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CALCULO DE CONCENTRACION DE PROTEINA:
CURVA DECALIBRACION
A= 0.2305C + 0.0633
0.00
0.05
0.10
0.15
0.20
0.25
0.30
0.17 0.33 0.50 0.67 0.83
CONCENTRACION (mg/ml)
ABSORBANCIA
0.195=0.2305x(X)+0.0633
X=0.571 mg/ml
BLANCO MUESTRA REPET. 1
LECTURA DE ABSOR. (540nm) 0.085 0.189 0.201
ABSORBANCIA NETO … 0.104 0.116
COEF. VARIABILIDAD (%) … 5.45
LECTURA PROMEDIO … 0.195
CONCENTRACION (mg/ml) … 0.571
El peso del hígado fue 6.0 gr. y se utilizo 24ml. de buffer acetato el
sobrenadante que resulto fue de 11.5ml.
CALCULOS DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA:
A = a * b * c
Donde:
• a = 18400 Lmol-1
cm-1
• b = 1 cm
• c = mg/L
Concentración de la muestra blanco:
0.134 = (18400 Lmol-1
cm-1
) x (1 cm) x c
c = 7.283 x 10-6
mol/L
7.283 x 10-6
mol  1000 mL
X  4.3 mL
X = 3.132 x 10-8
mol
3.132 x 10-8
mol  0.1 mL de extracto crudo
X  11.5 mL de extracto crudo
X = 3.601 x 10-6
mol
3.601 x 10-6
mol  11.5 mL
X mol  1000 mL
X = 3.132 x 10-4
mol/L
Concentración de la muestra 1:
0.199 = (18400 Lmol-1
cm-1
) x (1 cm) x c
c = 1.082x 10-5
mol/L
1.082x 10-5
mol  1000 mL
X  4.3 ml
X =4.651 x 10-8
mol
4.651 x 10-8
mol  0.1 mL de extracto crudo
X  11.5 mL de extracto crudo
X = 5.348x 10-6
mol
5.348x 10-6
mol  11.5 mL
X mol  1000 mL
X =4.650 x 10-4
mol/L
Concentración de la muestra 2:
0.209 = (18400 Lmol-1
cm-1
) x (1 cm) x c
c = 1.136x 10-5
mol/L
1.136x 10-5
mol  1000 mL
X  4.3 ml
X =4.884 x 10-8
mol
4.884 x 10-8
mol  0.1 mL de extracto crudo
X  11.5 mL de extracto crudo
X = 5.617x 10-6
mol
5.617x 10-6
mol  11.5 mL
X mol  1000 mL
X =4.884 x 10-4
mol/L
Velocidad de reacción de la muestra 1:
4.650 x 10-4
mol/L  2 min.
X  1 min.
X = 2.325 x 10-4
mol/L
X = 2.325 x 10-7
mol /ml.min.
Velocidad de reacción de la muestra 2:
4.884 x 10-4
mol/L  2 min.
X  1 min.
X = 2.442 x 10-4
mol/L
X = 2.442 x 10-7
mol/ml.min.
Blanco Muestra 1 Muestra 2
CONCENTRACIONES
3.132 x 10-4
mol
4.650 x 10-4
mol
4.884 x 10-4
mol
CONCENTRACION SIN EL
BLANCO …
1.518x 10-4
mol
1.752x10-4
mol
COEFICIENTE DE VARIABILIDAD
(%) … 5.131
VELOCIDAD DE Rx (mol/ml.min) … 2.325 x 10-7 2.442 x 10-7
VELOCIDAD PROMEDIO
(mol/ml.min) … 2.3835x10-7
CALCULO DE LA ACTIVIDAD ESPECIFICA DE LA FOSFATASA:
actividad específica = Actividad Enzimatica / Concentracion proteica
= 2.3835 x 10-7 / 0.571
= 0.4174 umol/mg.min
Conclusiones:
• Para ambos experimentos el coeficiente de variacion resulto ligeramente
mayor a 5%, por lo cual nuestros resultados no deben ser tomados con una
confiabilidad al 100%, son medianamente confiables.
• Como resultado obtuvimos 0.571mg/ml de proteina, lo cual nos indica que
el higado de pollo contiene una alta concentrracion de proteina, entonces
es importate su consumo como fuente de proteinas.
• De acuerdo a la actividad enzimatica de la fosfatasa observamos que el
higado de pollo no tiene a detiorarse con tanta rapidez como seria en el
pescado.
• Por medio de la actividad especifica vemos que la concentracion de las
proteinas en el higado de pollo tampoco tienden a deteriorase con tanta
rapidez,pero si requieren de un almacenamiento a bajas te,mperaturas
para que la pardida en proteinas no sea tanta.
Discusines:
• Un error al moemento de calcular los tiempos puede haber sido uno de los
motivos por el cual el coeficiente de variabilidad resulto ligeramente mayor
a 5%.
• El error en la medida de las cantidades del reactivo de biuret son otros
factores que también pueden haber ocasionado una variacion ligeramente
myor de lo aceptado (5%).
