Extraccion de pigmentos de los vegetales bioquimicamente por medio del papel de cromograma.

1. PRÁCTICA No. 2
Separación de pigmentos vegetales
mediante cromatografía en papel
Integrantes:
 Camacho Luna Vanessa.
 Cornejo Ramírez Karla Geraldine.
 Esmeralda Hernández Rudy Alejandro.
 Esquivel Fonseca Jennifer.
 González López Marisol.
2016
RUDY
CETIs No. 62
25/02/2016

2. Introducción
Un pigmento es: es un material que cambia el color de la luz que refleja como
resultado de la absorción selectiva del color.
Hay diversas clases de pigmentos, los principales son:
 Clorofilas(a,b,c , d y bacterioclorofilas) de colorción verde.
 Carotenoides (carotenos y xantofilias) de coloración amarilla y roja.
 Ficobilinas de coloración azul y roja presentes en las algas verdeazuladas.
Fundamento
En un hoja, además de la clorofila, existen otros pigmentos que se hallan
enmascarados por el intenso color verde manifestado por la clorofila; en
una hoja lo que hay es una mezcla de pigmentos con diferentes colores:
clorofila-a (verde intenso), clorofila-b (verde), carotenos (amarillo claro) y
xantofilas (amarillo anaranjado) en diferentes proporciones.
En Química existe una técnica instrumental para separar, aislar, purificar e
identificar los componentes de una mezcla compleja, tal técnica recibe el
nombre de cromatografía.
La cromatografía es una técnica de separación de una mezcla de solutos
en función de la diferente velocidad con la que se mueve cada uno de ellos
a través de un medio poroso, arrastrado por un disolvente en movimiento.
Objetivo:
El objetivo que el equipo planteo para esta práctica fue el de obtener
correctamente los pigmentos de algunos vegetales tales fueron la espinaca y la
zanahoria.

3. Materiales:
Mortero
 Espinacas
Zanahorias
Papel filtro

4. Tubos de ensayo en gradilla
Éter etílico
Alcohol metílico puro

5. Vaso de precipitado
Tubo capilar
Tira de papel cromatográfico
Sujetador

6. Procedimiento:
1.Colocar en un mortero trozos de hojas de
espinacas (y zanahorias) lavadas, quitando las
nevaduras más gruesas, junto con 10 o 15cc de
éter etílico.
(Nosotros agregamos 15cc de éter etílico para que
podamos tener más liquido).
2.Triturar sin golpear hasta que el líquido
adquiera una coloración verde intensa (y en
caso de la zanahoria, naranja intensa). (Utilizar
campana de gases a lo largo de toda la
práctica).

7. 3.Filtrar en un embudo con papel de filtro y
recoger en un tubo de ensayo (es suficiente
con 2 o 3cc de solución de pigmentos).
(Intentamos sacar todo el líquido posible de la
zanahoria y las espinacas. Logramos obtener más
liquido de las zanahorias).
4.Colocar en el vaso precipitado metanol
absoluto hasta una altura de de 0.5 a 1cm.

8. 5.Poner con el capilar en el papel de
cromatografía entre 5 y 10 gotas de solución de
pigmentos, espaciadad en el tiempo con el fin
de que vaya secándose el éter etílico y
aumente la cantidad de pigmentos. Las gotas
se pondrán siempre en el mismo punto (se
puede marcae con un lápiz), situado a unos
2cm por encima del borde inferior del papel.

9. 6.Doblar el papel cromatográfico a lo largo y
colocarlo en el vaso precipitado con la mancha
de pigmento a 1cm de la superficie del
eluyente. Fijar el papel cromatográfico con una
pinza a un soporte horizontal colocado en el
borde de vaso.

10. 7.Espera unos 30min. Y observar. (Nosotros nos
esperamos los 30 minutos y a cada 10 min.
observábamos los cambios que había en ella).

11. (Después de los 30min.)

12. Observaciones:
En esta práctica pudimos observar que siempre que se trabaje con reactivos una
vez que ya no se utilicen deben de cerrarse porque aparte que despiden el olor ,
se evaporan y la mezcla de gases puede generar explosiones, también
observamos que entra más se machacaban las zanahorias y las espinacas más
concentrado se volvía la disolución que se hacía y que entre más color tenga la
materia se ven mejor la concentración de los pigmentos, porque la zanahoria casi
no tenía color y se observaron muy tenuemente su pigmentación.
Conclusión:
Logramos el objetivo, ya que pudimos obtenerlos sin ningún problema.
La práctica fue un poco tediosa pero la pudimos realizar sin inconvenientes
Logramos observar cómo se separaban los pigmentos, el de la zanahoria fue un
poco vano los pigmentos ya qué la zanahoria estaba algo deshidratada.
CUESTIONARIO:
1. La solubilidad en alcohol de los pigmentos es de menor a mayor: caroteno,
clorofila a, clorofila b y xantofila. Indicar que pigmento corresponde a cada banda
2. ¿Por qué empleamos éter etílico para extraer la clorofila?
La clorofila se asocia con lípidos y proteínas hidrofóbicas de las membranas
fotosintéticas, la clorofila son compuestos insolubles en agua pero solubles en
compuestos orgánicos tales como acetona, alcohol, cloroformo, éter etílico, etc.
estas sustancias extraen cualquier compuesto soluble en ellas como: resinas,
ceras, pigmentos (como la clorofila), hormonas liposolubles, vitaminas liposolubles
y otros lípidos, etc. cuando las pruebas con éter o cetona se le realiza a plantas
fibrosas, como las gramíneas (gramas, pastos) casi todo lo extraído es clorofila
3. ¿Qué pigmentos son los más abundantes?
El Caroteno y la Xantofila

13. 4. Por encima de las clorofilas aparece más de una banda, ¿qué significado
tiene?
CATOTENO: Generalmente se conoce como caroteno al compuesto químico
llamado más específicamente β-caroteno. Este es el carotenoide más abundante
en la naturaleza y el más importante para la dieta humana, por lo que da su
nombre a todo un grupo de compuestos bioquímicos.
XANTOFILAS: Se conoce como xantofilas a los compuestos químicos
pertenecientes al grupo de los carotenoides que poseen uno o más átomos de
oxígeno en su estructura. Según la Unión Europea, el código alimentario para esta
familia de compuestos es E-161. Las xantofilas se encuentran también de forma
natural en muchas plantas, son compuestos pigmentados y presentan también
acción fotosintética. Estos pigmentos, más resistentes a la oxidación que las
clorofilas, proporcionan sus tonos amarillentos y parduzcos a las hojas secas.
5. Explica el proceso de separación por cromatografía en papel.
• Preparación del soporte o fase estacionaria
• Aplicación de la muestra y secado.
• Desarrollo de la cromatografía
• Secado de la placa
• Revelado y cuantificación.
6. Explica que es beta-caroteno. Cuales son los beneficios de su consumo.
No solo es capaz de ayudar a nuestra piel a broncearse. También ayuda a
proteger a nuestro organismo de enfermedades como el cancér gracias a sus
virtudes antióxidantes.