11.4 IMÁGENES MICROSCOPICAS Y MACROSCOPICAS ................................. 12
12. DIAGNOSTICO:................................................................................................... 14
12.1 Diagnostico Diferencial por los abortos:.......................................................... 14
12.2 Aislamiento de la Bacteria: .............................................................................. 14
12.3 Ensayo de reacción en cadena de la polimerasa (PCR)................................ 14
12.4 Pruebas serológicas ........................................................................................ 15
12.5 Aglutinación lenta en tubo (SAT) ..................................................................... 15
12.6 Prueba de placa de rosa de bengala (RBPT) ................................................. 15
12.7 Prueba de fijación del complemento (CFT)..................................................... 15
12.8 Test de Brucella............................................................................................... 16
12.9 Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) y otros tipos............... 16
13. PREVENCIÓN Y CONTROL:.............................................................................. 16
13.1 Vacunas: .......................................................................................................... 17
14. TRATAMIENTO ................................................................................................... 19
3. 1. INTRODUCCION:
La brucelosis, fiebre de Malta, enfermedad de Bang o fiebre ondulante es una
enfermedad bacteriana causada por miembros del género Brucella, es una
zoonosis importante y una causa significativa de pérdidas reproductivas en los
animales. Esta enfermedad es generalmente causada por Brucella abortus en
los bovinos, B. melitensis o B. ovis en pequeños rumiantes, B. suis en cerdos y
B. canis en perros. Las secuelas más comunes son abortos en hembras,
placentitis, los machos manifiestan pérdida de la fertilidad debido a orquitis y
epididimitis, aunque también se han informado otros síndromes. El impacto
principal de esta enfermedad, es el económico; las muertes son infrecuentes,
excepto en los fetos y neonatos. (1) (2)
La Brucelosis es considerada por la Organización Mundial de la Salud (OMS),
la Organización de las Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentación
(FAO) y la Organización Mundial de Sanidad Animal (OIE) como la zoonosis
más persistente en todo el mundo, pertenece a la lista de las enfermedades
reportadas por la Oficina Internacional de Epizoótias. (1) (2) (3)
1.2 HISTORIA:
El agente etiológico fue descubierto por David Bruce (1855-1931), donde en su
carrera como general en el año 1886, el patologo tenia una gran incognita de
por que sus soldados se morían por un gran cuadro febril. Como investigación
un año después de lo sucedido aislo el bazo de uno de sus soldados fallecido,
donde pudo encontrar el microorganismo Micrococcus melitensis,
posteriormente denominado Brucella melitensis (B. melitensis). En las
siguientes décadas se desencadenó el descubrimiento de varios
microorganismos relacionados con este. (4)
En 1896 el médico danés Bernhard Lauritz F. Bang (1848-1932) descubrió la
especie Brucella abortus (B. abortus) como el agente causal del aborto bovino.
En 1897, Matthew Louis Hughes (1867-1899) describió la enfermedad. En 1905
Themistokles Zammit (1864-1935) documentó el papel que tenían las cabras y
el consumo de sus productos como fuente de contagio para adquirir la
enfermedad. En 1914 Jacob Traum (1882-1966) aisló de los fetos abortados de
cerdos el microorganismo Brucella suis (B. suis). En 1920 la bacterióloga
norteamericana Alice Catherine Evans (1881-1975) comprobó la semejanza de
los microorganismos aislados por Bruce, Bang y Traum y sugirió designar a
dicho agente con el nombre de Brucella, en honor a David Bruce. (4)
La recuperación de distintas cepas de Brucella de mamíferos marinos y seres
humanos indica recientemente la importancia de la transmisión zoonótica.
4. 2. ETIOLOGÍA:
Son bacterias gramnegativas, su tamaño oscila entre los 0,7 µm de diámetro y
1,5 µm de longitud, se considera un ácido resistente parcial, de metabolismo
oxidativo, utilizan nitratos como aceptores de electrones, también usan de
actividad la reductasa y ureasa. Con predominio de formas coco bacilares
cortas. Son inmóviles y aeróbicos estrictos, de crecimiento lento y no poseen
cápsula ni forman esporas, además de intracelulares facultativos. Aunque no
sean móviles tienen todos los genes excepto las que formaría su cola (5) (6)
Las brucelas pueden sobrevivir a la congelación y descongelación, pero son
susceptibles a la mayoría de los desinfectantes comunes. La bacteria
permanece viable en el medio ambiente durante meses, especialmente en
condiciones frescas y húmedas. La pasteurización puede matar efectivamente
a Brucella en leche. (7)
5. La membrana celular externa: de las brucelas es un punto con suma
importancia de la bacteria, es rica en fosfatidilcolina y su componente más
estudiado es el lipopolisacáridos lisos (LPS) conocido también como
endotoxina, pero tambien contienen liposacaridos rugosos LPS-R. Este está
constituido por 3 regiones: lípido A, oligosacárido intermedio(núcleo),
polisacárido O o cadena O5. por que contienen antígenos de superficie de
liposacaridos es decir LPS, los antígenos que contienen se les da una
denominación de A y M; el antígeno A es principal en B. abortus y B. suis ,
mientras que el antígeno M predomina en B. melitensis. Estos LPS son los
principales factores de ataque bacteriano, así como el objetivo de muchas
pruebas inmunológicas. Algunas membranas externas e internas junto con
proteínas citoplasmáticas y periplásmicas también juegan un papel significativo
en múltiples actividades celulares. Se conoce además que esta bacteria
contiene otro polisacárido denominado hapteno nativo , químicamente idéntico
a la cadena O pero que no está unido al núcleo. Además se ha descrito un
tercer polisacárido conocido como poli B, pero según varios autores es
químicamente similar al hapteno nativo. (5) (6)
Las cepas lisas infectan por lo general a las hembras ,mientras que las
especies rugosas lo hacen con los machos. En general ,las cepas lisas son las
más virulentas,su ultraestructura es similar a la de algunas enterobacterias,
como Yersinia enterocolitica, Salmonella Iandau, Stenotrophomonas maltophilia
y Escherichia coli,entre otras (5) (6)
Las proteínas de la membrana externa también son útiles en el desarrollo de
pruebas de diagnóstico serológico incluso de vacunas, esto debido a su gran
especifidad a comparación de otras bacterias. Estas proteínas se encuentran
expuestas en la membrana externa, son menos accesibles en las cepas lisas
que en las rugosas debido al impedimento estérico ocasionado por las cadenas
O del LPS de las primeras
Estructura interna: las proteínas citoplasmáticas de la brucella son especificas
del genero, algunas de estas también participan en el diagnostico:
-Glucoproteina A2 termiresistente, involucrada en la síntesis de riboflavina y
que aparece en la fase activa de la infección
-La proteína periplásmica
Estas proteínas forman parte de un antigeno denominado CP, que se emplea
en las pruebas de ELISA.
