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UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE
GROHMANN-TACNA
FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA PROFESIONAL DE BIOLOGÍA-MICROBIOLOGÍA
CURSO DE NIVELACIÓN: ANÁLISIS CLÍNICO
DOCENTE: Mgr. Blga. Mariela Fresia Caihuaray Silva
SEGUNDA SEMANA
Hematología I.
Consideraciones generales.
Métodos hematológicos. Hematopoyesis.
Eritropoyesis.
Morfología del eritrocito normal y sus precursores.
Componentes de la sangre.
Serie roja.
Serie Blanca.
Plaquetas.
Constantes corpusculares. Hemoglobina. Hematocrito.
Velocidad de sedimentación globular
SEGUNDA SEMANA
Hematología I.
LA SANGRE: CARACTERÍSTICAS
- Consta de una parte líquida, el plasma sanguíneo, en
el que se encuentran elementos formes (las células
sanguíneas) en suspensión.
- La sangre es de color rojo debido a la presencia de
hemoglobina en los hematíes.
- Su pH se encuentra entre 7.35- 7.45.
- La Densidad de la sangre oscila entre 1050 y 1060,
con valores mayores en hombres que en mujeres.
- Volemia es la cantidad total de sangre que tiene un
individuo y representa aproximadamente el 8% del
peso corporal (5.5 L en un hombre de 70 Kg y 250
ml en un recién nacido que pese 3.2 Kg).
- Del volumen sanguíneo total, alrededor de 1 litro
se encuentra en los pulmones, 3 litros en la
circulación venosa sistémica y el litro restante se
reparte entre el corazón, las arterias sistémicas, las
arteriolas y los capilares.
- Las células sanguíneas se dividen en hematíes o
glóbulos rojos, los glóbulos blancos o leucocitos y
las plaquetas.
LA SANGRE: CARACTERÍSTICAS
- El Color de la sangre varía según la muestra
provenga de la red arterial (oxigenada) o venosa
(desoxigenada).
- La sangre venosa, pobre en oxigeno presenta color
rojo oscuro debido a que la hemoglobina se
encuentra reducida.
- La sangre arterial (oxigenada), en cambio, es de
color rojo brillante.
- La Viscosidad de la sangre se encuentra entre 3,5 y
5,5 Pa-s (Pascal/seg), y se relaciona con la cantidad
de eritrocitos y la concentración de proteínas
plasmáticas.
LA SANGRE: CARACTERÍSTICAS
- Distribución de nutrientes desde el intestino a los tejidos.
- Intercambio de gases: transporte de oxígeno desde los pulmones hasta los
tejidos y de dióxido de carbono desde los tejidos hasta los pulmones.
- Transporte de productos de deshecho, resultantes del metabolismo celular,
desde los lugares de producción hasta los de eliminación.
- Transporte de hormonas desde las glándulas endocrinas hasta los tejidos
diana.
- Protección frente a microorganismos invasores.
- Protección frente a hemorragias
LA SANGRE: FUNCIONES
EL PLASMA SANGUÍNEO
Incluyen: iones minerales (sodio, potasio, calcio, cloro), pequeñas moléculas
orgánicas (aminoácidos, ácidos grasos y glucosa) y proteínas plasmáticas (albúminas,
fibrinógeno).
Es un líquido amarillento claro constituido por un 95% de agua y
el 5% restante por diversas sustancias en solución y suspensión.
En condiciones normales, las proteínas del plasma constituyen el 7-9% del plasma (6-8
g/100 ml), destacando tres grandes grupos de proteínas: albúminas, globulinas y factores de
la coagulación como el fibrinógeno y la protrombina
Este proceso es fundamental para la vida humana, ya
que las células de la sangre después de algún
periodo de tiempo en la corriente sanguínea
degeneran, mueren y deben ser renovadas.
LA HEMATOPOYESIS
Es el proceso de producción de las células
sanguíneas, que involucra la proliferación,
diferenciación y maduración celular.
LA HEMATOPOYESIS
LA HEMATOPOYESIS
LA HEMATOPOYESIS
LA HEMATOPOYESIS
LA HEMATOPOYESIS
LA HEMATOPOYESIS
Comienza a partir de una célula madre hematopoyética.
Esa célula pluripotencial da origen a una célula de línea mieloide.
PROCESO DE FORMACIÓN DE LOS ERITROCITOS
ERITROPOYESIS
Esta recibe un nombre diferente para cada una de esas etapas:
Proeritroblasto, eritroblasto basófilo, eritroblasto policromatófilo,
eritroblasto ortocromatófilo (normoblasto), reticulocito y
finalmente, eritrocito, también denominado glóbulo rojo o
hematíe.
La célula mieloide pasa por diferentes etapas de maduración.
La eritropoyesis es el proceso generativo de los eritrocitos.
La vida finita de los eritrocitos, con una media de 120 días.
ERITROPOYESIS
Este proceso eritropoyético dura de 5 a 7 días.
Está regulado por un factor humoral, la eritropoyetina (glucoproteína
segregada por el riñón), que estimula la diferenciación y maduración de las
células más primitivas de la progenie roja, y acelera la maduración de los
eritroblastos.
La vitamina B12 y el ácido fólico permiten una
adecuada maduración del núcleo y del
citoplasma durante el proceso eritropoyético.
- Tienen forma de discos bicóncavos. Con
un diámetro medio de 8 micras.
- En el hombre normal su número es de
unos 5,200.000/mm3 y en la mujer
4,700.000/mm3 de sangre.
- Función es la de transportar la
hemoglobina y, en consecuencia, llevar
oxígeno (O2) desde los pulmones a los
tejidos y dióxido de carbono (CO2) desde
los tejidos a los pulmones.
- La hemoglobina (Hb) es la responsable
del color rojo de la sangre y es la
principal proteína de los eritrocitos (hay
unos 15 g/dl de sangre).
ERITROCITOS O HEMATÍES O GLÓBULOS ROJOS
- Cada molécula de Hb está formada por 4
subunidades y cada subunidad consiste en
un grupo hem (que contiene 1 átomo de
hierro) unido a una globina.
- La fracción con hierro de la Hb se une de
forma reversible al O2 para formar
oxihemoglobina.
ERITROCITOS O HEMATÍES O GLÓBULOS ROJOS
- La globina no se reutiliza y tampoco la
membrana; el hierro pasa a los
depósitos y se reutiliza.
- El grupo hem se transforma en biliverdina y luego en bilirrubina, la que se transporta
en la sangre por la albúmina hasta el hígado.
La componen los glóbulos rojos o eritrocitos (eri = rojo; cito = célula)
Morfología eritrocitaria
En un extendido o frotis de una muestra
sanguínea fresca mediante el
microscopio.
Recordar que un eritrocito normal tiene
una forma de discos bicóncavos de 7,5
micras de diámetros con un espesor
central de 1,2 y en la periferia de 2,1.
ERITROCITOS O HEMATÍES O GLÓBULOS ROJOS
RECUENTO DE GLÓBULOS ROJOS (RECUENTO ERITROCÍTICO)
El recuento eritrocítico se relaciona de
manera muy cercana con las
concentraciones de hemoglobina y
hematócrito.
Es parte integral de la valoración de
pacientes anémicos.
TÉCNICA RECUENTO DE ERITROCITOS
Pipeta de Thoma y líquido de
Hayem, isotónico con la sangre,
hasta la señal 1; así, la sangre
queda diluida al 1/10, si
tomamos sangre hasta la señal 1,
o al 1/20 si tomamos hasta 0.5.
TÉCNICA RECUENTO DE ERITROCITOS
TÉCNICA RECUENTO DE ERITROCITOS
TÉCNICA RECUENTO DE ERITROCITOS
- Esta prueba es un recuento del número de GR circulantes en 1 mm3 de sangre
venosa periférica.
- Los valores normales para GR varían de acuerdo con el género y la edad de la
persona.
- Cuando el valor desciende por debajo del intervalo del valor normal esperado, se
dice que el paciente se encuentra anémico.
EXPLICACIÓN DE LA PRUEBA
VALORES REFERENCIALES: ERITROCITOS
Fuente: Instituto Nacional de Salud. Procedimientos de Laboratorio. Ministerio de Salud
1. Hemorragia (p. ej., sangrado gastrointestinal o
traumatismo).
2. Hemólisis (p. ej., deficiencia de glucosa-6-fosfato
deshidrogenasa, esferocitosis o esplenomegalia
secundaria).
3. Deficiencia alimentaria (p. ej., hierro o vitamina
B12 ).
4. Aberraciones genéticas (p. ej., anemia de células
falciformes o talasemia).
5. Ingestión de fármacos (cloranfenicol, hidantoínas o
quinidina).
