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“Todo es veneno, Nada es veneno, Tododepende de la dosis“ Página 1
UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
“Calidad Pertinencia y Calidez”
D.L. N° 69-04, DE 14 DE ABRIL DE 1969
PROV. DE EL ORO-REP. DEL ECUADOR
UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
PRÁCTICA BF.8.01-02
Estudiante: Jorge Moisés Magallanes Medina
Docente: Dr. Carlos García
Carrera: Bioquímica Y Farmacia
Fecha de realización de la práctica: Lunes 5 de Junio del 2017
Curso: 8vo Semestre
Paralelo: “A”
Título de la Práctica: Intoxicación por metanol.
Animal de Experimentación: Pollo (vísceras).
Vía de Administración: Vía Intraperitoneal.
Volumen administrado: 10ml de metanol.
TIEMPOS:
 Inicio de la práctica: 8:30am
 Hora de disección: 8:40am
 Hora Inicio de Destilado: 08:50am
 Hora de finalización de Destilado: 9:00am
 Hora finalización de la práctica: 11:29am
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA
1. Observar la reacción que presenta las vísceras de pollo ante la Intoxicación por
Cloroformo.
2. Conocer mediante pruebas de identificación la presencia de cloroformo
FUNDAMENTO
El cloroformo es un líquido incoloro, dulcemente perfumado, que es más conocido por su uso
histórico como anestésico, aunque desde entonces ha sido abandonado debido a
preocupaciones sobre su seguridad. Hoy en día, el cloroformo se usa en una variedad de
procesos industriales, incluyendo la fabricación de productos químicos, refrigerantes y
disolventes. Se produce mediante la reacción de cloro con etanol y si bien es relativamente
estable, también es tóxico y debe ser manejado con cuidado. La exposición excesiva a
cloroformo puede causar daños a largo plazo para la salud de varios órganos importantes.
10
“Todo es veneno, Nada es veneno, Tododepende de la dosis“ Página 2
El cloroformo es un compuesto orgánico ampliamente utilizado. Su fórmula química es
CHCl3. Es un líquido incoloro y dulcemente perfumado también conocido como. Fue
utilizado como un anestésico temprano en cirugía y odontología y por esta razón las
personas que trabajan con el material deben evitar la inhalación de sus vapores.
MATERIALES, EQUIPOS, REACTIVOS Y SUSTANCIAS.
PROCEDIMIENTO
1. Desinfectar el área de trabajo y tener todos los materiales listos en la mesa de
trabajo
2. Preparar 10ml de Cloroformo.
MATERIALES EQUIPOS SUSTANCIAS MUESTRAS
 Vasos de
precipitación
 Pipetas
 Erlenmeyer
 Probeta
 Perlas de
vidrio
 Agitador
 Embudo
 Guantes
 Mascarilla
 Gorro
 Mandil
 Cronometro
 Estuche de
diseccion
 Agitador
 Fosforo
 Pinzas
 Cocineta
 Espátula
 Gradilla
 Aparato de
destilación
 Balanza
 Baño maria
 Campana de
extracción
 Alcohol 95%
 Nitrato de
plata
 Potasa
alcohólica
1:10
 Percloruro de
hierro
 B-naftol
 Piridina
 Clorhidrato de
piperacina
 Yodo
 Reactivo de
benedit
 Destilado de
vísceras de
pollo.
“Todo es veneno, Nada es veneno, Tododepende de la dosis“ Página 3
3. Agarrar el animal de experimentación (pollo) por las patas y mediante una aguja
hipodérmica administrar 10ml de cloroformo.
4. Colocar al animal de experimentación en la panema y observar los efectos de
intoxicación.
5. Luego del deceso, con la ayuda del estuche de disección, abrir al animal de
experimentación, y recolectar sus fluidos y vísceras picadas lo más finas posibles en
un vaso de precipitación.
6. Verter las vísceras en un balón de destilación y agregar 50ml, acido tartárico al 4%
y perlas de vidrio.
7. Destilar, recoger el destilado en NaOH 0.1N
8. Con aproximadamente 15ml del destilado recogido realizar las reacciones de
reconocimiento en medios biológicos.