Su genoma está constituido por 2 cromosomas circular es y carece de
plásmidos. Estudios cromosómicos de biovariedades de B. suis sugieren que el
género Brucella emerge de un ancestro común con un solo cromosoma, similar
al del biotipo 3 de B.suis. La estructura génica de B.suis biotipo 1 es similar a la
de B.melitensis ,B.abortus, B.ovis y B.neotomae; mientras que los biotipos 2 y 4
de B.suis difieren en el tamaño de sus 2 cromosomas con respecto a las otras
biovariedades (5) (1)
6. 3. TIPOS
Especies Hospedadores Biovares
B.Melitensis Ovejas, cabras, bovinos,
camellos, perros y seres
humanos
1,2 y 3
Predominante el 1 en
rumiantes
B.Abortus Bovinos, cabras, perros,
camellos y humanos
1,2,3,4,5,9
El 3 es el predominante
en rumiantes
B.Suis Cerdos, humanos,
perros, ciervos, liebres
1,2,3,4,5
Del 1 al 3 infecta a
cerdos
B. Canis Perros, hombre
B. Ovis Ovinos
B. Neumotae Ratones
B. Ceti Delfines,
marsopas,
ballenas
B.pinnipedialis Focas
B.microti Zorros rojos, roedores
de campo
B.inopinata Aún desconocido, se
encontró en humano
Se han registrado infecciones por esta bacteria en la mayor parte de especies,
pero con frecuencia sólo se observan en bovinos que pueden tener cualquier
edad, pero la infección persiste solamente en animales adultos; se ha
registrado también un aborto en una oveja, en equinos se ha encontrado con
frecuencia el microorganismo en agrandamientos bursales crónicos, donde se
hallan en calidad de invasor secundario y no de patógeno primario. (1)
4. TRANSMISION
Una de las principales transmisiones que encontramos mas comúnmente es
por el B.Abortus de los bovinos, aunque hay similitud en las transmisiones de
otras Brucellas
7. Todas las Brucellas se transmiten por via horizontal o vertical. El principal
método de transmisión es a través de los fetos expulsados, membranas
placentarias y las secreciones uterinas, esto debido a las altas concentraciones
que se manifiestan en el útero, Tambien los organismos se vierten en la leche,
transmitiéndolo a la cria.
El organismo logra sobrevivir en el medio ambiente durante meses,
especialmente en climas fríos y húmedos. A través de fómites, como en los
recipientes de alimento y agua, como medio horizontal, la inhalación también
llega a ser un modo de transmisión, otra forma de contagio es por la monta
natural o inseminación de toros infectados. (8) (7)
5. PERIODODE INCUBACION:
El período de incubación de la brucelosis en el ganado bovino y de otros
animales es bastante variable y varía de aproximadamente 2 semanas a 1 año
8. e incluso más en ciertos casos. Cuando se manifiesta el primer signo que es el
aborto, el período mínimo de incubación suele ser de unos 30 días. Algunos
animales abortan antes de desarrollar una reacción positiva a la prueba de
diagnóstico. Es posible que otros animales infectados nunca aborten.
Generalmente, los animales infectados que no abortan desarrollan una
reacción positiva a la prueba de diagnóstico dentro de los 30 a 60 días
posteriores a la infección, aunque algunos pueden no desarrollar una reacción
positiva durante varios meses o más de un año. (9)
6. PATOGENECIDAD:
Después de haberse infectado, las vias son la mucosa digestiva, respiratoria y
por abrasiones / heridas en la piel. Una vez ingresado al huésped, se multiplica
en el medio intracelular de los macrófagos, células dendríticas, esto pasa por la
capacidad de producir ureasa, este mismo juega un papel en la colonización
del huésped, a través de su ruta. La enzima degrada la urea modificando el pH
en el sitio en donde se encuentre la bacteria.