6. Insuficiencia medular (p. ej., fibrosis, leucemia o
quimioterapia antineoplásica).
7. Enfermedad crónica (tumor o sepsis).
8. Otras insuficiencias orgánicas (p. ej., enfermedad renal).
Factores que pueden producir concentraciones bajas de GR:
- Enfermedad renal. La eritropoyetina
se produce en los riñones y es un
fuerte estimulante de la producción
de GR.
- Embarazo normal. Durante la
gestación se presenta un aumento
del volumen sanguíneo debido a un
estado de sobrehidratación crónica;
junto con un estado relativo de
“desnutrición”, esto reduce el
número de GR por milímetro cúbico.
CONCENTRACIONES DISMINUIDAS
- Enfermedades
reumatoides/vasculares del
colágeno (p. ej., artritis
reumatoide, lupus, sarcoidosis).
- Leucemia. Enfermedad de
Hodgkin.
- Los cánceres hematológicos se
acompañan con frecuencia de
una insuficiencia medular en la
producción de GR.
- Enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC) grave.
Estados de hipoxia crónicos estimulan la producción de
GR como una reacción fisiológica para incrementar la
capacidad de transporte de oxígeno.
- Policitemia vera. Es resultado de una inapropiada
producción excesiva de GR en la médula.
- Deshidratación grave (p. ej., diarrea grave, quemaduras).
- Hemoglobinopatías. Rasgo de talasemia.
CONCENTRACIONES AUMENTADAS ERITROCITOSIS
- Como una respuesta fisiológica a situaciones externas (p. ej., grandes altitudes).
- Cardiopatía congénita. Las afecciones cardiacas cianógenas producen cifras bajas de PO2 de
manera crónica; y, en respuesta, los GR aumentan.
La serie blanca está constituida por los leucocitos (leuco = blanco; cito = célula).
Los leucocitos constituyen una unidad móvil del sistema inmune del organismo así
como son los encargados de los procesos de inflamación y reparación de los tejidos.
El número promedio de leucocitos en la sangre de un humano adulto es de 7 000 cel
/ l de sangre (con un rango de 4 000 a 10 000 cel / l de sangre).
LA SERIE BLANCA
En el siguiente esquema se presenta el proceso de formación de estas
células.
- Constituyen un conjunto de células de
diferente morfología y origen que
cumplen un papel en los mecanismos
de defensa del organismo.
- En condiciones normales la cantidad
de glóbulos blancos en una persona
adulta oscila entre 4000 y 10000 por
microlitro de sangre.
- Se originan en la Médula Ósea Roja a
partir de unas células madre
hematopoyéticas y en el tejido
linfático y se encuentran en todo el
organismo, incluyendo la sangre y el
tejido linfoide.
LA SERIE BLANCA
1) Los neutrófilos polimorfonucleares:
entre el 50% y el 70% del total
2) Los eosinófilos: entre un 0 y 3% del
total
3) Los basófilos polimorfonucleares:
entre un 0 y 1% )
4) Los monocitos: entre un 1 y 10%
5) Los linfocitos: entre un 20 y 40% L
LAS CELULAS SON:
Los linfocitos y las células plasmáticas son las
encargadas de producir anticuerpos contra los virus
y las bacterias. Los megacariocitos también hacen
parte de los leucocitos, pero en sangre solo se
encuentran fragmentos de estas células, llamadas
plaquetas o trombocitos (entre 150.000 y 300.000
plaq/ l de sangre) y tienen como función destacada
el proceso de coagulación de la sangre.
LA SERIE BLANCA
- Los neutrófilos, eosinófilos y los basófilos tienen un
aspecto granular cuando se observan al microscopio, de
ahí que también se les conozca como granulocitos. Los
granulocitos y los monocitos son especialistas en fagocitar
(deglutir) los microorganismos que invaden el cuerpo.
TÉCNICA RECUENTO DE GLÓBULOS BLANCO- LEUCOCITOS
Realizar el recuento de los leucocitos presentes en una dilución de 1 mm3 de sangre venosa
periférica.
La técnica: Diluir sangre anticoagulada con EDTA en líquido de Turck, y realizar el recuento
de las células mediante cámara de recuento de Neubauer utilizando un microscopio óptico.
TÉCNICA RECUENTO DE GLÓBULOS BLANCO- LEUCOCITOS
Para calcular el valor total de recuento tendremos en cuenta la dilución utilizada, el área
contada y la altura de la cámara utilizada.
TÉCNICA RECUENTO DE GLÓBULOS BLANCO- LEUCOCITOS
VALORES REFERENCIALES: DE GLÓBULOS BLANCO- LEUCOCITOS
• La alimentación, actividad física y esfuerzo pueden precipitar un aumento del recuento
leucocitario y alterar los valores diferenciales.
• El embarazo (último mes) y parto pueden acompañarse de valores aumentados de
leucocitos.
• Los pacientes sometidos a esplenectomía tienen una elevación leve a moderada del
recuento leucocitario.
• El recuento leucocitario es casi siempre menor en la mañana y mayor por la tarde.
FACTORES DE INTERFERENCIA EN EL RECUENTO DE
GLOBULOS BLANCOS- LEUCOCITOS
FACTORES DE INTERFERENCIA EN EL RECUENTO DE
GLÓBULOS BLANCOS- LEUCOCITOS
• Por lo general, el recuento de leucocitos se relaciona con la edad.
• Los fármacos que pueden incrementar los valores leucocitarios incluyen
adrenalina, alopurinol, ácido acetilsalicílico, cloroformo, heparina, quinina,
esteroides.
• Los compuestos que pueden inducir valores leucocitarios disminuidos incluyen
antibióticos, anticonvulsivos, antihistamínicos, antimetabolitos, fármacos
antitiroideos, arsénico, barbitúricos, quimioterapéuticos, , diuréticos y
sulfonamidas.
• Necrosis tisular.
• Inflamación.
• Deshidratación.
• Tormenta tiroidea. Un incremento marcado
de estas hormonas puede relacionarse con
el aumento de leucocitos.
RECUENTO LEUCOCITARIO AUMENTADO: LEUCOCITOSIS
• Infección. Los leucocitos son la base
para iniciar y mantener el
mecanismo de defensa del cuerpo
contra infección.
• Neoplasia leucémica y otros
trastornos mieloproliferativos.
• Los cánceres no medulares
avanzados (p. ej., pulmonar) se
relacionan con leucocitosis.
• Traumatismo, esfuerzo o hemorragia.
• El recuento de leucocitos está
influido probablemente por
hormonas (p. ej., adrenalina).
• Insuficiencia de la médula ósea (p. ej.,
después de quimioterapia o radioterapia
antineoplásicas, enfermedades
medulares infiltrativas, infecciones
generalizadas,
• Enfermedades autoinmunitarias
• Deficiencia dietética (p. ej., vitamina B12
, deficiencia de hierro).
RECUENTO LEUCOCITARIO DISMINUIDO: LEUCOPENIA
- Hiperesplenismo. El bazo extrae
leucocitos de forma más intensa de la
circulación sanguínea.
PLAQUETAS
Son fragmentos celulares anucleados,
derivados del Megacariocito de la Médula
Ósea Roja.
El número normal de plaquetas en una
persona adulta oscila entre 150.000 y
300.000 por mm3 de sangre.
La supervivencia de las plaquetas se mide
en días (alrededor de 7 a 9).
Su apariencia en sangre es oval o
discoidal y mide 0,5-2 µ de diámetro.
PLAQUETAS
TÉCNICA: FUNDAMENTO
• Son células pequeñas, redondas y sin núcleo
cuya función principal es mantener la integridad
vascular.
• Cuando hay una lesión del vaso sanguíneo, se
requiere hemostasia para formar un coágulo que
tapone el espacio hasta que cicatrice.
• La fase primaria del mecanismo hemostático
incluye agregación plaquetaria. De allí, las
plaquetas ayudan a iniciar la cascada de los
factores de la coagulación.
PLAQUETAS
TÉCNICA: FUNDAMENTO
• La mayor parte de las plaquetas existe en el torrente
sanguíneo; el (25%) se localiza en el hígado y el bazo.
• Los recuentos menores de 100 000/mm3 son indicativos de
trombocitopenia. Los recuentos mayores de 400 000/mm3
de trombocitosis.
Las enfermedades relacionadas de manera habitual con la
trombocitosis espontánea son la anemia por deficiencia de
hierro y las neoplasias (leucemia, linfoma, tumores sólidos
como en el colon).
Es posible la hemorragia espontánea con la trombocitopenia.
Si la trombocitopenia es grave, las plaquetas se cuentan de
forma manual.
PLAQUETAS
TÉCNICA: FUNDAMENTO
El sangrado espontáneo es un gran riesgo cuando los recuentos de
plaquetas son menores de 20 000/mm3 .