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  • 1. CALCULO DE CONCENTRACION DE PROTEINA: CURVA DECALIBRACION A= 0.2305C + 0.0633 0.00 0.05 0.10 0.15 0.20 0.25 0.30 0.17 0.33 0.50 0.67 0.83 CONCENTRACION (mg/ml) ABSORBANCIA 0.195=0.2305x(X)+0.0633 X=0.571 mg/ml BLANCO MUESTRA REPET. 1 LECTURA DE ABSOR. (540nm) 0.085 0.189 0.201 ABSORBANCIA NETO … 0.104 0.116 COEF. VARIABILIDAD (%) … 5.45 LECTURA PROMEDIO … 0.195 CONCENTRACION (mg/ml) … 0.571
  • 2. El peso del hígado fue 6.0 gr. y se utilizo 24ml. de buffer acetato el sobrenadante que resulto fue de 11.5ml. CALCULOS DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA: A = a * b * c Donde: • a = 18400 Lmol-1 cm-1 • b = 1 cm • c = mg/L Concentración de la muestra blanco: 0.134 = (18400 Lmol-1 cm-1 ) x (1 cm) x c c = 7.283 x 10-6 mol/L 7.283 x 10-6 mol  1000 mL X  4.3 mL X = 3.132 x 10-8 mol 3.132 x 10-8 mol  0.1 mL de extracto crudo X  11.5 mL de extracto crudo X = 3.601 x 10-6 mol 3.601 x 10-6 mol  11.5 mL X mol  1000 mL X = 3.132 x 10-4 mol/L Concentración de la muestra 1: 0.199 = (18400 Lmol-1 cm-1 ) x (1 cm) x c c = 1.082x 10-5 mol/L 1.082x 10-5 mol  1000 mL X  4.3 ml X =4.651 x 10-8 mol
  • 3. 4.651 x 10-8 mol  0.1 mL de extracto crudo X  11.5 mL de extracto crudo X = 5.348x 10-6 mol 5.348x 10-6 mol  11.5 mL X mol  1000 mL X =4.650 x 10-4 mol/L Concentración de la muestra 2: 0.209 = (18400 Lmol-1 cm-1 ) x (1 cm) x c c = 1.136x 10-5 mol/L 1.136x 10-5 mol  1000 mL X  4.3 ml X =4.884 x 10-8 mol 4.884 x 10-8 mol  0.1 mL de extracto crudo X  11.5 mL de extracto crudo X = 5.617x 10-6 mol 5.617x 10-6 mol  11.5 mL X mol  1000 mL X =4.884 x 10-4 mol/L Velocidad de reacción de la muestra 1: 4.650 x 10-4 mol/L  2 min. X  1 min. X = 2.325 x 10-4 mol/L X = 2.325 x 10-7 mol /ml.min.
  • 4. Velocidad de reacción de la muestra 2: 4.884 x 10-4 mol/L  2 min. X  1 min. X = 2.442 x 10-4 mol/L X = 2.442 x 10-7 mol/ml.min. Blanco Muestra 1 Muestra 2 CONCENTRACIONES 3.132 x 10-4 mol 4.650 x 10-4 mol 4.884 x 10-4 mol CONCENTRACION SIN EL BLANCO … 1.518x 10-4 mol 1.752x10-4 mol COEFICIENTE DE VARIABILIDAD (%) … 5.131 VELOCIDAD DE Rx (mol/ml.min) … 2.325 x 10-7 2.442 x 10-7 VELOCIDAD PROMEDIO (mol/ml.min) … 2.3835x10-7 CALCULO DE LA ACTIVIDAD ESPECIFICA DE LA FOSFATASA: actividad específica = Actividad Enzimatica / Concentracion proteica = 2.3835 x 10-7 / 0.571 = 0.4174 umol/mg.min
  • 5. Conclusiones: • Para ambos experimentos el coeficiente de variacion resulto ligeramente mayor a 5%, por lo cual nuestros resultados no deben ser tomados con una confiabilidad al 100%, son medianamente confiables. • Como resultado obtuvimos 0.571mg/ml de proteina, lo cual nos indica que el higado de pollo contiene una alta concentrracion de proteina, entonces es importate su consumo como fuente de proteinas. • De acuerdo a la actividad enzimatica de la fosfatasa observamos que el higado de pollo no tiene a detiorarse con tanta rapidez como seria en el pescado. • Por medio de la actividad especifica vemos que la concentracion de las proteinas en el higado de pollo tampoco tienden a deteriorase con tanta rapidez,pero si requieren de un almacenamiento a bajas te,mperaturas para que la pardida en proteinas no sea tanta. Discusines: • Un error al moemento de calcular los tiempos puede haber sido uno de los motivos por el cual el coeficiente de variabilidad resulto ligeramente mayor a 5%. • El error en la medida de las cantidades del reactivo de biuret son otros factores que también pueden haber ocasionado una variacion ligeramente myor de lo aceptado (5%).