1. Bacteriología de la Tuberculosis
Dr. Carlos Ma. Rivas Chetto
CENTRO DE REFERENCIA NACIONAL PARA MYCOBACTERIAS
18 de julio 2175 6to. Piso. Tel/fax: 403-1975 cmr1@adinet.com.uy

2. Tuberculosis en Uruguay 2008
• 650 – 700 casos nuevos por año.
• Se detuvo el descenso del número de casos.
• Incidencia registrada: 20 / 100.000
estimada: 31 / 100.000
PRINCIPALES FACTORES DE RIESGO:
POBREZA – SIDA - RECLUSIÓN

3. Casos de TB Todas las Formas y Pulmonares
Bacilíferos
1994 - 2008
608
715

4. TB en Uruguay - 2008
• Aumento de los casos de TB en los últimos 2 años.
• A partir de 2006 - 10% de incremento anual.
• La co-infección TB-VIH tiene una participación importante en
la incidencia, (14%), con tendencia estabilizada
• El número de TB en reclusos alcanzó un máximo histórico,
con un total de 87 casos (máximo 54 en 2004)
• No ha habido cambios en la tasa de resistencia a las drogas
antituberculosas. No se identificaron cepas con resistencia a
INH + RIF

5. - BACTERIOLOGIA CONVENCIONAL
- SISTEMAS de CULTIVOS RAPIDOS
- DOSIFICACION de ADA
- DOSIFICACIÓN DE INTERF. GAMMA
- TECNICAS EN ACIDOS NUCLEICOS
ESTUDIOS DE LABORATORIO PARA CONFIRMAR TUBERCULOSIS

6. BACTERIOLOGIA CONVENCIONAL
EXAMEN MICROSCÓPICO DIRECTOEXAMEN MICROSCÓPICO DIRECTO
ENORME VALOR: SIMPLE - RAPIDO – BAJO COSTOENORME VALOR: SIMPLE - RAPIDO – BAJO COSTO
CONFIRMA EL 70 % - 75 % DE LA TB PULMONARCONFIRMA EL 70 % - 75 % DE LA TB PULMONAR
(SERIE DE 3 MUESTRAS POR ENFERMO(SERIE DE 3 MUESTRAS POR ENFERMO))
POSITIVO: TUBERCULOSIS.
RÁPIDO INICIO DE ACCIONES PARA IMPEDIR TRANSMISIÓN
(tratamiento, aislamiento).
DETECTAR CASOS EN CONVIVIENTES (tratamiento, profilaxis).
SE CORTA LA CADENA DE TRASMISIÓN DE LA ENFERMEDAD

7. Confirmación de la TB pulmonar Uruguay 1974-2001

8. Casos en donde la microscopía no rinde
Directo positivo:
se visualiza 1 bacilo en el extendido cada 10 000 gérmenes
por mililitro de muestra.
Muestras de bajo rendimiento:
• Expectoración: casos paucibacilares, lesiones
mínimas, cerradas.
• L.C.R.
• Líquidos Pleurales.
• Sangre
Muestras con presencia de micobacterias saprófitas:
• Lavados gástricos
• Materias fecales

9. 100 Veces más sensible y específico que la microscopía.
Confirma un moderado porcentaje de casos (10 – 15 %).
De elección para diagnóstico en situaciones especiales.
Fundamental para identificación bacteriana – sensibilidad a
fármacos y vigilancia epidemiológica.
LA DEMORA ES SU PRINCIPAL DESVENTAJA.
MAS COMPLEJO Y COSTOSO QUE LA MICROSCOPÍA
BACTERIOLOGIA CONVENCIONAL
EL CULTIVO convencional

10. SISTEMAS DE CULTIVOS DE
DETECCIÓN RÁRIDA
• Se basan en la
DETECCIÓN PRECOZ DEL DESARROLLO BACTERIANO.
• Sistema radiactivo “ BACTEC 460 TB”.
El más rápido – Confiable - Caro – Radioisótopos - Manual.
• Sistemas no radioactivos:
• MB-BacT

11. SISTEMAS DE CULTIVOS DE DETECCIÓN RAPIDA
• SISTEMA FOTOCOLORIMETRICO.
• TOTALMENTE AUTOMATIZADO.
• DETECTA PRODUCCION DE CO2
• PERMITE REALIZAR HEMOCULTIVOS
• SE UTILIZA EN MUESTRAS ESPECIALES Y
PACIENTES CON SIDA
Sistema : MB – BacT

12. DEMORA en DETECTAR POSITIVOS 5 a 38 días
MUESTRAS D(+) PROMEDIO: 14 Días
MUESTRAS D (-) PROMEDIO: 18 Días
VENTAJA sobre C. convencional: 14 a 38 DIAS ANTES
CULTIVO NEGATIVO SE DESCARTA A LOS 42 DÍAS DE INCUBACIÓN
Sistema : MB – BacT
SISTEMAS DE CULTIVOS DE DETECCIÓN RAPIDA