Con recuentos superiores a 40 000/mm3 rara vez hay sangrado
espontáneo, pero puede observarse un sangrado prolongado por
traumatismo u operaciones con recuentos similares.
Las petequias y equimosis también pueden presentarse al mismo
grado que la trombocitopenia.
PLAQUETAS: INDICACIONES
Se realiza en pacientes que
desarrollan petequias (pequeñas
hemorragias en la piel),
sangrado, menstruaciones cada
vez más abundantes o
trombocitopenia.
Se usa como indicador del curso
de la enfermedad o tratamiento
para trombocitopenia o
insuficiencia de la médula ósea.
El recuento plaquetario es
la cuantificación real del
número de plaquetas
(trombocitos) por
milímetro cúbico de
sangre.
Hacer una dilución de la sangre
utilizando una pipeta de Thoma para
glóbulos blancos y un líquido diluyente
oxalato de amonio al 1% que hace
visibles a las plaquetas a la vez que
destruye a los eritrocitos.
Dejar sedimentar durante 15-20 minutos
Se examinará al microscopio un volumen
conocido de la muestra en la Cámara de
Neubauer, contando el número de plaquetas en
la zona donde se cuenta GR por cálculo se
obtiene el número de elementos por mm3 .
PLAQUETAS: TÉCNICA DE RECUENTO
CÁMARA DE NEUBAUER
PLAQUETAS: VALORES REFERENCIALES
• Vivir en grandes altitudes puede
incrementar las concentraciones
plaquetarias.
• Debido a que las plaquetas pueden
acumularse o agruparse, el recuento
automatizado está sujeto a cuando menos
un margen de error de 10 a 15%.
• El ejercicio extenuante puede causar
concentraciones aumentadas.
PLAQUETAS: FACTORES DE
INTERFERENCIA
PLAQUETAS: FACTORES DE INTERFERENCIA
• Fármacos que pueden inducir valores aumentados:
estrógenos y anticonceptivos orales.
• Fármacos que pueden causar concentraciones
disminuidas: se encuentran los antineoplásicos,
cloranfenicol, colchicina, cimetidina, hidralazina,
indometacina, isoniazida (INH), quinidina,
estreptomicina, sulfonamidas, diuréticos tiazídicos y
tolbutamida.
• Son posibles cifras disminuidas antes de la
menstruación.
• Trastornos malignos (leucemia, linfoma, tumores sólidos como en
el colon).
• Policitemia vera. Es una hiperplasia de todas las estirpes celulares
de la médula, incluidas las plaquetas.
• Con esplenectomía: se incrementa el recuento plaquetario.
• Artritis reumatoide.
• Anemia por deficiencia de hierro o anemia posterior a hemorragia.
Las plaquetas, por otro lado, pueden responder en presencia de
una deficiencia de hierro.
PLAQUETAS: CONCENTRACIONES AUMENTADAS- TROMBOCITOSIS
• Hiperesplenismo. El bazo extrae las plaquetas envejecidas de
la circulación sanguínea. Un bazo hipertrófico extrae más
plaquetas, viejas y nuevas.
• Hemorragia. Se pierden plaquetas en la hemorragia.
• Trombocitopenia inmunitaria (p. ej., trombocitopenia
idiopática, neonatal, postransfusional o inducida por
fármacos). No se producen plaquetas y desciende el recuento
• Leucemia y otros trastornos mielofibróticos.
• Enfermedad de Graves.
PLAQUETAS: CONCENTRACIONES DISMINUIDAS- TROMBOCITOPENIA
• Es el principal elemento y pigmento
de la sangre, que se encuentra en el
interior de los eritrocitos.
• En el adulto normal su concentración
es de 15 gr/% para el varón y de 12
gr/% para la mujer.
• Un gramo de Hgb es capaz de
transportar 1,34 ml de O2, por lo que
en condiciones normales se
transportará 21 ml de O2 cada 100
ml de sangre.
Dos cadenas alfa y dos beta
se unen al hem para
constituir el 97% de la
hemoglobina adulta normal:
la hemoglobina A.
Existen otros tipos dos tipos
de hemoglobina en el ser
humano normal: la
hemoglobina F (fetal), que se
halla preponderantemente
durante la vida intrauterina;
al nacer representa el 80%
del total, y este porcentaje se
reduce rápidamente en los
primeros meses de vida,
pudiendo persistir en
pequeña proporción en el
adulto.
La hemoglobina es una
proteína conjugada cuyo
núcleo prostético es el hem,
formado por cuatro núcleos
pirrólicos unidos al hierro.
Estas moléculas se unen a la
de globina, que a su vez está
formada por cadenas de
aminoácidos, siendo éstas de
dos tipos: alfa, de 141
aminoácidos, y beta de 146.
El tercer tipo es la hemoglobina A2, en donde las dos
cadenas beta están reemplazadas por dos delta. Representa
del 1,5 al 3,5% de la hemoglobina total
• Se determina por fotocolorimetría.
• Las variaciones fisiológicas son concordantes con el
hematocrito.
• La anemia es el déficit de glóbulos
rojos, y se determina cuando los valores
de hemoglobina se encuentran
disminuidos en sangre
• Su mayor utilidad es para definir un estado de
anemia.
PRINCIPIO DEL MÉTODO
Este método se basa en la disolución de la sangre en
una solución de ferrocianuro potásico y cianuro
potásico, el ferrocianuro potásico oxida las
hemoglobinas a metahemoglobinas y el cianuro
potásico proporciona los iones cianuro para formar
ciano-metahemoglobina.
FERROCIANURO
POTÁSICO
HEMOGLOBINAS METAHEMOGLOBINAS
oxida
iones
cianuro
CIANURO POTÁSICO
CIANO-
METAHEMOGLOBINAS
• Enfermedad cardiaca congénita
• Enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC) grave.
• Policitemia vera. Es resultado de una inapropiada producción
excesiva de GR en la médula, con incremento de la Hb.
• Deshidratación profunda (p. ej., diarrea grave, quemaduras).
• Los fumadores extremos tienen valores de Hb más altos que los
no fumadores.
• Enfermedad renal.
• Enfermedades reumatoides/vasculares
del colágeno (p. ej., artritis reumatoide
[AR], lupus, sarcoidosis).
• Neoplasia. Leucemia. Enfermedad de
Hodgkin
• En el embarazo se presentan
disminuciones ligeras en los valores de
Hb.
• Anemia
• Cirrosis.
• Hemorragia. Con un
sangrado activo, el número
de GR disminuye y por lo
tanto también la Hb.
• Deficiencia alimentaria.
Deficiencias vitamínicas o
minerales (p. ej., hierro).
• Insuficiencia medular. Con
una síntesis reducida de GR,
la Hb disminuye.
• Es una medida del porcentaje del
volumen total de sangre que se
compone de los glóbulos rojos (GR).
• Se utiliza como una cuantificación
rápida del recuento eritrocítico.
• Expresa la proporción de glóbulos
rojos en 100 ml de sangre.
• Su resultado se expresa en porcentaje.
• Se efectúa por dos métodos: el
macrohematocrito y el
microhematocrito.
- Capilares rojos y azules (75 mm x 1,5 mm).
- Plastilina.
• Tomar la muestra en capilares rojos heparinizados directamente del
pulpejo del dedo, o utilizar capilares azules sin heparina para sangre
venosa con anticoagulante de EDTA.
• Debe llenarse aproximadamente 70% - 80% del capilar.
• Ocluir (tapar) un extremo del capilar con plastilina.
• Colocar el capilar sobre la plataforma del cabezal de una centrífuga de
microhematocrito, con el extremo ocluido adherido al reborde externo
de la plataforma.
• Centrifugar por 5 minutos entre 10 000 - 12 000 rpm
Materiales requeridos:
Procedimiento:
• Los valores en niños son específicos de la edad, con cifras normales que varían a lo
largo de los primeros 18 años.
• Los valores disminuyen un poco en ancianos.
Tubos que muestran valores del
hematocrito de sangre normal,
sangre con evidencia de anemia y
sangre con evidencia de
policitemia.
Obsérvese la capa leucocitaria
localizada entre los glóbulos rojos
(GR) centrifugados y el plasma:
A) Porcentaje normal de GR
B) Anemia (porcentaje bajo de GR)
C) Policitemia (porcentaje alto de
GR)
• Las anomalías en el tamaño
de los GR puede alterar los
valores del Hct. Eritrocitos
más grandes se relacionan
con cifras de Hct más altas,
ya que éstos representan un
porcentaje mayor del
volumen total de sangre.
• Vivir en grandes altitudes
ocasiona un aumento de los
valores de Hct
• En caso de deshidratación, el Hct
se eleva de manera falsa y, en
presencia de hidratación excesiva,
disminuye.
