El documento describe los principales pasos y técnicas utilizadas en histología, incluyendo la fijación del tejido, su inclusión en parafina, tinción con hematoxilina y eosina, y examen microscópico. Describe los cuatro tipos básicos de tejidos - epitelial, conjuntivo, muscular y nervioso - y cómo se forman durante la histogénesis a partir de las tres capas germinales del embrión.

1. Generalidades de las técnicas
utilizadas en histología
Preparación del tejido
Tinción con hematoxilina y eosina con fijación en formalina
El primer paso en la preparación de un tejido u órgano es la
fijación para conservar la estructura
La fijación se utiliza para:
Abolir el metabolismo celular.
Impedir la degradación enzimática de las
células y tejidos par la autólisis (autodigestión)
Destruir microorganismos patógenos tales
como bacterias, hongos o virus
Endurecer el tejido como resultado de la
formación de enlaces cruzados o de la
desnaturalización de moléculas proteicas.
El fijador más común es
la formalina, solución
acuosa de formaldehido
al 37%
En el segundo paso, la muestra se dispone para su
inclusión en parafina con el fin de permitir su corte
En el tercer paso, la muestra se tiñe para permitir su
examen
Se tiñe con hematoxilina en agua
Después se tiñe con eosina en alcohol

2. Otros fijadores
La formalina no preserva todos los componentes de las células y
los tejidos
Otras técnicas de tinción
La hematoxilina y la eosina se utilizan principalmente para poner
en evidencia las características estructurales.
Histoquímica y citoquímica
Los procedimientos químicos específicos pueden proveer
información acerca de la función de las células y de los
componentes extracelulares de los tejidos
Composición química de las muestras histológicas
La composición quimica de un tejido listo para una tinción de
rutina difiere de la del tejido vivo.
Muchos de los componentes de los tejidos se pierden durante la
preparación de rutina de los cortes teñidos con H&E
Algunos ejemplos de las moléculas que se pierden:
Glucógeno, proteoglucanos, glucosaminoglucanos
Los componentes solubles, iones y moléculas pequeñas también
se pierden durante la preparación de muestras de parafina

3. HISTOQUÍMICA Y CITOQUÍMICA
◗◗ Los procedimientos histoquímicos y citoquímicos se basan
en la unión específica de un colorante con un componente
celular particular que exhibe actividad enzimática inherente.
◗◗ La eosina es un colorante ácido (rosa) y tiene una carga
neta negativa. Reacciona con grupos catiónicos cargados
positivamente en células y tejidos, en particular con los
grupos amino de las proteínas (estructuras eosinófilas).
◗◗ La hematoxilina actúa como un colorante básico (azul) y
tiene una carga neta positiva. Reacciona con grupos fosfato
ionizados cargados negativa- mente en los ácidos nucleicos
(estructuras basófilas).
◗◗ El ácido peryódico-reactivo de Schiff(PAS)tiñe hidratos de
carbono y moléculas ricas en hidratos de carbono de un color
púrpura característico. Se utiliza para demostrar el glucógeno
en las células, moco en las células y tejidos, la membrana basal
y fibras reticulares en el tejido conjuntivo.
◗◗ La inmunocitoquímica se basa en la especificidad de una
reacción entre un antígeno y un anticuerpo que está conjugado
ya sea con un colorante fluorescente (para microscopia
óptica) o con partículas de oro (para microscopía electrónica).
Tanto el método inmunocitoquímico directo como indirecto se
utilizan para localizar a un antígeno diana en las células y
tejidos.
◗◗

4. La hibridación es un método de localización de ARNm o ADN
mediante la hibridación de la secuencia de interés con una sonda
de nucleótidos de secuencia complementaria.
◗◗ La técnica de hibridación in situ con fluorescencia (FISH),
utiliza colorantes fluorescentes combinados con sondas de
nucleótidos, para visualizar múltiples sondas al mismo tiempo.
Esta técnica es muy utilizada en pruebas genéticas.
◗◗ La autorradiografía utiliza una emulsión fotográfica colocada
sobre un corte histológico para localizar material radiactivo
dentro de los tejidos.