Además, la bacteria se adhiere con cierta facilidad a la superficie de las
mucosas, su gran hidrofobicidad tendría que ver en ello, ya que Brucella no
posee ni fimbrias ni cápsula; ambas características favorecerían la colonización
y la generación de la enfermedad. Por otro lado, alguno de sus componentes
celulares (con función de adhesina), promovería específicamente la adherencia
a receptores específicos de la célula huésped. La unión sería necesaria para
inducir una serie de señales intracelulares, que faciliten la colonización e
invasión celular
El LPS protege contra varios mecanismos bactericidas como los péptidos
antimicrobianos, el ocido nitrico y los radicales libres. Lo mismo con las
proteínas presentes en la membrana. (11)
Se identifico que el sistema de secreción de Brucella tipo IV codificado por el
operón virB (T4SS) que es esencial para la supervivencia intracelular y la
persistencia in vivo, translocara las proteínas efectoras bacterianas
directamente en el citosol de la célula huésped dirigiendo el tráfico intracelular
de la vacuola que contiene Brucella para asi transportarse al retículo
endoplasmático rugoso convirtiéndolo en su nicho replicativo intracelular, es asi
que los antígenos M y A alteraran a las células presentadoras de antígenos e
inhibición de vías celulares que promueven la apoptosis y la destrucción célula
(11)
Estas se llegan a transportar juntos con los macrófagos hacia el sistema
linfoide para asi ser secretadas, sin éxito, ya que de aquí se diseminan a través
de todo el cuerpo en sus órganos diana que son con frecuencia de la leche, los
ganglios linfáticos supramamarios y linfáticos ilíacos, el bazo y el útero.
Sin embargo, los huesos, las articulaciones, el cerebro y los ojos también
pueden infectarse, esto en una fase aguda (2)
9. La relación tan estrecha con las hembras gestantes, se debe a que las
bacterias alcanzan los trofoblastos y la glándula mamaria a través de la
circulación, multiplicándose aun mas para producir el aborto. Mientras que en
los animales no premiados las bacterias continúan multiplicándose y
acumulándose en las secreciones y excreciones. (10)
Los factores de liquido alantoideo en las hembras estimulara su crecimiento. Se
cree que el nivel elevado de eritritol en la placenta y el líquido fetal a partir del
quinto mes de gestación es un factor importante para el aborto en animales. (2)
Los trofoblastos eritrofagocíticos al localizarse en el placentoma cerca de la
membrana corioalantoidea, da como resultado la apoptosis de las células y la
formación de úlceras en la membrana corioalantoidea. El aborto ocurre debido
al daño causado por las bacterias en la placenta y también debido a los
cambios hormonales inducidos por el estrés (7)
En el caso de los machos las bacterias se llegan a excretar junto con el semen
durante la fase aguda primaria del macho, pero disminuye en una fase crónica,
eso no significa que la bacteria desaparezca por completo, ya que puede durar
años su presencia en las excresiones o hasta interminente. Esto también
ocasionando una epidemitas y orquitis por su replicación. (2) (11)
No se encontró con exactitud el porcentaje de la tasa de mortalidad y
morbilidad, pero varios artículos estiman que hay mas morbilidad que
mortalidad en
7. ZOONOSIS:
El hombre adquiere la bacteria (la especie mas patogénica en humanos es la
B,melitensis), a través del contacto con animales infectados; se ha reportado
los trabajadores de la industria láctea o de mataderos que presentan heridas en
las manos corren el riesgo de infectarse de brucelosis, al ordeñar al animal y al
momento de manipular la carne y/o vísceras de animales contaminados por la
bacteria. En el caso de los trabajadores de ranchos, que limpian los establos de
animales infectados con brucelosis, corren el riesgo de infectarse vía
conjuntival, debido a que al remover los desechos de los animales, se generan
aerosoles que contienen al microorganismo. (5)
Los médicos veterinarios son también, un grupo de alto riesgo de contagio, ya
que su trabajo incluye la revisión, atención y vacunación a los animales con
brucelosis. Como se mencionó anteriormente, otro sector con alto riesgo de
contagio es el de las personas que manipulan muestras de fluidos biológicos,
tanto en laboratorios de diagnóstico clínico como de investigación o de
elaboración de vacunas. Sin embargo, la vía más común por la que se puede
adquirir la bacteria en población abierta, es por el consumo de derivados
lácteos no pasteurizados: leche cruda y quesos frescos sin pasteurizar, sobre
todo de origen caprino y bovino. (5)
La brucelosis en los humanos se presenta con diferentes manifestaciones
clínicas inespecíficas, incluyendo cuadros asintomáticos. Usualmente se
10. presenta como un cuadro febril agudo, puede confundirse con otras infecciones
y recibir tratamiento inadecuado, por lo que la enfermedad podría persistir y
manifestarse como una recaída o progresar a una infección crónica localizada.
Esta enfermedad compromete a cualquier órgano o tejido del cuerpo, y genera
una serie de complicaciones; entre las más comunes están las osteo-
articulares, hepato-biliares, de vías respiratorias, genito-urinarias,
cardiovasculares, neurológicas, cutáneas, y oftálmicas. Aun cuando se realice
el diagnóstico temprano y se prescriba correctamente la terapia, alrededor de
10 a 30% de los pacientes desarrollará brucelosis crónica. (12)
8. REPORTES MUNDIALES DE BRUCELLOSISEN LOS
ULTIMOS AÑOS:
AÑO 2014
9. REPORTES EN PERU:
En el Perú, la brucelosis humana se presenta principalmente en Lima y Callao,
donde se registra aproximadamente el 95% de los casos en todo el país, la
transmisión de la enfermedad se debe principalmente al consumo de leche,
quesos frescos y otros derivados lácteos fundamentalmente de origen caprino.