13. ADENOSINA DESAMINASA (ADA)
Enzima que interviene en el catabolismo de las purinas
Cataliza la desaminación de la adenosina a inosina
Ampliamente distribuida en el organismo humano
Principal actividad fisiológica es en tejido linfoide
10 –12 veces superior en linfocitos T
Esencial para la diferenciación de linfocitos y maduración
de monocitos

14. Se la considera como un marcador de la inmunidad celular
Aumenta en: - derrames pleurales, pericárdicos y
peritoneales de etiología tuberculosa
- derrames secundarios a artritis reumatoide
y estados linfoproliferativos.
La principal indicación práctica de la determinación de ADA es el :
DIAGNÓSTICO DEL DERRAME de serosas de origen TUBERCULOSO
ADA

15. ADA
 Sensibilidad : 80 - 100 %
 Especificidad : 85 - 95%
 Se destaca su elevado VPPN
 Evita técnicas invasivas en el abordaje
diagnóstico inicial
 Disminuye costos de atención al paciente

16. ADA
Existen otras patologías que pueden dar
resultados positivos.
Derrames serosos: - metaneumónicos
- artritis reumatoide
- LES
- linfomas
Derrames purulentos. Empiemas
CONCLUSION : técnica rápida , simple y económica que sirve como
una herramienta adicional en el DIAGNÓSTICO DE
TUBERCULOSIS
DE LAS SEROSAS.

17. DOSIFICACION DE
INTERFERON GAMMA
• Disponible: “Quantiferon TB Gold”
• Fundamento: Respuesta inmune celular frente a
antígenos de micobacterias provoca liberación de IFNG,
el cual es factible de dosificar.
• Se lograron aislar Ags. de M. tuberculosis (ESAT) los
cuales son 100% específcos de especie.
• En consecuencia una respuesta positiva de liberación de
IFNG por encima de ciertos niveles significa ITL o ETA.
• (ITL : Infección Tuberculosa Latente)
• (ETA : Enfermedad Tuberculosa Activa).

18. • Procedimiento:
• Se extraen 5 ml de sangre del paciente.
• Se incuban las células sanguíneas en
presencia de los Ags específicos durante
18 -24 horas.
• Se realiza la determinación al día
siguiente.
DOSIFICACION DE
INTERFERON GAMMA

19. Para la TB pleural confirmada por
cultivos de LP o biopsias pleurales
Sensib. Especif.
% %
• ADA 88 85.7
• IFNG 85.7 97. 5
• PCR 73 90
(CHEST 2000; 118:1355–
1364)

20. TÉCNICAS DE BIOLOGIA MOLECULAR
ADN / ARN
CON AMPLIFICACIÓN / SIN AMPLIFICACIÓN
DIAGNÓSTICO clínico
IDENTIFICACIÓN bacteriana
ESTUDIOS DE RESISTENCIAS
FINES EPIDEMIOLÓGICOS

21. INDICACIONES DE LOS MÉTODOS DE BIOLOGIA MOLECULAR EN EL DIAGNÓSTICO
DE LA TUBERCULOSIS
CONFIRMA M. TUBERCULOSIS EN MUESTRAS BAAR POSITIVAS
DIAGNÓSTICO RÁPIDO EN MUESTRAS RESPIRATORIAS BAAR NEGATIVAS
DIAGNÓSTICO RÁPIDO DE CASOS DIFÍCILES
( MENINGITIS, - TB DISEMINADA EN PACIENTES CON SIDA)

22. MÉTODOS DE BIOLOGIA MOLECULAR EN LA IDENTIFICACIÓN DE LAS
MICOBACTERIAS
PCR : IDENTIFICACIÓN DE ESPECIES DE MYCOBACTERIUM
por amplificación
de FRAGMENTOS DE ADN CONSTANTES
Y ESPECÍFICOS DE ESPECIE
EJEMPLOS: Frag. IS6110 específico del complejo M. tuberculosis.
RD1.RD2 Y ETDR Específicos de M. BCG

23. 600
500
400
300
200
100
M 1 2 3 4 M
IS 6110

24. RD1
Útil para diferenciar MB-BCG de MTBC
M 1 2 3 4 5 6 M

25. EN RESUMEN:
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• La microscopía continúa siendo el arma principal
para el diagnóstico de la tuberculosis EN URUGUAY
• Los cultivos convencionales son imprescindibles
para el diagnóstico, la identificación y sensibilidad
• Los cultivos rápidos, dosificación de ADA y IFNG
se imponen para los casos especiales.
• La biología molecular es imprescindible para la
identificación bacteriana y la sensibilidad; para el
diag. de la enfermedad aun tiene limitaciones.

26. Bacteriología de la Tuberculosis
Dr. Carlos Ma. Rivas Chetto
CENTRO DE REFERENCIA NACIONAL PARA MYCOBACTERIAS
18 de julio 2175 6to. Piso. Tel/fax: 403-1975 cmr1@adinet.com.uy