5. MICROSCOPÍA
◗◗ La interpretación correcta de las imágenes microscópicas es
muy importante ya que los órganos son tridimensionales, en
tanto que los cortes histológicos son bidimensionales.
◗◗ El poder de resolución es la capacidad de una lente o sistema
óptico del microscopio para producir imágenes separadas de los
objetos que están muy cerca uno de otro. El poder de resolución
de un microscopio óptico de campo claro (de uso frecuente entre
estudiantes e investigadores) es de aproximadamente 0,2 μm.
◗◗ Además de la microscopía de campo claro,otros sistemas
ópticos incluyen los siguientes:microscopía de contraste de fase,
microscopía de campo oscuro, microscopía de fluorescencia,
microscopía de barrido confocal y microscopía de luz
ultravioleta.
◗◗ Los microscopios electrónicos de
transmisión(MET;potenciateóricaderesoluciónde0,05nm)utiliza
n la interacción de un haz de electrones con una muestra para
producir una imagen.
◗◗ Los pasos en la preparación de muestras para el MET son
similares a los de la microscopia óptica, excepto que requieren
diferentes fijadores (gluteraldehído y tetraóxido de osmio),
medios de inclusión (resinas plásticas y epoxi) y colorantes de
tinción (metales pesa

6. Tejidos básicos
Los tejidos son cúmulos o grupos de células organizadas para llevar a
cabo una o más funciones específicas.
En el microscopio óptico, las células y los componentes ex-
tracelulares de varios órganos del cuerpo, exhiben un patrón de
organización reconocible y con frecuencia característica. Esta
disposición organizada refleja el esfuerzo cooperativo de las células
que desempeñan una función particular. Por consiguiente, un conjunto
organizado de células que funcionan en forma colectiva recibe el
nombre de tejido
A pesar de las variaciones en el aspecto general, la organización
estructural y las propiedades fisiológicas de los diversos órganos
del cuerpo, los tejidos que los componen se clasifican en cuatro
tipos básicos.
• El epitelio (tejido epitelial) cubre las superficies corporales,
reviste las cavidades del cuerpo, y forma glándulas.
• El tejido conjuntivo subyace o sostiene estructural y fun-
cionalmente a los otros tres tejidos básicos.
• El tejido muscular está compuesto por células contráctiles y es
responsable del movimiento.
-El tejido nervioso recibe, transmite e integra información del
medio interno y externo para controlar las actividades del
organismo.
Co
M

7. El tejido epitelial se
caracteriza por la
aposición estrecha
de sus células y por
su presencia en una
superficie libre.
El tejido conjuntivo se define
por su matriz extracelular.
A diferencia de las células
epiteliales, las células del tejido
conjuntivo están muy
separadas entre sí. Los
espacios intercelulares están
ocupados por un material
producido por las células. Este
material extracelular recibe el
nombre de matriz extracelular.
El tejido muscular se define según una
propiedad funcional: la capacidad
contráctil de sus células.
Las células musculares se caracterizan
por poseer grandes cantidades de las
proteínas contráctiles actina y miosina en
su citoplasma, y por su particular
organización celular en el tejido. Para
funcionar en forma eficiente al efectuar
movimientos, la mayoría de las células
musculares se agrupan en diferentes
haces que se distinguen con facilidad del
tejido que los rodea.
El tejido nervioso consiste en células
nerviosas (neuronas) y en distintos tipos
de células de sostén asociadas.
Si bien todas las células exhiben
propiedades eléctricas, las células
nerviosas o neuronas están altamente
especializadas para transmitir impulsos
eléctricos de un sitio a otro del or-
ganismo; también están especializadas
para integrar esos impulsos. Las células
nerviosas reciben y procesan
información desde el entorno externo e
interno y pueden tener receptores
sensoriales y órganos sensoriales
específicos para llevar a cabo esta
función.

8. HISTOGÉNESIS DE LOS TEJIDOS
En el comienzo del desarrollo del embrión, durante la fase de
gastrulación, se forma un embrión trilaminar (disco germinal
trilaminar). Las tres capas germinales son el ectodermo, el
mesodermo y el endodermo, las cuales dan origen a todos los
tejidos y órganos.
Las estructuras derivadas del ectodermo se desarrollan a partir
del ectodermo de superficie o del neuroectodermo.
El ectodermo de superficie da origen a la epidermis (y sus
derivados), al epitelio de la córnea y del cristalino del ojo,
esmalte dentario, compo- nentes del oído interno,
adenohipófisis, y la mucosa de la cavidad oral y de la región
distal del canal anal.
El neuroectodermo da origen al tubo neural, la cresta neural y
sus derivados.
El mesodermo da origen al tejido conjuntivo; tejido muscular;
corazón, vasos sanguíneos y linfáticos; bazo; hígado y gónadas
con los conductos genitales y sus derivados; mesotelio, que
reviste las cavidades corporales; y la corteza suprarrenal.
El endodermo da origen al epitelio del tubo digestivo; epitelio de
las glándulas digestivas extramurales (hígado, páncreas y
vesícula biliar); epitelio de la vejiga urinaria y la mayor parte de
la uretra; epitelio del sis- tema respiratorio; glándula tiroides,
paratiroides y timo; parénquima de las amígdalas; y epitelio de
la cavidad timpánica y de las trompas audi- tivas (de
Eustaquio).