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO
 Reacción de Dumas.- al adicionar unas gotas de destilado que contiene cloroformo
a unos mililitros de potasa alcohólica (proporción 1:10), se originan formiatos y
cloruro de potasio.
o CHCl3 + 4 KOH  ClK + HCO2K + H 2 O
o Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos porciones a una porción se le
agrega percloruro de hierro produciendo un color rojo en frío o un
precipitado en caliente.
o A la otra porción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose un
precipitado de cloruro de plata que se disuelve en amoníaco diluido.
 Reacción de Lustgarten.- al calentar la muestra con unos miligramos de beta naftol
y solución alcohólica concentrada de potasa (preferentemente un trozo de potasa
y algunas gotas de alcohol), se obtiene un franco color azul.
Si se sustituye el B-naftol por timol el color es Amarillo más o menos oscuro; con
resorcinol la coloración e roja – violáceo y con la piridina rojo.
 Reacción de fujiwara.-En un tubo de ensayo, se vierte 2 ml de lejía de sosa 1:2 con
una capa de 2mm de piridina y luego la muestra que contiene el cloroformo; se
agitan, podemos por unos instantes en baño de María y se deja en reposo; se
convierte en una materia coloreada que varía del rosa al rojo vivo, soluble en
piridina .Esta reacción sensible para unos pocos microgramos de cloroformo y es
aplicable en la orina de algún sujeto que haya absorbido de 15-20 g de agua
clorofórmica.
“Todo es veneno, Nada es veneno, Tododepende de la dosis“ Página 4
 Reacción de roseboom.- se disuelve un pequeño cristal de yodo en la solución
muestra y se agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de piperacina ; si el
cloroformo está presente en la muestra, la coloración violeta inicial cambia a
amarilla rojiza al disolverse el alcaloide.
 Reacción de Benedict.- si la solución muestra contiene cloroformo, reduce el
reactivo de Benedict, y de acuerdo a la concentración del tóxico puede producirse
una gama de colores que van desde el verde, amarillo, naranja o rojo ladrillo.
7. GRÁFICOS:
“Todo es veneno, Nada es veneno, Tododepende de la dosis“ Página 5
8. RESULTADOS OBTENIDOS.
Reacción de Dumas
Positivo característico
Reacción de Lustgarten
Positivo característico
Reacción de Fujiwara
Positivo característico
Reacción de Roseboom
Positivo característico
Reaccion de Benediet
Positivo característico
“Todo es veneno, Nada es veneno, Tododepende de la dosis“ Página 6
9. CONCLUSIÓN
Luego de la practica pudimos observar las vísceras ante la intoxicación de cloroformo
con la ayuda de las reacciones de reconocimiento se pudo comprobar la presencia de
cloroformo en estos medios biológicos teniendo en cuenta que las reacciones de
reconocimiento de cloroformo son indispensables para la verificación de una
intoxicación y muerte por este tóxico.
10.RECOMENDACIONES
 Usar siempre el equipo de protección adecuado para minimizar algún tipo de
accidente que ponga en riesgo nuestra salud.
 Aplicar las normas de bioseguridad en el laboratorio.
 Utilizar la cámara de gases para evitar intoxicaciones.
 Realizar la asepsia de la mesa de trabajo.
11.CUESTIONARIO
DESCRIBA LA COMPOSICIÓN QUÍMICA DEL CLOROFORMO
C: 10.05 %; H: 0.84 % y Cl: 89.10 %.
¿QUÉ ES EL CLOROFORMO?
El cloroformo es un líquido incoloro de aroma agradable no irritante y de sabor ligeramente
dulce. Se enciende espontáneamente cuando alcanza temperaturas muy altas
¿CUÁL ES EL TIPO DE INFLAMABILIDAD DEL CLOROFORMO?
La inflamabilidad que presenta es leve peligro de incendio cuando se expone a altas
temperaturas, de lo contrario, prácticamente no es inflamable.
12. ANEXOS
“Todo es veneno, Nada es veneno, Tododepende de la dosis“ Página 7
13. BIBLIOGRAFÍA
ATSDR. Cloroformo. September 1997. EE.UU. Disponible en:
http://www2.udec.cl/matpel/toxfaq_espanol/CLOROFORMO.pdf
PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERINA. Ficha de Datos de Seguridad.