Asimismo, de acuerdo a datos del Servicio Nacional de Sanidad Agraria –
SENASA del Ministerio de Agricultura, la prevalencia estimada de brucelosis
caprina reportado en los últimos años es de aproximadamente 4% en zonas
endémicas, esto a consecuencia de la crianza informal de animales infectados
y la contaminación de fuentes de agua, alimentos y ambientes comunes. (13)
En 2021, el SENASA tiene proyectado colectar 5 960 muestras de bovinos en
las provincias de: Chachapoyas (3740) y Bongará (2220); zonas caracterizadas
11. por la crianza de ganado bovino lechero. Luego de dos pruebas diagnósticas
con resultado negativo, los predios podrán obtener la certificación de hatos
libres de Brucelosis. (14)
Febrero del 2021
10. SIGNOS CLÍNICOS
Abortos (típicamente durante la segunda mitad de gestación), mortinatos y el
nacimiento de una descendencia débil son los signos clínicos predominantes
en bovinos. Los terneros débiles pueden morir poco después del nacimiento.
La mayoría de los animales abortan solo una vez y los embarazos posteriores
suelen ser normales. La lactancia puede ser disminuido. Los signos clínicos de
mastitis generalmente están ausentes. aunque B. abortus se elimina en la
leche. Sin complicaciones las pérdidas reproductivas no suelen ir
acompañadas de signos de enfermedad; sin embargo, la retención de la
placenta y secundaria la metritis son posibles complicaciones. Epididimitis
seminal vesiculitis, orquitis o abscesos testiculares a veces son visto en toros.
Se produce infertilidad o fertilidad reducida. (14)
ocasionalmente en ambos sexos, debido a metritis o orquitis / epididimitis. La
artritis y los higromas también pueden servisto, especialmente en infecciones a
largo plazo. Las muertes son raras excepto en el feto o recién nacido.
Infecciones en no embarazadas las vacas suelen ser asintomáticas
11. PATOLOGIA:
11.1 Las lesiones en Vacas:
Se encuentran lesiones inflamatorias granulomatosas, a menudo dentro de los
tejidos y órganos linfoides con una participación importante del sistema
fagocítico mononuclear (MPS).
La invasión del útero bovino grávido se caracteriza por placentitis necrótica
característica, que puede ser aguda y generalizada y provocar la muerte
prematura del feto seguida de aborto, o placentitis subaguda o crónica que
conduce a un aborto tardío o al nacimiento de un ternero vivo o infectado
metritis, placentitis y aborto. (2)
Los cotiledones se congestionan e hinchan, cubriéndose de exudados
amarillentos o pardos pegajosos, que se extienden profundamente en las
criptas. Las áreas intercotiledonarias están engrosadas, son opacas, a menudo
tienen un aspecto casi coriáceo y a menudo hay una pérdida de la apariencia
normal de color rojizo. con necrosis focal de las vellosidades coriónicas y
numerosas bacterias dentro de las células trofoblásticas.. . (2)
11.2 Lesiones en Toros:
El proceso de virilización que ocurre en el macho es un fenómeno que da las
condiciones propicias para la infección de Brucella, ya que los andrógenos y la
vitamina D y progestágenos constituyen sustancias orgánicas de acción
12. conjunta en el l orden de virilización, la combinación de todas estas hormonas
en el macho ofrece las mismas característica que la progesterona en la hembra
gestante. La Brucella tiene cierto tropismo a situarse en el aparato genital
masculino (testículo, epidídimo principalmente. La razón de este fenómeno está
basada en los mismos hechos que deciden el tropismo Brucelar hacia la
placenta, como apoyo a tal afirmación la riqueza en carbónico del epidídimo y
tejido testicular, así como el metabolismo hidrocarbonado de la glándula
testicular y riqueza en vitamina C (2)
Los perros machos infectados con B. canis desarrollan epididimitis, orquitis y
prostatitis, lo que resulta en una mala calidad del esperma e infertilidad. (7)
11.3 Lesiones en Caninos y Feto:
Los fetos abortados a su vez completamente infectado pueden tener
bronconeumonía, miocarditis, hemorragia renal, linfadenitis y hepatitis, tejidos
de recién nacidos infectados naturalmente, incluidos el estómago, los
intestinos, los riñones, el sistema nervioso central, el ombligo, el hígado, los
pulmones, los ganglios linfáticos y el bazo. Si llega a no abortar, el nacimiento
de cachorros con un aspecto físico débil y alta tasa de mortalidad neonatal.