• El Hct (en puntos porcentuales) es tres veces la
concentración de Hb (en gramos por decilitro) cuando
los GR son de tamaño normal y contienen cantidades
normales de Hb.
• Anemia hemolíticas
inducidas por fármacos.
• Cirrosis.
• Hemorragia. Con un
sangrado activo, el
número de GR
desciende y por tanto
también disminuye el
Hct.
• Deficiencia alimentaria. Con
ciertas deficiencias
vitamínicas o minerales (p.
ej., hierro).
• Insuficiencia medular.
• Enfermedad renal
• Embarazo normal
• Enfermedades
reumatoides/vasculares del
colágeno (p. ej., artritis
reumatoide, lupus).
• Linfoma. Mieloma múltiple.
Leucemia
• Fármacos que pueden inducir
valores disminuidos incluyen
cloranfenicol y penicilina.
Los índices de Wintrobe son tres:
El volumen
corpuscular (o
globular)
medio (VCM)
La hemoglobina
corpuscular
media (HCM)
Concentración de
hemoglobina
corpuscular
media (CHCM).
1 2 3
Los índices de eritrocitos proporcionan información acerca del tamaño
(VCM), el contenido de hemoglobina (HCM) y la concentración de
hemoglobina (CMHC) de los eritrocitos.
Esta prueba es útil para la clasificación de las anemias.
El VCM es una medida del volumen o
tamaño promedio de un solo GR y por lo
tanto se utiliza para la clasificación de las
anemias.
El VCM se calcula al dividir el hematócrito
entre el recuento total de GR:
Volumen Corpuscular Medio (VCM):
Volumen Corpuscular Medio (VCM):
Volumen Corpuscular Medio (VCM):
• La HCM es la medida de la cantidad
promedio de hemoglobina que se
encuentra en un GR.
• Nos da una idea del color: Hipocromía
(bajo color) normocromia (normal)
• Se expresa en picogramos.
• También nos permite clasificar a las
anemias.
• Aquellas con valores normales son
anemias normocrómicas, y aquellas con
valores disminuidas son anemias
hipocrómicas.
Hemoglobina Corpuscular Media (HCM):
• Se calcula al dividir la
concentración total de
hemoglobina entre el
número de GR
Cuando los valores de CMHC
descienden, la célula tiene una
deficiencia de hemoglobina y se
dice que es hipocrómica (esto se
observa con frecuencia en la
anemia por deficiencia de hierro y
la talasemia).
Si las cifras son normales, se dice
que la anemia es normocrómica (p.
ej., anemia hemolítica).
Concentración Media de Hemoglobina Corpuscular (CMHC):
Nos permite determinar la concentración promedio de hemoglobina por eritrocito en
porcentaje.
• El valor de la VSG se usa para demostrar la presencia de inflamación o
destrucción tisular, o ambas afecciones.
• Es una prueba “no específica” que indica destrucción de tejido, pero no
identifica la causa (o sea el trastorno patológico responsable)
Si se obtiene una muestra de sangre con anticoagulante y se deja en reposo en un tubo de
ensayo, en posición vertical, los eritrocitos se depositarán gradualmente en el fondo.
No todas las muestras de sangre sedimentan con la misma velocidad, lo que depende de
varios factores como el tamaño de los eritrocitos, la densidad y viscosidad del plasma,
estas últimas influidas por las concentraciones de proteínas.
Con frecuencia, los eritrocitos se
repelen entre sí debido a la presencia
de ácido siálico en su superficie, que
tiene carga eléctrica negativa.
El aumento de proteínas por un
Mieloma, macroglobulinemia, o un
proceso inflamatorio crónico,
disminuye la fuerza repelente entre
los eritrocitos, permitiendo que se
aglutinen (fenómeno de Rouleaux).
Cuando esto sucede, los eritrocitos aglutinados presentan
un mayor volumen, por lo que sedimentan a mayor
velocidad.
1. Mezclar la sangre por inversión por lo
menos durante 5 minutos.
2. Llenar un tubo de Wintrobe hasta la marca
0-10 usando una pipeta Pasteur. Es
importante vigilar que no se formen
burbujas en la columna de sangre o en el
fondo del tubo al llenarlo. Esto se logra
haciendo resbalar la sangre por las paredes
del tubo, iniciando en el fondo y sacando la
punta de la pipeta a medida que se va
llenando.
3. Colocar el tubo en la gradilla de Wintrobe,
verificando que ésta se encuentre bien
nivelada.
4. Dejar en reposo en una mesa sin
vibraciones, durante 60 minutos.
Leer la altura de la interfase
plasma/eritrocitos y anotar la
cifra.
Medir los milímetros
descendidos de glóbulos rojos
mediante la columna de plasma
por encima del paquete
globular.
El hemograma constituye uno de los exámenes de laboratorio más usados en el
campo de la hematología en lo referente a tamaño, forma y color de los
componentes sanguíneos y comprende una parte cualitativa y una cuantitativa.
Objetivo: Determinar los porcentajes de las
distintas clases de leucocitos normales y
anormales en la sangre.
Calidad del frotis debe abarcar 80% de la lámina con cabeza, cuerpo y cola.
Extensiones gruesas dificultan la visualización e identificación celular, mientras que las delgadas
originan una distribución anormal de los elementos
Fundamento El colorante de Wright va a permitir
suministrar un medio para estudiar la sangre y determinar
las variaciones y anormalidades de estructura, forma y
tamaño de los eritrocitos, su contenido de hemoglobina y
sus propiedades de coloración. La información obtenida
de un frotis de sangre periférica depende en gran parte de
la calidad del extendido y la coloración.
- Colorante de Wright. Frasco gotero.
- Solución amortiguada tamponada
Materiales
Procedimiento
Posteriormente, se hace el
recuento diferencial de
glóbulos blancos en 100
células
GRANULOCITOS
Son los elementos más abundantes de la
serie blanca en el torrente circulatorio.
Su nombre se debe a la presencia de
abundantes granulaciones citoplasmáticas
con características de tinción especiales que
los distinguen entre sí.
Estos gránulos corresponden a lisosomas que
poseen sustancias como heparina, histamina
o enzimas como: fosfatasa ácida, lisozima,
peroxidasa, fosfatasa alcalina, nucleotidasa,
lipasa.
Tienen un diámetro de 12µ, con
un núcleo multilobulado, con 3-5
lóbulos unidos por finos puentes
de cromatina.
Su vida media es de 6-7 días y
son los glóbulos blancos más
abundantes en la sangre.
Defienden al organismo contra
infecciones bacterianas y de
hongos.
Contiene numerosos gránulos neutrófilos
que se tiñen de color gris marrón con las
coloraciones panópticas habituales, presenta
también gránulos primarios o azurófilos,
difícilmente visibles al quedar sobrepuestos
por los gránulos neutrófilos.
Neutrófilo en banda:
Su tamaño es de 12 – 14 micras.
Se caracteriza por su núcleo en forma de C, S, P, M, U, T, R,
W, O, etc. y cromatina condensada en grumos, citoplasma
abundante, acidófilo y cubierto de finas granulaciones
específicas
Miden alrededor de 16 µ, se caracterizan por
tener en su citoplasma gránulos acidófilos que
poseen una forma redondeada con un tamaño
de 0,5 y 1,5 micras, ocupan todo el citoplasma
de la célula y se tiñe de color gris rojizo o
marrón anaranjado, siendo refringentes.
El núcleo es generalmente bilobulado,
pudiendo en algunas ocasiones tener tres
lóbulos, presentan cromatina picnótica
Lidian con las infecciones parasitarias y son las células inflamatorias
predominantes durante una reacción alérgica.
Tienen un núcleo poco visible debido a la
gran cantidad de gránulos en el
citoplasma, el núcleo es bi o tri lobulado.
Son principalmente responsables de las
respuestas alérgicas ya que liberan
Histamina, provocando vasodilatación.
Constituyen un complejo celular altamente
distribuido en el organismo.
Sus células se originan por la vía Mieloide,
derivando en un Precursor Unipotencial
Monocítico.
Los Monocitos miden entre 10-18 µ y constituyen
el 1-8 % de los glóbulos blancos circulantes de
un adulto normal.
Su núcleo a menudo adquiere forma de
herradura y circulan entre 2 a 3 días; luego se
alojan en distintos tejidos donde maduran como
Macrófagos.
El linfocito pequeño posee un
diámetro entre 6 y 10 micras.
El núcleo es relativamente
voluminoso y ocupa la mayor parte
de la célula, la cromatina es
condensada y no se aprecian
nucléolos.
El citoplasma es escaso y se dispone
en forma de una estrecha franja
perinuclear, no presenta
granulaciones.