Cloroformo (CHCl3). Cali, Colombia. Disponible en:
http://portales.puj.edu.co/doc-quimica/fds-labqca-dianahermith/CHCl3.pdf
14. FIRMA DE RESPONSABILIDAD
_____________________________
Moisés Magallanes Medina
C.I. 070642596-4

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  • 1. “Todo es veneno, Nada es veneno, Tododepende de la dosis“ Página 1 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA “Calidad Pertinencia y Calidez” D.L. N° 69-04, DE 14 DE ABRIL DE 1969 PROV. DE EL ORO-REP. DEL ECUADOR UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA PRÁCTICA BF.8.01-02 Estudiante: Jorge Moisés Magallanes Medina Docente: Dr. Carlos García Carrera: Bioquímica Y Farmacia Fecha de realización de la práctica: Lunes 5 de Junio del 2017 Curso: 8vo Semestre Paralelo: “A” Título de la Práctica: Intoxicación por metanol. Animal de Experimentación: Pollo (vísceras). Vía de Administración: Vía Intraperitoneal. Volumen administrado: 10ml de metanol. TIEMPOS:  Inicio de la práctica: 8:30am  Hora de disección: 8:40am  Hora Inicio de Destilado: 08:50am  Hora de finalización de Destilado: 9:00am  Hora finalización de la práctica: 11:29am OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA 1. Observar la reacción que presenta las vísceras de pollo ante la Intoxicación por Cloroformo. 2. Conocer mediante pruebas de identificación la presencia de cloroformo FUNDAMENTO El cloroformo es un líquido incoloro, dulcemente perfumado, que es más conocido por su uso histórico como anestésico, aunque desde entonces ha sido abandonado debido a preocupaciones sobre su seguridad. Hoy en día, el cloroformo se usa en una variedad de procesos industriales, incluyendo la fabricación de productos químicos, refrigerantes y disolventes. Se produce mediante la reacción de cloro con etanol y si bien es relativamente estable, también es tóxico y debe ser manejado con cuidado. La exposición excesiva a cloroformo puede causar daños a largo plazo para la salud de varios órganos importantes. 10
  • 2. “Todo es veneno, Nada es veneno, Tododepende de la dosis“ Página 2 El cloroformo es un compuesto orgánico ampliamente utilizado. Su fórmula química es CHCl3. Es un líquido incoloro y dulcemente perfumado también conocido como. Fue utilizado como un anestésico temprano en cirugía y odontología y por esta razón las personas que trabajan con el material deben evitar la inhalación de sus vapores. MATERIALES, EQUIPOS, REACTIVOS Y SUSTANCIAS. PROCEDIMIENTO 1. Desinfectar el área de trabajo y tener todos los materiales listos en la mesa de trabajo 2. Preparar 10ml de Cloroformo. MATERIALES EQUIPOS SUSTANCIAS MUESTRAS  Vasos de precipitación  Pipetas  Erlenmeyer  Probeta  Perlas de vidrio  Agitador  Embudo  Guantes  Mascarilla  Gorro  Mandil  Cronometro  Estuche de diseccion  Agitador  Fosforo  Pinzas  Cocineta  Espátula  Gradilla  Aparato de destilación  Balanza  Baño maria  Campana de extracción  Alcohol 95%  Nitrato de plata  Potasa alcohólica 1:10  Percloruro de hierro  B-naftol  Piridina  Clorhidrato de piperacina  Yodo  Reactivo de benedit  Destilado de vísceras de pollo.