(10)
11.4 IMÁGENES MICROSCOPICAS Y MACROSCOPICAS
B. Canis
Placenta canina (A) Vista sub-macroscopica de la
placenta con multiples áreas de necrosis
focalmente extensas que caracterizan una
placentitis necrosante (B) Tejido necrótico e
infiltrado inflamatorio neutrofílico marcado HE Bar=
50 micrometros (C) Inmunocistoquimica por la
detección de brucella sp trofoblasto con
cocobacilos inmunoetiquetados intracitoplásmicos
Bar= 20 micrometros (7)
13. B. Abortus
Placenta bovina de una vaca infectada con
Brucella abortus. Inmuno marcaje de varias
colonias de B. abortus con distribución
multifocal. Complejo estreptavidina-biotina-
peroxidasa (15)
Útero de una vaca infectada con Brucella
abortus inmediatamente después del aborto
Varios placentomas necróticos y
hemorrágicos, que caracterizan una
placentitis aguda hemorrágica-necrotizante y
fibrosa grave (15)
Bovino, placenta. La placenta contiene
numerosos cotiledones hemorrágicos. (14)
Epidídimo aumentado de tamaño por
brucelosis en bovino (16)
14. 12. DIAGNOSTICO:
12.1 Diagnostico Diferencial por los abortos:
Leptospirosis.
Rinotraqueitis infecciosa bovina (IBR).
Tricomoniasis.
Campilobacteriosis.
Listeriosis.
Aborto epizoótico (espiroquetosis).
Vibriosis
(2)
12.2 Aislamiento de la Bacteria:
El aislamiento de patógenos bacterianos es siempre un diagnóstico de
confirmación. Sin embargo, las desventajas son el largo tiempo necesario para
la identificación definitiva, generalmente dos semanas. Entonces para llegar al
aislamiento del organismo se opta por sacar muestras tanto como de bazo y
ganglios linfáticos (ilíacos, mamarios y prefemorales) durante la necropsia.
Como muestra clínica, la mejor fuente que se obtiene para aislamiento son las
secreciones uterinas y los fetos abortados. De los fetos abortados, las
muestras de elección son el contenido del estómago, el bazo, el hígado, los
pulmones y los ganglios linfáticos.
El medio basal deshidratado disponible comercialmente es el agar de soja
(TSA) de base media de Brucella , triptosa (o tripticasa) y soja (TSA). Se debe
agregar suero bovino (2-5%) para el crecimiento de cepas como B. abortus
biotipo 2. La base de agar sangre o agar Columbia proporciona excelentes
resultados tambien. El agar suero-dextrosa (SDA) o el agar glicerol dextrosa
son otros medios satisfactorios y ayudan en la observación de la morfología
colonial. Se recomienda el medio de Castañeda (medio bifásico no selectivo)
para el aislamiento de Brucella de la sangre y otros fluidos corporales o la
leche, lo que proporciona enriquecimiento y evita la interferencia en la
biotipificación cuando el organismo se cultiva en caldo. B. abortus requiere
suero y dióxido de carbono para su crecimiento, mientras que B. melitensis no
lo requiere. Sin embargo, se requieren medios selectivos como el de Farrell
para evitar el crecimiento de contaminantes. (7)
12.3 Ensayo de reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
La PCR es un método de diagnóstico rápido, que puede aplicarse incluso en
muestras de mala calidad. Esto podría usarse para interpretaciones y análisis
epidemiológicos, así como para caracterización molecular. La PCR y la
inmunohistoquímica (IHC) resultaron fiables para la confirmación de la
15. brucelosis bovina en tejido fetal abortado y cotiledones placentarios, mientras
que la serología fue útil para la detección de Brucella-animales positivos en una
manada. (2)
12.4 Pruebas serológicas
Las pruebas serológicas son importantes para los programas de seguimiento,
vigilancia, control y erradicación en todo el mundo. Los anticuerpos comienzan
a aparecer en la sangre aproximadamente una semana después de la infección
por Brucella. La IgM aparece primero seguida por la aparición de IgG. (7)
12.5 Aglutinación lenta en tubo (SAT)
Esta prueba es la pionera en la localización de la brucelosis y se utilizó por
mucho tiempo en los programas de control y erradicación de la enfermedad
como método de diagnóstico; consiste en una prueba sencilla y fácil de
implementar, pero requiere de un equipo de laboratorio básico y sus
características principales son la baja sensibilidad para detectar bovinos
infectados y su tendencia a reaccionar frente a las IgM, lo que ha permitido su
uso para detectar otras enfermedades de carácter infeccioso agudo (17)
12.6 Prueba de placa de rosa de bengala (RBPT)
También llamada prueba del antígeno tamponado por la capacidad de
mantener estable un pH determinado. La prueba “Rosa de Bengala” (RB), es
una reacción de aglutinación sobre lámina, que utiliza por un lado un antígeno
constituido de una suspensión de B.abortus (cepa 19) inactivadas y coloreadas
por Rosa de Bengala, en un medio tamponado (pH 3,5 ± 0,05), y por otro lado
el suero a investigar.