Los linfocitos medianos
tienen un diámetro entre
11 a 15 micras.
Los linfocitos grandes
poseen un diámetro
entre 16 a 25 micras.
El citoplasma es más
abundante.
Perfil de hemostasia.
• Factores de coagulación. (1er grupo)
• Tiempo de protrombina (TP), (2do grupo)
• Tiempo parcial de tromboplastina, (3er grupo)
• TC, TS, trastornos de la hemostasia. (4to grupo)

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  • 1. UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE GROHMANN-TACNA FACULTAD DE CIENCIAS ESCUELA PROFESIONAL DE BIOLOGÍA-MICROBIOLOGÍA CURSO DE NIVELACIÓN: ANÁLISIS CLÍNICO DOCENTE: Mgr. Blga. Mariela Fresia Caihuaray Silva SEGUNDA SEMANA
  • 2. Hematología I. Consideraciones generales. Métodos hematológicos. Hematopoyesis. Eritropoyesis. Morfología del eritrocito normal y sus precursores. Componentes de la sangre. Serie roja. Serie Blanca. Plaquetas. Constantes corpusculares. Hemoglobina. Hematocrito. Velocidad de sedimentación globular SEGUNDA SEMANA
  • 3. Hematología I. LA SANGRE: CARACTERÍSTICAS - Consta de una parte líquida, el plasma sanguíneo, en el que se encuentran elementos formes (las células sanguíneas) en suspensión. - La sangre es de color rojo debido a la presencia de hemoglobina en los hematíes. - Su pH se encuentra entre 7.35- 7.45. - La Densidad de la sangre oscila entre 1050 y 1060, con valores mayores en hombres que en mujeres.
  • 4. - Volemia es la cantidad total de sangre que tiene un individuo y representa aproximadamente el 8% del peso corporal (5.5 L en un hombre de 70 Kg y 250 ml en un recién nacido que pese 3.2 Kg). - Del volumen sanguíneo total, alrededor de 1 litro se encuentra en los pulmones, 3 litros en la circulación venosa sistémica y el litro restante se reparte entre el corazón, las arterias sistémicas, las arteriolas y los capilares. - Las células sanguíneas se dividen en hematíes o glóbulos rojos, los glóbulos blancos o leucocitos y las plaquetas. LA SANGRE: CARACTERÍSTICAS
  • 5. - El Color de la sangre varía según la muestra provenga de la red arterial (oxigenada) o venosa (desoxigenada). - La sangre venosa, pobre en oxigeno presenta color rojo oscuro debido a que la hemoglobina se encuentra reducida. - La sangre arterial (oxigenada), en cambio, es de color rojo brillante. - La Viscosidad de la sangre se encuentra entre 3,5 y 5,5 Pa-s (Pascal/seg), y se relaciona con la cantidad de eritrocitos y la concentración de proteínas plasmáticas. LA SANGRE: CARACTERÍSTICAS
  • 6. - Distribución de nutrientes desde el intestino a los tejidos. - Intercambio de gases: transporte de oxígeno desde los pulmones hasta los tejidos y de dióxido de carbono desde los tejidos hasta los pulmones. - Transporte de productos de deshecho, resultantes del metabolismo celular, desde los lugares de producción hasta los de eliminación. - Transporte de hormonas desde las glándulas endocrinas hasta los tejidos diana. - Protección frente a microorganismos invasores. - Protección frente a hemorragias LA SANGRE: FUNCIONES
  • 7. EL PLASMA SANGUÍNEO Incluyen: iones minerales (sodio, potasio, calcio, cloro), pequeñas moléculas orgánicas (aminoácidos, ácidos grasos y glucosa) y proteínas plasmáticas (albúminas, fibrinógeno). Es un líquido amarillento claro constituido por un 95% de agua y el 5% restante por diversas sustancias en solución y suspensión. En condiciones normales, las proteínas del plasma constituyen el 7-9% del plasma (6-8 g/100 ml), destacando tres grandes grupos de proteínas: albúminas, globulinas y factores de la coagulación como el fibrinógeno y la protrombina
  • 8. Este proceso es fundamental para la vida humana, ya que las células de la sangre después de algún periodo de tiempo en la corriente sanguínea degeneran, mueren y deben ser renovadas. LA HEMATOPOYESIS Es el proceso de producción de las células sanguíneas, que involucra la proliferación, diferenciación y maduración celular.
  • 15. Comienza a partir de una célula madre hematopoyética. Esa célula pluripotencial da origen a una célula de línea mieloide. PROCESO DE FORMACIÓN DE LOS ERITROCITOS ERITROPOYESIS Esta recibe un nombre diferente para cada una de esas etapas: Proeritroblasto, eritroblasto basófilo, eritroblasto policromatófilo, eritroblasto ortocromatófilo (normoblasto), reticulocito y finalmente, eritrocito, también denominado glóbulo rojo o hematíe. La célula mieloide pasa por diferentes etapas de maduración. La eritropoyesis es el proceso generativo de los eritrocitos.
  • 16. La vida finita de los eritrocitos, con una media de 120 días. ERITROPOYESIS Este proceso eritropoyético dura de 5 a 7 días. Está regulado por un factor humoral, la eritropoyetina (glucoproteína segregada por el riñón), que estimula la diferenciación y maduración de las células más primitivas de la progenie roja, y acelera la maduración de los eritroblastos. La vitamina B12 y el ácido fólico permiten una adecuada maduración del núcleo y del citoplasma durante el proceso eritropoyético.
  • 17. - Tienen forma de discos bicóncavos. Con un diámetro medio de 8 micras. - En el hombre normal su número es de unos 5,200.000/mm3 y en la mujer 4,700.000/mm3 de sangre. - Función es la de transportar la hemoglobina y, en consecuencia, llevar oxígeno (O2) desde los pulmones a los tejidos y dióxido de carbono (CO2) desde los tejidos a los pulmones. - La hemoglobina (Hb) es la responsable del color rojo de la sangre y es la principal proteína de los eritrocitos (hay unos 15 g/dl de sangre). ERITROCITOS O HEMATÍES O GLÓBULOS ROJOS
  • 18. - Cada molécula de Hb está formada por 4 subunidades y cada subunidad consiste en un grupo hem (que contiene 1 átomo de hierro) unido a una globina. - La fracción con hierro de la Hb se une de forma reversible al O2 para formar oxihemoglobina. ERITROCITOS O HEMATÍES O GLÓBULOS ROJOS - La globina no se reutiliza y tampoco la membrana; el hierro pasa a los depósitos y se reutiliza. - El grupo hem se transforma en biliverdina y luego en bilirrubina, la que se transporta en la sangre por la albúmina hasta el hígado.
  • 19. La componen los glóbulos rojos o eritrocitos (eri = rojo; cito = célula) Morfología eritrocitaria En un extendido o frotis de una muestra sanguínea fresca mediante el microscopio. Recordar que un eritrocito normal tiene una forma de discos bicóncavos de 7,5 micras de diámetros con un espesor central de 1,2 y en la periferia de 2,1. ERITROCITOS O HEMATÍES O GLÓBULOS ROJOS
  • 20. RECUENTO DE GLÓBULOS ROJOS (RECUENTO ERITROCÍTICO) El recuento eritrocítico se relaciona de manera muy cercana con las concentraciones de hemoglobina y hematócrito. Es parte integral de la valoración de pacientes anémicos.
  • 21. TÉCNICA RECUENTO DE ERITROCITOS Pipeta de Thoma y líquido de Hayem, isotónico con la sangre, hasta la señal 1; así, la sangre queda diluida al 1/10, si tomamos sangre hasta la señal 1, o al 1/20 si tomamos hasta 0.5.