  • 3. “Todo es veneno, Nada es veneno, Tododepende de la dosis“ Página 3 3. Agarrar el animal de experimentación (pollo) por las patas y mediante una aguja hipodérmica administrar 10ml de cloroformo. 4. Colocar al animal de experimentación en la panema y observar los efectos de intoxicación. 5. Luego del deceso, con la ayuda del estuche de disección, abrir al animal de experimentación, y recolectar sus fluidos y vísceras picadas lo más finas posibles en un vaso de precipitación. 6. Verter las vísceras en un balón de destilación y agregar 50ml, acido tartárico al 4% y perlas de vidrio. 7. Destilar, recoger el destilado en NaOH 0.1N 8. Con aproximadamente 15ml del destilado recogido realizar las reacciones de reconocimiento en medios biológicos. REACCIONES DE RECONOCIMIENTO  Reacción de Dumas.- al adicionar unas gotas de destilado que contiene cloroformo a unos mililitros de potasa alcohólica (proporción 1:10), se originan formiatos y cloruro de potasio. o CHCl3 + 4 KOH  ClK + HCO2K + H 2 O o Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos porciones a una porción se le agrega percloruro de hierro produciendo un color rojo en frío o un precipitado en caliente. o A la otra porción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose un precipitado de cloruro de plata que se disuelve en amoníaco diluido.  Reacción de Lustgarten.- al calentar la muestra con unos miligramos de beta naftol y solución alcohólica concentrada de potasa (preferentemente un trozo de potasa y algunas gotas de alcohol), se obtiene un franco color azul. Si se sustituye el B-naftol por timol el color es Amarillo más o menos oscuro; con resorcinol la coloración e roja – violáceo y con la piridina rojo.  Reacción de fujiwara.-En un tubo de ensayo, se vierte 2 ml de lejía de sosa 1:2 con una capa de 2mm de piridina y luego la muestra que contiene el cloroformo; se agitan, podemos por unos instantes en baño de María y se deja en reposo; se convierte en una materia coloreada que varía del rosa al rojo vivo, soluble en piridina .Esta reacción sensible para unos pocos microgramos de cloroformo y es aplicable en la orina de algún sujeto que haya absorbido de 15-20 g de agua clorofórmica.
  • 4. “Todo es veneno, Nada es veneno, Tododepende de la dosis“ Página 4  Reacción de roseboom.- se disuelve un pequeño cristal de yodo en la solución muestra y se agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de piperacina ; si el cloroformo está presente en la muestra, la coloración violeta inicial cambia a amarilla rojiza al disolverse el alcaloide.  Reacción de Benedict.- si la solución muestra contiene cloroformo, reduce el reactivo de Benedict, y de acuerdo a la concentración del tóxico puede producirse una gama de colores que van desde el verde, amarillo, naranja o rojo ladrillo. 7. GRÁFICOS:
  • 5. “Todo es veneno, Nada es veneno, Tododepende de la dosis“ Página 5 8. RESULTADOS OBTENIDOS. Reacción de Dumas Positivo característico Reacción de Lustgarten Positivo característico Reacción de Fujiwara Positivo característico Reacción de Roseboom Positivo característico Reaccion de Benediet Positivo característico
  • 6. “Todo es veneno, Nada es veneno, Tododepende de la dosis“ Página 6 9. CONCLUSIÓN Luego de la practica pudimos observar las vísceras ante la intoxicación de cloroformo con la ayuda de las reacciones de reconocimiento se pudo comprobar la presencia de cloroformo en estos medios biológicos teniendo en cuenta que las reacciones de reconocimiento de cloroformo son indispensables para la verificación de una intoxicación y muerte por este tóxico. 10.RECOMENDACIONES  Usar siempre el equipo de protección adecuado para minimizar algún tipo de accidente que ponga en riesgo nuestra salud.  Aplicar las normas de bioseguridad en el laboratorio.  Utilizar la cámara de gases para evitar intoxicaciones.  Realizar la asepsia de la mesa de trabajo. 11.CUESTIONARIO DESCRIBA LA COMPOSICIÓN QUÍMICA DEL CLOROFORMO C: 10.05 %; H: 0.84 % y Cl: 89.10 %. ¿QUÉ ES EL CLOROFORMO? El cloroformo es un líquido incoloro de aroma agradable no irritante y de sabor ligeramente dulce. Se enciende espontáneamente cuando alcanza temperaturas muy altas ¿CUÁL ES EL TIPO DE INFLAMABILIDAD DEL CLOROFORMO? La inflamabilidad que presenta es leve peligro de incendio cuando se expone a altas temperaturas, de lo contrario, prácticamente no es inflamable. 12. ANEXOS
  • 7. “Todo es veneno, Nada es veneno, Tododepende de la dosis“ Página 7 13. BIBLIOGRAFÍA ATSDR. Cloroformo. September 1997. EE.UU. Disponible en: http://www2.udec.cl/matpel/toxfaq_espanol/CLOROFORMO.pdf PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERINA. Ficha de Datos de Seguridad. Cloroformo (CHCl3). Cali, Colombia. Disponible en: http://portales.puj.edu.co/doc-quimica/fds-labqca-dianahermith/CHCl3.pdf 14. FIRMA DE RESPONSABILIDAD _____________________________ Moisés Magallanes Medina C.I. 070642596-4