Fueron Pietz & Schilf quienes en 1967 desarrollaron este antígeno acidificado
tamponado estable. Los resultados se reportan en forma cualitativa más no
cuantitativa de aglutinación, por medio de cruces. Por su fácil realización, es
muy útil como prueba de despistaje inicial o “screening”. Esta prueba es capaz
de detectar anticuerpos de tipo IgM e IgG, aunque el pH ácido, permite una alta
detección de las IgG1, reduciendo las uniones inespecíficas con otras
inmunoglobulinas. La prueba de rosa de Bengala, se considera muy adecuada
para detectar hatos infectados, o en los casos que se requiera, para garantizar
que los rebaños estén libres de brucelosis. (2)
12.7 Prueba de fijación del complemento (CFT)
La prueba de fijación del complemento (CFT) es una prueba muy específica
que puede detectar anticuerpos IgM e IgG1. Sin embargo, los anticuerpos del
tipo IgG2 impiden la fijación del complemento, lo que da lugar a resultados
falsos negativos. La CFT tiene en cuenta la medición cuantitativa de más
anticuerpos de tipo IgG1 que de anticuerpos de tipo IgM, ya que el proceso de
inactivación da como resultado la destrucción parcial de los anticuerpos IgM. La
CFT se considera mejor para los programas de control y vigilancia de la
brucelosis. (7)
16. 12.8 Test de Brucella
La prueba es la antigua forma convencional de probar la brucelosis en
animales. Esta prueba es especialmente útil como prueba de confirmación en
animales no vacunados y fue una prueba alternativa según la OIE. Mide la
reacción de hipersensibilidad de tipo retardada evidente por el aumento del
grosor de la piel. Esta prueba es más específica que los ensayos serológicos
habituales. Sin embargo, su sensibilidad es baja, lo que la convierte en una
buena prueba para el rebaño, pero no para la certificación individual. Sin
embargo, dado que requiere mucho tiempo y esfuerzo, se prefieren otras
pruebas rápidas. (7)
12.9 Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) y otros
tipos
ELISA, son de diferente tipo y sus características principales son su rapidez y
facilidad de ejecución, además de su gran especificidad y sensibilidad al
momento de detectar la brucelosis.
En este sentido, la primera variación es la prueba ELISA de tipo indirecto, que
se relaciona con una gran sensibilidad para detectar la brucelosis, pero su
dificultad radica en su incapacidad para diferenciar los anticuerpos que puedan
resultar tras la aplicación de la vacuna con Brucellosis abortus cepa S19, de los
anticuerpos producidos tras la infección entonces tras esto, es recomendable
que la prueba sea utilizada más como de análisis, que como prueba
confirmatoria especialmente en ganado vacunado.
Además de la prueba anterior, también está el ELISA competitivo (CELISA) que
es más específico que el IELISA, porque permite suprimir la gran mayoría de
reacciones de los anticuerpos residuales, tras la vacunación con brucellosis
abortus cepa S19, por lo cual es muy empleada como prueba confirmatoria
para el diagnóstico de la enfermedad.
Además de las anteriores, también está la prueba de diagnóstico ELISA DAVIH
BRU2, desarrollada por los laboratorios DAVIH, y tras la prueba en
instalaciones, se obtuvieron niveles de sensibilidad y especificidad muy altos,
por lo cual se considera muy adecuada para el diagnóstico de la enfermedad.
(18)
13. PREVENCIÓNY CONTROL:
En el caso de los ganados el control es mas especifico, primeramente, el
transporte de productos animales debe realizarse según los principios y
procedimientos generales previstos en el Código Zoosanitario Internacional de
la OIE. También se deben seguir esencialmente varios procedimientos de
prueba para animales junto con las medidas de cuarentena especificadas en
este código (OIE 2016). (7)
Generalmente se adoptan políticas de prueba y sacrificio para erradicar la
brucelosis animal. Este programa podría reducir eficazmente la incidencia y la
prevalencia de la brucelosis; sin embargo, la enfermedad en varios países no
se pudo erradicar debido a múltiples razones, incluida la dificultad para localizar
17. a los animales infectados con brucelosis y la incapacidad para contener o
regular el movimiento de animales, la compra de animales sin pruebas de
detección de brucelosis y la falta de educación e interés de los ganaderos con
respecto a la brucelosis. (7)
Además, un sistema eficaz para el control de la brucelosis animal depende de
varias medidas, incluido un mecanismo de vigilancia sólido para identificar a los
animales infectados, la prevención de la propagación de los animales
infectados y a los rebaños no infectados, la eliminación de los reservorios de
infección por Brucella y medidas preventivas para detener la infección. (7)
Además de las prácticas de manejo y cría de animales, la aparición de
brucelosis en el ganado también se ve influida por la consideración de puntos
clave importantes como la certificación adecuada de las novillas o toros recién
comprados, su política de vacunación mediante el uso de la cepa bacteriana
adecuada, estos factores deben incorporarse al planificar las políticas y
campañas de control de Brucella . Para el éxito del programa de control y
erradicación de la brucelosis, se recomienda la vacunación de vaquillas a gran
escala y la práctica de inseminación artificial con semen certificado libre de
brucelosis debe fomentarse ya que actúa como factor de riesgo importante. (9)
Brucella spp. son fácilmente asesinados por la mayoría de las veces
desinfectantes disponibles, incluidas soluciones de hipoclorito, 70% etanol,
isopropanol, yodóforos, desinfectantes fenólicos, formaldehído, glutaraldehído y
xileno. Se informó que una solución al 1% de ácido cítrico era menos eficaz. Un
estudio informó que el xileno y la cianamida de calcio descontaminaron el
estiércol líquido después de 2-4 semanas; sin embargo, algunas fuentes
recomiendan almacenar dicho estiércol tratado durante mucho más tiempo. Las
brucelas se inactivan con bastante rapidez con un pH ácido <3,5. También se
pueden destruir con calor húmedo de 121 ° C (250 ° F) durante al menos 15
minutos, calor seco de 320-338 ° F (160-170 ° C) durante al menos 1 hora,
irradiación gamma y pasteurización. Hervir durante 10 minutos suele ser eficaz
para los líquidos. (7)
13.1 Vacunas:
De acuerdo con el modelo Susceptible-Expuesto-Infeccioso-Recuperado-
Susceptible (SEIRS) sobre brucelosis, se observó que se necesitan 3,5 años
para eliminar la enfermedad de las fincas mixtas de ganado vacuno y ovino
endémicas con Brucella tras la vacunación. Mientras que evitar la vacunación a
las ovejas resultó en un incremento en su tiempo de eliminación a 16,8 años.