  • 22. TÉCNICA RECUENTO DE ERITROCITOS
  • 23. TÉCNICA RECUENTO DE ERITROCITOS
  • 24. TÉCNICA RECUENTO DE ERITROCITOS
  • 25. - Esta prueba es un recuento del número de GR circulantes en 1 mm3 de sangre venosa periférica. - Los valores normales para GR varían de acuerdo con el género y la edad de la persona. - Cuando el valor desciende por debajo del intervalo del valor normal esperado, se dice que el paciente se encuentra anémico. EXPLICACIÓN DE LA PRUEBA
  • 26. VALORES REFERENCIALES: ERITROCITOS Fuente: Instituto Nacional de Salud. Procedimientos de Laboratorio. Ministerio de Salud
  • 27. 1. Hemorragia (p. ej., sangrado gastrointestinal o traumatismo). 2. Hemólisis (p. ej., deficiencia de glucosa-6-fosfato deshidrogenasa, esferocitosis o esplenomegalia secundaria). 3. Deficiencia alimentaria (p. ej., hierro o vitamina B12 ). 4. Aberraciones genéticas (p. ej., anemia de células falciformes o talasemia). 5. Ingestión de fármacos (cloranfenicol, hidantoínas o quinidina). 6. Insuficiencia medular (p. ej., fibrosis, leucemia o quimioterapia antineoplásica). 7. Enfermedad crónica (tumor o sepsis). 8. Otras insuficiencias orgánicas (p. ej., enfermedad renal). Factores que pueden producir concentraciones bajas de GR:
  • 28. - Enfermedad renal. La eritropoyetina se produce en los riñones y es un fuerte estimulante de la producción de GR. - Embarazo normal. Durante la gestación se presenta un aumento del volumen sanguíneo debido a un estado de sobrehidratación crónica; junto con un estado relativo de “desnutrición”, esto reduce el número de GR por milímetro cúbico. CONCENTRACIONES DISMINUIDAS - Enfermedades reumatoides/vasculares del colágeno (p. ej., artritis reumatoide, lupus, sarcoidosis). - Leucemia. Enfermedad de Hodgkin. - Los cánceres hematológicos se acompañan con frecuencia de una insuficiencia medular en la producción de GR.
  • 29. - Enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC) grave. Estados de hipoxia crónicos estimulan la producción de GR como una reacción fisiológica para incrementar la capacidad de transporte de oxígeno. - Policitemia vera. Es resultado de una inapropiada producción excesiva de GR en la médula. - Deshidratación grave (p. ej., diarrea grave, quemaduras). - Hemoglobinopatías. Rasgo de talasemia. CONCENTRACIONES AUMENTADAS ERITROCITOSIS - Como una respuesta fisiológica a situaciones externas (p. ej., grandes altitudes). - Cardiopatía congénita. Las afecciones cardiacas cianógenas producen cifras bajas de PO2 de manera crónica; y, en respuesta, los GR aumentan.
  • 30. La serie blanca está constituida por los leucocitos (leuco = blanco; cito = célula). Los leucocitos constituyen una unidad móvil del sistema inmune del organismo así como son los encargados de los procesos de inflamación y reparación de los tejidos. El número promedio de leucocitos en la sangre de un humano adulto es de 7 000 cel / l de sangre (con un rango de 4 000 a 10 000 cel / l de sangre). LA SERIE BLANCA
  • 31. En el siguiente esquema se presenta el proceso de formación de estas células.
  • 32. - Constituyen un conjunto de células de diferente morfología y origen que cumplen un papel en los mecanismos de defensa del organismo. - En condiciones normales la cantidad de glóbulos blancos en una persona adulta oscila entre 4000 y 10000 por microlitro de sangre. - Se originan en la Médula Ósea Roja a partir de unas células madre hematopoyéticas y en el tejido linfático y se encuentran en todo el organismo, incluyendo la sangre y el tejido linfoide. LA SERIE BLANCA
  • 33. 1) Los neutrófilos polimorfonucleares: entre el 50% y el 70% del total 2) Los eosinófilos: entre un 0 y 3% del total 3) Los basófilos polimorfonucleares: entre un 0 y 1% ) 4) Los monocitos: entre un 1 y 10% 5) Los linfocitos: entre un 20 y 40% L LAS CELULAS SON:
  • 34. Los linfocitos y las células plasmáticas son las encargadas de producir anticuerpos contra los virus y las bacterias. Los megacariocitos también hacen parte de los leucocitos, pero en sangre solo se encuentran fragmentos de estas células, llamadas plaquetas o trombocitos (entre 150.000 y 300.000 plaq/ l de sangre) y tienen como función destacada el proceso de coagulación de la sangre. LA SERIE BLANCA - Los neutrófilos, eosinófilos y los basófilos tienen un aspecto granular cuando se observan al microscopio, de ahí que también se les conozca como granulocitos. Los granulocitos y los monocitos son especialistas en fagocitar (deglutir) los microorganismos que invaden el cuerpo.
  • 35. TÉCNICA RECUENTO DE GLÓBULOS BLANCO- LEUCOCITOS Realizar el recuento de los leucocitos presentes en una dilución de 1 mm3 de sangre venosa periférica. La técnica: Diluir sangre anticoagulada con EDTA en líquido de Turck, y realizar el recuento de las células mediante cámara de recuento de Neubauer utilizando un microscopio óptico.
  • 36. TÉCNICA RECUENTO DE GLÓBULOS BLANCO- LEUCOCITOS Para calcular el valor total de recuento tendremos en cuenta la dilución utilizada, el área contada y la altura de la cámara utilizada.
  • 37. TÉCNICA RECUENTO DE GLÓBULOS BLANCO- LEUCOCITOS
  • 38.
  • 39. VALORES REFERENCIALES: DE GLÓBULOS BLANCO- LEUCOCITOS
  • 40. • La alimentación, actividad física y esfuerzo pueden precipitar un aumento del recuento leucocitario y alterar los valores diferenciales. • El embarazo (último mes) y parto pueden acompañarse de valores aumentados de leucocitos. • Los pacientes sometidos a esplenectomía tienen una elevación leve a moderada del recuento leucocitario. • El recuento leucocitario es casi siempre menor en la mañana y mayor por la tarde. FACTORES DE INTERFERENCIA EN EL RECUENTO DE GLOBULOS BLANCOS- LEUCOCITOS
  • 41. FACTORES DE INTERFERENCIA EN EL RECUENTO DE GLÓBULOS BLANCOS- LEUCOCITOS • Por lo general, el recuento de leucocitos se relaciona con la edad. • Los fármacos que pueden incrementar los valores leucocitarios incluyen adrenalina, alopurinol, ácido acetilsalicílico, cloroformo, heparina, quinina, esteroides. • Los compuestos que pueden inducir valores leucocitarios disminuidos incluyen antibióticos, anticonvulsivos, antihistamínicos, antimetabolitos, fármacos antitiroideos, arsénico, barbitúricos, quimioterapéuticos, , diuréticos y sulfonamidas.
  • 42. • Necrosis tisular. • Inflamación. • Deshidratación. • Tormenta tiroidea. Un incremento marcado de estas hormonas puede relacionarse con el aumento de leucocitos. RECUENTO LEUCOCITARIO AUMENTADO: LEUCOCITOSIS • Infección. Los leucocitos son la base para iniciar y mantener el mecanismo de defensa del cuerpo contra infección. • Neoplasia leucémica y otros trastornos mieloproliferativos. • Los cánceres no medulares avanzados (p. ej., pulmonar) se relacionan con leucocitosis. • Traumatismo, esfuerzo o hemorragia. • El recuento de leucocitos está influido probablemente por hormonas (p. ej., adrenalina).
  • 43. • Insuficiencia de la médula ósea (p. ej., después de quimioterapia o radioterapia antineoplásicas, enfermedades medulares infiltrativas, infecciones generalizadas, • Enfermedades autoinmunitarias • Deficiencia dietética (p. ej., vitamina B12 , deficiencia de hierro). RECUENTO LEUCOCITARIO DISMINUIDO: LEUCOPENIA - Hiperesplenismo. El bazo extrae leucocitos de forma más intensa de la circulación sanguínea.
  • 44. PLAQUETAS Son fragmentos celulares anucleados, derivados del Megacariocito de la Médula Ósea Roja. El número normal de plaquetas en una persona adulta oscila entre 150.000 y 300.000 por mm3 de sangre. La supervivencia de las plaquetas se mide en días (alrededor de 7 a 9). Su apariencia en sangre es oval o discoidal y mide 0,5-2 µ de diámetro.
  • 45. PLAQUETAS TÉCNICA: FUNDAMENTO • Son células pequeñas, redondas y sin núcleo cuya función principal es mantener la integridad vascular. • Cuando hay una lesión del vaso sanguíneo, se requiere hemostasia para formar un coágulo que tapone el espacio hasta que cicatrice. • La fase primaria del mecanismo hemostático incluye agregación plaquetaria. De allí, las plaquetas ayudan a iniciar la cascada de los factores de la coagulación.
  • 46. PLAQUETAS TÉCNICA: FUNDAMENTO • La mayor parte de las plaquetas existe en el torrente sanguíneo; el (25%) se localiza en el hígado y el bazo. • Los recuentos menores de 100 000/mm3 son indicativos de trombocitopenia. Los recuentos mayores de 400 000/mm3 de trombocitosis. Las enfermedades relacionadas de manera habitual con la trombocitosis espontánea son la anemia por deficiencia de hierro y las neoplasias (leucemia, linfoma, tumores sólidos como en el colon). Es posible la hemorragia espontánea con la trombocitopenia. Si la trombocitopenia es grave, las plaquetas se cuentan de forma manual.
