1. CETIS 62
PRÁCTICA NO. 2
SEPARACIÓN DE PIGMENTOS
VEGETALES MEDIANTE
CROMATOGRAFIAEN PAPEL.
MATERIA
BIOQUÍMICA
DOCENTE
IBQ Marta GabrielaAceves Morales
ESPECIALIDAD
LABORATORIO CLÍNICO
GRADO: 6° SEMESTRE GRUPO:“E”
EQUIPO
NUM.7
INTEGRANTES
Acosta Mendoza Edgar Guadalupe
Isaías Ojeda Arlette Guadalupe
Muñoz Gutiérrez Abigail del Rosario
Silva Lerma Sanjuana Ivette
Vázquez CelioAndrea
2. Fundamento
Todas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad en
disolventes apolares, lo que permite su separación cuando una
solución de las mismas asciende por capilaridad a través de una tira
de papel poroso (papel de cromatografía o de filtro) dispuesta
verticalmente sobre una película de un disolvente orgánico (etanol), ya
que las más solubles se desplazaran a mayor velocidad, pues
acompañaran fácilmente al disolvente a medida que este asciende.
Las más menos solubles avanzaran menos en la tira de papel de filtro.
Aparecerán, por tanto, varias bandas de diferentes colores (hasta siete
o más, dependiendo del material utilizado) que estarán más o menos
alejados de la disolución alcohólica según la mayor o menor
solubilidad de los pigmentos.Estas bandas poseerán diferente grosor,
dependiendo de la abundancia del pigmento en la disolución.
4. Procedimiento
1.- Colocar en un mortero trozos de hojas de espinacas lavadas,
quitando las nervaduras más gruesas, junto con 10 o 15 cc de éter
etílico.
2.- Triturar sin golpear hasta que el líquido adquiera una coloración
verde intensa (utilizar campana de gases a lo largo de toda la práctica)
3.- Filtrar en un embudo con papel de filtro y recoger en un tubo de
ensayo (es suficiente con 2 o 3 cc de solución de pigmentos).
4.- Colocar en la tapadera de una caja de Petri metanol absoluto hasta
una altura de 0.5 a 1 cm.
5.- Cortar una tira de papel de filtro de unos 8 cm de anchura y unos
10 a 15 cm de altura.
6.- Poner con el capilar en el papel de cromatografía entre 5 y 10
gotas de solución de pigmentos, espaciadas en el tiempo con el fin de
que vaya secándose el éter etílico y aumente la cantidad de
pigmentos. Las gotas se pondrán siempre en el mismo punto (se
puede marcar con un lápiz), situando a unos 2cm por encima del
borde inferior del papel.
7.- Doblar el papel cromatógrafo a lo largo y colocarlo en la placa de
Petri con la mancha de pigmento a 1 cm de la superficie del eluyente.
Podemos sustituir la placa Petri por un vaso de precipitado y fijar en
papel cromatógrafo con una pinza a un soporte horizontal colocando
en el borde del vaso (por ejemplo, una varilla de vidrio).
8.- Esperar unos 30 minutos y observar.
9.- Repite el mismo procedimiento con otro vegetal
8. Resultados
finales
El resultado obtenido al fianl fue una pigmentacion de ambos , pues del vetabel al
chacarlos cada 5 minutos su pintura hiva decolorandose , pero en vez de ir hacia
abajo la pintura se fue hacia arriva decolorandose cada vez que trnscurria el
tiempo a lo igual que las espinacaz
El resultado del vetabel fue una coloracion que paso de un tono muy morado hasta
obtener y llegar aun tono rosa-rojizo
En cambio la ezpinza de un tonalidad verde militar paso a un tonalidad en la parte
de abajo amarillenta y cada vez que subia tomanba un color verde claro
9. OBSERVACIONES
En la realización de la práctica se pudo observar que en el transcurso de haber
colocado la tira de papel cromatógrafo sobre el alcohol aparecieron bandas de
distintos colores que representan: carotenos, xantofilas y clorofila a y b. Que
corresponden a los distintos pigmentos fotosintéticos presentes en las hojas de
espinaca y en la del betabel.
CONCLUSIONES.
Se obtuvieron los pigmentos fotosintéticos de la clorofila que son los que le dan
color a las hojas de las plantas ya que la fotosíntesis es un proceso que permite a
los vegetales obtener la materia y energía que necesitan para desarrollar sus
funciones vitales se lleva a cabo gracias a la presencia en las hojas y en los tallos
jóvenes de pigmentos capases de captar la energía luminosa.
Cromatografía en papel: se basa en la diferencia de velocidad al desplazarse los
distintos pigmentos sobre una banda de papel poroso. Los más solubles se
desplazan más deprisa, los menos solubles más despacio.
10. CUESTIONARIO:
1. La solubilidad en alcohol de los pigmentos es, de mayor a menor:
carotenos, clorofila a, clorofila b y xantofila. Indicar que pigmento
corresponde a cada banda.
2. ¿Por qué empleamos éter etílico para extraer la clorofila?
Por qué la la clorofila son compuestos insolubles en agua pero solubles en
compuestos orgánicos como el eter
3. ¿Qué pigmentos son los más abundantes?
El caroteno y la xantofila
4. Por encima de las clorofilas aparece más de una banda ¿Qué
significado tiene?
CATOTENO: Generalmente se conoce como caroteno al compuesto químico
llamado más específicamente β-caroteno (leáse beta-caroteno). Este es el
carotenoide más abundante en la naturaleza y el más importante para la dieta
humana, por lo que da su nombre a todo un grupo de compuestos bioquímicos.
XANTOFILAS: Se conoce como xantófilas a los compuestos químicos
pertenecientes al grupo de los carotenoides que poseen uno o más átomos de
oxígeno en su estructura.
Estos pigmentos, más resistentes a la oxidación que las clorofilas, proporcionan
sus tonos amarillentos y parduzcos a las hojas secas.
5. Explica el proceso de separación por cromatografía en papel.
Las diferencias sutiles en el coeficiente de partición de los compuestos dan como
resultado una retención diferencial sobre la fase estacionaria y, por tanto, una
separación efectiva en función de los tiempos de retención de cada componente
de la mezcla.
11. 6. Explica que es el beta-caroteno. Cuáles son los beneficios de su
consumo.
1. POR SU ALTO CONTENIDO DE AGUA
2. FUENTE CASI EXCLUSIVA DE VITAMINA C
3. POR SU APORTE DE FIBRA
4. RICOS EN ANTIOXIDANTES
5. POR SU EFECTO DIURÉTICO
6. NOS APORTAN ÁCIDOS ORGÁNICOS