Por lo tanto, la vacunación del ganado en zonas endémicas es sumamente
esencial. La vacuna contra la brucelosis en animales juega un papel crucial en
el manejo de la enfermedad, a su vez según lo indicado en los protocolos, las
hembras deben vacunarse cuando tengan entre 3 meses y 8 meses de edad.
(7)
CEPA 19:
18. Vacuna liofilizada para reconstituir con diluyente estéril. La cepa 19 de Brucella
abortus es una cepa lisa que posee la cadena O del LPS, por ello, en animales
inmunizados con esta cepa se pueden observar anticuerpos específicos contra
este antígeno del tipo IgG1, IgG2b e IgM. El defecto genético que permite la
atenuación de esta cepa aún no ha sido definido, pero hace que pierda un
mecanismo de virulencia esencial.
Es la vacuna de referencia con la que se compara el resto de las vacunas y
una de las más utilizadas. Se utiliza como una vacuna viva las edades
recomendadas de vacunación son entre 3 y 6 meses 2 ml por animal, vía
subcutánea exclusivamente en la región pre o pos escapular (adelante o detrás
de la paleta) o en la zona media de la tabla del cuello. Administrar al ganado
adulto una dosis reducida de la vacuna puede inducir el desarrollo de títulos
duraderos de anticuerpos, abortar y excretar la cepa vacunal por la leche. (19)
RB51:
La vacuna cepa RB51 es una mutación derivada de la cepa virulenta Brucella
abortus 2308, es una cepa rugosa, resistente a rifampicina. Esta cepa es
utilizada desde 1996 contra la brucelosis bovina en Estados Unidos y en otros
países, como Chile. Es administrada en dosis de Inyecte 2 mL por vía
subcutánea a los 3 a 8 meses. La protección que proporciona la vacunación
con esta cepa se debe a la activación de linfocitos T. La vacunación induce
altos niveles de IFN-γ, lo cual es fundamental en las etapas primarias de la
infección. La vacunación con cepa RB51 permite la diferenciación entre
bovinos vacunados y aquellos infectados con cepas silvestres debido a que no
induce anticuerpos contra la cadena O del lipopolisacárido. Se ha determinado
que puede causar placentitis, endometritis e infección fetal, en vaquillas adultas
que han sido vacunadas durante la preñez. (19)
La vacuna de la cepa RB51 no interfiere con los resultados del serodiagnóstico
a diferencia de la vacuna de la cepa 19.
REV1:
Seguridad, inmunogenecidad y eficacia. La vacuna viva de B. melitensis Rev-1
ha sido considerada como la mejor vacuna disponible para la profilaxis de la
infección por B. melitensis en pequeños rumiantes como cabras y ovejas. Dosis
1 ml y Administración vía subcutánea
Los sitios donde la infección con B. melitensis en cabras y ovejas es
ampliamente diseminada, los bovinos pueden también infectarse con estas
especies de bacterias, de esta manera, Rev 1 ha sido evaluada para la
vacunación de ganado donde se ha mostrado que esta cepa vacunal induce
inmunidad al reto con B. melitensis igual o superior a la inmunidad inducida por
B. abortus cepa 19.
No se recomienda la administración de la vacuna Rev1 durante el embarazo ya
que esta vacuna exhibe un alto nivel de virulencia que provoca la inducción de
19. abortos. Además, la respuesta de los anticuerpos a la vacunación interfiere en
el diagnóstico de la infección natural. (20)
Mientras que en B. Canis se experimento con muchas vacunas, sin mucho
existo, últimos estudios indicarían que utilizaran esta vez dos nuevas vacunas
para la brucelosis canina, a saber, una cepa mutante de B. canis Δ vjbR y B.
ovis Δ abcBA. Esta última cepa de vacuna ha sido desarrollada por nuestro
grupo aprovechando las similitudes antigénicas entre B. canis y B ovis., Una
investigación experimental demostró que la vacuna candidata B. ovis Δ abcBA
protege contra el desafío experimental de ratones con B. Canis, y cuando esta
cepa de vacuna se encapsula en alginato y se administra a perros, no se llega
a eliminar en el semen ni en la orina y es segura. (11)
14. TRATAMIENTO
Se a intentando distintos tratamientos que involucran antibióticos, pero solo
cesa los signos, ya que la brucella al ser intracelular aun sigue presente dentro
del huésped por mucho tiempo
Igualmente se tomo una investigación que utilizo estos fármacos:
Tratamiento A, una combinación de oxitetraciclina (OTC), 30 ml por día por vía
intramuscular, estreptomicina (ST, 6 gramos por día durante 15 días por vía
intramuscular) y rifampicina e isoniazida (RFI), 6 tabletas (600mG + 300mG
cada uno) diariamente por vía oral.