  • 47. PLAQUETAS TÉCNICA: FUNDAMENTO El sangrado espontáneo es un gran riesgo cuando los recuentos de plaquetas son menores de 20 000/mm3 . Con recuentos superiores a 40 000/mm3 rara vez hay sangrado espontáneo, pero puede observarse un sangrado prolongado por traumatismo u operaciones con recuentos similares. Las petequias y equimosis también pueden presentarse al mismo grado que la trombocitopenia.
  • 48. PLAQUETAS: INDICACIONES Se realiza en pacientes que desarrollan petequias (pequeñas hemorragias en la piel), sangrado, menstruaciones cada vez más abundantes o trombocitopenia. Se usa como indicador del curso de la enfermedad o tratamiento para trombocitopenia o insuficiencia de la médula ósea. El recuento plaquetario es la cuantificación real del número de plaquetas (trombocitos) por milímetro cúbico de sangre.
  • 49. Hacer una dilución de la sangre utilizando una pipeta de Thoma para glóbulos blancos y un líquido diluyente oxalato de amonio al 1% que hace visibles a las plaquetas a la vez que destruye a los eritrocitos. Dejar sedimentar durante 15-20 minutos Se examinará al microscopio un volumen conocido de la muestra en la Cámara de Neubauer, contando el número de plaquetas en la zona donde se cuenta GR por cálculo se obtiene el número de elementos por mm3 . PLAQUETAS: TÉCNICA DE RECUENTO
  • 52. • Vivir en grandes altitudes puede incrementar las concentraciones plaquetarias. • Debido a que las plaquetas pueden acumularse o agruparse, el recuento automatizado está sujeto a cuando menos un margen de error de 10 a 15%. • El ejercicio extenuante puede causar concentraciones aumentadas. PLAQUETAS: FACTORES DE INTERFERENCIA
  • 53. PLAQUETAS: FACTORES DE INTERFERENCIA • Fármacos que pueden inducir valores aumentados: estrógenos y anticonceptivos orales. • Fármacos que pueden causar concentraciones disminuidas: se encuentran los antineoplásicos, cloranfenicol, colchicina, cimetidina, hidralazina, indometacina, isoniazida (INH), quinidina, estreptomicina, sulfonamidas, diuréticos tiazídicos y tolbutamida. • Son posibles cifras disminuidas antes de la menstruación.
  • 54. • Trastornos malignos (leucemia, linfoma, tumores sólidos como en el colon). • Policitemia vera. Es una hiperplasia de todas las estirpes celulares de la médula, incluidas las plaquetas. • Con esplenectomía: se incrementa el recuento plaquetario. • Artritis reumatoide. • Anemia por deficiencia de hierro o anemia posterior a hemorragia. Las plaquetas, por otro lado, pueden responder en presencia de una deficiencia de hierro. PLAQUETAS: CONCENTRACIONES AUMENTADAS- TROMBOCITOSIS
  • 55. • Hiperesplenismo. El bazo extrae las plaquetas envejecidas de la circulación sanguínea. Un bazo hipertrófico extrae más plaquetas, viejas y nuevas. • Hemorragia. Se pierden plaquetas en la hemorragia. • Trombocitopenia inmunitaria (p. ej., trombocitopenia idiopática, neonatal, postransfusional o inducida por fármacos). No se producen plaquetas y desciende el recuento • Leucemia y otros trastornos mielofibróticos. • Enfermedad de Graves. PLAQUETAS: CONCENTRACIONES DISMINUIDAS- TROMBOCITOPENIA
  • 56. • Es el principal elemento y pigmento de la sangre, que se encuentra en el interior de los eritrocitos. • En el adulto normal su concentración es de 15 gr/% para el varón y de 12 gr/% para la mujer. • Un gramo de Hgb es capaz de transportar 1,34 ml de O2, por lo que en condiciones normales se transportará 21 ml de O2 cada 100 ml de sangre.
  • 57. Dos cadenas alfa y dos beta se unen al hem para constituir el 97% de la hemoglobina adulta normal: la hemoglobina A. Existen otros tipos dos tipos de hemoglobina en el ser humano normal: la hemoglobina F (fetal), que se halla preponderantemente durante la vida intrauterina; al nacer representa el 80% del total, y este porcentaje se reduce rápidamente en los primeros meses de vida, pudiendo persistir en pequeña proporción en el adulto. La hemoglobina es una proteína conjugada cuyo núcleo prostético es el hem, formado por cuatro núcleos pirrólicos unidos al hierro. Estas moléculas se unen a la de globina, que a su vez está formada por cadenas de aminoácidos, siendo éstas de dos tipos: alfa, de 141 aminoácidos, y beta de 146. El tercer tipo es la hemoglobina A2, en donde las dos cadenas beta están reemplazadas por dos delta. Representa del 1,5 al 3,5% de la hemoglobina total
  • 58. • Se determina por fotocolorimetría. • Las variaciones fisiológicas son concordantes con el hematocrito. • La anemia es el déficit de glóbulos rojos, y se determina cuando los valores de hemoglobina se encuentran disminuidos en sangre • Su mayor utilidad es para definir un estado de anemia.
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  • 61. PRINCIPIO DEL MÉTODO Este método se basa en la disolución de la sangre en una solución de ferrocianuro potásico y cianuro potásico, el ferrocianuro potásico oxida las hemoglobinas a metahemoglobinas y el cianuro potásico proporciona los iones cianuro para formar ciano-metahemoglobina. FERROCIANURO POTÁSICO HEMOGLOBINAS METAHEMOGLOBINAS oxida iones cianuro CIANURO POTÁSICO CIANO- METAHEMOGLOBINAS
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  • 67. • Enfermedad cardiaca congénita • Enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC) grave. • Policitemia vera. Es resultado de una inapropiada producción excesiva de GR en la médula, con incremento de la Hb. • Deshidratación profunda (p. ej., diarrea grave, quemaduras). • Los fumadores extremos tienen valores de Hb más altos que los no fumadores.
  • 68. • Enfermedad renal. • Enfermedades reumatoides/vasculares del colágeno (p. ej., artritis reumatoide [AR], lupus, sarcoidosis). • Neoplasia. Leucemia. Enfermedad de Hodgkin • En el embarazo se presentan disminuciones ligeras en los valores de Hb. • Anemia • Cirrosis. • Hemorragia. Con un sangrado activo, el número de GR disminuye y por lo tanto también la Hb. • Deficiencia alimentaria. Deficiencias vitamínicas o minerales (p. ej., hierro). • Insuficiencia medular. Con una síntesis reducida de GR, la Hb disminuye.
  • 69. • Es una medida del porcentaje del volumen total de sangre que se compone de los glóbulos rojos (GR). • Se utiliza como una cuantificación rápida del recuento eritrocítico. • Expresa la proporción de glóbulos rojos en 100 ml de sangre. • Su resultado se expresa en porcentaje. • Se efectúa por dos métodos: el macrohematocrito y el microhematocrito.
  • 70. - Capilares rojos y azules (75 mm x 1,5 mm). - Plastilina. • Tomar la muestra en capilares rojos heparinizados directamente del pulpejo del dedo, o utilizar capilares azules sin heparina para sangre venosa con anticoagulante de EDTA. • Debe llenarse aproximadamente 70% - 80% del capilar. • Ocluir (tapar) un extremo del capilar con plastilina. • Colocar el capilar sobre la plataforma del cabezal de una centrífuga de microhematocrito, con el extremo ocluido adherido al reborde externo de la plataforma. • Centrifugar por 5 minutos entre 10 000 - 12 000 rpm Materiales requeridos: Procedimiento:
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  • 73. • Los valores en niños son específicos de la edad, con cifras normales que varían a lo largo de los primeros 18 años. • Los valores disminuyen un poco en ancianos.
  • 74. Tubos que muestran valores del hematocrito de sangre normal, sangre con evidencia de anemia y sangre con evidencia de policitemia. Obsérvese la capa leucocitaria localizada entre los glóbulos rojos (GR) centrifugados y el plasma: A) Porcentaje normal de GR B) Anemia (porcentaje bajo de GR) C) Policitemia (porcentaje alto de GR)
  • 75. • Las anomalías en el tamaño de los GR puede alterar los valores del Hct. Eritrocitos más grandes se relacionan con cifras de Hct más altas, ya que éstos representan un porcentaje mayor del volumen total de sangre. • Vivir en grandes altitudes ocasiona un aumento de los valores de Hct • En caso de deshidratación, el Hct se eleva de manera falsa y, en presencia de hidratación excesiva, disminuye. • El Hct (en puntos porcentuales) es tres veces la concentración de Hb (en gramos por decilitro) cuando los GR son de tamaño normal y contienen cantidades normales de Hb.