Tratamiento B, se usó enrofloxacina (En, 30 ml por día durante 15 días por vía
intramuscular) en lugar de OTC, junto con ST y RFI con la misma tasa de
dosis. En la fase II del programa de mantenimiento A, se utilizó una
combinación de oxitetraciclina (OTC), 30 ml cada tres días por vía
intramuscular y rifampicina e isoniazida (RFI), 6 tabletas (600mG + 300mG
cada una) al día por vía oral durante 15 días. En la fase II del programa de
mantenimiento B, se usó bayrocina (una inyección, 30 ml por vía intramuscular)
en lugar de enrofloxacina, junto con RFI con la misma tasa de dosis durante 15
días. En ambos grupos, se administró un polvo protector del hígado a base de
hierbas (polvo Liv-52) por vía oral con una tasa de dosis de 10 gramos diarios
por vaca. (21)
El diagnostico de las secreciones vaginales por cultivo a la décima semana
después del inicio de la terapia con antibióticos de todas las vacas tratadas,
resulto siendo un éxito en el presente estudio lo cual logro mostrar que la
eliminación de organismos de Brucella en las secreciones vaginales cesó y no
volvió a comenzar.
20. Referencias
1. OIE. Bovine Brucellosis. Manual of Diagnostic Tests and Vaccines. 2004; Chapter
2.3.1(pp 1-831.).
2. Golac JM. Diagnóstico de la prevalencia de Brucelosis bovina en los hatos
ganaderos mediante la prueba serológica (Rosa de bengala) en el distrito de
Pardo. Tesis. Naranjos: Universidad Nacional de San martin-Escuela de Medicina
Veterinaria, San Martin.
3. Lucero NE,ASM,EGI&JNR. Brucella isolated in humans and animals in Latin
America. Epidemiological Infection. 2008; Pp. 136(496-503).
4. Brucelosis,unazoonosisfrecuente. Medicina e investigacion. 2015; 3(2)(129---133).
5. N.E.Álvarez-Hernández MDFyMOR. Brucelosis,una zoonosis frecuente. Medicina e
Investigacion. 2015; 3(2):(129-133).
6. Castro HA GS. Pract.Ml.Brucelosis:una revision practica. Acta Bioquin Latinoam.
2005; 39:(203-16).
7. Sandip Kumar Khuranaa AS,RT,MP,BG,MZS,RC,KKSKP. Bovine brucellosis – a
comprehensive review. Taylor y Francis. 2021; 42(1: 61-88).
8. Tukana A GB. Dairy farm demographics and management factors that played a
role i. rop Anim Health Prod. 2017; 41((6):1171–1178).
9. U.S. DEPARTMENT OF AGRICULTURE. Animal and Plant Health Inspection
Service. [Online]; 2020. Acceso 3 de Agostode 2020. Disponible en:
https://www.aphis.usda.gov/aphis/ourfocus/animalhealth/animal-disease-
information/cattle-disease-information/tuberculosis-brucellosis-monthly-report/facts-
about-brucellosis.
10. Amjadi O RA,MM,ZP,ZA. A review of the immunopathogenesis of brucellosis. Infect
this. 2019; 51((5):321–333.).
11. Renato L. Santos1* TDSJPSMCEaTAP. Canine Brucellosis: An Update. Frontiers
in Veterinary Science. 2021.
12. Rosa Lilia Guzmán-Hernández ACRDÁCMRMG. Brucelosis: zoonosis de
importancia en México. Rev. Chilena infectol. 2016; 33((6) :656-662).
21. 13. Centro nacional de epidemiologia, prevencion y control de enfermedades. Boletin
epidemiologico. SENASA. 2021; 30(06).
14. Senasa. [Online]; 2021. Disponible en:
http://www.senasa.gob.pe/senasacontigo/refuerzan-acciones-de-prevencion-y-
control-de-brucelosis-bovina-en-amazonas/.
15. USDA, OIE. Brucellosis:Brucella abortus. The center for food psecurit and Public
health. 2018;(12).
16. Poester Fernando SLR. Pathogenesis and pathobiology of brucellosis in livestock.
Revue scientifique et technique (International Office of Epizootics). 2013; 32(15).
17. PL N. Visual guides of animal reproduction. [Online]; 1980. Acceso 26 de
septiembrede 2021. Disponible en: https://visgar.vetmed.ufl.edu/sp_bovrep/testis-
epididymis/testis-epididymis.html.
18. Villegas Maestre LD. BRUCELOSIS BOVINA, PROBLEMA SOCIOECONOMICO Y
SANITARIO EN LAS GANADERIAS..
19. M.V MIGUEL ACOSTA ANDRADE MVMCMOM. PRUEBAS DIAGNOSTICAS DE
BRUCELOSIS BOVINA..
20. Nilgen Farley Barrera Estrada EMGCCRZ. EFECTIVIDAD DE TRES
PROTOCOLOS DE VACUNACION CONTRA BRUCELOSIS BOVINA EN HATOS
LECHEROS DE LA SABANA DE BOGOTA. Tesis para titulo. bogota: universidad
de ces. universidad del rosario.
21. Omar A. Saldarriaga MyMTRBMPD. Inmunobiología de la infección por Brucella
spp. Col Science. 2002; 15(2).
22. Singh Shoor GVKASTRK. Therapeutic Management of Bovine Brucellosis in
Endemically Infected Dairy Cattle Herd of Native Sahiwal Breed. Advances in
Animal and Veterinary Sciences. 2014; 2.
23. Chacón-Díaz C ASPGEGMMAAABML. Brucella canis is an intracellular pathogen
that induces a lower proinflammatory response than smooth zoonotic counterparts.
Infect human. 2015; 83:(4861–70).