  • 76. • Anemia hemolíticas inducidas por fármacos. • Cirrosis. • Hemorragia. Con un sangrado activo, el número de GR desciende y por tanto también disminuye el Hct. • Deficiencia alimentaria. Con ciertas deficiencias vitamínicas o minerales (p. ej., hierro). • Insuficiencia medular. • Enfermedad renal • Embarazo normal • Enfermedades reumatoides/vasculares del colágeno (p. ej., artritis reumatoide, lupus). • Linfoma. Mieloma múltiple. Leucemia • Fármacos que pueden inducir valores disminuidos incluyen cloranfenicol y penicilina.
  • 77. Los índices de Wintrobe son tres: El volumen corpuscular (o globular) medio (VCM) La hemoglobina corpuscular media (HCM) Concentración de hemoglobina corpuscular media (CHCM). 1 2 3 Los índices de eritrocitos proporcionan información acerca del tamaño (VCM), el contenido de hemoglobina (HCM) y la concentración de hemoglobina (CMHC) de los eritrocitos. Esta prueba es útil para la clasificación de las anemias.
  • 78. El VCM es una medida del volumen o tamaño promedio de un solo GR y por lo tanto se utiliza para la clasificación de las anemias. El VCM se calcula al dividir el hematócrito entre el recuento total de GR: Volumen Corpuscular Medio (VCM):
  • 81. • La HCM es la medida de la cantidad promedio de hemoglobina que se encuentra en un GR. • Nos da una idea del color: Hipocromía (bajo color) normocromia (normal) • Se expresa en picogramos. • También nos permite clasificar a las anemias. • Aquellas con valores normales son anemias normocrómicas, y aquellas con valores disminuidas son anemias hipocrómicas. Hemoglobina Corpuscular Media (HCM): • Se calcula al dividir la concentración total de hemoglobina entre el número de GR
  • 82. Cuando los valores de CMHC descienden, la célula tiene una deficiencia de hemoglobina y se dice que es hipocrómica (esto se observa con frecuencia en la anemia por deficiencia de hierro y la talasemia). Si las cifras son normales, se dice que la anemia es normocrómica (p. ej., anemia hemolítica). Concentración Media de Hemoglobina Corpuscular (CMHC): Nos permite determinar la concentración promedio de hemoglobina por eritrocito en porcentaje.
  • 83. • El valor de la VSG se usa para demostrar la presencia de inflamación o destrucción tisular, o ambas afecciones. • Es una prueba “no específica” que indica destrucción de tejido, pero no identifica la causa (o sea el trastorno patológico responsable)
  • 84. Si se obtiene una muestra de sangre con anticoagulante y se deja en reposo en un tubo de ensayo, en posición vertical, los eritrocitos se depositarán gradualmente en el fondo. No todas las muestras de sangre sedimentan con la misma velocidad, lo que depende de varios factores como el tamaño de los eritrocitos, la densidad y viscosidad del plasma, estas últimas influidas por las concentraciones de proteínas.
  • 85. Con frecuencia, los eritrocitos se repelen entre sí debido a la presencia de ácido siálico en su superficie, que tiene carga eléctrica negativa. El aumento de proteínas por un Mieloma, macroglobulinemia, o un proceso inflamatorio crónico, disminuye la fuerza repelente entre los eritrocitos, permitiendo que se aglutinen (fenómeno de Rouleaux). Cuando esto sucede, los eritrocitos aglutinados presentan un mayor volumen, por lo que sedimentan a mayor velocidad.
  • 86. 1. Mezclar la sangre por inversión por lo menos durante 5 minutos. 2. Llenar un tubo de Wintrobe hasta la marca 0-10 usando una pipeta Pasteur. Es importante vigilar que no se formen burbujas en la columna de sangre o en el fondo del tubo al llenarlo. Esto se logra haciendo resbalar la sangre por las paredes del tubo, iniciando en el fondo y sacando la punta de la pipeta a medida que se va llenando. 3. Colocar el tubo en la gradilla de Wintrobe, verificando que ésta se encuentre bien nivelada. 4. Dejar en reposo en una mesa sin vibraciones, durante 60 minutos.
  • 87. Leer la altura de la interfase plasma/eritrocitos y anotar la cifra. Medir los milímetros descendidos de glóbulos rojos mediante la columna de plasma por encima del paquete globular.
  • 88.
  • 89.
  • 90. El hemograma constituye uno de los exámenes de laboratorio más usados en el campo de la hematología en lo referente a tamaño, forma y color de los componentes sanguíneos y comprende una parte cualitativa y una cuantitativa. Objetivo: Determinar los porcentajes de las distintas clases de leucocitos normales y anormales en la sangre.
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  • 92.
  • 93. Calidad del frotis debe abarcar 80% de la lámina con cabeza, cuerpo y cola. Extensiones gruesas dificultan la visualización e identificación celular, mientras que las delgadas originan una distribución anormal de los elementos
  • 94.
  • 95. Fundamento El colorante de Wright va a permitir suministrar un medio para estudiar la sangre y determinar las variaciones y anormalidades de estructura, forma y tamaño de los eritrocitos, su contenido de hemoglobina y sus propiedades de coloración. La información obtenida de un frotis de sangre periférica depende en gran parte de la calidad del extendido y la coloración.
  • 96. - Colorante de Wright. Frasco gotero. - Solución amortiguada tamponada Materiales Procedimiento
  • 97. Posteriormente, se hace el recuento diferencial de glóbulos blancos en 100 células
  • 98.
  • 99.
  • 100.
  • 101. GRANULOCITOS Son los elementos más abundantes de la serie blanca en el torrente circulatorio. Su nombre se debe a la presencia de abundantes granulaciones citoplasmáticas con características de tinción especiales que los distinguen entre sí. Estos gránulos corresponden a lisosomas que poseen sustancias como heparina, histamina o enzimas como: fosfatasa ácida, lisozima, peroxidasa, fosfatasa alcalina, nucleotidasa, lipasa.
  • 102. Tienen un diámetro de 12µ, con un núcleo multilobulado, con 3-5 lóbulos unidos por finos puentes de cromatina. Su vida media es de 6-7 días y son los glóbulos blancos más abundantes en la sangre. Defienden al organismo contra infecciones bacterianas y de hongos. Contiene numerosos gránulos neutrófilos que se tiñen de color gris marrón con las coloraciones panópticas habituales, presenta también gránulos primarios o azurófilos, difícilmente visibles al quedar sobrepuestos por los gránulos neutrófilos.
  • 103. Neutrófilo en banda: Su tamaño es de 12 – 14 micras. Se caracteriza por su núcleo en forma de C, S, P, M, U, T, R, W, O, etc. y cromatina condensada en grumos, citoplasma abundante, acidófilo y cubierto de finas granulaciones específicas
  • 104. Miden alrededor de 16 µ, se caracterizan por tener en su citoplasma gránulos acidófilos que poseen una forma redondeada con un tamaño de 0,5 y 1,5 micras, ocupan todo el citoplasma de la célula y se tiñe de color gris rojizo o marrón anaranjado, siendo refringentes. El núcleo es generalmente bilobulado, pudiendo en algunas ocasiones tener tres lóbulos, presentan cromatina picnótica Lidian con las infecciones parasitarias y son las células inflamatorias predominantes durante una reacción alérgica.
  • 105. Tienen un núcleo poco visible debido a la gran cantidad de gránulos en el citoplasma, el núcleo es bi o tri lobulado. Son principalmente responsables de las respuestas alérgicas ya que liberan Histamina, provocando vasodilatación.
  • 106. Constituyen un complejo celular altamente distribuido en el organismo. Sus células se originan por la vía Mieloide, derivando en un Precursor Unipotencial Monocítico. Los Monocitos miden entre 10-18 µ y constituyen el 1-8 % de los glóbulos blancos circulantes de un adulto normal. Su núcleo a menudo adquiere forma de herradura y circulan entre 2 a 3 días; luego se alojan en distintos tejidos donde maduran como Macrófagos.
  • 107. El linfocito pequeño posee un diámetro entre 6 y 10 micras. El núcleo es relativamente voluminoso y ocupa la mayor parte de la célula, la cromatina es condensada y no se aprecian nucléolos. El citoplasma es escaso y se dispone en forma de una estrecha franja perinuclear, no presenta granulaciones. Los linfocitos medianos tienen un diámetro entre 11 a 15 micras. Los linfocitos grandes poseen un diámetro entre 16 a 25 micras. El citoplasma es más abundante.
  • 108.
  • 109.
  • 110. Perfil de hemostasia. • Factores de coagulación. (1er grupo) • Tiempo de protrombina (TP), (2do grupo) • Tiempo parcial de tromboplastina, (3er grupo) • TC, TS, trastornos de la hemostasia. (4to grupo)